通心络对糖尿病大鼠心肌RAGE、NF-κB的影响

目的研究通心络对糖尿病大鼠心肌组织糖基化终末产物受体(RAGE)及核转录因子(NF-κB)表达的影响,探讨其对糖尿病大鼠心肌的保护作用及机制。方法雄性W istar大鼠60只,随机选出15只作为正常对照组(C组,n=15),剩余45只尾静脉注射0.1%链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病模型,成模大鼠40只,随机分为糖尿病模型组(DM组,n=20)和糖尿病通心络治疗组(TXL组,n=20),通心络500m g/(kg.d)。喂养24周后,各组大鼠存活数为C组12只、DM组9只、TXL组13只,处死大鼠迅速心脏穿刺取血,测空腹血糖、糖化血红蛋白(HbA1c)及糖基化终末产物(AGEs)等指标。RT-PCR及W estern b lot法测定大鼠心肌组织中RAGE和NF-κB的表达。结果与C组相比,DM组大鼠血清中AGEs水平及心肌组织中RAGE和NF-κB的表达显著升高(P均<0.05)。经通心络治疗后,TXL组大鼠血清中AGEs的水平与DM组无统计学差异(P>0.05),但心肌组织中RAGE和NF-κB的表达较DM组显著降低(P均<0.05)。结论通心络可能通过抑制糖尿病大鼠心肌组织RAGE及NF-κB的表达而对糖尿病大鼠心肌组织起到一定的保护作用。     

葡萄子原花青素对糖尿病肾病大鼠非酶糖基化终产物和骨形态蛋白7表达的影响

   目的   研究葡萄子原花青素（GSPE）对糖尿病大鼠非酶糖基化终产物（AGEs）、肾组织结缔组织生长因子（CTGF）及骨形态蛋白7（BMP 7）表达的影响。  方法   将45只链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病大鼠模型随机分为糖尿病组（DM组,n=15只）、GSPE小剂量［250mg/（kg·d）］治疗组（T1组,n=15只）和大剂量［500mg/（kg·d）］治疗组（T2组,n=15只）,另以15只正常大鼠作为对照组（C组）,15只正常大鼠给予GSPE 250mg/（kg·d）作为正常治疗组（CT组）。于24周末检测各组大鼠血糖、血清AGEs、血压、24?h尿蛋白定量、血肌酐（Scr）、尿肌酐（Ucr）、肾重/体重水平。以光镜PAS染色及电镜观察肾脏病理改变。用RT PCR、Western blot方法及免疫组化方法检测肾组织中CTGF、BMP-7mRNA及蛋白表达水平的改变。  结果   与C组相比,DM组血清AGEs、血压、24h尿蛋白定量、内生肌酐清除率（Ccr）、肾重/体重均显著升高（P＜0.01）,肾病理改变加重,肾组织CTGF mRNA及蛋白表达增加（P＜0.01）,而BMP-7mRNA及蛋白降低（P＜0.05）。与DM组相比,T1组和T2组血清AGEs、血压、24h尿蛋白定量、Ccr和肾重/体重显著降低（P＜0.05或P＜0.01）,病理改变减轻, BMP-7mRNA及蛋白表达水平升高(P＜0.05或P＜0.01）,而CTGF mRNA及蛋白显著降低（P＜0.01）。T1组与T2组之间相比,Ccr、肾重/体重水平、CTGF mRNA及蛋白差异有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）。   结论    GSPE可以减轻糖尿病大鼠蛋白尿、改善肾脏病理,对其肾脏有明显保护作用,其机制与降低血清AGEs、抑制肾组织CTGF过高表达、上调BMP-7表达有关。     

通络方剂对1型糖尿病大鼠肾功能及肾脏CTGF、RAGE、p-ERK1/2表达的影响

目的观察通络方剂对链脲佐菌素(STZ)诱导的1型糖尿病大鼠肾组织CTGF、RAGE、p-ERK1/2表达的影响,并探讨其可能的肾脏保护机制。方法健康SD大鼠随机分为正常组(n=10)和造模组(n=50)。造模组大鼠给予单次腹腔注射STZ 60 mg/kg,造模成功后随机分为5组:糖尿病非治疗组,通络方剂低、中、高剂量组,氯沙坦组(n=10)。适应性饲养1周后,按分组不同每天分别给予不同处理因素,持续12周后处死,称体质量,测血肌酐、尿素氮,留24 h尿检测尿肌酐、尿蛋白、尿微量白蛋白,取左肾称质量,Real-time PCR法检测右肾组织中CTGF mRNA、RAGE mRNA的表达,Western印迹法检测右肾组织CTGF、RAGE、p-ERK1/2、Total-ERK1/2蛋白的表达。结果通络方剂中、高剂量组较糖尿病非治疗组能明显降低糖尿病大鼠血尿素氮、24 h尿蛋白、尿微量白蛋白、肌酐清除率,改善肾功能,降低RAGE mRNA、CTGF mRNA的表达,减少RAGE、CTGF、p-ERK1/2蛋白表达(P<0.05)。结论通络方剂可能通过抑制RAGE-ERK1/2-CTGF信号转导通路发挥对1型糖尿病大鼠的肾脏保护作用。     

肾病综合征患儿血清TGF-β1、CTGF、BMP-7检测的临床意义

目的 检测原发性肾病综合征(primary nephrotic syndrome,PNS)患儿血清转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)、骨形态发生蛋白-7(bone mo...     

通心络联合干细胞移植对糖尿病足大鼠促血管新生的影响

目的观察通心络联合外周血干细胞移植治疗对糖尿病足溃疡大鼠促血管新生的影响。方法 2012年10月—2013年8月于河北以岭医药研究院药理实验室进行实验。高脂喂养联合低剂量链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病大鼠模型,通过冰块降温和液氮冷冻,诱导大鼠糖尿病足溃疡模型。将造模成功的50只大鼠分为正常对照组、模型组、通心络组、干细胞组、通心络+干细胞组5组,每组10只,正常对照组和模型组大鼠以等体积的生理盐水灌胃;通心络组给予通心络0.8 g/kg灌胃,1次/d;干细胞组给予干细胞移植治疗;通心络+干细胞组给予干细胞移植同时给予通心络0.8 g/kg灌胃,1次/d,于给药7 d后处死动物取材进行指标检测。ELISA法测定血清血管内皮生长因子(VEGF)、晚期糖基化终末产物(AGE)、晚期糖基化终末产物受体(RAGE),RT-PCR法测定组织局部VEGF mRNA、RAGE mRNA表达水平。结果各组间比较血清VEGF、AGE、RAGE有显著差异(F=28.675、18.018、35.946,P均=0.000),与模型组比较,通心络组、干细胞组及通心络+干细胞组血清VEGF显著增加(P<0.05),AGE、RAGE显著降低(P<0.05);与干细胞组比较,通心络组血清VEGF显著增加(P<0.01),AGE、RAGE降低(P<0.05),通心络+干细胞组血清VEGF显著增加(P<0.01),AGE、RAGE显著降低(P<0.01);与通心络组比较,通心络+干细胞组血清VEGF增加(P<0.05),AGE、RAGE降低(P<0.05);各组间溃疡局部组织VEGF mRNA、RAGE mRNA表达有显著差异(F=8.152、7.650,P=0.000),与模型组比较,通心络组增加溃疡局部VEGF mRNA表达,降低RAGE mRNA表达(P<0.05),通心络+干细胞组显著增加溃疡局部VEGF mRNA表达,降低RAGE mRNA表达(P<0.01),干细胞组溃疡局部组织VEGF mRNA、RAGE mRNA表达无统计学差异(P>0.05);与干细胞组比较,通心络组显著增加溃疡局部VEGF mRNA表达(P<0.01),降低RAGE mRNA表达(P<0.05),通心络+干细胞组显著增加溃疡局部VEGF mRNA表达(P=0.002),显著降低RAGE mRNA表达(P<0.01);与通心络组比较,通心络+干细胞组增加溃疡局部VEGF mRNA表达(P<0.05),降低RAGE mRNA表达(P<0.05)。结论通心络联合外周血干细胞移植能够提高糖尿病足溃疡大鼠血清和溃疡局部组织中VEGF水平,降低AGE、RAGE水平,促进血管新生。     

罗格列酮对糖尿病肾病大鼠肾脏结缔组织生长因子表达的影响

目的:探讨罗格列酮(RGZ)对糖尿病肾病大鼠肾组织结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法:大鼠随机分成治疗组、模型组、正常组(n=9)。治疗组、模型组大鼠用链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病肾病模型,均造模成功7只。治疗组大鼠于造模前24h行RGZ灌胃,模型组和正常组以等体积蒸馏水灌胃。12周后处死动物,观察肾小球病理学变化及细胞外基质(ECM)相对面积,用免疫组织化学法检测肾皮质CTGF的表达。结果:治疗组及模型组肾小球ECM相对面积及肾皮质CTGF表达水平均较正常组升高,但治疗组2指标均较模型组低(P<0.01);治疗组肾脏病理学改变较模型组减轻。结论:RGZ能改善糖尿病时肾脏的病理变化,延缓肾纤维化的发生,其作用可能与抑制肾组织中CTGF的表达有关。     

通心络对糖尿病肾病尿白蛋白排泄率的影响

目的观察通心络对糖尿病肾病(diabitic nephropathy,DN)尿白蛋白排泄率(UAER)的影响.方法选择72例Ⅲ～Ⅳ期DN患者,随机分为两组,各36例.在常规降糖,降压药治疗的基础上,治疗组加用通心络胶囊,每日6粒分3次口服,连用8周,观察治疗前后UAER,D-D聚体,糖化血红蛋白(HbA1C),血尿素氮(BUN),血肌酐(SCr),总胆固醇(TC),甘油三酯(TG)的变化.结果治疗组BUN,SCr,TC,TG治疗后UAER,D-D聚体,BUN,SCr,TC,TG明显下降,治疗前后比较差异有显著性(P<0.05),与对照组比较差异有显著性(P<0.05);两组治疗前后HbA1C差异无显著性(P>0.05).结论通心络可明显降低糖尿病肾病患者的UAER及D-D聚体,并有改善肾功能及降低血脂的作用.     

通心络胶囊对早期糖尿病肾病患者胱抑素C的影响

目的 通过观察通心络胶囊对早期糖尿病肾病患者血浆胱抑素C水平的影响,了解其对糖尿病肾病的疗效。方法 60例早期糖尿病肾病患者按随机数字表法分为治疗组和对照组,两组均给予医学营养治疗指导,采用降糖药物控制血糖,血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)或血管紧张素Ⅱ受体阻滞剂(ARB)控制血压,在血糖、血压达标的基础上,治疗组加服通心络胶囊;检测治疗前后空腹血糖(FBG)、血肌酐(Scr) 、尿白蛋白排泄率(UAER)、C-反应蛋白(CRP)、胱抑素C(Cys-C)等指标。两组均随访12周。结果 治疗后两组Scr 、UAER、CRP和Cys-C均有改善,治疗组起效快且降低UAER、Cys-C的效果优于对照组(P<0.05) 。结论 通心络胶囊治疗早期糖尿病肾病能有效改善肾脏的微循环,降低Cys-C、UAER等指标,延缓肾功能损害的进展。     

Midkine反义寡聚脱氧核苷酸对糖尿病肾病大鼠肾脏CTGF表达水平的影响

目的:研究中期因子(MK)反义寡聚脱氧核苷酸(AS-ODNs)对早期糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏结缔组织生长因子(CTGF)表达水平的影响,揭示MK AS-ODNs在早期DN中的治疗前景。方法:将SD大鼠完全随机分为正常组、DN组和MK AS-ODNs组各20只,DN组和MK AS-ODNs组行单肾切+高糖高脂饲料+链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病模型。成模第6周,MK AS-ODNs组尾静脉注射MK AS-ODNs,正常组和DN组予等量生理盐水,干预4 d后处死并留取肾脏组织,利用实时荧光定量PCR技术检测肾脏组织MK及CTGF的表达情况。结果:DN组大鼠肾脏MK和CTGF的表达水平较正常组明显增多且差异有统计学意义(P<0.05);MK AS-ODNs组大鼠肾脏MK和CTGF的表达水平较DN组明显减少且差异有统计学意义(P<0.05);MK与CTGF在大鼠肾脏组织的表达呈正相关(r=0.498,P<0.05)。结论:早期DN大鼠肾脏MK和CTGF的表达增多,MK AS-ODNs通过抑制MK的合成降低CTGF的表达水平,延缓DN进展。     

虎杖免煎冲剂对糖尿病大鼠肾脏RAGE及VEGF表达的影响

目的探讨虎杖免煎冲剂对实验性糖尿病大鼠肾脏病理结构和糖基化终末产物受体(RAGE)、血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法Wistar大鼠36只,其中8只喂养普通饲料(正常组),其余28只给予高糖高脂饲料喂养,4周后注射链脲佐菌素(STZ)造成糖尿病模型,造模成功后,分别用蒸馏水(模型组)、虎杖免煎冲剂(虎杖组)、氟伐他汀(他汀组)灌胃。8周后观察各生化指标的变化;HE染色及电镜下观察肾脏病理改变;免疫组化法检测肾小球RAGE、VEGF的表达水平。结果与模型组相比,虎杖组大鼠的肾重／体重、肌酐清除率、24h尿蛋白量、肾小球平均体积均下降(P＜0.01,P＜0.05),肾脏病变程度轻,肾小球RAGE、VEGF表达下调(P＜0.05,P＜0.01)。结论虎杖免煎冲剂对糖尿病大鼠具有肾脏保护作用。其机制可能与其下调肾组织中RAGE、VEGF的表达有关。     

缬沙坦和氟伐他汀干预CTGF对糖尿病肾病的影响

目的通过检测结缔组织生长因子（CTGF）在糖尿病肾病（DN）患者外周血中的含量,观察缬沙坦及氟伐他汀治疗前后对24h尿白蛋白排泄率（UAER）和CTGF的影响,探讨DN的发病机制及治疗方法。方法选取我院DN住院患者20例,选取年龄相匹配的健康志愿者20例为对照组（NC组）。根据用药情况将DN患者分为DN＋缬沙坦治疗组（DA组）、DN＋氟伐他汀治疗组（DF组）,观察3个月。应用ELISA法检测血中CTGF浓度,并检测患者24h尿白蛋白排泄率（UAER）,进行组间及治疗前后比较。结果 DN组患者治疗前血CTGF浓度较NC组明显增多（P〈0.01）;与治疗前比较,DA组、DF组血CTGF浓度均减少（P〈0.05）,但DA组下降的程度与DF组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。治疗后DA组、DF组24h尿白蛋白排泄率（UAER）减少（P〈0.01）,但DA组下降的程度与DF组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 CTGF在DN患者血中浓度增加,其在DN发病过程中起重要作用。氟伐他汀及缬沙坦通过降低CTGF来改善DN病情。     

霉酚酸酯对糖尿病大鼠肾组织结缔组织生长因子表达的影响

目的探讨霉酚酸酯(MMF)对糖尿病大鼠肾组织结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法建立单侧肾切除糖尿病模型,大鼠随机分为对照组、糖尿病组与MMF给药组。8周末检测24小时尿白蛋白排泄率(AER)、肾组织与尿丙二醛(MDA)含量;并行肾组织形态学指标观察;应用免疫组化方法检测肾组织CTGF表达。结果MMF 给药组大鼠肾重、肾重/体重、AER与肾小球面积、肾小球容积、系膜区面积明显低于模型组(P<0.05,P<0.01);MMF 给药组可明显减少糖尿病大鼠肾组织及尿MDA含量(P<0.05);模型组肾小球CTGF表达明显高于对照组(P<0.01), MMF给药组这些改变明显减轻(P<0.01)。结论MMF对糖尿病大鼠肾脏有明显保护作用,其机制可能部分与抑制肾组织氧化应激、下调CTGF表达有关。     

维生素D对2型糖尿病肾病大鼠肾脏中转化生长因子-β1、重组人胶原蛋白-1 和结缔组织生长因子表达的影响

目的探讨维生素D对糖尿病肾病大鼠转化生长因子-β1（TGF—β1）、结缔组织生长因子（CTGF）和重组人胶原蛋白-1（collagen-1）表达的影响,进一步探讨以上3个基因在糖尿病肾病中相互作用以及维生素D对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用。方法将54只雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组（18只）、模型组（18只）、治疗组（18只）。其中,模型组及治疗组大鼠均行糖尿病肾病造模,饲以高脂高糖饲料6周,空腹12h后给予小剂量链腺佐菌素腹腔注射。注射1周后,不同日期测随机血糖（GLU）3次,若3次GLU均≥16．7mmol／L为2型糖尿病大鼠。2型糖尿病成模后的大鼠在6周和7周时用尿微量蛋白试纸连续测大鼠晨尿3次以上,若为阳性,则为2型糖尿病肾病的大鼠。治疗组给予骨化三醇溶于0．05mL花生油以0．03μg／（kg·d）灌胃37d,模型组给予花生油灌胃37d。处死大鼠,取肾脏,采用HE、电镜技术观测。肾脏组织的形态学变化,采用实时荧光定量PCR技术（RT—PCR）评价肾脏TGF—β1、collagen-1及CTGF基因表达的变化。结果①模型组TGF—β1、collagen-1及CTGF基因表达高于正常对照组（P〈0．05）,治疗组TGF—β1、collagen-1及CTGF基因表达明显低于模型组（P〈0．05）。②采用HE、电镜技术可以看出治疗组病理组织形态学,尤其是组织结构完整性明显优于模型组。结论糖尿病。肾病大鼠中,维生素D可以通过下调TGF—β1、collagen-1及CTGF基因的表达,对糖尿病肾病起保护作用。     

淫羊藿对肾阳虚雄性大鼠股骨骨形态发生蛋白-7表达的实验研究

目的 观察淫羊藿对醋酸泼尼松所致的肾阳虚雄性SD大鼠股骨骨形态发生蛋白-7(BMP-7)表达的影响.方法 3月龄雄性SD大鼠24只,随机分为正常组、肾阳虚模型组、淫羊藿组,灌胃给药90 d后,RT-PCR检测股骨BMP-7 mRNA的表达,免疫组化检测股骨BMP-7的表达.结果 醋酸泼尼松致肾阳虚大鼠股骨BMP-7 mRNA和BMP-7的表达明显下降(P＜0.05),淫羊藿能在mRNA水平(P＜0.05)和蛋白水平上提高股骨BMP-7的表达.结论 淫羊藿可提高股骨中BMP-7的表达来诱导成骨,修复骨损伤.     

血清骨形态发生蛋白-7与99Tcm-DTPA肾动态显像在糖尿病肾病中的相关性研究

目的：探讨血清骨形态发生蛋白-7（BMP-7）与99Tcm-二乙基三胺五乙酸（99Tcm-DTPA）肾动态显像肾小球滤过率（GFR）测定在糖尿病肾病中的相关性。方法：选择本院2015年7月至2017年7月内分泌科收治的糖尿病患者64例,根据尿白蛋白排泄率分为尿蛋白正常组（18例）、微量蛋白尿组（31例）和临床蛋白尿组（15例）,另选取同期健康体检者30例作为对照组,测定血清BMP-7水平,肾动态显像测定GFR,对比分析各组检测结果。结果：随着糖尿病肾损害的加重,血清BMP-7水平逐渐降低;与对照组相比,尿蛋白正常组糖尿病患者的GFR显著升高,而微量蛋白尿组和临床蛋白尿组患者的GFR却显著降低;相关分析提示糖尿病肾病患者血清BMP-7和GFR呈显著正相关。结论：血清BMP-7能反映糖尿病早期肾功能的损害,结果准确,易于操作,99Tcm -DTPA肾动态显像GFR测定已成为评价肾功能常用的影像方法,可准确反映糖尿病患者肾功能,二者联合应用在糖尿病肾病的早期诊断或筛查中具有重要临床意义。     

积雪草苷对烫伤创面成纤维细胞及结缔组织生长因子表达的影响

目的探讨积雪草苷对烫伤创面成纤维细胞及结缔组织生长因子（CTGF）表达的影响。方法将30只SD大鼠按随机数字表法进行分组,选取6只大鼠不予烫伤,其余进行烫伤建模,采用积雪草苷和凡士林对烫伤创面组织进行同体对照研究,HE染色评估成纤维细胞变化,免疫组织化学法检测CTGF蛋白表达情况,并用透射电镜观察成纤维细胞微观结构改变。结果积雪草苷治疗组大鼠伤后第14天创面CTGF含量高于对照组（P〈0．05）,伤后第21天创面CTGF含量低于对照组（P〈0.05）。成纤维细胞HE染色的大体形态及电镜观察呈现双相动态变化。结论积雪草苷可能对成纤维细胞增殖及CTGF表达存在双相调节作用,对促进创面少瘢痕愈合有一定作用。     

Rg1、Rb1对糖尿病肾病大鼠肾结缔组织生长因子的影响

目的:探讨Rg1、Rb1对糖尿病肾病(DN)大鼠肾结缔组织生长因子(CTGF)蛋白表达的影响。方法:雄性SD大鼠75只,按体质量随机分为正常组10只,模型组65只。模型组大鼠按55 mg/kg体质量腹腔一次性注射链脲佐菌素,72 h后血糖≥16.7 mmol/L,尿糖≥4"+"者为糖尿病造模成功。将造模成功的大鼠按血糖高低随机分为模型组、厄贝沙坦组、Rg1大剂量组、Rg1小剂量组和Rb1组。用药12周,处死大鼠无菌取肾,行肾组织HE、Mallory染色,观察各生化指标和肾组织病理形态学改变,采用免疫组化方法分析肾组织CTGF蛋白的表达情况。结果:模型组肾组织表现为DN病理改变;正常组及用药组肾小管上皮细胞、肾间质细胞胞浆有轻度CTGF表达,模型组CTGF则呈强阳性表达,Rg1、Rb1组CTGF表达较模型组明显减少(P<0.05)。结论:Rg1、Rb1可通过对肾组织CTGF蛋白表达下调而发挥治疗和预防糖尿病肾病的作用。