外源性碱性成纤维细胞生长因子促进周围神经损伤后功能恢复的实验研究

目的 探讨碱性成纤维细胞因子结合静脉套接对周围神经缺损修复后功能恢复的作用。方法切断兔一侧坐骨神经主干，用自体静脉桥接，使神经两断端在管内相距１ｃｍ，实验组于静脉段内注入碱性成纤维细胞生长因子溶液，对照组注入等量的生理盐水。分别于手术后１０天、３０天、１００天取标本经光镜检查，其中１００天组先做电生理检测。结果 两组均于术后３０天见有神经纤维通过缺损处。术后１００天腓肠单次刺激肌力恢复，实验组为５     

超声微泡造影剂联合鼠神经生长因子对高眼压兔视神经损害的保护作用

目的　观察超声微泡造影剂联合鼠神经生长因子（ｍｏｕｓｅｎｅｒｖｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ｍＮＧＦ）对高眼压兔视神经损害的保护作用。方法　新西兰大白兔４０只,随机分为５组（每组８只）。空白对照组（Ａ组）、高眼压模型组（Ｂ组）、高眼压模型＋玻璃体内注射ｍＮＧＦ组（Ｃ组）、高眼压模型＋玻璃体内注射ｍＮＧＦ联合超声组（Ｄ组）、高眼压模型＋玻璃体内注射ｍＮＧＦ联合超声微泡组（Ｅ组）。行闪光视觉诱发电位（ｆｌａｓｈｖｉｓｕａｌｅｖｏｋｅｄｐｏｔｅｎｔｉａｌ,Ｆ-ＶＥＰ）检测,记录Ｐ１００波潜伏期及振幅;取各组兔视网膜行病理形态学观察和透射电镜观察兔视神经超微结构。结果　Ｂ组眼压在造模后１周、２周、４周分别为（３３．４±２．８）ｍｍＨｇ（１ｋＰａ＝７．５ｍｍＨｇ）、（３４．１±２．５）ｍｍＨｇ和（３４．８±２．２）ｍｍＨｇ,与Ａ组眼压（１３．６±１．８）ｍｍＨｇ、（１３．４±１．７）ｍｍＨｇ和（１３．３±１．４）ｍｍＨｇ相比差异有显著统计学意义（Ｐ＝０．０００）。Ｂ组的Ｐ１００潜伏期（１２５．００±１８．７０）ｍｓ和振幅（５．５０±３．０３）ｎＶ较Ａ组的Ｐ１００潜伏期（４６．２０±６．９０）ｍｓ和振幅（１５．９０±２．４８）ｎＶ明显延长和降低,差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）;Ｅ组的Ｐ１００潜伏期（６３．８０±８．３５）ｍｓ和振幅（１１．３７±２．８４）ｎＶ较Ｂ、Ｃ、Ｄ组明显缩短和升高,差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。Ｂ组视网膜神经节细胞（ｒｅｔｉｎａｌｇａｎｇｌｉｏｎｃｅｌｌｓ,ＲＧＣ）计数（１４．９７±１．３０）个明显少于Ａ组（２６．０４±０．７０）个,差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）;Ｅ组ＲＧＣ计数（２３．９７±０．９０）个明显高于Ｂ、Ｃ、Ｄ组,但仍低于Ａ组,差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。Ｅ组兔视网膜各层结构较Ｂ、Ｃ、Ｄ组完整,分层较清晰。Ｅ组兔视神经髓鞘结构尚完整,轴突内微管、微丝结构可见,较Ｂ、Ｃ、Ｄ组视神经超微结构明显改善。结论　超声微泡造影剂与鼠神经生长因子联合使用可增强鼠神经生长因子对高眼压兔视神经损害的保护作用。     

原发性慢性闭角型青光眼黄斑区结构损害的定量研究及相关分析

目的　探讨慢性原发性闭角型青光眼（ｃｈｒｏｎｉｃｐｒｉｍａｒｙａｎｇｌｅ-ｃｌｏｓｕｒｅｇｌａｕｃｏｍａ,ＣＰＡＣＧ）患者黄斑区神经节细胞复合体（ｍａｃｕｌａｒｇａｎｇｌｉｏｎｃｅｌｌｃｏｍｐｌｅｘ,ｍＧＣＣ）厚度变化及与视网膜神经纤维层（ｒｅｔｉｎａｌｎｅｒｖｅｆｉｂｅｒｌａｙｅｒ,ＲＮＦＬ）厚度的相关性。方法　采用ＲＴＶｕｅ１００-２ＯＣＴ检测ＣＰＡＣＧ患者５５例（５５眼）早期、中期及晚期与正常人３０例（３０眼）平均、上方、下方ｍＧＣＣ厚度及平均、上方、下方ＲＮＦＬ厚度,比较组间各检测指标的差异,分析ｍＧＣＣ厚度与ＲＮＦＬ厚度的相关性。结果　早期ＣＰＡＣＧ组、中期ＣＰＡＣＧ组、晚期ＣＰＡＣＧ组平均、上方、下方ｍＧＣＣ厚度值分别为（９５．１５±８．２１）μｍ、（９６．１１±７．７７）μｍ、（９５．０５±９．９４）μｍ,（７６．０４±８．５８）μｍ、（８３．０４±８．７２）μｍ、（７４．１７±９．７１）μｍ,（６４．４０±１０．１３）μｍ、（６８．８３±１３．２６）μｍ、（６３．３４±１２．６１）μｍ。早期ＣＰＡＣＧ组、中期ＣＰＡＣＧ组、晚期ＣＰＡＣＧ组各ＲＮＦＬ及ｍＧＣＣ厚度值均较正常对照组降低,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）;随着青光眼病情的进展,ＲＮＦＬ厚度及ｍＧＣＣ厚度逐渐变薄,中期ＣＰＡＣＧ组各ＲＮＦＬ及ｍＧＣＣ厚度值均较早期ＣＰＡＣＧ组降低,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）,晚期ＣＰＡＣＧ组各ＲＮＦＬ及ｍＧＣＣ厚度值均较中期ＣＰＡＣＧ组降低,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。ＣＰＡＣＧ患者平均ｍＧＣＣ厚度和平均ＲＮＦＬ厚度、上方ｍＧＣＣ厚度和上方ＲＮＦＬ厚度、下方ｍＧＣＣ厚度和下方ＲＮＦＬ厚度均呈高度正相关（ｒ＝０．９８７、０．９７６、０．９７１,均为Ｐ＝０．０００）。结论　频域ＯＣＴ检测的ＣＰＡＣＧ患者的ｍＧＣＣ厚度随青光眼病情的进展逐渐变薄,与ＲＮＦＬ厚度有良好的相关性。     

频域-OCT观测原发性闭角型青光眼患者视盘形态、视网膜神经纤维层及神经节细胞复合体的临床意义

目的　应用频域-ＯＣＴ观测原发性闭角型青光眼（ｐｒｉｍａｒｙａｎｇｌｅｃｌｏｓｅｄｇｌａｕｃｏｍａ,ＰＡＣＧ）患者视盘形态、视网膜神经纤维层（ｒｅｔｉｎａｌｎｅｒｖｅｆｉｂｅｒｌａｙｅｒ,ＲＮＦＬ）及黄斑区神经节细胞复合体（ｇａｎｇｌｉｏｎｃｅｌｌｃｏｍｐｌｅｘ,ＧＣＣ）,分析其与视野平均缺损（ｍｅａｎｄｅ-ｖｉａｔｉｏｎ,ＭＤ）的相关性。方法　选取３５例６０眼ＰＡＣＧ患者,根据视野损害程度分为早期及中晚期２组,与３３例正常人进行频域-ＯＣＴ对比检查。测量视盘形态学参数、整体平均ＲＮＦＬ厚度（ＲＮＦＬ-Ａｖｇ）、上方平均ＲＮＦＬ厚度（ＲＮＦＬ-Ｓｕｐ）、下方平均ＲＮＦＬ厚度（ＲＮＦＬ-Ｉｎｆ）、整体平均ＧＣＣ的厚度（ＧＣＣ-Ａｖｇ）、上方平均ＧＣＣ厚度（ＧＣＣ-Ｓｕｐ）、下方平均ＧＣＣ厚度（ＧＣＣ-Ｉｎｆ）,并分析青光眼患者组视野ＭＤ与ＲＮＦＬ、ＧＣＣ的相关性。结果　视盘各形态学参数在各期ＰＡＣＧ组与正常对照组间的差异具有统计学意义（视盘面积Ｆ＝１４．２９、Ｐ＝０．０００;视杯面积Ｆ＝１１．３１、Ｐ＝０．０００;盘沿面积Ｆ＝６．２７、Ｐ＝０．００２;盘沿容积Ｆ＝１０．４１、Ｐ＝００００;视神经盘容积Ｆ＝３．５３、Ｐ＝０．０３４;视杯容积Ｆ＝１０．９９、Ｐ＝０．０００;杯盘比Ｆ＝８．６４、Ｐ＝０．０００;杯盘纵比Ｆ＝３．１４、Ｐ＝００４８;杯盘横比Ｆ＝４．２０、Ｐ＝０．０１２）。其中视盘面积差异表现为两个ＰＡＣＧ组均较正常对照组大,而两个ＰＡＣＧ组间差异无统计学意义;其他各参数表现为:中晚期ＰＡＣＧ组的视杯面积、视杯容积、杯盘比均比正常对照组显著增大;而盘沿面积、盘沿容积和视神经盘容积均比正常对照组显著减小。增大及缩小的程度与正常对照组比较,差异均具有统计学意义,变化符合ＰＡＣＧ神经损害的特点;而早期ＰＡＣＧ组在上述参数中与正常对照组之间的差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）。对ＲＮＦＬ及ＧＣＣ的分析中,ＰＡＣＧ组与正常对照组间的差异具有统计学意义（ＲＮＦＬ-ＡｖｇＦ＝９．７９、Ｐ＝０．０００;ＲＮＦＬ-ＳｕｐＦ＝６．４８、Ｐ＝０００２;ＲＮ-ＦＬ-ＩｎｆＦ＝７．５４、Ｐ＝０．００１;ＧＣＣ-ＡｖｇＦ＝６．６２、Ｐ＝０．００２;ＧＣＣ-ＳｕｐＦ＝５．６９、Ｐ＝０．００５;ＧＣＣ-ＩｎｆＦ＝６．４５、Ｐ＝０．００３）。组间两两比较发现:中晚期ＰＡＣＧ组上述各参数与正常对照组的差异具有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）;而早期ＰＡＣＧ组各参数与正常对照组间的差异无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）。中晚期ＰＡＣＧ组ＲＮＦＬ和ＧＣＣ均与ＭＤ呈明显的正相关（ｒ＝０．６８９５,Ｐ＝０．００１;ｒ＝０５２７１,Ｐ＝０．０１０）;早期ＰＡＣＧ组ＲＮＦＬ及ＧＣＣ与ＭＤ无相关性（ｒ＝－０．２０８４、Ｐ＝０．２４４;ｒ＝０．２００１、Ｐ＝０２８１）。结论　频域-ＯＣＴ是一种比较敏感的能够观察到视网膜结构改变的检查方法,但其对于早期青光眼的诊断仍具有局限性。     

人玻璃体膜及视网膜前膜免疫组化研究

目的 鉴定人玻璃体膜及视网膜前膜的细胞成分。方法 对增生性玻璃体视网膜病变（ＰＶＲ）１２例和外伤性ＰＶＲ８例患者经玻璃体手术取出的增生膜标本,用鼠抗人角蛋白、波形蛋白、神经胶质纤维酸性蛋白（ＧＦＡＰ）和ＣＤ１４等４种单抗做免疫组织化学ＡＢＳ法染色并观察。结果 １２例ＰＶＲ膜抗角蛋白染色均为阳性,６例抗ＧＦＡＰ阳性,１０例抗ＣＤ１４阳性;８例外伤性ＰＶＲ膜２例抗角蛋白染色阳性,７例抗ＧＦＡＰ阳性,３     

肝素结合性表皮生长因子在翼状胬肉中的表达及意义

目的　研究肝素结合性表皮生长因子（ｈｅｐａｒｉｎ-ｂｉｎｄｉｎｇｅｐｉｄｅｒｍａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＨＢ-ＥＧＦ）在翼状胬肉组织中的表达与分布,探讨其在翼状胬肉发生过程中的作用。方法　收集２０１３年８月至２０１４年８月在南昌大学眼科医院行翼状胬肉切除的４０例标本,采用免疫组织化学染色和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分别检测２２例初发与１８例复发翼状胬肉标本中ＨＢ-ＥＧＦ的表达情况,并与正常对照组结膜标本进行比较。结果　ＨＢ-ＥＧＦ在初发型翼状胬肉组织的头部相对表达值为２．７７、体部相对表达值为１．７６,正常结膜相对表达值为１．３７。复发型胬肉组织中ＨＢ-ＥＧＦ在其头部相对表达值为１．９５、体部相对表达值为１.５７,正常结膜相对表达值为０．９６。ＨＢ-ＥＧＦ在初发型和复发型翼状胬肉组织中均主要定位于上皮细胞和血管内皮细胞的胞浆中,以上皮细胞表达最为显著。相同标本数复发型翼状胬肉头部组织中ＨＢ-ＥＧＦ的相对表达值为４．３０,为正常对照结膜（相对表达值为１．０９）的３．９倍、为初发型（相对表达值为１．３２）翼状胬肉头部组织３．１倍,且初发型翼状胬肉头部组织表达量为正常对照组的１．３倍。结论　高水平的ＨＢ-ＥＧＦ可能是翼状胬肉发生与复发的重要因素,提示可以把ＨＢ-ＥＧＦ作为干预靶点来控制翼状胬肉的发生与复发。     

视网膜下液生长因子含量与增生性玻璃体视网膜病变关系

目的 探讨生长因子与增生性玻璃体视网膜病变形成和发展的关系。方法 选４１例孔源性视网膜脱离伴ＰＶＲ患者,采用放射免疫方法测其ＴＮＦ,ＦＧＦ,ＴＧＦ－β,ＥＧＦ的含量。结果 ＰＶＲ患者视网膜下液中ＴＮＦ,ＥＧＦ,ＦＧＦ浓度明显高于对照组（Ｐ〈０．０５）。ＴＮＦ,ＥＧＦ,ＦＧＦ浓度Ｃ组高于Ｂ组,Ｂ组高于Ａ组,差异有显著性（Ｐ〈０．０５）。视网膜下液中ＴＮＦ,ＥＧＦ浓度各组高于血浆中ＴＮＦ,ＥＧＦ浓度,     

生长因子与视网膜神经节细胞

视网膜神经节细胞（ＲＧＣｓ）是青光眼的主要损伤细胞，ＲＧＣｓ的死亡常导致视功能发生不可逆性损害。新近研究的某些生长因子能促进ＲＧＣｓ的存活和轴突再生。本文着重介绍了神经生长因子（ＮＧＦ）、脑源性神经营养因子（ＢＤＮＦ）、神经营养蛋白－３（ＮＴ－３）、ＮＴ－４／５、睫状神经营养因子（ＣＮＴＦ）、成纤维细胞生长因子（ＦＧＦ）及靶源性生长因子等对ＲＧＣｓ的作用，为ＲＧＣｓ的实验研究和临床研究提供基础     

生长因子与视网膜神经节细胞

视网膜神经节细胞（ＲＧＣｓ）是青光眼的主要损伤细胞，ＲＧＣｓ的死亡常导致视功能发生不可逆性损害。新近研究的某些生长因子能促进ＲＧＣｓ的存活和轴突再生。本文着重介绍了神经生长因子（ＮＧＦ）、脑源性神经营养因子（ＢＤＮＦ）、神经营养蛋白－３（ＮＴ－３）、ＮＴ－４／５、睫状神经营养因子（ＣＮＴＦ）、成纤维细胞生长因子（ＦＧＦ）及靶源性生长因子等对ＲＧＣｓ的作用，为ＲＧＣｓ的实验研究和临床研究提供基础。     

Bevacizumab对人Tenon囊成纤维细胞转分化的抑制作用

目的　观察Ｂｅｖａｃｉｚｕｍａｂ（贝伐单抗）对转化生长因子（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＴＧＦ）-β２诱导下的人Ｔｅｎｏｎ囊成纤维细胞转分化的抑制作用,探讨抗新生血管药物抑制青光眼术后滤过泡瘢痕化的机制。方法　用含体积分数１０％胎牛血清的ＤＭＥＭ高糖型培养基对人Ｔｅｎｏｎ囊成纤维细胞株进行体外常规培养和传代。实验分为空白对照组、ＴＧＦ-β２处理组（加入终浓度为１０μｇ?Ｌ－１的ＴＧＦ-β２ＤＭＥＭ完全培养基）及Ｂｅｖａｃｉｚｕｍａｂ干预组（加入１０μｇ?Ｌ－１的ＴＧＦ-β２和１．０ｇ?Ｌ－１的ＢｅｖａｃｉｚｕｍａｂＤＭＥＭ完全培养基）,置于３７℃、体积分数５％二氧化碳培养箱中培养４８ｈ,并分别应用细胞免疫荧光染色技术和ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ实验检测Ｂｅｖ-ａｃｉｚｕｍａｂ对ＴＧＦ-β２刺激下人Ｔｅｎｏｎ囊成纤维细胞α-平滑肌肌动蛋白（α-ｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅａｃｔｉｎ,α-ＳＭＡ）表达的影响。结果　α-ＳＭＡ蛋白主要表达在细胞质中,免疫荧光染色结果显示ＴＧＦ-β２处理组可以见到α-ＳＭＡ的荧光表达,而Ｂｅｖａｃｉｚｕｍａｂ干预组α-ＳＭＡ蛋白表达受到抑制。ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ结果显示空白对照组、ＴＧＦ-β２ 处理组及Ｂｅｖａｃｉｚｕｍａｂ干预组α-ＳＭＡ蛋白相对表达量分别为０．６３０±０．０３８、１．１３０±０．０７１和０．３４０±０．０３３,Ｂｅｖａｃｉｚｕｍａｂ干预组α-ＳＭＡ蛋白相对表达量低于空白对照组和ＴＧＦ-β２处理组（均为Ｐ＜０．０５）。结论　Ｂｅｖａｃｉｚｕｍａｂ可明显抑制ＴＧＦ-β２诱导下人Ｔｅｎｏｎ囊成纤维细胞α-ＳＭＡ蛋白的表达,抑制成纤维细胞表型转化。     

BAMBI过表达抑制缺氧诱导的恒河猴视网膜血管内皮细胞增殖和迁移

目的　探讨过表达激活素膜结合抑制剂（ｂｍｐａｎｄａｃｔｉｖｉｎｍｅｍｂｒａｎｅ-ｂｏｕｎｄｉｎｈｉｂｉｔｏｒ,ＢＡＭＢＩ）对缺氧诱导的恒河猴视网膜血管内皮细胞（ＲＦ／６Ａ）增殖和迁移的影响。方法　将ＲＦ／６Ａ细胞分为四组:正常对照组、缺氧组、缺氧＋ｐＦＬＡＧ组和缺氧＋ＢＡＭＢＩ组。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测各组细胞中ＢＡＭＢＩ的表达,倒置显微镜观察各组细胞形态和密度,ＣＣＫ-８法和流式细胞仪分别检测各组细胞的增殖和周期情况,Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ检测细胞的迁移,Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测转化生长因子β１（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ-β１,ＴＧＦ-β１）和血管内皮生长因子（ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＶＥＧＦ）的表达。结果　与对照组相比,缺氧组细胞数目明显增多,增殖增加,培养１２０ｈ后,对照组细胞增殖倍数为５．００±０．２８,缺氧组为７．６４±０．３２（Ｐ＜０．００１）;缺氧组Ｓ期进程显著加快,占（１０．４４±２．６１）％,对照组Ｓ期占（２０．７９±２．２３）％（Ｐ＜０．０５）;细胞迁移增加,缺氧组细胞数目为３３．８０±４．２０,对照组为８．３５±２．５０（Ｐ＜０．０５）,ＴＧＦ-β１和ＶＥＧＦ的表达明显增加（Ｐ＜０．０５）。缺氧＋ＢＡＭＢＩ组:缺氧处理的细胞转染ｐＦＬＡＧ-ＢＡＭ-ＢＩ后,与缺氧组相比,ＢＡＭＢＩ蛋白表达显著上调,细胞数目明显减少,增殖显著降低,培养１２０ｈ后,增殖倍数为５．５３±０．２７（Ｐ＜０．００１）,细胞Ｓ期受到阻滞,占（１８．７５±２．９２）％,迁移显著下降,数目为１３．００±２．８０（Ｐ＜０．０５）,ＴＧＦ-β１和ＶＥＧＦ的表达明显下调（Ｐ＜０．０５）。结论　过表达ＢＡＭＢＩ可抑制缺氧诱导的ＲＦ／６Ａ细胞的增殖和迁移,进而有望抑制视网膜血管新生。     

脉络膜新生血管模型大鼠视网膜核转录因子-κBp65、血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子表达的变化

目的　观察脉络膜新生血管（ｃｈｏｒｏｉｄａｌｎｅｏｖａｓｃｕｌａｒｉｚａｔｉｏｎ,ＣＮＶ）模型大鼠视网膜核转录因子-κＢｐ６５（ｎｕｃｌｅａｒｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎｆａｃｔｏｒｋａｐｐａ-Ｂｐ６５,ＮＦ-κＢｐ６５）、血管内皮生长因子（ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＶＥＧＦ）、碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ｂＦＧＦ）表达的变化。方法　取ＢＮ大鼠１２只,随机分为正常组、模型组,每组各６只。正常组不做任何处理,模型组以１００ｇ·Ｌ-１水合氯醛腹腔注射麻醉,复方托吡卡胺滴眼液双眼散瞳,倍诺喜行眼表麻醉,在全视网膜镜下用５３２ｎｍ激光于视盘周围做视网膜光凝建立ＣＮＶ模型。每周行ＦＦＡ、ＯＣＴ检查眼底,观察ＣＮＶ生成情况。５周后处死大鼠,取大鼠视网膜用免疫组织化学法检测视网膜内ＮＦ-κＢｐ６５、ＶＥＧＦ、ｂＦＧＦ阳性表达积分光密度。结果　造模５周后ＦＦＡ及ＯＣＴ检查可见模型组ＣＮＶ形成。免疫组织化学法检测结果:正常组大鼠视网膜上ＮＦ-κＢｐ６５阳性表达的积分光密度为９２６４．３３±１４７９．４９,模型组的积分光密度为３４８１５．８３±３８７３．６１,两组比较差异有统计学意义（ｔ＝１５．０９５,Ｐ＜０．０１）;正常组大鼠视网膜上ＶＥＧＦ阳性表达的积分光密度为１９９４．９３±３０９．００,模型组为１３３１８．５４±１９５８．１１,两组比较差异有统计学意义（ｔ＝１３．９９２,Ｐ＜０．０１）;正常组大鼠视网膜上ｂＦＧＦ阳性表达的积分光密度为１６０８．７４±２３５．５５,模型组为１５９６３．１４±２０３４．１２,两组比较差异有统计学意义（ｔ＝１７．１７１,Ｐ＜０．０１）。结论　５３２ｎｍ激光光凝可诱导大鼠视网膜上ＮＦ-κＢｐ６５的表达,ＮＦ-κＢｐ６５在ＣＮＶ发生发展中可能起重要作用。     

原发性青光眼合并2型糖尿病患者房水及血液中MMP-2及TIMP-2的表达

目的　探讨基质金属蛋白酶２（ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ-２,ＭＭＰ-２）及金属蛋白酶２组织抑制因子（ｔｉｓｓｕｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｏｆｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ-２,ＴＩＭＰ-２）与原发性青光眼合并２型糖尿病的关系。方法　研究对象分Ａ组、Ｂ组、Ｃ组、Ｄ组、Ｅ组、Ｆ组６组,每组３０眼。Ａ组为原发性开角型青光眼（ｐｒｉｍａｒｙｏｐｅｎａｎｇｌｅｇｌａｕｃｏｍａ,ＰＯＡＧ）组,Ｂ组为原发性闭角型青光眼（ｐｒｉｍａｒｙａｎｇｌｅｃｌｏ-ｓｕｒｅｇｌａｕｃｏｍａ,ＰＡＣＧ）组,Ｃ组为ＰＯＡＧ合并２型糖尿病组,Ｄ组为ＰＡＣＧ合并２型糖尿病组,Ｅ组为糖尿病性白内障组,Ｆ组为年龄相关性白内障组。采用酶联免疫吸附试验检测各组房水及血清中ＴＩＭＰ-２及ＭＭＰ-２的含量,并计算ＴＩＭＰ-２／ＭＭＰ-２值。结果　在６组研究对象的房水中,ＭＭＰ-２浓度在Ａ组为（２４．９２±６．６２）μｇ?Ｌ－１、Ｂ组为（３６．８０±１５．０７）μｇ?Ｌ－１、Ｄ组为（２８.４４±５．７８）μｇ?Ｌ－１,均较Ｆ组的（２２．８７±３.５４）μｇ?Ｌ－１显著升高（均为Ｐ＜０．０５）;同时房水中ＴＩＭＰ-２浓度在Ａ组为（４３.９２±１９．５７）μｇ?Ｌ－１、Ｂ组为（７６．１３±２７．６７）μｇ?Ｌ－１、Ｄ组为（６１．９２±６．５１）μｇ?Ｌ－１,也均较Ｆ组的（２２.４８±３．５６）μｇ?Ｌ－１显著升高（均为Ｐ＜０．０５）。Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ组房水中ＴＩＭＰ-２／ＭＭＰ-２值较Ｅ组和Ｆ组显著提高,约为其２倍,但Ａ组、Ｂ组、Ｃ组、Ｄ组间ＴＩＭＰ-２／ＭＭＰ-２值无显著性差异。在６组研究对象的血清中,Ａ组ＭＭＰ-２和ＴＩＭＰ-２浓度最高,分别为（３９６．７５±４９．３０）μｇ?Ｌ－１和（３３７．６７±６２．７８）μｇ?Ｌ－１,其余各组间ＭＭＰ-２和ＴＩＭＰ-２浓度无显著性差异。６组研究对象血清中ＴＩＭＰ-２／ＭＭＰ-２值无明显差异。结论　原发性青光眼患者中ＴＩＭＰ-２／ＭＭＰ-２值均存在失衡,说明ＭＭＰ-２的活性变化及ＴＩＭＰ-２／ＭＭＰ-２值与ＰＯＡＧ和ＰＡＣＧ的发病密切相关,但２型糖尿病对原发性青光眼的病程进展无明显影响。     

图形视网膜电图和图形视觉诱发电位同时记录青光眼及高眼压症的研究

对３０例５０只青光眼、１４例２８只高眼压症进行ＰＥＲＧ和ＰＶＥＰ同时记录。首次发现青光眼和高眼压症的ＲＣＴ延长，同时青光眼组ＡＰ５０、ＡＰ１００下降、ＬＰ１００延长，异常率分别为４６％、５２％￣５４％，高眼压症组ＡＰ５０和ＬＰ１００的异常率均为２８．５７％。青光眼组ＬＰ１００、ＲＣＴ与视野缺损、Ｃ／Ｄ在小呈正相关，ＡＰ１００与视野缺损、Ｃ／Ｄ大小呈负相关，ＡＰ５０与视野缺损呈负相关。本研究从电生理     

乙酰半胱氨酸对角膜新生血管形成过程中瘦素和PEDF表达的调节

目的　观察大鼠碱烧伤后不同时期角膜组织病理学变化、瘦素和色素上皮衍生因子（ｐｉｇｍｅｎｔｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍｄｅｒｉｖｅｄｆａｃｔｏｒ,ＰＥＤＦ）的表达以及乙酰半胱氨酸对瘦素和ＰＥＤＦ表达的影响,探讨他们与角膜新生血管（ｃｏｒｎｅａｌｎｅｏｖａｓｃｕｌａｒｉｚａｔｉｏｎ,ＣＮＶ）的关系。方法　使用碱烧伤诱导大鼠ＣＮＶ模型,采用浸润１ｍｏｌ?Ｌ－１ＮａＯＨ溶液,直径为３．０ｍｍ的单片滤纸,准确置于大鼠右眼角膜中央２３ｓ制作ＣＮＶ模型。７５只大鼠随机分成３组,每组２５只,左眼为正常对照眼。Ａ组自烧伤之日起每天滴注ＰＢＳ液;Ｂ组每天滴注乙酰半胱氨酸;Ｃ组烧伤后７ｄ之内每天滴注ＰＢＳ液,７ｄ后每天加滴乙酰半胱氨酸。用裂隙灯显微镜观察ＣＮＶ,分别计算ＣＮＶ长度和面积,并行ＨＥ染色和免疫组织化学检测。结果　Ｂ组ＣＮＶ生长趋势与Ａ组、Ｃ组基本相似,但较Ａ组、Ｃ组生长迟缓,Ｃ组比Ａ组缓慢,但稍快于Ｂ组。Ｃ组角膜病理变化与Ａ组相似,较Ｂ组稍重。除４ｄ时Ａ组和Ｃ组间ＣＮＶ长度及面积差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）外,余时间点组间两两比较差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。免疫组织化学检测显示角膜碱烧伤后,瘦素和ＰＥＤＦ的表达开始增高。伤后７ｄ,各组瘦素表达:Ａ组、Ｂ组、Ｃ组分别为０．２７６１±０１１４４、０２３２２±０．０７４９、０．２６９２±０．０６４６,ＰＥＤＦ表达分别为０．３５２１±０．１０７４、０．３８９９±０．０７２１、０．３５６１±０．１２３３,三组瘦素、ＰＥＤＦ表达总体比较差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）;两两比较显示,Ａ组与Ｂ组、Ｂ组与Ｃ组瘦素、ＰＥＤＦ表达差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。伤后１４ｄ,各组瘦素与ＰＥＤＦ的表达总体比较差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）;各组间两两比较显示,瘦素、ＰＥＤＦ表达差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。结论　瘦素和ＰＥＤＦ表达水平与ＣＮＶ的生成具有相关性,乙酰半胱氨酸能有效降低瘦素的表达,提高ＰＥＤＦ的表达。     

碱性成纤维细胞生长因子和胰岛素样生长因子-I及其协同作用对牛晶体上皮细胞增殖的影响

目的　研究碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ｂＦＧＦ）、胰岛素样生长因子Ｉ（ｉｎｓｕｌｉｎｌｉｋｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒＩ，ＩＧＦⅠ） 及二者的共同作用对体外牛晶体上皮细胞（ｂｏｖｉｎｅ ｌｅｎｓｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌ，ＢＬＥＣ）增殖的影响。方法　ＢＬＥＣ原代培养，取第４ 代细胞种入２４ 孔板，加入不同浓度的ｂＦＧＦ、ＩＧＦⅠ、ｂＦＧＦ＋ ２０ μｇ／ＬＩＧＦⅠ，２０ ｈ 后加入３ＨＴＤＲ，１６ ｈ 后作液闪计数。结果　一定浓度的ｂＦＧＦ（１～１００ μｇ／Ｌ） 、ＩＧＦⅠ（２０～１００ μｇ／Ｌ） 在体外有促进ＢＬＥＣ 增殖的作用（ Ｐ＜ ０－０１ ） ，２０ μｇ／Ｌ的ＩＧＦⅠ可增加ｂＦＧＦ的促ＢＬＥＣ增殖作用。结论　生长因子及它们之间的协同作用在促进晶体上皮细胞异常增殖的过程中起重要作用。     

莱菔硫烷对链脲佐霉素诱导的大鼠糖尿病白内障的治疗作用

目的　探讨莱菔硫烷（Ｓｕｌｆｏｒａｐｈａｎｅ,ＳＦＮ）对链脲佐霉素诱导的大鼠糖尿病白内障的治疗作用。方法　将７２只雄性ＳＤ大鼠随机分为正常对照组、模型组、ＳＦＮ低剂量干预组、ＳＦＮ中剂量干预组、ＳＦＮ高剂量干预组和苄达赖氨酸（ｂｅｎｄａｚａｃｌｙ-ｓｉｎｅ,ＢＤＬ）组,每组１２只,后５组腹腔一次性注射链脲佐菌素（６５ｍｇ·ｋｇ－１）建立糖尿病白内障模型,从造模成功当日开始,ＳＦＮ低、中、高剂量干预组分别给予５０ｍｇ·ｋｇ－１、１００ｍｇ·ｋｇ－１、２００ｍｇ·ｋｇ－１ＳＦＮ灌胃,ＢＤＬ组以２００ｍｇ·ｋｇ－１ＢＤＬ灌胃,其余２组用同体积的生理盐水,每天１次,治疗１２周后,测定空腹血糖水平,裂隙灯观察大鼠晶状体变化并对其混浊度进行分级,分离晶状体并制备成匀浆液,测定丙二醛（ｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅ,ＭＤＡ）含量及超氧化物歧化酶（ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅｄｉｓｍｕｔａｓｅ,ＳＯＤ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ-ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ,ＧＳＨ-Ｐｘ）、过氧化氢酶（ｃａｔａｌａｓｅ,ＣＡＴ）活性,ＥＬＩＳＡ检测糖基化终末产物（ａｄｖａｎｃｅｄｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎｅｎｄｐｒｏｄｕｃｔｓ,ＡＧＥｓ）含量,行Ｗｅｓｔｅｒｎ-ｂｌｏｔｔｉｎｇ检测醛糖还原酶（ａｌｄｏｓｅｒｅｄｕｃｔａｓｅ,ＡＲ）表达。结果　用药后１２周,ＳＦＮ中、高剂量干预组大鼠空腹血糖明显低于模型组（均为Ｐ＜０．０５）,而ＳＦＮ低剂量干预组、ＢＤＬ组仍处于高血糖水平,与模型组比较,差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）。正常对照组大鼠晶状体透明,无混浊发生;而模型组大鼠晶状体出现雾状混浊、核混浊,分级为Ⅲ ～Ⅴ级,其混浊度显著高于正常对照组（Ｐ＜０．０１）。与模型组比较,ＳＦＮ中、高剂量干预组晶状体混浊度等级差异明显减轻（均为Ｐ＜０．０５）,而ＳＦＮ低剂量干预组、ＢＤＬ组晶状体混浊度等级与模型组相比,差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）。与正常对照组比较,模型组大鼠晶状体组织中ＭＤＡ含量升高,而ＳＯＤ、ＧＳＨ-Ｐｘ、ＣＡＴ活性降低,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０１）。经中、高剂量ＳＦＮ或ＢＤＬ处理后,ＭＤＡ含量较模型组减少（均为Ｐ＜０．０５）,ＳＯＤ、ＧＳＨ-Ｐｘ、ＣＡＴ活性较模型组增加（均为Ｐ＜０．０５）。而ＳＦＮ低剂量干预组上述指标与模型组相比,差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）。模型组大鼠晶状体组织中ＡＧＥｓ含量较正常对照组升高（Ｐ＜０．０１）;相对于模型组,经中、高剂量ＳＦＮ处理１２周后,ＡＧＥｓ含量明显减少（均为Ｐ＜０．０５）;而ＳＦＮ低剂量干预组、ＢＤＬ组ＡＧＥｓ含量与模型组比较,差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）。运用Ｗｅｓｔｅｒｎ-ｂｌｏｔｔｉｎｇ检测各组大鼠晶状体组织ＡＲ蛋白表达,结果显示:正常对照组ＡＲ蛋白呈低水平表达,模型组ＡＲ蛋白表达明显上调,与正常对照组比较,差异有统计学意义（Ｐ＜０．０１）;相对于模型组,经中、高剂量ＳＦＮ或ＢＤＬ处理后,ＡＲ蛋白表达水平降低（均为Ｐ＜０．０５）,而ＳＦＮ低剂量干预组ＡＲ蛋白表达水平与模型组比较,差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。结论　ＳＦＮ对链脲佐菌素诱导的大鼠糖尿病白内障有治疗作用,其机制可能与增强抗氧化能力、抑制ＡＧＥｓ产生及下调ＡＲ表达有关。     

大鼠外伤性PVR中胶质纤维酸性蛋白免疫组织化学观察

对大鼠眼后段芽通伤所致的外伤性增殖性玻璃体视网膜病变（ＰＶＲ）形成过程中视网膜Ｍｕｌｌｅｒ细胞的胶质纤维酸性蛋白（ＧＦＡＰ）免疫活性改变及神经胶质细胞移行分布进行动态观察。伤后３天，Ｍｕｌｌｅｒ细胞ＧＦＡＰ阳性染色开始增强；第７天，整个视网膜Ｍｕｌｌｅｒ细胞呈ＧＦＡＰ阳性着色；１４天即可见有神经胶质细胞出现于视网膜前增生纤维组织中；第２１及２８天，在观网膜前及穿通伤口的增生纤维组织中可见大量视网膜神经胶质细胞存在，提示反应性星形胶质化是ＰＶＲ的主要病变基础，是造成视网膜损害的重要原因。     

慢病毒载体介导TLR2基因干扰大鼠角膜上皮细胞和基质细胞的实验研究

目的　观察慢病毒载体（ｌｅｎｔｉｖｉｒａｌｖｅｃｔｏｒ,ＬＶ）介导ＴＬＲ２基因干扰大鼠角膜上皮细胞（ｃｏｒｎｅａｌｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌ,ＣＥＣ）和基质细胞（ｃｏｒｎｅａｌｓｔｒｏｍａｌｃｅｌｌ,ＣＳＣ）的有效性和安全性。方法　分别培养大鼠ＣＥＣ和ＣＳＣ,转染组用携带绿色荧光蛋白（ｅｎｈａｎｃｅｄｇｒｅｅｎｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔｐｒｏｔｅｉｎ,ｅＧＦＰ）和ＴＬＲ２小干扰ＲＮＡ（ｓｍａｌｌｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅＲＮＡ,ｓｉＲＮＡ）的ＬＶ转染,空白对照组加入空白培养液,阴性对照组加入不携带目的基因的ＬＶ。转染组按最佳感染复数（ｍｕｌｔｉｐｌｉｃｉｔｙｏｆｉｎｆｅｃｔｉｏｎ,ＭＯＩ）分别为１０、５０、１００、２００加入ＬＶ-ＴＬＲ２-ｓｉＲＮＡ-ｅＧＦＰ,选择ｅＧＦＰ表达最强的ＭＯＩ进行后续实验,观察细胞形态,ＣＣＫ８检测细胞增殖情况。流式细胞仪检测两种角膜细胞的转染效率,ＲＴ-ＰＣＲ检测转染后ＴＬＲ２ｍＲＮＡ的表达情况。结果　ＭＯＩ＝２００时转染ＣＥＣ和ＣＳＣ荧光表达最高,和空白对照组相比细胞形态未发生明显改变;ＣＣＫ８结果显示转染组与空白对照组、阴性对照组的ＩＯＤ值差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）;流式细胞仪检测ＣＥＣ和ＣＳＣ转染效率分别为７７．６００％ ±１．１００％和７６．３００％ ±１．３８７％,和阴性对照组相比差异均有显著统计学意义（均为Ｐ＜０．００１）。ＲＴ-ＰＣＲ检测转染后ＣＥＣ和ＣＳＣＴＬＲ２ｍＲＮＡ相对表达量均较对照组明显下降,差异均有显著统计学意义（均为Ｐ＜０．００１）。结论　ＬＶ-ＴＬＲ２-ｓｉＲＮＡ-ｅＧＦＰ可在体外稳定有效转染ＣＥＣ和ＣＳＣ,且对细胞安全性无影响,可有效下调ＴＬＲ２ｍＲＮＡ的表达。     

糖尿病视网膜病变与尿微量蛋白的关系

目的探讨尿微量蛋白与糖尿病视网膜病变（ＤＲ）的关系。方法检测１０６例糖尿病病人尿微量蛋白的４个指标：ＡＬＢ／Ｃｒ、ＴＲＦ／Ｃｒ、ＲＢＰ／Ｃｒ和ＮＡＧ／Ｃｒ，同时观察这些病人的视网膜情况。结果伴有糖尿病视网膜病变的病人的ＡＬＢ／Ｃｒ、ＴＲＦ／Ｃｒ、ＲＢＰ／Ｃｒ和ＮＡＧ／Ｃｒ较不伴有糖尿病视网膜病变的病人明显增高。经Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归分析，ＴＲＦ／Ｃｒ作为独立的因素仍然与糖尿病视网膜病变相关。结论ＴＲＦ／Ｃｒ的异常可能预示着早期的糖尿病视网膜病变。