健脾化痰汤对胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞炎症细胞因子分泌的影响

目的:观察健脾化痰汤含药血清对胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞分泌脂联素、TNF-α和IL-6的影响,探讨其改善IR可能机制。方法:采用细胞培养技术,将3T3-L1小鼠前脂肪细胞诱导分化为成熟脂肪细胞,通过地塞米松诱导建立IR细胞模型,将脂肪细胞分为正常组(基础培养液加10%空白组血清培养正常脂肪细胞)、IR组(基础培养液加10%空白组血清培养IR脂肪细胞)、中药组(基础培养液加10%健脾化痰组血清培养IR脂肪细胞)和西药组(基础培养液加10%比格列酮组血清培养IR脂肪细胞),培养48 h,葡萄糖氧化酶法检测细胞培养上清液中葡萄糖浓度,ELISA法检测细胞培养上清液中脂联素、TNF-α和IL-6含量。结果:与正常组比较,IR组葡萄糖消耗量和脂联素含量显著降低(P<0.05),TNF-α和IL-6含量显著升高(P<0.05);与IR组比较,中药组和西药组葡萄糖消耗量和脂联素含量明显升高(P<0.05),TNF-α和IL-6含量显著降低(P<0.05)。结论:脂联素、TNF-α和IL-6参与IR发生,健脾化痰汤可能通过调节IR脂肪细胞炎症细胞因子分泌,改善IR。     

决明子乙醇提取物对高脂血症模型大鼠糖脂代谢及相关炎性细胞因子的影响

目的：观察决明子乙醇提取物对实验性高脂血症模型大鼠血脂、血糖及炎性细胞因子白介素6（IL-6）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）的影响,探讨决明子治疗高脂血症的调脂外作用机制。方法：采用饲喂高脂饲料和饮用10%乙醇溶液的方法建立高脂血症大鼠模型。造模成功后,随机分为5组,模型组,阳性对照组（血脂康,0.15 g·kg^-1）,决明子低、中、高（4,8,16 g·kg^-1）剂量组,各组均按10 mL·kg^-1体积ig给予相应药物,并设正常对照组,连续ig 4周。灌胃给药期间继续饲喂高脂饲料和饮用10%乙醇溶液。末次给药后,采血,用全自动生化仪测定大鼠血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白-胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白-胆固醇（HDL-C）、葡萄糖（Glu）的含量,并用ELISA法测定血清中IL-6和TNF-α的含量。结果：与正常对照组比较,高脂血症模型组大鼠血清TC,TG,LDL-C,Glu含量显著升高（P<0.01）,HDL-C显著降低（P<0.01）;IL-6和TNF-α含量显著升高（P<0.01）。与模型组比较,决明子乙醇提取物高、中剂量组能显著降低大鼠血清中TC,TG,LDL-C,Glu的含量,显著升高HDL-C的含量（P<0.01）;显著降低大鼠血清IL-6和TNF-α水平（P<0.01）。结论：决明子乙醇提取物不仅可有效改善高脂血症模型大鼠的血糖及血脂水平,亦可明显降低炎性细胞因子IL-6和TNF-α水平,这可能有利于动脉粥样硬化斑块的稳定。     

基于JNK信号通路探讨扶肝化纤汤对肝星状细胞活化增殖的影响

目的 探讨扶肝化纤汤对肝星状HSC-T6细胞活化增殖及c-Jun氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase,JNK）信号通路的影响。方法 SD大鼠ig扶肝化纤汤制备含药血清,转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）诱导HSC-T6细胞活化,设置对照组（10%胎牛血清）、模型组（15%正常血清）、扶肝化纤汤含药血清组（15%含药血清）、JNK抑制剂组（15%正常血清、20 μmol/L SP600125）,干预24 h。CCK-8法检测各组HSC-T6细胞增殖情况;ELISA法检测细胞上清液中白细胞介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）、IL-6和肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）水平;Western blotting检测p-JNK和α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）表达;qRT-PCR检测JNK和α-SMA mRNA表达;细胞免疫荧光检测α-SMA表达。结果 TGF-b1诱导24 h后,HSC-T6细胞变长,胞体变大,胞质内折光颗粒减少,部分细胞融合成片状。与模型组比较,各给药组均可明显抑制HSC-T6增殖（P<0.05）,显著抑制炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α的分泌（P<0.05）,下调p-JNK、α-SMA蛋白表达及JNK、α-SMA mRNA表达水平（P<0.05）,扶肝化纤汤含药血清与JNK抑制剂作用相当。结论 扶肝化纤汤可抑制HSC细胞活化增殖,减少活化HSC-T6细胞JNK、α-SMA mRNA表达,降低p-JNK、α-SMA蛋白表达水平。抑制JNK信号通路激活可能是扶肝化纤汤抗肺纤维化的另一种作用机制。     

阿托伐他汀影响原发性高血压患者循环血单个核细胞炎症因子表达的临床研究

 目的 探讨阿托伐他汀对原发性高血压（EH）患者循环血单个核细胞 (PBMC) 分泌炎症细胞因子——肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素1β（IL-1β）的影响。方法 40例血脂正常的EH男性患者随机分成阿托伐他汀治疗组(阿托伐他汀10 mg·d-1,qd, 20例)及20例常规治疗组治疗3个月。采用密度梯度离心法分离PBMC,检测治疗前后PBMC分泌TNF-α、IL-6、IL-1β水平,20名年龄与性别相匹配的健康者作为正常对照。结果 EH患者PBMC分泌TNF-α、IL-6、IL-1β水平明显高于正常对照组（P<0.01）;治疗后PBMC分泌TNF-α、IL-6、IL-1β水平,阿托伐他汀组明显低于治疗前（P<0.01、P<0.05）,常规治疗组则无显著差异（P>0.05）。两组治疗前后血压有显著差异( P<0.01),但组间无显著差异(P>0.05)。结论 EH患者PBMC处于激活状态,存在炎症反应。阿托伐他汀可抑制PBMC分泌炎症细胞因子,可能有利于改善并延缓高血压的进程。     

基于CD14, IL-1β表达及SGC-7901细胞凋亡变化探讨清热化湿方防治胃癌的机制

目的: 观察清热化湿方对人胃腺癌细胞7901增殖、凋亡及CD14基因、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及白细胞介素1β(IL-1β)表达的影响。方法: 采用血清药理学方法,对照组予胎牛血清,治疗组分别予不同体积分数(5%,10%,15%,20%,30%)清热化湿方含药血清干预体外培养的胃腺癌细胞SGC-7901,应用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测细胞增殖,流式细胞仪分析细胞凋亡率、细胞周期,免疫组化、Real-time PCR技术检测CD14,TNF-α,IL-1β蛋白及mRNA表达情况。结果: 与对照组比较,治疗组SGC-7901细胞存活率明显下降(P<0.05);与对照组比较,治疗组S期细胞减少、G₀/G₁期细胞增多,且与药物质量浓度有剂量依赖性(P<0.05)。治疗组可明显下调CD14,TNF-α,IL-1β蛋白及mRNA表达并促进细胞凋亡(P<0.05),以中剂量更为明显。结论: 清热化湿方可能通过调控CD14,TNF-α,IL-1β表达,介导SGC-7901细胞S期,诱导细胞凋亡,发挥防治胃癌的效应。     

肌瘤清胶囊对子宫肌瘤模型大鼠血清NOS、TNF-α和IL-2水平的影响

目的:本研究主要观察肌瘤清胶囊对子宫肌瘤大鼠血清NOS活性及TNF-α、IL-2水平的影响,探讨肌瘤清胶囊治疗子宫肌瘤的可能机制。方法:采用雌激素、孕激素共同肌注的方法建立大鼠子宫肌瘤模型,灌胃给予肌瘤清胶囊11周,检测血清NOS活性和IL-2、TNF-α水平。结果:模型组大鼠血清NOS活性和TNF-α水平较正常组显著升高(P<0.01),IL-2水平显著降低(P<0.01);而肌瘤清胶囊能明显降低血清NOS活性和TNF-α水平(P<0.05或P<0.01),升高血清IL-2水平(P<0.05或P<0.01)。结论:肌瘤清胶囊能明显降低血清NOS活性和TNF-α水平,升高IL-2水平,提示肌瘤清胶囊抑制子宫肌瘤作用可能与调节内分泌、提高机体免疫功能有关。     

茯苓酸调节Hippo信号通路对二乙基亚硝胺诱导的肝癌大鼠的治疗作用研究

[目的]探讨茯苓酸调节Hippo信号通路对二乙基亚硝胺(DEN)诱导的肝癌大鼠的治疗作用。[方法]取SD大鼠随机分为对照组、模型组、茯苓酸低剂量(3.5 mg/kg)组、茯苓酸中剂量(7 mg/kg)组、茯苓酸高剂量(14 mg/kg)组、氟尿嘧啶(50 mg/kg)组,每组10只,模型组和给药组大鼠通过腹腔注射DEN诱导建立肝癌模型,对照组大鼠腹腔注射等剂量0.9%氯化钠溶液,以茯苓酸和氟尿嘧啶分组处理后检测各组大鼠血清肝功能指标谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平;检测各组大鼠体质量变化、肝脏指数、肝表面癌结节数、最大癌结节体积;以苏木精-伊红(HE)染色检测各组大鼠肝组织病理形态并比较其炎症细胞浸润数;以试剂盒检测大鼠血清炎症因子白细胞介素(IL)-6、IL-17、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与氧化应激因子超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)水平;以蛋白免疫印迹法检测各组大鼠肝组织Hippo信号通路相关蛋白[Yes相关蛋白(YAP)、LATS1]表达。[结果]与对照组比较,模型组大鼠肝组织发生明显癌变,给药结束后体质量、血清SOD、CAT水平显著降低(P＜0.05),血清ALT、AST、IL-6、IL-17、TNF-α与MDA水平、肝脏指数、肝表面癌结节数、最大癌结节体积、炎症细胞浸润数、肝组织LATS1蛋白表达及p-YAP1/YAP1显著升高(P＜0.05);与模型组比较,茯苓酸低、中、高剂量组、氟尿嘧啶组大鼠肝组织癌变症状均减轻,给药结束后体质量、血清SOD、CAT水平升高(P＜0.05),血清ALT、AST、IL-6、IL-17、TNF-α与MDA水平、肝脏指数、肝表面癌结节数、最大癌结节体积、炎症细胞浸润数、肝组织LATS1蛋白表达及p-YAP1/YAP1降低(P＜0.05),且茯苓酸各组呈剂量依赖性(P＜0.05);茯苓酸高剂量组与氟尿嘧啶组大鼠比较,各指标比较差异无统计学意义(P＞0.05)。[结论]茯苓酸可降低Hippo信号通路活性,抑制DEN诱导的炎症和氧化应激,减轻大鼠肝组织损伤并缓解其癌变症状,改善大鼠肝功能。     

参麦注射液对慢性再生障碍性贫血患者血清肿瘤坏死因子及骨髓CD34+细胞凋亡的影响

目的:探讨参麦注射液治疗慢性再生障碍性贫血(chronic aplastic anemia,CAA)的疗效及其作用机制。方法:将65例CAA患者随机分为治疗组和对照组,治疗组采用参麦注射液配合西药常规治疗,对照组单用西药治疗,治疗后进行疗效评价,并分别于治疗前后检测患者血清肿瘤坏死因子(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)水平,以及采用免疫磁珠分离系统(MACS)分离纯化骨髓CD₃₄⁺细胞,用DNA末端原位标记(TUNEL)技术分析骨髓CD₃₄⁺细胞原位凋亡状况。结果:治疗组总有效率为63.6%,对照组总有效率为40.6%,治疗组疗效明显优于对照组(P<0.01);治疗前,CAA患者血清TNF-α浓度、骨髓CD₃₄⁺细胞凋亡率均明显高于健康对照组(P<0.01),治疗后,治疗组血清TNF-α浓度明显降低(P<0.01),骨髓CD₃₄⁺细胞凋亡率减低(P<0.05),与对照组相比均有显著差异(P<0.05)。结论:参麦注射液治疗CAA疗效确切,其机制可能为降低CAA患者血清TNE-α浓度,减少骨髓CD₃₄⁺细胞凋亡。     

黄连-生地药对对胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞TNF-α、IL-1β与IL-6分泌的影响

目的 通过观察并对比黄连、生地及二药配对含药血清对胰岛素抵抗(IR)3T3-L1脂肪细胞IL-6、IL-1β与TNF-α分泌量的情况，揭示生地、黄连与两者配伍对于IR的改善机制，对两药配伍原理加以明确。方法 运用高浓度葡萄糖(Glu)与高浓度胰岛素(INS)法培养构建INS抵抗3T3-L1脂肪细胞模型，分别给予黄连、生地、黄连-生地、盐酸罗格列酮进行干预，以葡萄糖氧化酶(GOD)法测定培养液内Glu消耗量，以ELISA法测定各组培养液内IL-6、IL-1β与TNF-α的分泌量。结果 相较空白对照组，模型组Glu消耗量大幅下降(P<0.01);相较模型组，在Glu消耗量上各药物干预组皆为显著提高表现(P<0.01);其中，黄连-生地组在此方面显著高于单药组(P<0.01)。结论 生地、黄连与两者配伍皆可使IR 3T3-L1脂肪细胞分泌IL-6、IL-1β、TNF-α的量显著减少，此与以上药物可使IR改善可能相关。在对IR 3T3-L1脂肪细胞分泌IL-6、TNF-α以及IL-1β施以抑制方面，相较于生地、黄连各单药组，黄连-生地组皆表现出优势，提示黄连、生地配伍对TNF...     

中风胶囊对动脉粥样硬化大鼠血脂及相关细胞因子的影响

目的:观察中风胶囊(ZFJN)对动脉粥样硬化(AS)模型大鼠血脂及相关细胞因子的影响。方法:SD大鼠随机分为正常组,模型组,中风胶囊低、高剂量组(1.5,3.0 g·kg^-1),阿托伐他汀钙片(阿乐,5 mg·kg^-1)组。正常组动物摄食正常颗粒饲料,其余组在摄食高脂饲料的基础上采用ip维生素D₃加激发免疫反应的方法复制AS模型,各组动物连续ig相应药物90 d,检测血清胆固醇(TC),甘油三酯(TG),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-18(IL-18),脂联素(APN),可溶性CD40L(sCD40L)并计算动脉硬化指数(AI);取主动脉进行HE染色,观察组织病理学变化。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清TC,LDL-C,HDL-C,TNF-α,IL-18,sCD40L及AI明显升高(P<0.05,P<0.01),而APN水平明显降低(P<0.01);与模型组比较,ZFJN高剂量组均明显降低大鼠血清LDL-C,TNF-α,IL-18以及AI水平(P<0.05,P<0.01),明显升高血清APN水平(P<0.01);HE染色显示模型组主动脉可见内皮损伤和粥样斑块,给药各组均可抑制其主动脉损伤。结论:ZFJN对大鼠AS的发生发展具有一定干预作用,其作用环节与降低血清LDL-C含量,提高APN水平,减少炎性细胞因子TNF-α,IL-18的分泌或释放有关。     

基于TLR4-MyD88-TRAF6信号通路的儿茶素没食子酸酯抗小神经胶质细胞炎性损伤作用

[目的]研究儿茶素没食子酸酯（EGCG）对小神经胶质细胞（BV-2）炎性损伤的保护作用,并探讨其对TLR4-MyD88-TRAF6信号通路活化的影响。[方法]采用脂多糖（LPS,1 mg/L）体外诱导BV-2细胞炎性损伤,将细胞分为正常对照组、LPS诱导组、LPS+低剂量（50 μmol/L）EGCG组、LPS+中剂量（100 μmol/L）EGCG组、LPS+高剂量（200 μmol/L）EGCG组;CCK8法检测BV-2细胞相对存活率,ELISA法检测炎性因子白介素6（IL-6）、白介素1β（IL-1β）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平,Western Blot方法分析诱生型一氧化氮合酶（iNOS）、前列腺素内氧化酶还原酶（COX-2）、Toll样受体4（TLR4）、髓样分化因子88（MyD88）及TNF-α相关受体因子6（TRAF6）蛋白表达。[结果]与LPS诱导组相比,不同浓度EGCG干预的BV-2细胞相对存活率明显升高（P<0.05）,细胞上清炎性因子IL-6、IL-1β及TNF-α水平明显降低（P<0.05）,细胞中炎性蛋白iNOS及COX-2表达水平显著降低（P<0.05）;细胞中TLR4、MyD88及TRAF6蛋白表达也显著降低（P<0.05）,并表现出剂量依赖性。[结论]EGCG能显著抑制LPS诱导的BV-2细胞炎症损伤,抑制炎症相关蛋白的表达,其可能作用机制是通过抑制TLR4-MyD88-TRAF6信号通路活化。     

复方香鱼口服液对炎症大鼠、小鼠的影响及机制研究※

目的 通过对复方香鱼口服液、鱼腥草提取液、三叶香茶菜提取液抗炎作用的药效学比较,探求二药配伍作用依据。方法 采用二甲苯致小鼠耳肿胀、角叉菜胶致大鼠足肿胀、脂多糖诱导产生小鼠急性炎症三种炎症模型,以肿胀抑制率、肿胀度、细胞因子IL-17F、IL-1β、TNF-α、IL-6、SOD、MDA含量和脏器指数为指标,评估其抗炎活性。结果 与空白组比较,模型组中小鼠耳肿胀度、大鼠足肿胀度明显增加（P<0.01）;脂多糖所致急性炎症小鼠的脾脏指数显著增加（P<0.05）,血清中的IL-1β、IL-17F含量显著升高（P<0.01）,肝脏中的TNF-α、IL-6含量显著升高（P<0.01）。与模型组比较,复方香鱼口服液高低剂量组、鱼腥草高剂量组、三叶香茶菜高低剂量组均可明显抑制二甲苯引起的小鼠耳肿胀（P<0.01或P<0.05）,能显著降低IL-1β和TNF-α、IL-6含量（P<0.01或P<0.05）;造模后2~6 h,复方香鱼口服液高低剂量组、鱼腥草高剂量组、三叶香茶菜高剂量组均可明显抑制角叉菜胶引起的大鼠足肿胀（P<0.01或P<0.05）;复方香鱼口服液高剂量组、三叶香茶菜高剂量组能显著降低血清中MDA和IL-17F含量（P<0.01或P<0.05）。同剂量组间比较,复方香鱼口服液高低剂量组与鱼腥草高低剂量组、三叶香茶菜高低剂量组小鼠耳肿胀抑制作用与小鼠足肿胀度抑制作用有显著性差异（P<0.01或P<0.05）。结论 性效相似的鱼腥草和三叶香茶菜配伍,使得复方香鱼口服液抗炎作用显著增强,降低MDA、IL-17F、IL-1β、TNF-α、IL-6水平可能是其抗炎药效的主要机制。     

复肝春6号对小鼠肝癌的抑制作用及对荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的：研究复肝春6号（FGC-6）的抗肝癌作用及对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法：将接种H22肝癌细胞的小鼠分为模型组、5-氟尿嘧啶组（5-Fu组）、FGC-6 高、中、低剂量组（含生药量70,35,15 g·kg^-1）,另设正常对照组,连续给药10 d。观察小鼠瘤重、体重、NK细胞杀靶活性、淋巴细胞增殖活性及脾细胞白细胞介素2（IL-2）分泌量的变化。制备FGC-6含药血清,以MTT法和生长曲线法观察该含药血清对体外培养H22细胞的增殖抑制作用。 结果：FGC-6高剂量可明显抑制荷瘤小鼠移植瘤的生长,且FGC-6含药血清对H22细胞增殖有明显的抑制作用,呈时间和浓度依赖性。模型组荷瘤小鼠的NK细胞杀靶活性和脾细胞IL-2分泌量均明显低于正常对照组（P<0.05）； 而FGC-6高剂量组荷瘤小鼠的NK细胞杀靶活性、脾细胞IL-2分泌量和淋巴细胞增殖活性均得到明显改善,FGC-6中剂量治疗使荷瘤小鼠的脾细胞IL-2分泌能力增强,与模型组比较差异显著（P<0.05）。 结论： FGC-6可明显抑制H22细胞的生长,改善荷瘤小鼠的免疫功能。     

湿热痹片对佐剂性关节炎大鼠T细胞及细胞因子网络的调节作用

目的:观察湿热痹片对灭活结核分枝杆菌(Mtb)诱导的佐剂性关节炎大鼠T细胞及细胞因子水平的影响。方法:采用热杀死结核分枝杆菌(H37RaMtb)免疫SD大鼠,以诱导佐剂性关节炎,用ELASA法检测大鼠外周血T淋巴细胞亚群、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;同时测定大鼠踝关节滑膜组织中IL-1β,IL-6,IL-10及血管内皮细胞生长因子(VEGF)水平的变化。结果:与模型对照组比较,湿热痹组CD8⁺T细胞水平升高(P<0.05),CD4⁺/CD8⁺比值降低(P<0.05);促炎细胞因子TNF-α,IL-1β及IL-6水平下调(P<0.01),VEGF含量降低(P<0.01),同时抗炎因子IL-10水平上升(P<0.01)。结论:湿热痹片通过调节T细胞及细胞因子网络平衡而发挥对类风湿关节炎的治疗作用。     

鹿瓜多肽口服液对大鼠佐剂性关节炎的治疗作用及其机制

 目的研究鹿瓜多肽口服液(lugua polypeptide solution,LGPS)对大鼠佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)的治疗作用,并探讨其可能的作用机制。方法复制大鼠AA模型后第8天,LGPS按3.5,7和14mg·kg^-1给大鼠灌胃治疗,每天1次,连续16d。于给药第4,7,10,13,16及18天测定大鼠左、右足跖容积,计算肿胀率。治疗后第19天测定大鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能,关节渗出液中PGE2含量,血液流变学,血清SOD活性及MDA、NO、IL-1β、TNF-α和IL-6含量。结果LGPS能明显降低AA大鼠右后关节的原发性肿胀和左后关节的继发性肿胀(P<0.05～P<0.001),可使腹腔巨噬细胞吞噬功能,全血低(5/s)、中(80/s)、高切(160/s)黏度,血沉,血清MDA、NO、IL-1β、TNF-α及IL-6含量明显降低,血清SOD活性明显提高(P<0.05或P<0.01),对关节渗出液中PGE2含量则无明显影响(P>0.05)。结论LGPS对大鼠AA有明显治疗作用,可能与其抑制巨噬细胞活化,降低血清中IL-1、TNF-α和IL-6含量,提高机体对氧自由基的清除力及改善血液流变性有关。     

加味茵陈蒿汤对湿热哮喘大鼠气道白细胞介素-6, 信号转导因子-3表达的影响及与气道炎症的关系

目的: 探讨加味茵陈蒿汤对湿热哮喘大鼠气道急性炎症的影响及其可能的机制。 方法: 50只健康雄性SD大鼠随机分成5组,每组10只,分别为空白组、湿热哮喘模型组、加味茵陈蒿汤低、高剂量组(6.29,12.58 g ·kg^-1 ·d^-1)、地塞米松组(0.08 mg ·kg^-1 ·d^-1)。多因素干预建立湿热哮喘大鼠模型,实验第16天开始给药,末次激发24 h以内处死大鼠,腹主动脉采血,留取肺组织检测。对各组大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞进行计数和炎性细胞分类,酶联免疫吸附实验(ELISA)法测定BALF中细胞因子白细胞介素(IL)-2,IL-4,IL-5,IL-6,干扰素-γ(IFN-γ)水平,免疫组织化学染色检测气道信号转导因子-3(STAT3)蛋白表达,以甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)为内参,RT-PCR定量检测肺组织STAT3水平。应用SPSS 17.0软件进行统计分析。 结果: 与正常组比较,模型组IL-4,IL-5,IL-6水平升高(P<0.05),IL-2,IFN-γ水平降低(P<0.05),气道STAT3蛋白、肺组织STAT3 mRNA水平升高;与模型组比较,各给药组大鼠IL-4,IL-5,IL-6水平降低(P<0.05),IL-2,IFN-γ水平均升高(P<0.05),且哮喘大鼠BALF中IL-6,气道STAT3蛋白,肺组织STAT3 mRNA分别与BALF中细胞总数及嗜酸性粒细胞,淋巴细胞,IL-4,IL-5,IL-6呈正相关(P<0.01),与IL-2,IFN-γ呈负相关(P<0.01)。各给药组均可降低气道炎症及STAT3信号通路表达,地塞米松组疗效最优,其次为加味茵陈蒿汤低剂量组。 结论: 加味茵陈蒿汤能明显降低气道炎症,其作用机制可能与抑制IL-6/STAT3信号通路表达从而调节Thl/Th2细胞因子失衡有关。     

灰树花干预非酒精性脂肪性肝炎的实验研究

观察灰树花对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的防治作用.采用高脂饲料喂养12周建立大鼠NASH模型,同时分别以0.5,1.0 g·kg^-1·d^-1的灰树花粉混悬液进行干预,常规HE染色观察肝组织脂肪变和炎症程度,计算NAFLD活动度积分(NAS),生化法检测血清ALT,AST以及血清和肝组织TG,CHOL水平,硫代巴比妥酸法测定肝组织MDA含量,黄嘌呤氧化酶法测定肝组织SOD活性,二硫代硝基苯甲酸法测定肝组织GSH-PX活性,ELISA法测定肝组织TNF-α,IL-6水平.结果显示,高脂饮食诱导的NASH模型组大鼠肝组织NAS,血清ALT,AST,CHOL以及肝组织TG,CHOL水平较正常组明显增高(P< 0.01,P< 0.05),血清TG水平较正常组明显下降(P< 0.05);肝组织MDA,TNF-α,IL-6水平增高(P< 0.01),而SOD,GSH-PX水平显著降低(P< 0.01);不同剂量灰树花干预后,大鼠肝组织的NAS、血清ALT和肝组织TG,CHOL,MDA,TNF-α,IL-6水平较模型组明显减少(P< 0.05),SOD,GSH-PX活性显著增强(P< 0.05).灰树花可能通过改善高脂饮食诱导的NASH大鼠肝脏脂质代谢紊乱,减轻氧化应激水平,降低炎症细胞因子的产生,防止NASH的进展.     

当归芍药散通过调控NF-κB炎性通路改善H2O2诱导的SH-SY5Y细胞氧化损伤的作用

目的:研究当归芍药散(Danggui Shaoyaosan,DSS)含药血清对过氧化氢(H2O2)诱导人神经母细胞瘤细胞(SHSY5Y)氧化应激和炎症反应的调控作用。方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法测定SH-SY5Y细胞存活率构建最佳时间和最佳剂量的H2O2诱导的细胞损伤模型。实验设空白组,模型组,当归芍药散含药血清高、中、低剂量组(2.5%,5%,10%)。采用MTT比色法检测DSS干预后细胞活率,分光光度法测定抗氧化指标丙二醛(MDA),过氧化氢酶(CAT),超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH),采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)mRNA表达水平,采用免疫荧光检测核转录因子-κB(NF-κB)p65的核移位情况。结果:H2O2浓度为250μmol·L-1干预24 h后SH-SY5Y细胞存活率约55%为最佳造模条件,DSS高、中、低剂量干预后,与模型组比较,细胞活率呈剂量依赖性上升(P<0.05),MDA明显下调(P<0.05),抗氧化指标CAT,SOD和GSH明显上升(P<0.05);H2O2能显著上调SH-SY5Y细胞炎性因子TNF-α,IL-1β和IL-6 mRNA表达水平,并介导胞质NF-κB的激活和向核移位,当归芍药散含药血清能呈剂量依赖性抑制NF-κB p65的入核并降低IL-1β,IL-6和TNF-α等细胞炎性因子的mRNA表达水平。结论:当归芍药散含药血清可以显著降低H2O2诱导的SH-SY5Y细胞的氧化损伤通过改善其抗氧化状态,同时也能降低炎症反应通过抑制NF-κB信号通路。     

二苯乙烯苷对6-OHDA损伤的SH-SY5Y细胞外氨基酸, 细胞内钙离子浓度的影响

目的: 观察二苯乙烯苷(TSG)对6-羟基多巴胺(6-OHDA)损伤的SH-SY5Y细胞的保护作用并探讨相关机制。 方法: 以SH-SY5Y细胞为研究对象,以100 μmol ·L^-1 6-OHDA建立SH-SY5Y细胞损伤模型,以浓度6.25,12.5,25,50,100,200 μmol ·L^-1 TSG作用损伤的SH-SY5Y细胞,另设空白组,四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞存活率,观察不同浓度的TSG对其的保护作用,激光共聚焦显微镜检测细胞内钙离子浓度的变化,高效液相-荧光法检测上清液中兴奋性氨基酸谷氨酸(Glu),抑制性氨基酸γ-氨基丁酸(GABA)含量。 结果: 与空白组比较,模型组细胞存活率降低,游离钙明显增多(P<0.01),细胞外Glu及GABA浓度明显升高(P<0.01);与模型组比较,TSG预处理24 h可以改善6-OHDA造成的细胞存活率的下降,其中12.5 μmol ·L^-1的细胞保护作用最为明显(P<0.05),明显降低内游离钙含量,明显降低细胞外Glu及GABA浓度(P<0.05,P<0.01),TSG对其有明显的抑制作用。 结论: TSG可能通过减轻钙超载及兴奋性毒性对6-OHDA损伤的SH-SY5Y细胞起到保护作用。     

通窍活血汤调节Nrf2通路对新生大鼠缺血缺氧性脑损伤血管保护及神经功能改善作用研究

[目的]研究通窍活血汤对新生大鼠缺血缺氧性脑损伤血管保护和神经功能改善作用及对核转录因子2(Nrf2)通路的调节作用。[方法]新生大鼠随机分为正常对照组(12只)及造模组(60只),采用颈总动脉结扎法建立缺血缺氧性脑损伤大鼠模型,并随机分为脑损伤组、通窍活血汤低、中、高剂量组及神经节苷脂组,每组12只,通窍活血汤低、中、高剂量组分别按照4、8、16 g/kg的剂量灌胃给予通窍活血汤,神经节苷脂组按照10 mg/kg的剂量腹腔注射神经节苷脂,每日1次,连续14 d,Morris水迷宫实验测定大鼠90 s内靶象限停留时间及穿越平台次数,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清可溶性内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)、可溶性血栓调节蛋白(sTM)、内皮素(ET)-1含量、血管组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及肿瘤坏死因子(TNF)-α表达水平、脑组织TNF-α、白介素(IL)-1β及IL-6表达水平,苏木精-伊红(HE)染色法测定海马组织病理学改变,实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)测定海马组织Nrf2、血红素氧合酶-1(HO-1)、Janus激酶2(JAK2)、信号转导和转录激活因子3(STAT3)m RNA表达水平,蛋白免疫印迹法(Western Blot)测定海马组织Nrf2、HO-1、JAK2、STAT3蛋白表达水平。[结果]与正常对照组比较,脑损伤组大鼠靶象限停留时间及穿越平台次数显著减少(P＜0.05)。血管组织SOD表达水平,海马组织Nrf2、HO-1 m RNA及蛋白表达水平显著降低(P＜0.05)。血清sEPCR、sTM、ET-1含量、血管组织MDA及TNF-α表达水平、脑组织TNF-α、IL-1β及IL-6水平、海马组织JAK2、STAT3 mRNA及蛋白水平显著升高(P＜0.05)。与脑损伤组比较,通窍活血汤低、中、高剂量组及神经节苷脂组大鼠脑损伤组大鼠靶象限停留时间及穿越平台次数显著增加(P＜0.05)。血管组织SOD表达水平、海马组织Nrf2、HO-1 mRNA及蛋白表达水平显著升高(P＜0.05)。血清s EPCR、sTM、ET-1含量、血管组织MDA及TNF-α表达水平、脑组织TNF-α、IL-1β及IL-6表达水平、海马组织JAK2、STAT3 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P＜0.05),且通窍活血汤不同剂量组间存在显著差异(P＜0.05)。[结论]通窍活血汤能够显著抑制缺血缺氧性脑损伤大鼠神经损伤及脑组织炎症反应,抑制血管氧化应激损伤,发挥脑组织及血管的保护作用,其机制可能与调节Nrf2通路有关。