蛇毒神经生长因子对鼠视网膜神经节细胞微管相关蛋白-1B的影响

目的 通过对视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)微管相关蛋白-1B(microtubule associated protein-1B,MAP-1B)的研究,观察蛇毒神经生长因子(venom nerve growth factor,vNGF)在鼠视神经夹伤后对RGCs的保护作用.方法 将Wistar大鼠40只随机分为实验对照组、实验治疗组,每组20只.制作视神经夹伤模型,用头部宽1 mm的微型血管夹夹伤大鼠右眼视神经后,实验治疗组向右眼玻璃体内注入vNGF 100 BU(0.025 mL).实验对照组向右眼玻璃体内注入0.025 mL平衡盐液.2组的左眼均未做任何处理,作为正常对照组.于损伤后3 d、7 d、14 d、30 d、60 d取材,在光镜下计数RGCs,透射电镜观察不同时间段各组视网膜形态学变化,并进行MAP-1B免疫组织化学染色分析.结果 光镜下,伤后3～30 d实验治疗组的RGCs数目高于实验对照组,差异有显著统计学意义(P＜0.01),伤后2组RGCs数目均比正常对照组少,差异有显著统计学意义(P＜0.01).伤后60 d,实验治疗组与实验对照组之间的RGCs数目差异无统计学意义(P＞0.05),实验治疗组、实验对照组与正常对照组差异有显著统计学意义(P＜0.01). 电镜下,伤后14 d实验治疗组视网膜微管数目比实验对照组多,排列也较整齐.免疫组织化学结果实验治疗组2周内MAP-1B表达逐渐增强,1个月时明显减弱;实验对照组3 d时有MAP-1B表达,到2周时表达明显减弱.结论 在视神经损伤早期,vNGF能减轻视神经夹伤后微管的损坏,提高MAP-1B的表达强度,提高RGCs的存活数量,对RGCs有明显的保护作用.     

蛇毒神经生长因子对大鼠视神经夹伤保护的电镜观察

目的研究蛇毒神经生长因子在视神经损伤后对视网膜神经节细胞的保护作用。方法将Wistar大鼠40只随机分为实验对照组和实验治疗组。制作实验性视神经夹伤模型,用头部宽1mm的微型血管夹夹伤大鼠右眼视神经后,实验治疗组向伤眼玻璃体腔内注入蛇毒神经生长因子100BU(0.025mL)。实验对照组向伤眼玻璃体腔内注入0.025mL平衡盐液。于损伤后第3d、7d、14d、30d、60d取材,用透射电镜观察不同时间段各组视网膜形态学变化。结果电镜下大鼠视网膜改变:实验治疗组和对照组电镜下均可见坏死和凋亡。伤后14d,实验治疗组视网膜微管数目比实验对照组较多,排列比较整齐。结论在视神经损伤早期,蛇毒神经生长因子能减轻视神经夹伤后微管的损坏,提高视网膜神经节细胞的存活数量,对视网膜神经节细胞有明显的保护作用。     

神经营养因子影响视神经夹伤后视网膜GAP-43mRNA表达变化

目的：观察大鼠视神经夹伤后视网膜上GAP-43基因的变化,观察玻璃体腔内注射睫状神经营养因子（ciliary neurotrophic factor,CNTF）和腺病毒介导脑源性神经营养因子（adenovirally delivered brain-derived neurotrophic factor,Ad-BDNF）对视网膜上GAP-43mRNA的影响.方法：成年SD大鼠球后2mm处作视神经夹伤模型,经巩膜玻璃体腔内注射微量神经营养因子（neurotraphic factors,NFs）,应用原位杂交法观察视网膜的GAP-43mRNA的变化.结果：正常SD大鼠视网膜上仅在节细胞层检测到少数细胞存在GAP-43mRNA杂交信号,对照组和CNTF治疗组视神经夹伤后1wk内可观察到视网膜神经节层中存在较强的GAP-43mRNA杂交信号,伤后2wk时已减弱至伤前,Ad-BDNF治疗组在视神经夹伤后4wk内在视网膜上均能观察到GAP-43mRNA的杂交信号,其中在夹伤后1～2wk时杂交信号相对较强.结论：视神经夹伤能上调视网膜上GAP-43mRNA表达,玻璃体腔内注射Ad-BDNF在伤后4wk内均能上调视网膜上GAP-43mRNA表达.     

活化的巨噬细胞对钳夹伤大鼠视神经生长相关蛋白-43表达的影响

目的观察钳夹伤大鼠眼内注射酵母多糖后对视神经生长相关蛋白（gowth-associated protein-43,GAP-43）表达的影响,并探讨巨噬细胞所起的作用。方法大鼠视神经钳夹伤后,于左眼玻璃体腔注射酵母多糖5μL,右眼注射磷酸盐缓冲液5μL,分别于7d、14d和21d提取视神经蛋白行免疫印迹分析。结果酵母多糖处理眼中,GAP-43蛋白的表达显著增加,7d即升高,14d时明显增强,直到21d时仍保持较高水平,各时间点相对磷酸盐缓冲液处理眼均有显著性差异（P〈0.05）。结论酵母多糖玻璃体腔注射后,能诱导眼内巨噬细胞活化,活化的巨噬细胞能增强钳夹伤大鼠视神经GAP-43蛋白的表达,对视神经的再生修复可能有一定的促进作用。     

银杏叶提取物对大鼠视神经挫伤后视网膜形态及视神经GAP-43表达的影响

目的观察银杏叶提取物（EGb761）对大鼠视神经夹挫伤后视网膜形态学及视神经GAP-43表达的影响。方法SD大鼠60只随机分为正常组12只、对照组24只、治疗组24只。后两组建立视神经不完全损伤模型,从伤后1 h开始,隔日1次,对照组给予生理盐水球后注射,治疗组给予EGb761球后注射。在伤后3 d、7 d、14 d、28 d取材,HE染色观察两组视网膜形态学改变;RT-PCR检测两组视神经中GAP-43 mRNA的表达水平。结果各时间点视网膜病理学改变治疗组轻于对照组,GAP-43 mRNA的表达治疗组较对照组高（P〈0.05）。结论EGb761可以抑制神经节细胞的损伤,使视神经组织中GAP-43 mRNA表达增加,促进视神经夹挫伤后视神经的再生。     

大鼠视神经挫伤后生长相关蛋白的变化及重组人促红细胞生成素的作用

目的 研究大鼠视神经挫伤后视神经生长相关蛋白( GAP-43)的变化及重组人促红细胞生成素(rhEPO)的作用.方法 建立外伤性视神经损伤的动物模型,随机分为正常对照组、损伤组(视神经钳夹+生理盐水)及rhEPO组(视神经钳夹+rhEPO),于损伤后1d、4d、7d、14 d和28 d对各组视网膜及视神经进行形态学观察,免疫组化染色法测定视神经GAP-43的活性.结果 rhEPO组较损伤组视网膜及视神经病变明显减轻；在损伤后4d和7d趼组间损伤远端GAP-43表达差异无统计学意义(P＞0.05)；14 d和28 d rhEPO组损伤远端GAP-43表达较损伤组明显升高(P＜0.05).结论 rhEPO对视神经不完全损伤可促进视网膜神经节细胞存活与视神经纤维再生修复.     

人脐血干细胞玻璃体腔移植对大鼠外伤性视神经损伤的保护作用

目的观察人脐血干细胞(human umbilical cord blood stem cells,h UCBSC)移植对视神经部分受损SD大鼠视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGC)的保护作用。方法将48只健康成年SD大鼠随机分为2组,2组SD大鼠暴露视神经,应用40 g夹持力的视神经夹在大鼠眼球后2 mm处夹视神经30 s造成部分视神经损伤模型,均损伤左眼。A组:伤后1周玻璃体腔注射脐血干细胞载体PBS,24只。B组:伤后1周玻璃体腔注射h UCBSC,24只;2组均于注射后7 d、14 d、21 d、28 d处死动物。处死前7 d双上丘注射50 g·L-1荧光金逆行标记双眼RGC。然后按时间先后处死大鼠分离视网膜置于荧光显微镜下,计数2组RGC并计算RGC标识率。结果 A、B两组视神经损伤眼RGC计数均低于未损伤眼(均为P<0.05),且随时间延长两组RGC标识率均呈下降趋势(均为P<0.05),但B组注射后7 d、14 d、21 d、28 d RGC标识率(77.52±6.33)%、(74.12±8.23)%、(64.78±5.21)%、(59.93±9.00)%下降幅度明显较A组(75.68±8.74)%、(68.21±10.59)%、(56.24±9.34)%、(48.91±8.81)%平缓。同时间段B组RGC标识率均高于A组,且差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论玻璃体腔注射h UCBSC可减缓外伤性视神经损伤大鼠视网膜中RGC的凋亡,对RGC具有一定的保护作用。     

雪旺细胞源营养神经活性物质对大鼠视网膜节细胞损伤的作用

目的 观察雪旺细胞(Schwann cells,SC)源营养神经活性物质 (SC derived neurotrophic activity,SCNA)对Sprague-Dawly(SD)大鼠视神经损伤后视网膜节细胞(retinal ganglion cells,RGC)存活的影响。 方法 体外培养日龄3～5 d SD乳鼠SC,收集无血清条件培养液,经超滤浓缩后制成冻干粉。SD大鼠分为正常对照组,视神经夹伤对照组,视神经夹伤溶剂对照组,视神经夹伤SCNA 治疗组,每组20只眼。荧光金逆行标记RGC后7 d,除正常对照组外均行球后视神经夹伤,SCNA治疗组将100 ng SCNA注入大鼠玻璃体腔内。分别于视神经夹伤后第5、7、14、21、28 d 将动物灌注固定,做全视网膜铺片,行RGC计数。 结果 视神经夹伤后第7 d RGC开始减少,14 d时降至正常对照的70.2%,28 d时降至40.5%。SCNA治疗组7 d时RGC数开始减少,但14、21、28 d RGC数均明显多于视神经夹伤对照组及视神经夹伤溶剂对照组(P＜0.01)。 结论 在视神经夹伤后眼内注射SCNA能减少RGC的死亡对RGC损伤有保护作用。（中华眼底病杂志,2000,16：1-70）     

丙戊酸钠对大鼠视神经损伤后视网膜生长相关蛋白-43表达的影响

目的 研究丙戊酸钠对大鼠视神经损伤后视网膜生长相关蛋白-43（GAP-43）表达的影响,探讨丙戊酸钠在视神经损伤后的作用及其机制.方法 健康雄性SD大鼠60只（72只眼）,随机分3组：正常组（不做任何处理）12只（24只眼）、对照组（等量生理盐水腹腔注射）和治疗组（丙戊酸钠300 mg/kg腹腔注射）,每组24只大鼠（24只眼）.建立大鼠视神经不完全损伤模型,分别于损伤后3d、7d、14 d、21 d处死,光镜下观察视网膜神经节细胞的病理形态学变化,计算机图像分析技术和免疫组织化学技术半定量检测视网膜组织GAP-43的平均光密度值.结果 视神经损伤后对照组和治疗组视网膜神经节细胞数目均呈下降趋势.与对照组比较,治疗组视网膜神经节细胞空泡化程度轻,各层胞核排列相对密集整齐.治疗组GAP-43免疫组化染色的平均光密度值及阳性细胞计数均高于对照组.结论 由丙戊酸钠对视神经损伤后GAP-43表达的增强,可以推断丙戊酸钠对视神经损伤具有保护作用.     

地塞米松对兔视神经钳夹伤后视网膜神经节细胞存活及Nogo-A表达的影响

目的观察地塞米松对家兔视神经钳夹伤后视网膜神经节细胞(retinal ganglion cell,RGC)存活的影响及损伤视神经、视网膜Nogo-A表达的变化。方法采用兔球后视神经钳夹伤模型,健康成年家兔分为正常对照组、损伤组、治疗组。分别于损伤后3d、7d、14d处死动物,观察单位面积RGC存活数量及损伤后Nogo-A在视神经、视网膜的表达变化。结果视神经损伤后,治疗组RGC的存活数高于损伤组及对照组(P<0.01)。对照组、损伤组损伤后3d、7d、14d视神经、视网膜Nogo-A表达增强,至损伤后7d达高峰;治疗组视神经、视网膜表达亦增强,各时间点均弱于损伤组、对照组,差异有显著统计学意义(P<0·01)。结论视神经损伤后,地塞米松能够增加RGC的存活数量,能够下调No-go-A的表达,这可能是地塞米松治疗作用机制之一。     

生长因子与角膜内皮细胞

角膜内皮细胞是维持角膜透明的关键细胞成分,角膜内皮细胞密度降低和形态异常可导致内皮细胞功能失代偿而降低视力。在伤口愈合过程中,生长因子可增加角膜内皮细胞密度槿刺激内皮细胞再生,促进伤口愈合。肽类生长因子影响着多种细胞生理过程,包括细胞增殖,分化,移行和存活。     

Growth factors in the anterior segment: role in tissue maintenance, wound healing and ocular pathology

A number of growth factors and their associated receptors, including epidermal growth factor, transforming growth factor-beta, keratinocyte growth factor, hepatocyte growth factor, fibroblast growth factor and platelet-derived growth factor have been detected in the anterior segment of the eye. On binding to cellular receptors, these factors activate signalling cascades, which regulate functions including mitosis, differentiation, motility and apoptosis. Production of growth factors by corneal cells and their presence in the tear fluid and aqueous humour is essential for maintenance and renewal of normal tissue in the anterior eye and the prevention of undesirable immune or angiogenic reactions. Growth factors also play a vital role in corneal wound healing, mediating the proliferation of epithelial and stromal tissue and affecting the remodelling of the extracellular matrix (ECM). These functions depend on a complex interplay between growth factors of different types, the ECM, and regulatory mechanisms of the affected cells. Imbalances may lead to deficient wound healing and various ocular pathologies, including edema, neovascularization and glaucoma. Growth factors may be targeted in therapeutic ophthalmic applications, through exogenous application or selective inhibition, and may be used to elicit specific cellular responses to ophthalmic materials. A thorough understanding of the mechanism and function of growth factors and their actions in the complex environment of the anterior eye is required for these purposes. Growth factors, their function and mechanisms of action as well as the interplay between different growth factors based on recent in vitro and in vivo studies are presented.     

Recent developments in our understanding of how platelet-derived growth factor (PDGF) and its receptors contribute to proliferative vitreoretinopathy

Proliferative vitreoretinopathy, a disease process occurring in the setting of a rhegmatogenous retinal detachment, is thought to develop as a result of exposure of retinal cells to vitreous. Vitreous contains many growth factors, and platelet-derived growth factor (PDGF) has been considered a major contributor to PVR. Evaluation of both PDGF and PDGF receptors (PDGFRs) as potential therapeutic targets in the context of a rabbit model of PVR revealed that PDGFR-based approaches protected from PVR, whereas neutralizing PDGFs was a much less effective strategy. The basis for these observations appears to reflect that fact that the PDGFR could be activated by a wide spectrum of vitreal agents that are outside of the PDGF family. Furthermore, blocking signaling events by which the non-PDGFs indirectly activated PDGF α receptor (PDGFRα) protected rabbits from developing PVR. These studies demonstrate that the best therapeutic targets for PVR are not PDGFs, but PDGFRα and certain signaling events required for indirectly activating PDGFRα.     

生长因子与增生性玻璃体视网膜病变相关性的研究进展

增生性玻璃体视网膜病变(PVR)是眼球穿通伤及孔源性视网膜脱离手术后的常见并发症。该病的发病机制仍未明确,但研究表明,视网膜色素上皮(RPE)细胞具有自分泌细胞因子的能力,许多生长因子在PVR患者的玻璃体或者视网膜下积液中过度表达,这些生长因子及其受体在PVR的发生发展中扮演了重要角色,血-视网膜屏障被破坏后,生长因子的生理平衡即被打破,RPE细胞受到生长因子的刺激发生上皮-间质转化(EMT)、迁移及增殖,进而与其他细胞及细胞外基质形成视网膜前膜,牵拉视网膜造成视网膜脱离。近年来学者们对生长因子在PVR的形成中所涉及的信号通路、促EMT进程及细胞增殖做了大量研究,本文将对近年来促PVR发展的生长因子及拮抗生长因子治疗PVR的研究结果作一综述。     

神经营养因子和生长因子等对培养的成人视网膜神经细胞的影响

目的　探讨成人视网膜神经细胞体外培养条件 ,脑源性神经营养因子 (BDNF)、神经营养素 (NT 4 )、表皮生长因子 (EGF)、成纤维细胞生长因子 (FGF)、诱导分化因子全反式视黄酸 (RA)等对成人视网膜神经细胞生长、增殖、凋亡的影响及调控机制。方法　胰蛋白酶消化结合机械吹打分离成人视网膜神经细胞 ,在培养基中加入或不加入BDNF、NT 4、EGF、FGF、RA。根据细胞形态、生长方式及免疫细胞化学特征确定细胞类型。比较各组中神经元的数目、转录调控因子c fos、c jun及细胞凋亡调控因子Bcl 2、Bax表达水平。结果　与对照组相比 ,BDNF、FGF处理组存活的神经元特异性烯醇酶、Thy1.1抗体和Bcl 2、c fos及c jun表达阳性细胞数也增多 (均P <0 0 1) ,培养的视网膜神经细胞在体外存活时间可长达 8个月 ;RA处理组c fos、c jun阳性细胞数较对照组增多 (均P <0 0 1) ;而NT 4、EGF处理组各项指标与对照组比较 ,差异无显著意义 (均P >0 0 5 )。结论　BDNF、FGF、RA能显著提高体外培养的成人视网膜神经细胞的存活 ,其机制可能涉及上调转录调控因子c fos、c jun及凋亡抑制因子Bcl 2的表达 ,或下调凋亡促进因子Bax的表达。但EGF、NT 4对体外培养的视网膜神经细胞存活状态无明显改善作用。     

圆锥角膜组织中EGF和bFGF变化免疫组织化学的研究

目的 观察正常人及圆锥角膜中表皮生长因子(EGF)和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF)的表达，探讨EGF和hFGF在圆锥角膜中的变化。方法 采用免疫组织化学SABC法检测角膜组织中EGF、bFGF的表达，结果 在圆锥角膜上皮层、Bowman层和内皮层有EGF表达，EGF比正常角膜的表达强；在圆锥角膜的上皮层、实质层和内皮层可见bFGF的阳性表达，圆锥角膜的基质瘢痕区bFGF有较强的阳性表达。结论 圆锥角膜组织中EGF水平增高，促进上皮细胞和基质细胞的DNA合成，从而使组织愈合。bFGF表达增强可以促进角膜上皮、基质细胞和内皮细胞的增殖。     

水蛭素对血小板源性生长因子及受体的影响

目的 通过观察水蛭素对血小板源性生长因子(PDGF)及受体(PDGF-R)的影响,深入探讨水蛭素防治增生性玻璃体视网膜病变(PVR)形成的机制。方法 利用穿孔性眼外伤的动物模型,分别给予10U/ml和20U/ml的水蛭素于玻璃体腔内,用酶联免疫法(ELISA)测定玻璃体中PDGF的含量,用免疫组织化学法观察玻璃体腔内细胞增殖相关抗原(Ki-67)、白介素1β转换酶(interlukin 1-β converting enzyme,ICE)和PDGFR的表达。结果 造模后3d和28dPDGF的检测结果显示生理盐水对照组(434.88±56,75,457.17±74.39)与剂量Ⅰ组之间(285.95±54.04,322.50±106.93)差异有显著性(P<0.01);PDGF-R的检测结果显示生理盐水对照组(147.82±14.95,141.05±19.03)与剂量Ⅰ组(87.27±20.80,2.57±16.75)和剂量Ⅱ组(97.67±11.37,68.26±5.6)之间差异有显著性(P<0.01);ICE的检测结果显示生理盐水对照组(38.51±3.04,39.74±3.78)与剂量Ⅰ组(57.01±10.02,57.61±9.04)和剂量Ⅱ组(56.22±4.95,57.45±8.25)之间差异有显著性(P<0.01)。Ki-67检测结果显示造模后28d生理盐水对照组(127.83±128.72)与剂量Ⅰ组(51.67±18.61)和剂量Ⅱ组(51.50±31.55)之间差异有显著性(P<0.01和P<0.05)。结论 水蛭素通过抑制PDGF的分泌和PDGF-R的激活而抑制玻璃体腔内细胞的     

IGF-1参与调控眼球生长的研究进展

眼球生长是一个在视觉信号诱导下的主动过程,视网膜、脉络膜和巩膜都参与了这一过程,并且有多种信号分子在调控眼球生长的过程中发挥了重要作用。IGF-1作为一种强有力的促生长因子在维持和控制细胞生长、增殖、分化、成熟和再生等方面具有重要作用,在眼内也有广泛的表达,并且参与了眼科多种疾病的发生发展。近年来,它在调控眼球生长过程中发挥的作用受到了广泛的关注。本文对IGF-1在促进眼球主动生长的调控作用展开综述。     

抗VEGF药物联合PRP治疗新生血管性青光眼的效果

目的：探究抗血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)联合视网膜激光光凝(PRP)治疗新生血管性青光眼(neovascular glaucoma,NVG)的效果,以及对房水中VEGF、血小板源性生长因子-C(platelet derived growth factor-C,PDGF-C)的影响。

方法：选择2016-11/2017-11在我院接受检查和治疗的NVG患者90例93眼,随机分为对照组和观察组。对照组使用PRP治疗,观察组使用PRP联合玻璃体注射雷珠单抗治疗。比较两组患者治疗后1mo的临床疗效、虹膜新生血管和视力恢复情况。并分析治疗前和治疗后1mo视网膜静脉循环时间、眼压、视网膜神经纤维层(retinal nerve fiber layer,RNFL)厚度、视野缺损值、房水中VEGF和PDGF-C水平以及不良反应。

结果：治疗后1mo观察组的临床疗效、虹膜新生血管消失情况和视力恢复情况优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后1mo观察组的视网膜静脉循环时间、眼压、视野缺损值、房水VEGF和PDGF-C水平均显著低于对照组,RNFL厚度显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者不良反应发生情况比较,差异无统计学意义(P>0.05)。

结论：对NVG患者使用视网膜激光光凝联合抗VEGF药物治疗可更有效抑制血管生成,恢复视网膜功能,具有更好的疗效,这可能与联合治疗具有更佳的下调VEGF与PDGF-C的作用有关。     

PDGF抗体和VEGF抗体预防增生性玻璃体视网膜病变

目的评价血小板源性生长因子（PDGF）抗体和血管内皮生长因子（VEGF）抗体对实验性增生性玻璃体视网膜病变（PVR）的预防作用。方法将兔制成PVR模型，将一定浓度的PDGF抗体、VEGF抗体及BSS液分别在当时及第7d注入兔眼的玻璃体腔，每日观察兔眼情况，处死兔子做眼病理切片及免疫组织化学染色。结果间接检眼镜观察可见对照组与实验组均出现视网膜脱离。玻璃体腔内注药后第21d、28dPVR分级实验组与对照组差异有统计学意义（P〈0．05），在制作动物模型时直接注入和第7d时注入差异无统计学意义（P〉0．05）。病理检查所见与间接检眼镜所见相符。免疫组织化学染色计算阳性细胞百分率，亦得出相同结果。结论玻璃体腔内注入PDGF抗体、VEGF抗体均可预防PVR的进展，注药时间对于PVR的发展无明显影响。