血浆纤维蛋白原Clauss测定法和PT演算法比较

纤维蛋白原(fibrinogen,Fg)是临床常用的凝血检测项目,其测定方法众多.我科使用CA-50 血凝仪检测Fg有Clauss测定法和PT演算法两种测定方法.现将两法测定结果作一比较.     

血浆纤维蛋白原测定方法

纤维蛋白原 (fibrinogen ,Fg)是临床常用检测项目 ,除在止血过程中扮演重要角色外 ,其含量增高被认为是缺血性心脑血管疾病发病的独立因素之一 ,检测其血浆含量有助于缺血性心脑血管疾病危险度判断[1] 。目前Fg测定主要包括Fg血浆水平、亚组分、纤维蛋白单体聚集功能、基因多态性等几个方面 ,其中血浆Fg含量测定最为常用 ,现就此作一综述。一、血浆Fg的测定方法Fg是一大分子可溶性糖蛋白 ,其分子为一长条状的二聚体 ,含 3对由二硫键相连的多肽链 (Aα、Bβ和γ) ,正常血浆浓度为 2～ 4g/L。在分子结构和生理活性的基础上 ,发展了许多测…     

CA-7000全自动血凝仪性能评价的探讨

目的对SYSMEX公司生产的CA-7000全自动血凝仪进行性能评价。方法用level I和levelⅡ2个浓度值的质控品对其检测凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶原时间(APTT)、纤维蛋白原(Fg)进行批内、批间不精密度;用卫生部室间质评物来检测PT、APTT、Fg正确度;取20个健康人群来检测PT、APTT、Fg进行生物参考区间转移的验证;检测高值和低值标本PT、APTT和Fg并进行携带污染率评价;参考CLSI的H21-A4文件确定其检测PT的正常值;用高低值标本来检测Fg的检测限、线性范围和可报告范围的评价。结果CA-7000检测PT、APTT批内CV%<3.75%,Fg批内CV%<5.0%;PT、APTT批间CV%<5.0%,Fg批间CV%<6.67%;检测PT、APTT、Fg的偏倚分别小于5.0%、5.0%、6.67%;检测PT、APTT、Fg的携带污染率符合要求;检测PT的正常值为10.99S;检测Fg的检测限为0.48g/L、线性范围为1.059~6.34g/L、可报告范围为56g/L。结论CA-7000全自动血凝仪各项性能指标符合要求,可用于临床检测。     

血浆纤维蛋白原及D-二聚体检测对老年下肢骨折并发深静脉血栓的早期诊断价值

目的 探讨血浆纤维蛋白原（Fg）及D-二聚体（D-Dimer DD）检测对老年下肢骨折并发深静脉血栓（DVT）的早期诊断价值。方法 对106例老年下肢骨折患者术前及术后第3天进行血浆Fg及DD的定量检测,跟踪观察患者病情。结果 106例患者有10例并发DVT,并发DVT组术前、术后第3天血浆Fg及DD的检测结果有显著性差异（P〈0.05）。未并发DVT组术前、术后第3天血浆Fg及DD的检测结果无显著性差异（P〉0.05）。而并发DVT组与未并发DVT组相比较：术前血浆Fg及DD的检测结果无显著性差异（P〉0.05）;术后第3天血浆Fg及DD的检测结果有显著性差异（P〈0.05）。结论 血浆Fg及DD的动态监测对老年下肢骨折并发DVT具有早期诊断价值。     

先天性纤维蛋白原减少症患者伴有血小板纤连蛋白增高

目的：检测先天性纤维蛋白原（Fg)缺乏症患者血小板和血浆中纤连蛋白（Fn)含量，并探讨其在血小板粘附与聚集中的作用。方法：选择一个Fg缺乏症家系，血标本离心后经Sepharose2B柱分离纯化并富集血小板，分别用免疫荧光染色，流式细胞术、Western blot蛋白分析法检测该家系所有成员和正常人血小板α颗粒和血浆中Fn,Fg含量；用流式细胞术检测血小板膜表面GPⅡb/Ⅲa含量。结果：三种方法检测均提示Fg减少纯合子血小板中Fn含量明显高于正常人（约5倍），且纯合子＞杂合子＞正常人；而三者血浆中的Fn含量无差异；纯合子和杂合子血板中Fg含量低于正常人，与血浆Fg含量呈正相关，Fg缺乏患者与正常人血小板膜表现GPⅡb/Ⅲa表达水平无差异。结论：血小板α颗粒中Fn增多可能部分代偿Fg的缺乏，进而引起血小板的粘附与聚集。     

血浆纤维蛋白原测定方法

纤维蛋白原(fibrinogcn，Fg)是临床常用检测项目，除在止血过程中扮演重要角色外，其含量增高被认为是缺血性心脑血管疾病发病的独立因素之一，检测其血浆含量有助于缺血性心脑血管疾病危险度判断。目前Fg测定主要包括Fg血浆水平、亚组分、纤维蛋白单体聚集功能、基因多态性等几个方面，其中血浆Fg含量测定最为常用，现就此作一综述。     

纤维蛋白原和D-二聚体联合检测在肝癌中的临床意义

目的通过检测肝癌患者血浆中的纤维蛋白原(Fg)和D二聚体(D-D)含量,探讨肝癌患者Fg和D-D与原发性肝细胞癌的分化程度以及转移与否的关系,评价其在肝癌辅助诊断及预后中的临床意义。方法取69例原发性肝癌患者(其中未转移组30例、转移组22例、治疗组17例)、60例正常对照组的静脉血采用法国STA-Compact全自动血凝分析仪检测Fg和D-D的含量。结果 30例未转移肝癌患者Fg含量升高、D-D含量明显升高;22例转移性肝癌患者血浆中的Fg和D-D含量均明显升高,与对照组差异有统计学意义(P<0.01);17例治疗组Fg和D-D含量有不同程度下降。结论 Fg和D-D含量的变化与肝癌病情严重程度及预后显著相关,可作为肝癌的鉴别诊断及预后的一项重要观察指标。     

正常孕妇纤维蛋白原使用不同参考值范围的临床差异

目的 探讨正常孕妇Fg参考值范围的临床价值.方法 分别使用原Fg参考值(一般人群)以及现用的孕期相关的孕妇Fg参考值,对Sysmex CA-7000全自动血凝仪检测的12 423名正常孕妇早、中、晚孕或产后的Fg结果 进行分析和比较.校准并且每日质控合格后检测临床标本.原Fg参考值范围参照<临床检验基础>(第4版)标准,现用Fg参考值为本实验室利用纵向序贯研究所建正常孕妇各孕期Fg参考值.对两参考值范围进行一致性检验,计算Kappa值.结果 原Fg参考值范围为2.00～4.00 g/L,现用正常孕妇早、中、晚孕及产后各孕期Fg参考值范围分别为2.73～4.93、2.94～5.00、3.01～5.98、1.76～3.60 g/L.相比于原Fg参考值范围,使用现用Fg参考值范围异常率降低到1/4,经一致性检验,Kappa=0.128,Kappa<0.4,U=26.825,P<0.05,两参考值范围判断标准一致性较差;对表现不一致的对象进一步分析,高/低于原Fg参考范围而现用Fg参考范围正常的共6270名,占50.47%,说明现用参考值大幅度降低了因Fg生理性增高而导致的异常判断,降低"误诊率";原Fg参考范围正常而高/低于现用Fg参考范围的共323名,占2.60%,其中低于现用Fg参考范围303名,说明现用参考值增加了低Fg水平异常判断的敏感性,降低"漏诊率".结论 从经济角度考虑,现用Fg参考值范围更适用、经济;从应用角度考虑,现用Fg参考值范围评价个体危险性的敏感性增加.     

纤维蛋白原γ链Arg275His突变所致异常纤维蛋白原的功能研究

目的 对两个遗传性异常纤维蛋白原血症家系的突变纤维蛋白原(Fg)进行功能研究.方法 常规筛查凝血功能;Fg抗原和活性分别用免疫比浊法和Clauss法测定;抽提DNA,对Fg 3个基因(FGA、FGB和FGG)以及抗凝血酶基因(AT3)所有外显子及侧翼序列进行PCR扩增、测序及分析;采用常规血栓弹力图(TEG)和功能性FgTEG检查对家系B先证者及其父亲进行凝血功能的综合评价及血浆功能性Fg评估;应用Western blot检测血浆Fg肽链分子量;采用Fg动态聚集曲线和纤维蛋白溶解曲线实验检测血浆Fg的功能.结果 2例先证者凝血酶原时间(TT)和爬虫酶凝固时间(RT)明显延长,Fg活性仅为0.5 g/L和0.6 g/L,但其抗原均正常,分别为2.32 g/L和2.66 g/L.两个家系先证者均存在γ链Arg275His杂合突变,家系B先证者的祖父和姑母同时检出AT3 g.5876T＞C(Ser116Pro)杂合突变.家系B先证者及其父亲TEG检测结果中α值分别接近和低于正常参考值范围下限,但最大波幅(MA值)均为正常;在功能性Fg TEG检测中,MA值明显偏低.Fg动态聚集曲线中先证者和家系患者的起跳时间明显延长、峰值明显降低.纤维蛋白溶解曲线中多数患者的纤维蛋白在特定时间内不能被纤溶酶原完全溶解.结论 首次发现遗传性异常纤维蛋白原血症合并AT缺陷的患者.γ链Arg275 His突变使Fg在纤维蛋白单体聚合以及纤维蛋白溶解方面出现异常.联合应用常规TEG和功能性TEG检测,可以更好地评估异常纤维蛋白原血症患者Fg的功能.     

β链基因突变导致遗传性无纤维蛋白原血症一例报告

目的检测1例遗传性无纤维蛋白原血症患者家系纤维蛋白原(Fg)基因突变。方法检测先证者及其家系成员血浆Fg^2 C及Fg的水平，从外周血单个核细胞中提取基因组DNA，PCR扩增Fg基因的所有外显子及侧翼内含子序列，检测其基因突变。结果发现先证者Fg基因共2处突变，FGB基因7972碱基处缺失G以及FGG基因2543碱基处的纯合T→A。结论FGG基因2543碱基处为多态位点，形成1144位氨基酸的I／K多态性。FGB基因7972碱基处缺失G，导致β链419位氨基酸之后的移码突变，形成了缺少最后27个氨基酸的截短的B链，后者可能是导致遗传性无纤维蛋白原血症的病理机制之一。FGB基因7972碱基处缺失G为国际首次发现的Fg基因突变。     

血浆纤维蛋白原 D-二聚体术后检测应用探讨

目的探讨术后长期卧床患者进行D-二聚体（D-D）和纤维蛋白原（Fg）检测的临床意义。方法分别用透射比浊法和酶联免疫吸附试验法（ELISA）测定术后需长期卧床患者的Fg和D-D,比较二者与健康对照组、一般组及术前后的差异。结果一般组和卧床组术后第2天和第5天与健康对照组及术前的D-D和Fg比较均升高,差异均有统计学意义（P〈o．05）。卧床组在术后5dD-D和Fg均较一般组高,而且与卧床组第2天相比检测水平也升高,差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论术后卧床患者及时检测Fg、D-D能有效监测静脉血栓的形成,使临床医生能及时采取有效的预防措施,避免并发症的发生。     

血浆D-二聚体、纤维蛋白原及鳞状细胞癌抗原水平在宫颈癌中的变化及临床意义

目的探讨血浆D-二聚体(D-D)、纤维蛋白原(Fg)及鳞状细胞癌抗原(SCCA)在宫颈癌手术前后的变化及临床意义。方法选取经病理证实的宫颈癌患者60例(宫颈癌组),宫颈良性病变患者(宫颈良性病变组)及健康体检者(健康对照组)各45例,观察各组空腹及宫颈癌术后血浆D-D、Fg及SCCA水平变化,并对结果进行分析。结果宫颈癌患者血浆D-D、Fg及SCCA水平显著高于良性组及健康对照组,差异具有统计学意义(P0.05),良性组血浆D-D、Fg及SCCA水平与健康体检组相比,差异无统计学意义(P0.05);在术后一周宫颈癌患者血浆D-D、Fg及SCCA水平较手术前明显下降(P0.05);宫颈癌组血浆D-D、Fg及SCCA单项检测和联合检测的阳性率显著高于良性组及健康对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论血浆D-D、Fg及SCCA水平在宫颈癌患者手术前后变化显著,其联合检测有助于对宫颈癌的早期诊断,可作为宫颈癌患者诊断、疾病监测及预后的指标。     

血浆制品凝血因子Ⅷ和纤维蛋白原水平与献血人群ABO血型关系的研究

目的探讨血浆制品因子Ⅷ(FⅧ)、纤维蛋白原(Fg)含量水平与献血人群ABO血型的关系。方法按照血浆制品类别的不同分为Ⅰ、Ⅱ组,Ⅰ组为冷沉淀组,Ⅱ组为新鲜冷冻血浆(FFP)组;冷沉淀、FFP均为4~6 h采集的400 mL新鲜全血制备而成。分别对上述两组血浆制品进行FⅧ、Fg测定;FⅧ的活性检测采用一期法,Fg采用凝血酶法检测。结果中A、B血型献血者FⅧ、Fg含量较O、AB型者含量显著升高,且A型最高,O型最低,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论由于A、B型人群中的FⅧ、Fg含量较高,可能容易引发对与该种血型相关的疾病;非O血型比较容易患血管栓塞和动脉硬化,可能与该血型人群的FⅧ、Fg含量较高有关。     

四例遗传性异常纤维蛋白原血症患者基因型和凝血功能分析

目的 研究遗传性异常纤维蛋白原血症患者表型、基因型及功能.方法 对4例遗传性异常纤维蛋白原血症患者及其家系成员行常规凝血及抗凝检测.分别用免疫比浊法和Clauss法测定血浆纤维蛋白原(Fg)抗原和活性,用Western blot法检测Fg三条肽链的分子量;分别进行血浆Fg凝固率、Fg动态聚集功能、纤维蛋白动态溶解功能检测;抽提患者及家系成员DNA,PCR扩增Fg 3个基因FGA、FGB和FGG所有外显子及其侧翼序列,DNA直接测序并进行基因分析.结果 4例患者活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)以及抗凝指标(抗凝血酶活性、蛋白C活性和蛋白S活性)均正常,凝血酶时间(TT)和蕲蛇酶时间(RT)明显延长;Fg活性降低(分别为0.54、0.52、0.43和0.50 g/L),Fg抗原基本正常(分别为2.0、2.9、1.7和2.3 g/L);Western blot未检测到异常条带;患者血浆Fg凝固率降低至50%左右;Fg动态聚集开始时间延迟、最大聚集率下降;纤维蛋白凝块溶解速率降低;基因分析发现4例患者均发生了Aα链16位精氨酸的改变,3例为FGA g.1203G→A,导致Arg16His杂合错义突变,1例为FGA g.1202 C→T,导致Arg16Cys杂合错义突变.结论 4例患者Fg分子的凝固率降低、聚集和纤溶功能异常均由Aα链16位精氨酸杂合错义突变所致.     

稀释回归法检测乳糜血标本凝血项目应用探讨

目的建立并评价解决乳糜血标本凝血功能检测的稀释回归法。方法随机收集56例外观清亮标本,分别检测3倍稀释及未稀释的PT、APTT和Fg结果,并对两者进行直线回归分析。另收集26例乳糜血标本,分别以3倍稀释及高速离心后取下清液检测PT、APTT和Fg,并对稀释回归后结果与高速离心后两组数据进行配对t检验。以MD图对PT、APTT和Fg在医学决定水平和参考区间上下限进行方法学评价。结果 PT、APTT和Fg稀释法与未稀释直线回归R2分别为0.9365、0.7834和0.9151;乳糜组稀释回归法与高速离心法结果无显著性差异。在MD图评价中,PT所有结果,APTT只有35s、37s、25s,Fg只有5g/L、4g/L、2.5g/L在优秀性能区。结论稀释回归法可以适用于乳糜血凝血功能检测,但使用过程中要注意其局限性。     

纤维蛋白原测定对弥散性血管内凝血前期的诊断效能

目的：统计纤维蛋白原（Fg）测定对DIC前期（pre-DIC）诊断的敏感性、特异性及诊断效能。方法pre-DIC组和对照组各120例,均为男40例,女80例。Sysmex CA1500凝固法测定Fg,同时进行鱼精蛋白副凝固试验（3P）。结果pre-DIC组Fg水平与对照组t检验差异无统计学意义（P＞0.05）;患者中Fg＜1.5 g/L占17.50%,Fg＞4.0 g/L占8.33%;分别以Fg＜1.5 g/L、Fg＞4.0 g/L、3P阳性为阈值,pre-DIC组阳性例数较对照组χ2检验差异均有统计学意义（P＜0.05）;Fg诊断pre-DIC的特异度98.33%,灵敏度17.50%,准确度和Kappa指数低于3P;阳性预测值91.30%,阴性预测值低于60%。结论由于Fg的双相性,对pre-DIC的诊断效能低,Fg＜1.5 g/L＋3P阳性,pre-DIC可能大,有条件的医院应增设D-二聚体和纤维蛋白原/纤维蛋白降解产物检测筛查pre-DIC。     

Fg、D-D、FDP与糖尿病肾病早期诊断的关系

目的 探讨检测血小板计数(PLT)、血小板分布宽度(PDW)、血小板平均容积(MPV)、纤维蛋白原(Fg)、D-二聚体(D-D)、纤维蛋白降解产物(FDP)用于糖尿病肾病(DN)早期诊断的临床价值。方法 选择2021年1-12月陕西省中医医院内分泌和肾内科收治的99例患者作为研究对象,其中46例单纯糖尿病患者作为对照组,53例DN患者作为观察组,检测两组患者PLT、PDW、MPV、Fg、D-D、FDP等,对各项检测指标进行统计学分析。结果 观察组患者Fg、D-D、FDP水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);两组患者PLT、PDW、MPV水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);Fg、D-D、FDP诊断糖尿病肾损伤的受试者工作特征曲线下面积分别为0.732、0.666、0.785。结论 检测Fg、D-D、FDP对DN患者早期肾损伤和病情监测具有一定的临床应用价值。     

急性脑梗死患者血浆D-二聚体、纤维蛋白原与脂蛋白（a）水平检测及其意义

目的分析急性脑梗死患者血浆D一二聚体（D-D）,纤维蛋白原（Fg）及脂蛋白（a）（LP（a））的水平变化,探讨三者在急性脑梗死临床诊断及治疗中的价值。方法急性脑梗死患者72例（56.3±5.9岁）和对照组30例（58.2±5.8岁）进行血浆D-D、Fg及Lp（a）的联合检测并进行统计学分析。结果患者血浆D-D,Fg及LP（a）含量高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）,血浆D-D、Fg及Lp（a）水平越高,梗死面积越大,病情越严重。结论血浆D-D、Fg及Lp（a）检测对急性脑梗死的诊断和治疗具有参考价值。     

两个遗传性低且异常纤维蛋白原缺陷症家系分析

目的对两个复合杂合突变导致低且异常纤维蛋白原(Fg)缺陷症家系进行表型和基因型分析, 并初步探讨其分子致病机制。方法调查两个先证者及家系成员(3代7人和3代10人)。采用凝固法检测凝血酶时间(TT)和Fg活性(Fg:C), 免疫比浊法检测Fg抗原(Fg:Ag)。DNA直接测序法分析先证者Fg的FGA、FGB和FGG基因所有外显子和侧翼序列及家系成员相应的突变位点区域。通过凝血酶诱导进行Fg聚集试验;用ClustalX-2, 1-win软件分析突变位点的保守性;PROVEAN和Mutation Taster在线生物信息学软件预测突变位点的致病性;用Pymol软件分析突变前后蛋白质空间结构及分子作用力的变化。结果先证者A和先证者B, Fg:C明显下降(分别为0.74和0.78 g/L), Fg:Ag同步降低(分别为0.96和0.94 g/L), 两个先证者TT均延长。基因测序分析显示, 先证者A和先证者B的FGA第6外显子均存在c.2185G>A(p.AαGlu710Lys)杂合错义突变;另外, 先证者A的FGG第7外显子存在c.701G>T(p.γTrp208Leu)杂合错义...     

急性脑梗死患者同型半胱氨酸、D-二聚体和纤维蛋白原相关性探讨

目的探讨急性脑梗死（ACI）患者血浆同型半胱氨酸（Hcy）、D-二聚体（DD）及纤维蛋白原（Fg）水平变化及其之间的相关性。方法收集263例ACI患者（ACI组）、112名健康人（对照组）血液标本,采用循环酶法测定Hcy、免疫比浊法测定DD和Fg。结果 ACI患者血浆Hcy、DD和Fg的水平均明显高于对照组（P均〈0.01）。ACI患者血浆Hcy与DD水平存在显著性正相关（P〈0.01）,与Fg水平无显著性相关;血浆DD与Fg水平之间也存在显著性正相关。结论血浆Hcy、DD、Fg水平与ACI的发生、发展密切相关,三者联合检测对ACI的预防、治疗和预后均有着十分重要的临床意义。