猪囊虫短程抗体快速ELISA检测试剂盒的建立和初步应用

目的：建立猪囊虫特异IgG4快速检测试剂盒，并初步探讨其应用价值。方法：采用辣根过氧化物酶标记的抗人IgG4单克隆抗体为探针，结合商品化的酶联免疫吸附试验制成快速检测试剂盒，检测现症囊虫病病人，其它寄生虫病病人和健康对照血清中的特异IgG4。结果：44例现症囊虫病病人特异IgG4阳性42例，阳性率为95.5%，21例正常人及27例其它寄生虫病人检测全部阴性（阴性100%，包虫除外）。结论：本试剂盒操作简单、快速，结果鲜明便于目测判断，适于推广用作猪囊虫病的诊断及近期疗效考核。     

丝虫特异IgG4检测试剂盒的研制

目的　建立丝虫特异IgG4检测试剂盒 ,根据检测不同样本的敏感性、特异性及重复性 ,评价其用于丝虫病防治后期流行病学调查和疾病监测的价值。　方法　利用细胞融合技术制备抗人IgG4单克隆抗体 ,对试验的各环节和条件进行探索 ,结合商品化的酶免疫试剂制作工艺研制一种敏感、特异 ,操作简便 ,经济实用的丝虫特异IgG4检测试剂盒 ,并对丝虫病病人、其它寄生虫病病人和健康对照血清以及滤纸血样本进行检测。　结果　 68例丝虫病病人特异IgG4阳性 64例 ,阳性率为 94.1% ;3 8例正常人及 60例其他寄生虫病病人检测全部阴性 ;对丝虫病病人血清和滤纸血检测结果基本一致。该试剂盒操作简单 ,检测本底很低 ,结果鲜明 ,易于判断。　结论　该试剂盒适于丝虫病防治后期的流行病学调查和疾病监测。     

金标抗人IgG4单抗浸测试验对脑囊虫病诊断与疗效评价的研究

为探讨检测患者血清中特异IgG4对脑囊虫病诊断和疗效考核的价值,应用金标抗人IgG4单抗浸测试验检测患者血清特异IgG4。结果检测疗前组脑囊虫病患者91例,特异IgG4阳性者84例,阳性率92.3％;同时检测其它寄生虫病27例、中枢神经系统疾病16例和健康对照25例,除1例肝包虫病病人血清出现弱交叉反应外,其它均为阴性;检测经抗囊药物不同疗程治疗的脑囊虫病患者血清,发现随着疗程的增加,临床症状的好转,患者血清特异IgG4明显降低或消失。表明检测患者血清特异IgG4对脑囊虫病的诊断和疗效考核具有较好的应用价值。     

丝虫特异IgG4检测试剂盒的研制

目的 建立丝虫特异IgG4检测试剂盒，根据检测不同样本的敏感性、特异性及重复性，评价其用于丝虫病防治后期流行病学调查和疾病监测的价值。方法 利用细胞融合技术制备抗人IgG4单克隆抗体，对试验的各环节和条件进行探索，结合商品化的酶免疫试剂制作工艺研制一种敏感、特异，操作简便，经济实用的丝虫特异IgG4检测试剂盒，并对丝虫病病人、其它寄生虫病病人和健康对照血清以及滤纸血样本进行检测。结果 68例丝虫病病人特异IgG4阳性64例，阳性率为94．1％；38例正常人及60例其他寄生虫病病人检测全部阴性；对丝虫病病人血清和滤纸血检测结果基本一致。该试剂盒操作简单，检测本底很低，结果鲜明，易于判断。结论 该试剂盒适于丝虫病防治后期的流行病学调查和疾病监测。     

金标抗人IgG4单抗浸测试验对脑囊虫病诊断与疗效评价的研究

为探讨检测患者血清中特异ＩｇＧ４对脑囊虫病诊断和疗效考核的价值,应用金标抗人ＩｇＧ４单抗浸测试验检测患者血清特异ＩｇＧ４。结果检测疗前组脑囊虫病患者９１例,特异ＩｇＧ４阳性者８４例,阳性率９２．３％;同时检测其它寄生虫病２７例、中构神经系统疾病１６例和健康对照２５例,除１例肝包虫病病人血清出现弱交叉反应外,其它均为阴性;检测经抗囊药物不同疗程治疗的脑囊虫病患者血清,发现随着疗程的增加,临床症状的好转,患者血清特异ＩｇＧ４明显降低或消失。表明检测患者血清特异ＩｇＧ４对脑囊虫病的诊断和疗效考核具有较好的应用价值。     

美洲钩虫病患者血清优势抗体的检测分析

目的检测钩虫成虫抗原对钩虫病患者血清的反应性,以分析钩虫病患者血清中识别抗原组分的优势特异抗体类或亚类。方法以美洲钩虫成虫粗抗原为包被抗原,应用辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗人抗体(不同类或亚类)作为检测试剂进行酶联免疫吸附试验(ELISA),分析比较钩虫病患者、健康人及其他寄生虫病患者的血清抗体的反应性。结果ELISA法分析显示,98份钩虫病患者血清含有特异抗体Ig M、Ig D、Ig E、Ig G、Ig G1、Ig G2、Ig G3和Ig G4的比例分别为41.84%、2.04%、1.02%、92.93%、19.39%、25.51%、17.35%和88.78%;而健康人和其他寄生虫病患者血清未检测到相应抗体的比例分别为77.61%、97.01%、92.54%、79.10%、95.52%、92.53%、92.53%和92.53%;若分别以这些特异抗体为检测靶,其诊断效能分别为56.36%、40.61%、38.18%、87.88%、50.30%、52.73%、47.88%和90.30%。Ig G4和Ig G作为检测靶分子的检测敏感性远高于Ig M、Ig D、Ig E及其他3种Ig G亚类(P0.05)。Ig G4与Ig G之间检测的敏感性差异无统计学意义(χ2=1.61,P0.05),Ig G4的特异性高于Ig G(χ2=4.97,P0.05)。结论Ig G4抗体为美洲钩虫病患者(或感染者)血清中特异优势抗体。     

应用免疫酶染色试验检测囊虫病患者血清抗体

应用猪囊尾蚴头节冰冻切片抗原进行免疫酶染色试验(IEST)。检测已确诊囊虫病人血清88份,阳性率为93.2％;正常人血清60份,阴性符合率为95.0％;其它寄生虫病患者血清80份,交叉反应率为5.0％。重现性试验显示其检测结果稳定,重现性好。试验结果表明,IEST是一种非常敏感、特异、稳定和可靠的血清学诊断方法;且该法操作简便,取得结果快速,检测费用低廉,不需要特殊仪器,特别适合于现场应用。     

日本血吸虫快速酶联免疫吸附试验抗体检测试剂盒的应用研究

目的 探讨日本血吸虫快速酶联免疫吸附试验（F-ELISA）抗体检测试剂盒检测日本血吸虫病的特异性、敏感性及与其他寄生虫病的交叉反应。方法 采用F-ELISA法检测日本血吸虫急性、慢性及晚期病人血清中抗SEA抗体和健康人、并殖吸虫、肝吸虫、囊虫及旋毛虫病患者血清中的交叉抗体。结果 检测急性、慢性及晚期血吸虫病人的敏感性分别为100%、95.19%和77.78%，检测正常人的特异性为98.46%，与并殖吸虫、肝吸虫、囊虫及旋毛虫病人的交叉反应率分别为11.63%、7.55%、0和13.33%。结论 F-ELISA检测日本血吸虫病具有敏感性高、特异性强、快速简便等优点，具有较高的现场查病和临床诊断血吸虫病的应用价值。     

金标特异抗原单克隆抗体斑点免疫金染色用于检测脑囊虫病循环抗原的研究

应用金标记猪囊尾蚴囊液抗原为探针,以抗猪囊尾蚴抗原的McAb为联桥,建立了非常规Dot-IGS用于检测脑囊虫病患者CAg的方法,用4G_2McAb检测84例脑囊虫病人脑脊液(CSF),CAg阳性率为88.09％。检测63例其他疾病患者,出现2例假阳性。以1F_(11)McAb检测14例脑囊虫病人,13例检出CAg,阳性率为92.86％。检测其他疾病患者36例,均为阴性。用4G_2与1F_(11),株McAb可分别检出最小抗原量为1ng/ml和0.25ng/ml。本法敏感、特异、操作简单,可用于脑囊虫病的诊断。     

青海省东部农村人体猪带绦/囊虫病调查分析

目的 调查青海省东部农村人体猪带绦/囊虫病的流行情况。方法 使用问卷进行流行因素调查;粪抗原ELISA法用于绦虫病检测;生理盐水直接涂片法和醛醚法镜检绦虫卵用于绦虫病人的确诊;囊虫病ELISA法用于囊虫病检测。结果 调查4个自然村,共766人。镜检598人,确诊绦虫病病人2例,患病率为0.33%;绦虫病粪抗原ELISA检查512人份,阳性率为9.18%;囊虫病ELISA检查652人,阳性率为4.14%。结论 该地区绦/囊虫病流行仍然很严重。     

不同抗囊尾蚴抗体检测试剂盒用于囊尾蚴病血清学诊断效果评价

目的　评价不同厂家生产的4种抗囊尾蚴IgG、IgG4和IgM抗体酶联免疫吸附试验（ELISA）检测试剂盒的诊断效果,为囊尾蚴病流行病学调查和临床检测提供参考。方法　采用A品牌3种抗囊尾蚴抗体（IgG、IgG4和IgM抗体）ELISA检测试剂盒以及B品牌抗囊尾蚴IgG抗体ELISA检测试剂盒,同时检测40份脑囊尾蚴病患者、100份健康人、30份斯氏并殖吸虫病患者、17份细粒棘球蚴病患者和19份皮下或脑裂头蚴病患者血清,比较不同试剂盒检测囊尾蚴病的敏感度、特异度和假阳性率。结果　A品牌抗囊尾蚴IgG、IgG4和IgM抗体ELISA试剂盒以及B品牌抗囊尾蚴IgG抗体ELISA试剂盒检测囊尾蚴病的敏感度分别为95.00%（38/40）、87.50%（35/40）、7.50%（3/40）和75.00%（30/40）,特异度分别为98.00%（98/100）、100.00%（100/100）、100.00%（100/100）和100.00%（100/100）;A品牌抗囊尾蚴IgG抗体ELISA试剂盒检测囊尾蚴病的敏感度高于B品牌（[χ2] = 6.28,P < 0.05）,两者特异度差异无统计学意义（[χ2] = 2.01,P > 0.05）。4种试剂盒检测并殖吸虫病、细粒棘球蚴病、裂头蚴病患者血清总假阳性率分别为37.88%（25/66）、22.73%（15/66）、62.12%（41/66）和15.15%（10/66）（[χ2] = 37.61,P < 0.05）;其中A品牌抗囊尾蚴IgM抗体ELISA试剂盒检测总假阳性率最高（[χ2] = 7.56,P' < 0.008）,A品牌抗囊尾蚴IgG抗体ELISA试剂盒检测总假阳性率高于B品牌（[χ2] = 8.75,P' < 0.008）。4种试剂盒检测并殖吸虫病患者血清假阳性率分别为40.00%（12/30）、16.67%（5/30）、76.67%（23/30）和13.33%（4/30）（[χ2] = 32.88,P < 0.05）,检测裂头蚴病患者血清假阳性率分别为21.05%（4/19）、26.32%（5/19）、73.68%（14/19）和15.79%（3/19）（[χ2] = 19.97,P < 0.05）,均以A品牌抗囊尾蚴IgM抗体ELISA试剂盒检测假阳性率最高（P' 均 < 0.008）。4种试剂盒检测细粒棘球蚴病患者血清假阳性率分别为52.94% （9/17）、29.41%（5/17）、23.53%（4/17）和17.65%（3/17）,差异无统计学意义（[χ2] = 8.24,P > 0.05）。A品牌抗囊尾蚴IgM抗体ELISA试剂盒检测并殖吸虫病、棘球蚴病和裂头蚴病患者血清假阳性率分别为76.67%（23/30）、23.53%（4/17）和73.68%（14/19）（[χ2] = 14.537,P < 0.05）,其中检测棘球蚴病患者血清假阳性率最低（[χ2] = 14.537,P' < 0.014）;其他3种试剂盒检测并殖吸虫病、棘球蚴病和裂头蚴病患者血清假阳性率差异均无统计学意义（P 均> 0.05）。 结论　不同囊尾蚴病免疫学诊断试剂各有优劣;A品牌抗囊尾蚴IgG抗体ELISA试剂盒敏感度较高,但需进一步解决与其他寄生虫病的交叉反应和稳定性问题。     

斑点金免疫渗滤法在检测囊虫抗体中的应用

目的　将斑点金免疫渗滤法用于检测囊虫抗体 ,以制备囊虫病诊断试剂盒。方法　经透析的猪囊尾蚴囊液作为检验抗原 ,对 71份囊虫病患者、90份正常人和 2 0份其他病患者血清进行了斑点金免疫渗滤法检测并与酶联免疫吸附法比较。结果　斑点金免疫渗滤法的敏感性为 90 .1% (6 4 / 71) ,特异性为 95 .6 % (86 / 90 ) ,其他病患者血清反应中仅 1例脑肿瘤患者血清阳性 ,其余为阴性。斑点金免疫渗滤法和酶联免疫吸附法的符合率为94 .4 % (15 2 / 16 1)。结论　斑点金免疫渗滤法有较好的应用于临床检测囊虫病的潜力     

ELISA检测特异性IgG4诊断肺吸虫病的效果观察

目的探讨用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测特异性IgG4诊断肺吸虫病的效果.方法采用ELISA法检测了肺吸虫病病人血清中的特异性IgG和IgG4抗体及肝吸虫、囊虫、旋毛虫、日本血吸虫病病人和正常人血清中的交叉抗体.结果检测肺吸虫病病人血清中IgG4的敏感性为95.35%,检测正常人血清的特异性为100%,与常规使用的酶联葡萄球菌A蛋白(HRP-SPA)检测结果及检测IgG结果比较差异无显著性(P均＞0.05);与其他寄生虫病病人血清中的交叉反应率,IgG4显著低于用常规HRP-SPA检测结果. 结论ELISA法检测肺吸虫病病人血清中特异性IgG4具有较高的诊断应用价值.     

ELISA检测华支睾吸虫病患者血清特异性IgG_4的诊断价值

目的　探讨用ELISA检测华支睾吸虫病患者血清中特异性IgG4 的诊断价值。　方法　用华支睾吸虫成虫可溶性抗原进行ELISA分别检测华支睾吸虫病患者 (76例 )血清中的特异性IgG和IgG4 抗体及日本血吸虫病、并殖吸虫病、囊尾蚴病患者 (分别为 63、3 5、41例 )和健康者 (65人 )血清中的交叉抗体。　结果　检测 76例华支睾吸虫病患者血清中IgG4 的检出率为 93 .42 % ,检测 65例健康者血清中的IgG4 均为阴性 ,分别与检测IgG结果比较差异均无显著性意义 (P均 >0 .0 5 ) ;与其它寄生虫病的交叉反应率 ,IgG4 显著低于IgG ;诊断效率及阳性、阴性预告值分别为 96.45 %、10 0 %和 92 .85 %。　结论　用ELISA检测华支睾吸虫病患者血清中特异性IgG4 具有较高的诊断应用价值。     

Co-agglutination test for cysticercus antigen detection in the serum for the diagnosis of cysticercosis

The objective of the study was to develop the co-agglutination (Co-A) test, a rapid slide agglutination test for the diagnosis of cysticercosis. The present study included 21 cases of cysticercosis, which comprised seven cases of clinico-radiologically definite cases of neurocysticercosis (NCC) proven with either computed tomography (CT) scan or magnetic resonance imaging (MRI), eight cases of clinically strong NCC, six cases of extraneural cysticercosis in muscle and eye; 40 non-cysticercal parasitic infection controls; and 20 healthy controls. Hyperimmune cysticercus antiserum was raised in rabbits and was used to coat Staphylococcus aureus (Cowan strain-I) bearing protein A (SAPA) cells, and the Co-A was standardized to detect cysticercal antigen in the serum. Serum samples from 12 out of 21 (57%) cases of cysticercosis were positive for cysticercal antigen by the Co-A test. Of the 12 positive samples, eight were from cases of neurocysticercosis and four from cases of extra-neural cysticercosis. Serum samples from seven out of 40 non-cysticercal parasitic infection controls and serum samples from one out of 20 (5%) healthy controls showed a false-positive reaction for the antigen by the Co-A test. There was a statistically significant difference between the antigen detection rates among cysticercosis patients on one hand, and the patients with other parasitic diseases (P = 0.0014), and healthy controls (P=0.0003) on the other. The Co-A test appears to be a moderately sensitive and specific test for the diagnosis of cysticercosis.     

应用胶体金SEA—DIPSTICK法检测日本血吸虫病血清抗体的研究

目的：建立一种快速、简便、实用的检测日本血吸虫病血清抗体的Dipstick方法。方法：应用胶体金SEA－dipstick法检测日本血吸虫病血清抗体。结果：用该法检测急性血吸虫病血清28人份和慢性血吸虫病血清297人份，其阳性检出率分别为100％和97.13％。在518例正常人和573例其它4种寄生虫病人血清中有0.19％假阳性和2.4％交叉反应。与Dot-ELISA比较，经卡方检验表明两者的敏感性无显著性差异，而SEA－dipstick法的特异性较Dot-ELISA强。结论：胶体金SEA－dipstick法检测日本血吸虫病血清抗体有较高的敏感性和特异性，并且方法快速，操作简便，不需特殊仪器设备，稳定性高，重复性好，具有广泛的 应用前景。     

The significance of immunoblot in serodiagnosis of cysticercosis cellulosae

50, 92 and 30 samples collected respectively from cases with cysticercosis cellulosae, other parasitic diseases and normal controls were examined with SDS-gradient (5-20%) polyacrylamide-gel electrophoresis and immunoblot. The results showed that 26 KD protein band of the cysticercus antigen is highly specific for cysticercosis and no cross reaction could be seen in patients with other parasitic diseases, especially hydatid disease, and healthy controls. As we know that the cysticercus antigen usually has a high cross-reaction rate with hydatidosis by ELISA method, the positive rate of this test for cysticercosis is 70% in comparison with 80% and 76% of ELISA and CFT respectively and the difference in the figures of these three tests has no statistical significance. Our study suggested that this method is valuable in clinical diagnosis and epidemiological surveys for research work on cysticercosis cellulosae.     

血吸虫循环抗原检测的现场试验Ⅰ

将血吸虫肠相关趋阴极抗原的单克隆抗体用于Dot—ELISA,共检测2175份血清,其中急性血吸虫病血清210份,阳性率为91.9％;慢性血吸虫病血清798份,阳性率为86.7％;正常人血清752份,假阳性率为1.1％;除肺吸虫病外,对其他寄生虫病或非寄生虫感染疾病血清无明显交叉反应。用单盲法Dot—ELISA检测3批血清,结果敏感性为86.5％～95.1％;特异性为96.9％～100.0％。检测流行区居民547份血清,Dot—ELISA阳性反应130份;粪检阳性72例。两者均为阳性者55例,相符率为76.4％。上述结果表明,Dot—ELISA检测循环抗原确实具有较好的敏感性与特异性,适于大规模应用及流行病学调查。     

快速诊断人畜旋毛虫病ELISA试剂盒的研制及应用

本研究建立了快速诊断人畜旋毛虫病的ELISA试剂盒,该试剂盒与常规ELISA平行检测107例旋毛虫病人血清,阳性率分别为99.07％和97.19％;检测10份感染旋毛虫的病猪血清、5份病豚鼠血清、4份病犬血清、5份病兔血清,除病兔的阳性率两法均为80％外,其余两法均为100％。实验证明该试剂盒具有较好的特异性和重复性,已在全国人体寄生虫病分布调查中推广应用。     

检测包虫病患者血清特异IgG4诊断价值的研究

目的探讨检测患者血清特异IgG4诊断包虫病的效果.方法采用两种抗原(棘球蚴囊液粗抗原及其抗原B)通过ELISA法检测棘球蚴病病人、非棘球蚴病病人和健康对照血清特异IgG4.结果粗抗原和抗原B检测棘球蚴患者血清特异IgG4的阳性率分别为94.4%和89.8%;与部分猪囊尾蚴病患者血清出现交叉反应外,与肺吸虫病、旋毛虫病、血吸虫病、肝囊肿等患者的血清以及健康对照血清均未出现交叉反应.结论检测棘球蚴患者血清特异IgG4敏感性高,特异性强,具有较好的诊断价值.