霉酚酸酯对小鼠异基因骨髓移植后急性移植物抗宿主病的预防作用

目的：探讨新型免疫抑制剂霉酚酸酯（MMF）对小鼠异基因骨髓移植（allo-BMT)后急性移植物抗宿主病（aGVHD)的预防作用。方法：用主要组织相容性抗原（MHC）完全不合的纯种近交系小鼠[供鼠：雌性C57BL／6J（H－2^b)鼠；受鼠：雄性BALB／c(H-2^d)鼠]建立allo-BMT/aGVHD动物模型，随机分6组，给予MMF、环孢菌素A（CsA) 甲氨喋呤（MTX）或联合不同剂量MMF作为aGVHD预防方案。观察其aGVHD的预防作用。结果：移植小鼠出现典型的aGVHD症状，未用aGVHD预防方案的移植小鼠（第6组）死亡高峰在移植后第5－第7天，死亡率达100％。用不同aGVHD预防方案的1－5组小鼠aGVHD症状明显减轻，平均生存时间（MST）较第6组显著延长（分别延长3．4，8．4，9．0，6．1，8．8d（P＜0．05）。不同aGVHD预防方案的移植小鼠之间，移植后外周血常规变化差异无显著性。经用各预防方案后，移植小鼠cGVHD病理表现减轻，且MMF、CsA、MTX三药联合组的病理分级轻于MMF单药组或CsA MTX标准方案组。结论：MMF单药及与CsA MTX联合均能有效预防小鼠allo-BMT后的aGVHD，减轻其症状和病理损害程度，显著延长平均生存时间。小剂量MMF（≤30mg/kg）与CsA TMX的联用效果优于大剂量MMF（60mg/kg）与CsA MTX的联用效果。适当剂量的MMF（10－60mg/kg）对骨髓植入和造血恢复没有显著影响。     

延迟连续骨髓移植对主要H-2不合小鼠移植后急性移植物抗宿主病的影响

目的 研究延迟连续骨髓移植对主要H-2不合小鼠移植后急性移植物抗宿主病(aGVHD)的影响.方法 以近交系C57BL/6(H-2b)小鼠为供鼠、BALB/c(H-2d)小鼠为受鼠,受鼠接受总剂量为8.0 Gy 60Co γ射线全身照射(TBI)后,实验分为5组:①空白对照组(只输注0.4 ml RPMI 1640);②经典移植组(TBI后4 h输注);③连续移植组(TBI后4 h,1、2、3 d连续输注);④延迟移植组(TBI后4 d输注);⑤延迟连续移植组(TBI后4、5、6、7 d连续输注).移植后用流式细胞术检测各组受鼠H-2b细胞植入水平,ELISA法测定IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ的血浆浓度,比较各组的生存率、aGVHD发生情况及造血重建情况.结果 经典移植组出现典型aGVHD表现,均于3周内死亡,连续移植组、延迟移植组60 d生存率分别为30%、50%,延迟连续移植组出现aGVHD的小鼠数量少、程度轻,60 d存活率70%,高于其他组(P＜0.05).延迟移植组和延迟连续移植组血浆IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10分泌高峰较经典移植组延迟5～10 d,IL-4、IL-10的表达高于经典移植组(P＜0.05),IL-2、IFN-γ的表达低于经典移植组(P＜0.05).各组血浆IL-6浓度均于TBI后5～10 d达高峰,且经典移植组的表达高于其他组(P＜0.05).延迟连续移植组60 d时H-2b细胞的百分率为(98.1±1.1)%,20d时外周血白细胞计数恢复正常.结论 延迟连续骨髓移植可减轻小鼠异基因移植后的aGVHD,提高生存率,不影响骨髓植入和造血重建,是合适的移植方式,其减轻aGVHD机制可能与减少T细胞Ⅰ类细胞因子分泌,促进Ⅱ类细胞因子分泌有关.     

环孢菌素A联合霉酚酸酯预防小鼠H-2半相合非清髓性骨髓移植后GVHD的发生

为探讨环孢菌素A(CSA)联合霉酚酸酯 (MMF)方案对小鼠主要组织相容性抗原 (H 2 )半相合非清髓性骨髓移植后急性移植物抗宿主病 (aGVHD)的预防作用 ,建立了H 2半相合小鼠 (供鼠为C5 7BL/6J,受鼠为C5 7BL/6J×BALB/C杂交F1代小鼠 )的非清髓性骨髓移植模型。采用CSA +MMF或CSA +MTX作为aGVHD预防方案 ,观察 5 0天 ,记录受鼠发生aGVHD情况。结果显示 ,未做aGVHD预防的小鼠在移植后 2 2 - 2 5天出现典型的aGVHD症状 ,aGVHD发生率为 75 % (15 /2 0 ) ,致死率为 10 0 % (15 /15 )。接受aGVHD预防的小鼠 ,aGVHD症状和病理表现均明显减轻 ,CSA +MTX方案组aGVHD发生率为 4 0 % (8/2 0 ) ,致死率为 6 2 .5 % (5 /8) ,CSA +MMF方案组aGVHD发生率为 30 % (6 /2 0 ) ,致死率为 5 0 % (3/6 ) ,均显著低于未预防组 (P <0 .0 5 ) ,但两预防组之间无显著性差异。结论 :CSA +MTX预防方案能有效降低H 2半相合非清髓性骨髓移植小鼠aGVHD的发生率和致死率 ,而CSA +MMF方案能进一步减轻aGVHD的症状及病理损害程度。     

高压氧对异基因骨髓移植后aGVHD影响的实验研究

本研究探讨高压氧（HBO）在抗异基因骨髓移植后aGVHD和提高生存率中的作用及机制。给受致死量照射的C57BL／6受鼠注入供鼠BALB／c骨髓与脾淋巴细胞的混合液，分别给与高压氧、环孢素A、氨甲蝶呤处理。用流式细胞仪检测脾T细胞及其亚群和黏附分子CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋CD11a^＋、CD4^＋CD18^＋、CD8^＋CD11a^＋、CD8^＋CD18^＋的表达，用ELISA和RT-PCR法检测细胞因子IL-2、IL-4、IL-10和TNFα的表达。结果表明：HBO组小鼠11天的活存率明显高于异基因移植组及CsA＋MTX组；HBO和CsA＋MTX可明显降低脾组织中CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋CD11a^＋、CD4^＋CD18^＋、CD8^＋CD11a^＋、CD8^＋CD18^＋的表达（P〈0.05）；HBO组小鼠血清IL-2和TNFα的浓度及脾组织中IL-2和TNFα mRNA的含量都低于异基因骨髓移植组（P〈0.05），但高于CsA＋MTX组；HBO组小鼠脾组织中IL-4和IL-10 mRNA的含量显著高于异基因骨髓移植组和CsA＋MTX组（P〈0、05）。结论：高压氧在对抗aGVHD和提高活存率方面优于环孢素A和氨甲蝶呤，其抗aGVHD的作用机制与调节促炎／抑炎细胞因子的分泌和黏附分子的表达及抑制T淋巴细胞作用有关。     

TGF-β减轻异基因骨髓移植小鼠急性移植物抗宿主病

为了探讨转化生长因子β（TGF—β）对小鼠异基因骨髓移植后急性移植物抗宿主病发生发展的影响，用C57BL／6小鼠作为供鼠，BABL/c小鼠为受鼠，建立小鼠同种异基因骨髓移植模型。BABL／c受鼠随机分为4组：空白对照组、单纯照射组、移植对照组和TGF—β实验组。TGF—β实验组于移植前2天至移植后7天每日皮下注射TGF—β1（1μg/kg）。结果显示：TGF-β实验组小鼠生存时间明显长于移植对照组（P〈0．01），TGF—β实验组小鼠小肠、皮肤及肝脏GVHD病理改变明显轻于移植对照组。移植后7天TGF—β实验组小鼠血清IL-2浓度较空白对照组高，但远低于移植对照组；TGF—β实验组血清IL—10浓度明显高于移植对照组。结论：TGF—β能够减轻或抑制小鼠allo—BMT后致死性的aGVHD发生，提高移植后存活率。TGF—β可能使Th1细胞向Th2细胞偏移，抑制IL-2等Th1类细胞因子的分泌，同时促进了Th2类细胞因子IL—10的表达，降低aGVHD的发生。     

猕猴单倍体相合外周血造血干细胞移植后多种细胞因子mRNA表达的动态分析

本研究分析猕猴单倍体相合造血干细胞移植前后外周血单个核细胞中细胞因子（TGF-β,IL-2,IL-6,IL-10,IFN-γ,TNF-α,FAS-L）mRNA的表达并探讨这些细胞因子在急性移植物抗宿主病（aGVHD）发生和病理变化中的作用,以寻找能够早期预测和鉴别诊断aGVHD的指标.5例猕猴经非清髓预处理后接受单倍体相合外周血造血干细胞移植;半定量逆转录聚合酶链反应法（RT-PCR）检测移植前后8种细胞因子mRNA的表达,动态观察这些细胞因子在移植后aGVHD中的表达情况.结果表明：5例猕猴均成功获得造血重建.1例移植排斥,长期无病存活;其余4例为混合嵌合和完全嵌合植入,1例低比例嵌合植入经第二次;注供者外周血造血干细胞后获得高比例嵌合植入;1例发生肠道Ⅲ度GVHD.移植前后体内Th1和Th2类细胞因子都有不同程度的变化,在aGVHD期间TGF-β呈下调表达,其余均为上调表达;植入比例减低的猕猴各细胞因子也下降至移植前水平.结论：TGF-β在aGVHD发生前的下降趋势可能是GVHD预测指标,并且能够作为肠道GVHD的鉴别诊断指标.     

霉酚酸酯联合环孢素预防同胞供体异基因造血干细胞移植后移植物抗宿主病

1986年美国西雅图建立的环孢素（CsA）联合短程甲氨蝶呤（MTX）方案由于明显降低移植物抗宿主病（GVHD）的发生率和严重性及改善长期生存而成为预防GVHD的金标准方案，但临床明显的急性GVHD（aGVHD）（Ⅱ～Ⅳ度）的中位发生率仍达40％。随着多种新型免疫抑制剂的不断出现，GVHD的预防方案亦在不断得到改进和替代。霉酚酸酯（MMF）作为一种新型高效免疫抑制剂已广泛用于非清髓性移植及无血缘关系供者移植，而用于同胞HLA相合清髓性移植报道有限。我们采用CsA联合MMF方案预防GVHD用于42例HLA相合同胞异基因造血干细胞移植（allo-HSCT），现报道如下。     

单倍体相合造血干细胞移植急性移植物抗宿主病小鼠模型的构建和发病机制的探讨

目的:构建单倍体相合造血干细胞移植(HSCT)小鼠急性移植物抗宿主病(aGVHD)模型,并探讨其发病机制。方法:建立以C57BL/6(H-2~b)为供鼠,137Csγ射线11 Gy照射[C57BL/6×CBA/Ca]F1(H-2b×k)为受鼠的单倍体相合造血干细胞移植aGVHD模型。将受鼠随机分为照射对照、去除T细胞的骨髓细胞(TD-BM)、TD-BM+T细胞(1)和TD-BM+T细胞(2)共4组。移植后对受鼠生存期和体重进行评分;比较移植后14 d受鼠的靶器官损伤情况,比较TD-BM和TD-BM+T细胞(1)组的病理评分;比较移植后14和28 d TD-BM和TD-BM+T细胞(1)组的骨髓嵌合率;应用ELISA法分别检测移植后14 d TD-BM和TD-BM+T细胞(1)组受鼠血清中细胞因子IFN-γ、TNF-ɑ和IL-1的浓度。应用流式细胞术检测TD-BM和TD-BM+T细胞(1)组受鼠脾细胞中H-2b+H-2k-CD4+IFN-γ+Th1细胞的百分比和CFSE检测供者T细胞发生的增殖情况。结果:TD-BM、照射对照、TD-BM+T细胞(1)和TD-BM+T(2)组平均活存时间分别为60、13.29±5.50、33±2.35、29.14±1.77 d。移植后14 d,TD-BM+T细胞(1)和TD-BM+T(2)组小鼠出现肝脏、结肠、肺脏和皮肤等多器官损伤,而在TD-BM组多器官损伤不明显。移植后14和28 d,TD-BM和TD-BM+T细胞(1)组小鼠的嵌合率均94%。移植后14 d,TD-BM+T细胞(1)受鼠血清中细胞因子IFN-γ、TNF-ɑ和IL-1水平较TD-BM组明显增高。移植后14 d,TD-BM+T细胞(1)组中H-2b+H-2kCD4+IFN-γ+百分比明显高于TD-BM组[(0.5240±0.08447)%vs(7.912±0.6087)%](P0.05)。移植后14d,供者T细胞在受者体内发生明显增殖。结论:C57BL/6(H-2b)→[C57BL/6×CBA/Ca]F1(H-2b×k)可作为单倍体相合移植aGVHD的实验模型;Th1细胞在单倍体相合移植aGVHD中可能发挥重要作用。     

IFN-γ对造血干细胞移植后肺部GVHD的作用

目的:探讨IFN-γ对造血干细胞移植后肺部GVHD的作用。方法:应用C57BL/6J和B6D2F1小鼠通过造血干细胞移植(HSCT)建立小鼠GVHD模型。根据移植的方式将小鼠分为3组:同基因HSCT组(C57BL/6J→C57BL/6J),异基因HSCT组(C57BL/6J→B6D2F1)及IFN-γ-/-异基因HSCT组(IFN-γ-/-C57BL/6J→B6D2F1)。移植后分析比较3组小鼠生存期、aGVHD临床评分及肺组织病理,检测肺泡灌洗液中总细胞数及小鼠IFN-γ水平。结果:同基因移植组小鼠第42天全部存活,无aGVHD临床症状。异基因移植组小鼠有aGVHD表现,24 d生存率大于50%,GVHD临床评分高于同基因移植组。在移植后第28天肺组织病理可见肺泡出血及淋巴细胞浸润。IFN-γ-/-异基因移植组小鼠出现致死性aGVHD表现,14 d内小鼠全部死亡,GVHD临床评分第1周就高达6.7±0.83,明显高于异基因移植组,小鼠肺组织发生严重的aGVHD病理改变,其支气管肺泡灌洗液中总细胞数在移植后第1周较其他两组明显增高,但其血清中IFN-γ含量明显低于异基因移植组及同基因移植组(P0.05)。结论:供者来源的IFN-γ对造血干细胞移植后肺组织起重要的免疫保护作用。     

基质金属蛋白酶抑制剂对小鼠急性移植物抗宿主病的预防作用

目的探讨基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP)对小鼠异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后急性移植物抗宿主病(aGVHD)的预防作用。方法用主要组织相容性复合物完全不相合的纯种近交系小鼠[供鼠为雌性 C57B/L6(H-2~b)鼠;受鼠为雄性 BALB/c(H-2~d)鼠]建立 allo-HSCT 后 aGVHD 动物模型。将小鼠随机分3组,给予 TIMP(A 组)、环孢菌素 A(CsA)(B 组)作为 GVHD 的预防方案。结果移植小鼠出现典型的 aGVHD 症状,未用 aGVHD 预防方案的移植小鼠(C 组)死亡高峰在移植后第5天～第7天,全部死亡。用 aGVHD 预防方案的 A 组和 B 组小鼠 aGVHD 症状明显减轻,平均生存时间较 C 组显著延长[分别延长(4.8±1.4) d 和(4.3±0.9)d,p<0.05]。不同 aGVHD 预防方案的移植小鼠之间,移植后外周血常规变化差异无统计学意义。应用预防方案后,移植小鼠 aGVHD 病理表现减轻。结论 TIMP 能有效预防小鼠 allo-HSCT 后 aGVHD,减轻其症状和病理损害程度,显著延长平均生存时间。TIMP 对造血干细胞植入和造血恢复无显著影响。     

移植物化学修饰与阻断 OX40-OX40L途径预防异基因骨髓移植小鼠移植物抗宿主病的研究

目的 观察甲氧基聚乙二醇-琥珀酰亚胺丙酸酸酯(mPEG-SPA)与抗OX40L单抗预处理移植物对小鼠异基因骨髓移植后急性移植物抗宿主病(aGVHD)的影响及其机制.方法 供、受鼠的脾淋巴细胞体外混合培养,加入抗OX40L单抗孵育培养后,再用mPEG-SPA化学修饰,与C57BL/6供鼠骨髓细胞混合后移植给经致死量全身照射的BALB/c受鼠.同时设相应的对照组.观察移植后受鼠aGVHD的临床表现、病理学改变、存活时间及生存率等,检测移植鼠T淋巴细胞亚群,细胞因子的变化及异基因嵌合体.结果 ①单纯骨髓移植对照组小鼠均出现aGVHD临床表现,17 d内全部死于aGVHD,存活时间为(12.1±5.5)d;而mPEG-SPA和抗OX40L单抗单独或联合预处理组小鼠一般状态较好,部分出现aGVHD表现,且较单纯骨髓移植对照组症状轻,皮肤、肝脏、小肠病理表现均较单纯骨髓移植对照组明显减轻,mPEG-SPA和抗OX40L单抗单独或联合预处理组小鼠存活时间分别为(36.2±24.9)、(32.0±24.8)和(44.3±23.2)d,均较单纯骨髓移植对照组明显延长(P＜0.05),其中抗OX40L mPEG-SPA联合预处理组小鼠平均存活时间最长(P＜0.05),mPEG-SPA单独预处理组和抗OX40L单独预处理组牛存率分别为50.0%、41.7%,明显高于单纯骨髓移植组,OX40L mPEGSPA联合预处理组生存率最高,为66.7%.②移植后对照组小鼠血清IFN-γ浓度升高,在+10～+15d时达高峰;而mPEG-SPA和抗OX40L单抗单独或联合预处理组降低,+10 d时降至最低,OX40LmPEG-SPA联合预处理组降低最明显(P＜0.01).移植后对照组IL4、IL-10浓度轻度降低,而mPEG-SPA和抗OX40L单抗单独或联合预处理组均明显升高(P＜0.05),+10～+15 d达高峰,以联合组升高最明显(P＜0.01).③mPEG-SPA和抗OX40L单抗单独或联合预处理组+60 d时异基因嵌合率为95%～100%,证实为完全供者型植入.结论 mPEG-SPA与抗OX40L单抗联合应用能够阻断T细胞激活的抗原和共刺激双信号通路,协同抑制T细胞的增殖活性,促进Th0细胞向Th2细胞分化,从而明显减轻小鼠骨髓移植中aGVHD的发生.     

昆明山海棠预防小鼠急性移植物抗宿主病的实验研究

目的观察昆明山海棠（THH）对急性移植物抗宿主病（aGVHD）小鼠血浆IFN-y、IL-4、IL-10浓度的影响，探讨THH预防aGVHD的可能机制。方法BALB／c受鼠清髓性预处理后输注C57BL／6供鼠的骨髓细胞和脾细胞混合液，建立aGVHD模型。实验分为4组：对照组（A组）、环孢素（CsA）预防组（B组）、THH预防组（C组）、THH和CsA联合预防组（D组）。观察aGVHD发生情况和受鼠嵌合体植入情况，ELISA法检测各组受鼠血浆IFN-y、IL-4、IL-10浓度。结果①B、c、D组受鼠血浆IFN-y的浓度明显低于A组（P〈0、05），D组下降最明显；IL-4浓度无明显变化；IL-10浓度均高于A组（P〈0．05），D组上升最明显；②A组受鼠移植后中位生存时间为9d，B、C、D组移植后中位生存时间均〉30d，较A组明显延长（P〈0．05）；③A组受鼠均有典型翘毛、弓背、腹泻、体重减轻表现，20d内全部死于GVHD；B、C、D组仅有翘毛、弓背表现，腹泻、体重减轻不明显；B、C组病理改变皮肤无异常，仅肝脏或小肠有少量淋巴细胞浸润；D组存活小鼠病理检查未见明显异常，均比A组轻；④B、C、D组受鼠＋30天骨髓细胞表面H-2^b分子百分率分别为（99．18±0．58）％、（97．68±0．59）％、（99、15±0．11）％。结论THH可以调节aGVHD小鼠细胞因子分泌，可用于aGVHD的预防，小剂量THH与CsA联合应用有协同作用，能减少CsA的用量。     

同胞异基因外周血干细胞移植治疗白血病研究

本研究观察异基因外周血干细胞移植 (PBSCT)治疗白血病的疗效与副作用。所选供者均为HLA A、B、DR位点与患者完全相同的同胞兄弟姐妹。供者经 2 5 0 μg/kgrhG CSF动员 5天后 ,单采外周血干细胞 1- 2次。 4例白血病病人经过改良Bu/Cy预处理方案 ,输入单个核细胞 6.78× 10 8/kg± 1.96× 10 8/kg( 5× 10 8/kg - 8.67×10 8/kg) ,其中CD3 4 为 15 .0 2× 10 6 /kg± 8.93× 10 6 /kg ( 5 .3× 10 6 /kg - 2 4 .2 3× 10 6 /kg) ,用MTX CsA MMF预防急性移植物抗宿主病 (aGVHD)。结果表明 :移植前 2天到移植后 2天白细胞降至最低 ,移植后 11- 17天中性粒细胞 >0 .5× 10 9/L ,移植后 11到 5 5天血小板 >5 0× 10 9/L。 4例中 2例出现aGVHD ,2例出现cGVHD ,2例出现感染。移植后 2 8天复查骨髓显示造血恢复 ,STR位点的DNA检查显示供者细胞生长。结论 :采用改良Bu/Cy方案和用MTX CsA MMF预防aGVHD方案进行PBSCT治疗白血病是一种安全、可靠的治疗方法。     

单倍体相合骨髓移植中急性移植物抗宿主病预防新方案的临床研究

目的　探讨骨髓移植 (BMT)供者应用G CSF和受者接受连续免疫抑制剂及加CD2 5单克隆抗体 (单抗 )预防急性重度移植物抗宿主病 (GVHD)的单倍体移植方案的可行性。方法　 38例白血病患者接受单倍体相合未去T细胞BMT ,供者应用G CSF动员 7d后采集骨髓 ;受者应用连续免疫抑制剂预防急性GVHD ,临床观察移植结果。结果　所有患者均取得三系造血重建 ,移植后粒细胞 >0 .5×1 0 9 L及血小板 >2 0× 1 0 9 L的中位时间分别为第 1 9天和 2 3天 ,植入直接证据检测证实完全供者造血 ,发生Ⅱ～Ⅳ度急性GVHD 4例 ,发生率为 1 0 .5 % ,无病存活大于 6个月可评价慢性GVHD 2 8例 ,均发生慢性GVHD ,表现轻微和局限 ,其中广泛性慢性GVHD 3例 ,发生率为 1 0 .7%。免疫功能恢复的结果显示 ,在移植后 1 8个月内动态观察免疫细胞计数的变化 ,CD3+、CD8+、CD1 9+、CD56+细胞在 1 2个月内可恢复至正常水平 ,CD4+细胞在移植后 1 8个月内恢复。随访中位时间 1 2个月 (6～ 2 6个月 ) ,死亡 1 2例 ,Kaplan Meier生存分析 ,2年估计无病生存率为 (68.4± 6 .0 ) % ,存活病例Karnofsky评分大于 90 %。结论　经G CSF动员的骨髓与连续免疫抑制剂的应用 ,特别是CD2 5单抗应用于未去T细胞单倍体相合BMT急性重度GVHD的预防 ,对移植物植入、免疫     

Severe immune hemolysis after minor ABO-mismatched allogeneic peripheral blood progenitor cell transplantation occurs more frequently after nonmyeloablative than myeloablative conditioning

BACKGROUND: Hemolysis as a result of donor-recipient minor ABO mismatching is a complication of allogeneic peripheral blood progenitor cell (PBPC) transplantation (PBPCT). The increased B-lymphocyte content of PBPC grafts and immunosuppressive regimens without methotrexate (MTX) may increase incidence and severity of this event. STUDY DESIGN AND METHODS: A total of 93 patients were analyzed after allogeneic PBPCT. In 25 (27%) cases, minor (n=21) or bidirectional (n=4) ABO mismatching was present. Of these, 15 patients received myeloablative and 10 received nonmyeloablative conditioning regimens. For GVHD, prophylaxis cyclosporin A (CsA) alone (n=2) or CsA with MTX (n=13) was given after myeloablative conditioning and CsA with mycophenolate mofetil (MMF) after nonmyeloablative conditioning (n=10). RESULTS: Hemolysis occurred in 4 out of 25 (16%) patients with minor or bidirectional ABO mismatching only. Three patients underwent nonmyeloablative conditioning and were given CsA with MMF, and one patient underwent myeloablative conditioning and was given CsA alone for GVHD prophylaxis. Hemolysis began 7 to 10 days after transplantation, and donor type alloantibodies were detectable concomitantly with recipients type RBCs. CONCLUSION: Patients receiving minor or bidirectional ABO-mismatched PBPC grafts and GVHD prophylaxis without MTX are at risk of hemolysis. Prophylactic interventions in patients before minor ABO-mismatched PBPCT not receiving MTX should be taken into consideration. Careful monitoring of hemolysis parameters during the first 15 days after PBPCT transplantation is mandatory.     

G-CSF预处理供者单倍体相合骨髓移植加用CD25 单克隆抗体预防急性GVHD的临床研究

探索单倍体相合未去T细胞骨髓移植应用CD25单克隆抗体预防急性移植物抗宿主病(GVHD)的疗效。在1999年2月至2001年11月期间，对28例白血病病人进行HLA2—3个位点不合骨髓移植，其中2000年11月前完成的不使用CD25单杭的15例为对照组，此后完成的13例为本方案组，两组供均接受粒细胞集落刺激因子(G—CSF，Lenograstim)250μg／d，皮下注射，连用7天后采髓；环抱菌素A，氨甲蝶呤，抗胸腺细胞球蛋白和霉酚酸酯(MMF)联合用于GvHD预防。研究组病例在移植前2小时和移植后第4天加用CD25单克隆抗体(Basiliximab)进一步预防GvHD；并对两组移植后植入，GvHD发生和无病存活情况进行比较。结果表明，28例患移植后均植入成功，植入直接证据的检测证实完全供造血，两组造血重建时间比较无显性差异(P＞0.05)；未用抗体的对照纽急性Ⅱ—IV度GvHD发生率33.3％，本方案组加用CD25单克隆抗体，无1例发生急性Ⅱ—IV度GVHD，两组之间差异有显性(P＜0．05)；慢性GvHD发生均为局限性，两组的差异无显性(P＞0.05)。对照组中位随访26(15—36)月，活存9／15例，本方案组中位随访8(3—15)月，活存12／13例，Kaplan—Meier存活曲线分析与对数秩检验，本方案组1年无病生存率明显高于对照组(P＜0．05)。结论：单倍体相合骨髓移植加用CD25单克隆抗体有利于急性重度GvHD的预防，显提高单倍体相合骨髓移植无病生存率。