高盐对SHR大鼠内皮功能的影响

目的 观察高盐饮食负荷下SHR大鼠内皮功能的变化,探索盐在心血管疾病发生发展中的作用机制.方法 5周龄SHR雄性大鼠16只,高盐组(4% NaCl)、正常盐组(0.4% NaCl) 各8只, 运用鼠尾动脉测定大鼠血压,于饲养4周后处死,取血清测定亚硝酸盐NOx和丙二醛(MDA)含量;取胸主动脉采用免疫组织化学方法观察内皮型一氧化氮合酶eNOS的改变.结果 4周后高盐组的收缩压高于正常盐组(P<0.05);高盐组血清NOx水平以及主动脉eNOS表达水平均高于正常盐组(P<0.05);高盐组血清MDA水平(P<0.05)高于正常盐组.结论 高盐的摄入可导致SHR大鼠体内氧化应激水平升高和内皮功能失调.     

芦丁对大鼠缺血再灌注心肌组织iNOS和eNOSmRNA表达的影响

目的：研究芦丁对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法通过左冠状动脉结扎建立SD大鼠心肌缺血再灌注模型,将大鼠随机分为对照组、模型组、芦丁组、L-NAME（eNOS 抑制剂）组,ELISA 法检测血清一氧化氮（NO）水平,免疫抑制法检测血清肌酸激酶同工酶（CK-MB）浓度,实时荧光定量 PCR分析各组心肌组织iNOS 和eNOS mRNA 表达的变化。结果与模型组比较,芦丁组血清 NO 水平增高（P＜0.01）,CK-MB 浓度下降（P＜0.01）,eNOS mRNA 表达升高（P＜0.01）,iNOS mRNA 表达下降（P＜0.01）。结论芦丁缺血预处理对心肌起到了保护作用,其机制可能与上调心肌组织eNOS mRNA 、下调iNOS mRNA 表达有关。     

清肝降压饮对自发性高血压大鼠心肌eNOS表达的影响

目的：观察清肝降压饮防治自发性高血压大鼠（SHR）心肌肥厚的作用,并探讨其作用机制。方法：将SHR随机分为模型组、清肝降压饮低剂量组、清肝降压饮高剂量组和西药组,并用Wistar大鼠作空白对照。灌胃4周后,利用免疫组化方法检测大鼠心肌内皮型一氧化氮合酶（eNOS）的表达。结果：各给药组大鼠血压、左室重量指数均较模型组显著降低（P〈0.01）,同时各给药组大鼠心肌细胞eNOS的表达均较模型组显著升高（P〈0.01）,其中清肝降压饮高剂量组效果最显著。结论：清肝降压饮可通过促进SHR心肌细胞eNOS的表达,降低SHR的血压和左心室重量指数,产生防治高血压心肌肥厚的效应。     

HIF-1对大鼠心肌iNOS、VEGF蛋白表达的影响

目的观察缺氧诱导因子-1(HIF-1)对大鼠心肌诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达的影响。方法应用HIF-1活性诱导剂氯化钴预处理大鼠,观察大鼠心肌iNOS、VEGF蛋白表达的变化。结果HIF-1α、iNOS、VEGF蛋白表达在预处理前分别为0.57±0.04、1.39±0.07、5.87±0.58。HIF-1α在预处理后3h(3.88±0.62)显著增加(t=3.04,P<0.01),6h(12.82±0.58)达高峰(F=3.87,P<0.01);iNOS蛋白表达在预处理后3h(8.10±0.40)显著增加(t=2.95,P<0.01),24h(13.74±0.58)达高峰(F=3.92,P<0.01);VEGF蛋白表达在处理后1h(9.18±0.75)即显著增加(t=3.08,P<0.01),之后在预处理后3h(21.72±0.53)和12h(23.97±0.73)分别形成两个表达高峰(均F=3.58,P<0.01)。结论氯化钴预处理大鼠后,HIF-1可促进心肌内iNOS、VEGF蛋白的表达,同时VEGF表达增高可能还存在其他的作用机制。     

ALF大鼠eNOSmRNA,iNOSmRNA表达的实验研究

目的：从分子水平探讨急性肝功能衰竭（acute liver failure,ALF)大鼠机体重脏器eNOSmRNA,iNOSmRNA表达的变化,揭示其在ALF时多脏器功能障碍中的作用,方法：通过切除大鼠90％肝脏制备急性肝功能衰竭模型,并在ALF6h及应用NO供体或／和NOS抑制剂6h分别处死动物,取其肝,肺,肾,小肠和大肠制备组织切片,应用原位杂交方法测定每一组织eNOSmRNA和iNOSmRNA活性表达情况,结果：eNOSmRNA表达在ALF6h肺,大肠显示增加,而iNOSmRNA在肝,肺,肾,小肠和大肠表达明显增;ALF12h,应用NO供体和／或NOS抑制剂,肺,大肠表达eNOSmRNA下降,同时肝,肺,肾,小肠和大肠iNOSmRNA表达均明显降低。结论：急笥肝功能衰竭早期（6h)肺,大肠eNOSmRNA和肝,肺,肾,小肠和大肠iNOSmRNA表达显著增高,其翻译合成iNOS诱导产生的大量NO,可能参与早期脏器功能的损害,而应用NO供体和／或NOS抑制剂eNOSmRNA和iNOSmRNA的表达均明显降低,从而减轻对脏器的损害。     

依那普利对自发性高血压大鼠血压、一氧化氮及诱导型一氧化氮合酶的影响

目的 :观察依那普利对自发性高血压大鼠 (SHR)血压、血清一氧化氮 (NO)及组织诱导型一氧化氮合酶 (i NOS)的影响。方法 :SHR2 2只 ,随机分为生理盐水组、依那普利正常剂量组及其低剂量组 ,每天灌胃 1次 ,连续 1 5 d,实验前后测定 3组的血压 ,末次给药后摘眼球取血以及取动物脏器 ,分别测定血清 NO的含量和 i NOS的活性。结果 :灌胃 1 5 d后 ,依那普利正常剂量组的血压明显降低 (P <0 .0 1 ) ,其 NO含量为 (80 .3± 5 .5 ) μmol/L,与生理盐水组 [(1 1 0 .7± 6 .2 ) μmol/L]相比 ,差异有统计学意义 (P <0 .0 1 ) ;依那普利低剂量组血压亦降低 ,NO含量为 (90 .1± 2 .2 ) μmol/L,与生理盐水组相比 ,差异亦有统计学意义 (P <0 .0 1 ) ,依那普利正常剂量组组织中 i NOS活性 (1 .0 2± 0 .1 2 )降低 ,低剂量组为 1 .83± 0 .32 ,两组与生理盐水组 (2 .97± 0 .88)相比 ,差异均有统计学意义 (均 P <0 .0 1 )。结论 :依那普利在有效降低血压的同时 ,可提高血清 NO的含量 ,并且可使组织中 i NOS的活性降低     

糖皮质激素对机械通气大鼠肺组织iNOS、NO表达的影响

目的通过观察糖皮质激素对机械通气大鼠肺组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及一氧化氮(NO)表达的影响,探讨糖皮质激素对呼吸机所致肺损伤(ventilator induced lung injury,VILI)的干预作用。方法 24只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、机械通气组、地塞米松(DXM)干预组。用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肺组织iNOS mRNA表达,用免疫组织化学染色法检测肺组织iNOS蛋白表达,用硝酸还原酶法测定肺组织和血浆NO含量。结果机械通气组和DXM干预组大鼠肺组织iNOS mRNA及其蛋白表达水平,以及血浆和肺组织NO含量均明显高于对照组(P<0.01);DXM干预组上述指标与机械通气组比较均明显降低(P<0.01)。结论糖皮质激素可通过抑制肺组织iNOS的表达,减少NO的生成,对机械通气大鼠肺组织具有保护作用。     

腹水草抗大鼠乙醇型胃溃疡的作用及其对NO、iNOS和VEGF表达的影响

[目的]观察腹水草水提液抗大鼠乙醇型胃溃疡的作用效果,以及对一氧化氮（NO）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、和血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。[方法]48只SPF级SD大鼠随机分成正常对照组、模型组、雷尼替丁组,腹水草高、中、低剂量组,每组8只。正常对照组和模型组分别给予0.9%生理盐水灌胃;而雷尼替丁组则给予0.18%雷尼替丁混悬液灌胃（0.027g·kg^-1·d^-1）;腹水草各剂量组分别给予高、中、低剂量腹水草水提液灌胃（浓度分别为2.8、1.4、0.7 g·kg^-1·d^-1）,每天1次,连续14d。于最后1次灌胃1h后,采用无水乙醇造模1h。然后处死大鼠,比较各组大鼠胃溃疡指数及溃疡抑制率,分别采用硝酸还原酶法,夹心ELISA和荧光定量PCR法分析不同剂量腹水草水提液对NO含量、iNOS活力, VEGF蛋白,iNOS、VEGF mRNA表达的影响。[结果]腹水草水提液可以显著的抑制溃疡的发生。腹水草水提液高、中、低剂量给药组的溃疡抑制率分别为90.83%、70.26%、45.93%。与模型组相比,腹水草高剂量给药组大鼠胃黏膜组织中NO含量显著提高（P〈0.01）,腹水草各给药组大鼠胃黏膜组织中iNOS活力和iNOS mRNA的表达量均显著提高（P〈0.01）,而对于VEGF则无统计学差异。[结论]腹水草水提液具有显著地抗大鼠乙醇型胃溃疡的作用,其作用机制可能与提高胃组织中NO含量,iNOS活力及其mRNA的表达有关。     

糖尿病对大鼠阴茎组织中eNOS和nNOS的影响及胰岛素的治疗作用

目的:研究糖尿病(DM)对大鼠阴茎组织中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和神经型一氧化氮合酶(nNOS)蛋白表达的影响及胰岛素的治疗作用。方法:随机选取雄性SD大鼠70只,其中60只以链脲佐菌素(STZ)诱导建立DM模型后,行阿朴吗啡阴茎勃起实验,筛选DM性ED模型。以未加处理因素的10只大鼠作为正常对照组,发生ED者随机分为DM性ED组、胰岛素组,发生DM但未发生ED者作为DM组,未成DM者作为STZ组。各组干预6周后,采用免疫组织化学SP法检测各组大鼠阴茎组织中eNOS、nNOS蛋白表达。结果:DM组、DM性ED组大鼠阴茎组织中eNOS、nNOS蛋白表达水平显著低于正常对照组(P<0.01);胰岛素组显著高于DM组和DM性ED组(P<0.01),其中,eNOS蛋白表达水平接近于正常对照组(P>0.05),nNOS蛋白表达水平低于正常对照组(P<0.01);STZ组与正常对照组之间eNOS、nNOS蛋白表达差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:(1)DM可以显著降低大鼠阴茎组织中eNOS、nNOS蛋白表达水平,提示其可能是DM性ED发病的重要机制之一;(2)胰岛素干预可以减缓DM性ED大鼠阴茎组织中eNOS、nNOS蛋白表达的下降。     

一氧化氮合酶在急性肝功能衰竭大鼠主要器官中表达的变化

目的：从分子和蛋白水平揭示在急性肝功能衰竭（ALF）时不同一氧化氮合酶（NOS）诱导产生的一氧化氮（NO）在肝、肺、肾脏和肠组织中表达的变化。方法：雄性Wistar大鼠60只，随机分为6组：假手术（SO组）、ALF6h组、ALF12h组、L－Arg组、L－NAME组、L－Arg L-NAME组，每组10只，L－Arg用量300mg/kg,L－NAME用量30mg/kg；用原位杂交和免疫组化方法检测肝、肺、肾组织eNOSmRNA、iNOSmRNA表达和小肠、大肠eNOS和iNOS表达。结果：ALF6h组肺eNOSmRNA表达明显增加，肝、肺、肾iNOSmRNA表达亦显著增加，而ALF12h组则明显降低（P＜0．05）。应用L－Arg在ALF6h组肝、肾iNOSmRNA表达明显降低，而应用L－NAME和（或）应用L－Arg有ALF6h组肺eNOSmRNA及肝、肺、肾iNOSmRNA表达均显著降低（P＜0．05）；ALF6h组小肠、大肠黏膜iNOS表达显著增加，而eNOS表达在6h、12h组明显降低，尤其在12h组降低更明显（P＜0．05）；应用L－Arg和（或）应用LK－NAME时，小肠、大肠黏膜eNOS、iNOS表达均明显降低（P＜0．05）；应用L－NAME大肠黏膜eNOS、iNOS表达均明显降低（P＜0．05）。结论：ALF早期肺、肾组织iNOSmRNA表达显著增加，小肠、大肠黏膜eNOS活性降低，iNOS活性增加，应用NO供体能够降低肝、肺、肾iNOSmRNA 的应用；应用L－Arg和（或）L－NAME时，能够降低小肠、大肠黏膜iNOS表达，可能减轻NO对肝、肺、肾和肠黏膜的损害。     

大鼠iNOS基因siRNA表达体系的构建及鉴定

目的:构建大鼠iNOS基因的siRNA表达体系,为建立RNAi干扰技术平台打下基础。方法:应用siR-NA设计软件在大鼠iNOS的mRNA上寻找特异性的短核苷酸序列,设计合成两条互补的小发夹结构的DNA序列,经退火后形成双链DNA片段,将其克隆到线性的pSilencerTM1.0-U6载体中,转化DH5α大肠杆菌,提取质粒,酶切鉴定后进行测序分析。结果:酶切和序列测定结果表明,大鼠iNOS基因的siRNA表达载体构建成功。结论:成功构建了大鼠iNOS基因的siRNA表达体系,为今后借助RNA干扰技术调节iNOS基因的表达、研究iNOS基因与其它因子的关系奠定了基础。     

咬合力丧失对大鼠牙周组织中iNOS表达的影响

目的:研究咬合力丧失后诱导型一氧化氮合酶(iNOS)影响牙周组织改建的分子机制.方法:选用Wistar大鼠建立咬合力丧失的动物模型,按照拔牙后的各时间段不同随机分8组,采用HE、免疫组化染色法,观察牙周细胞中iNOS的表达.结果:光镜下观察到实验组的牙周组织较正常改建明显.免疫组化染色结果:阳性物质iNOS在牙周膜中的表达实验组较对照组有显著增强,尤其是第2 d和第3周组(P＜0.01).结论:咬合力丧失促使牙周组织中iNOS的表达发生变化,提示iNOS很有可能是影响牙周组织改建的一个重要因素.     

热应激对大鼠睾丸iNOS表达的影响及其意义

目的 研究热应激对大鼠睾丸诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）表达的影响及其意义。方法42d龄SD雄性健康大鼠12只建立单侧隐睾作为热应激处理的模型,术后第7d处死大鼠留取双侧睾丸,采用RT—PCR及免疫组化SABC法分别检测生精细胞iNOSmRNA和蛋白表达的变化,TUNEL法检测生精细胞凋亡。结果热应激处理后生精上皮内可见iNOS强阳性表达,而对侧睾丸生精上皮内无iNOS表达;热应激处理后睾丸iNOSmRNA也较对侧睾丸增强,生精细胞凋亡指数明显高于对侧睾丸,差异均有显著性意义（P〈0．05）。结论热应激导致生精上皮内iNOS表达增强,生精细胞凋亡增加,iNOS参与介导生精细胞凋亡。     

雄激素致无排卵大鼠卵巢nNOS、eNOS、ET-1的表达

目的 观察雄激素致无排卵大鼠(ASR)血浆及卵巢血管舒张因子一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(nNOS、eNOS)、环磷酸鸟苷(cGMP)、血管收缩因子内皮素1(ET-1)、血管紧张素Ⅱ(ATⅡ)的变化,探讨卵巢血管舒-缩因子在无排卵发病机制中的作用.方法 建立雄激素致无排卵大鼠模型,分为模型组和正常组.采用放射免疫法测定模型组、正常组大鼠血浆NO、cGMP、ET-1、ATⅡ以及血清雌二醇(E2)、孕酮(P)、睾酮(T)含量;采用免疫组化法检测大鼠卵巢nNOS、eNOS、ET-1表达;采用HE染色观察大鼠卵巢组织形态学变化.结果 与正常组比较,模型组大鼠血浆NO、cGMP含量降低(P<0.01),血浆ET-1、ATⅡ含量升高(P<0.01).血清E2、T含量及E2/P显著升高(P<0.01),血清P含量无统计学差异(P>0.05);与正常组比较,模型组大鼠卵巢颗粒细胞以及髓质nNOS、eNOS表达减弱(P<0.01),ET-1表达增强(P<0.01);正常组大鼠卵巢皮质可见发育期各级卵泡及黄体;模型组大鼠卵巢皮质卵泡囊状扩张,颗粒细胞层极薄.结论 雄激素致无排卵大鼠血浆及卵巢血管舒张因子降低、收缩因子增高,可能使卵巢血液供应障碍、颗粒细胞凋亡,导致卵泡在排卵前闭锁,无排卵的发生.     

自发性高血压大鼠心肌细胞凋亡和诱导型一氧化氮合酶的变化及其机制探讨

目的 检测自发性高血压大鼠（SHR）心肌细胞凋亡和心肌细胞诱导型一氧化氮合成酶（iNOS)的变化并探讨其机制。方法 透射电子显微镜技术以及脱氧核苷酸末端转移酶缺口末端标记法（TUNEL）观察检测SHR和正常血压大鼠（WKY）心肌细胞凋亡的变化；运用免疫荧光方法检测SHR和WKY大鼠心肌细胞iNOS的变化；所得结果运用图像分析系统分析处理。结果 透射电子显微镜观察发现SHR组左心室心肌组织中可见具有凋亡形态特征的心肌细胞；TUNEL法检测SHR组心肌细胞凋亡明显高于WKY组（P＜0.01)。免疫荧光检测SHR组心肌细胞内iNOS活性明显高于WKY组（P＜0.01)。结论 SHR心肌细胞凋亡显著增加，可能在自发性高血压病的发病过程中起重要作用；SHR心肌细胞内iNOS活性显著增加，可能对心肌细胞凋亡起诱导作用。     

ATP对细菌内毒素引起的大鼠耳蜗iNOS表达的影响

目的:探讨三磷酸腺苷(ATP)对细菌内毒素(LPS)引起的大鼠耳蜗诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响及其对耳蜗损伤的保护作用.方法:通过向大鼠鼓室内注射LPS造成急性中耳炎的动物模型,应用免疫组化方法,结合听性脑干反应(ABR)阚值检测,研究ATP对LPS引起的大鼠耳蜗iNOS活性的影响.结果:ATP对LPS引起的大鼠耳蜗iNOS表达和ABR阈移有明显的抑制作用.结论:ATP对LPS引起的大鼠耳蜗损伤有保护作用,这种保护作用可能与降低耳蜗iNOS活性有关.     

缺血后处理对大鼠肝脏一氧化氮合酶表达的影响及意义

目的:探讨缺血后处理(ischemic postconditioning,IPO)对大鼠肝脏一氧化氮合酶(nitric oxide sythase,NOS)表达的影响及意义。方法:建立70%大鼠肝脏缺血再灌注模型,将32只雄性SD大鼠随机分为3组:假手术组(SO组,n=8)、缺血再灌注组(IR组,n=12)、缺血后处理组(IPO组,n=12),IPO组于再灌注恢复血流前,给予多次短暂复灌复停处理。再灌注3h后,比较各组血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)变化,硝酸还原酶法测定一氧化氮(NO)含量,逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)检测肝脏组织内皮型NOS(eNOS)mRNA、诱导型NOS(iNOS)mRNA表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝脏组织eNOS、iNOS蛋白表达,光镜观察组织病理学改变。结果:与SO组相比,其余两组血清ALT、AST、NO含量均明显升高(P<0.01),组织eNOS、iNOS表达均明显增强。与IR组相比,IPO组ALT、AST明显降低(P<0.01),NO明显升高(P<0.01),eNOS、iNOS表达增强。光镜下,IR组、IPO组呈现典型缺血再灌注...     

eNOS对大鼠颈动脉球囊损伤后平滑肌细胞增殖的影响

目的 研究内皮型一氧化氮合酶(eNOS)对大鼠球囊损伤后平滑肌细胞增殖的影响.方法 构建腺病毒-eNOS(AdCMV-eNOS)质粒,以脂质体介导转染293细胞,扩增后转染SD大鼠球囊损伤后平滑肌细胞(实验组),以转染Ad-LacZ重组质粒的平滑肌细胞作为对照组.RT-PCR技术观察转染后平滑肌细胞eNOS mRNA的表达;细胞计数法分别检测实验组、对照组、正常组和单纯球囊损伤组平滑肌细胞的增殖能力..结果 RT-PCR检测发现实验组平滑肌细胞表达eNOS mRNA,而对照组无表达.各时间点细胞计数结果显示,正常组均明显少于单纯球囊损伤组(P＜0.05),而实验组均明显少于单纯球囊损伤组和对照组(P＜0.05).结论 重组腺病毒表达载体构建正确;eNOS可以抑制平滑肌细胞增殖.为eNOS预防经皮腔内冠状动脉成形术术后再狭窄基因转染奠定了基础.     

地塞米松对大鼠肺缺血再灌注后eNOS表达的影响

目的：通过观察地塞米松对大鼠肺缺血再灌注后内皮型一氧化氮合酶（eNOS）的影响探讨其对缺血再灌注肺的保护机制。方法：40只健康SD大鼠,雌雄不拘,随机分为5组：假手术组（S）、单纯缺血组（I）、缺血再灌注组（IR）、小剂量地塞米松干预组（D1）及大剂量地塞米松干预组（D2）,每组8只。根据Eppinger模型制作SD大鼠单侧肺IRI动物模型,Western-blot法检测eNOS蛋白质浓度,HE染色观察组织病理学改变。结果：与其它组比较,IR组肺组织中eNOS表达明显下降（P〈0.01）,地塞米松干预后,eNOS表达明显增高,以D2组明显。病理切片示IR组肺组织结构损害分级显著重于其它组,地塞米松干预后肺组织结构损害分级下降,以D2组明显。结论：eNOS在正常肺组织中表达较多,IR可使eNOS表达明显下降,地塞米松可使eNOS表达增高,尤以大剂量时明显,地塞米松通过上调eNOS表达减轻缺血再灌注肺组织损伤。     

姜黄素对糖尿病脑病大鼠氧化应激及海马iNOS表达的影响

\[摘要\]目的探讨糖尿病脑病与氧化应激和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的关系,及姜黄素治疗的效果和机制。 方法大鼠随机分为正常对照组(CN)、正常姜黄素组(Cur)、糖尿病组(DM)、糖尿病+姜黄素治疗组(DM+Cur),以注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,Cur组和DM+Cur组采用Cur(60 mg·kg-1·d-1)灌胃给药。12周后测定海马组织超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量,RT-PCR和免疫组化方法检测海马iNOS mRNA表达水平及iNOS免疫阳性细胞平均光密度值(MOD)值。 结果与CN组相比,DM组海马组织SOD和CAT活性明显降低(P<0.01),NO和MDA含量明显增加(P<0.01),海马组织iNOS mRNA及蛋白表达较CN组明显增加(P<0.01);与DM组相比,DM+Cur组SOD和CAT活性明显增加(P<0.01),NO和MDA含量明显降低(P<0.01),海马组织iNOS mRNA及MOD值明显降低(P<0.01)。 结论糖尿病脑病与氧化应激水平及海马组织iNOS 表达升高相关;姜黄素可能通过抗氧化活性及下调iNOS表达,而对糖尿病脑病起保护作用。