uPA,uPAR,PAI-1在具有不同转移率的鼻咽癌细胞系中的表达

目的：研究尿激酶型纤溶酶原激活剂（urokinase-type plasminogen activator,uPA)和它的受体（uPAR)、抑制剂（PAI－1）在具有不同转移率的鼻咽癌细胞系CNE－2Z（20％淋巴道转移）、CNE－2Z－H5（40％淋巴道转移）、CNE－2Z－H5－9（90％淋巴道转移）中的表达。方法：应用逆转录聚合酶反应（RT－PCR）方法检测uPA,uPAR,PAI-1在基因转录水平的表达。结果：uPA,uPAR mRNA在CNE－2Z－H5－9中表达最高，在CNE－2Z中表达最低；PAI－1 mRNA在CNE－2Z－H5－9中无表达，在CNE－2Z，CNE－2Z－H5有表达，但差异无显著性。结论：uPA、uPAR可能促进鼻咽癌细胞侵袭、转移，PAI－1可能起抑制作用。     

uPAR表达在鼻咽癌侵袭和转移中的作用

目的探讨尿激酶型纤溶酶原激活剂受体（ urokinase-type plasminogen activator receptor, uPAR ）在鼻咽癌组织中的表达及其与鼻咽癌侵袭和转移的关系。方法应用RT-PCR和免疫组织化学方法，检测55例鼻咽癌术后组织标本中uPAR表达，分析uPAR表达与鼻咽癌临床病理特征的关系。结果鼻咽癌组织中都存在uPAR基因的表达，并定位于细胞质和域细胞膜中，uPAR基因mRNA和蛋白质的检测均显示有淋巴结转移的癌组织uPAR表达高于元淋巴结转移组，TNM分期Ⅲ～Ⅳa期的癌组织高千Ⅰ～Ⅱ期．均有统计学煮艾（P〈0．01）．结论鼻咽癌组织中uPAR基因及蛋白质表达与鼻咽癌的侵袭和转移密切相关。     

uPA在鼻咽癌组织中的表达及其意义

目的探讨尿激酶型纤溶酶原激活剂在鼻咽癌组织中的表达及其与鼻咽癌侵袭和转移的关系。方法应用RT—PCR和免疫组化方法检测55例鼻咽癌术后组织标本中uPA的表达，分析uPA表达与鼻咽癌临床病理特征的关系。结果鼻咽癌组织中都存在uPA基因的表达，并定位于细胞质和／或细胞膜中，uPA基因mRNA和蛋白质的检测均显示有淋巴结转移的癌组织uPA表达高于无淋巴结转移组，TNM分期Ⅲ～Ⅳa的癌组织高于Ⅰ～Ⅱ组，均有统计学意义。结论鼻咽癌组织中uPA基因及蛋白质表达与鼻咽癌的侵袭和转移密切相关。     

uPAR表达对鼻咽癌侵袭和转移的影响

目的　探讨尿激酶型纤溶酶原激活剂受体 (uPAR)对鼻咽癌侵袭和转移的影响。方法　以鼻咽癌细胞系 (CNE 2Z)及其克隆株 (CNE 2Z H 5 ,CNE 2Z H 5 9)作为研究材料 ,应用逆转录聚合酶反应 (RT PCR )检测uPAR在基因转录的表达 ;应用蛋白免疫印迹 (Westen Blotting)方法检测uPAR蛋白水平的表达 ;通过异质黏附抑制实验 ,观察uPAR在鼻咽癌细胞侵袭和转移过程中的作用。结果　uPAR在CNE 2Z H 5 9中表达最高 ,其次为CNE 2Z H 5 ,在CNE 2Z中表达最低 ;uPAR抗体能抑制CNE 2Z H 5 9的异质黏附能力。结论　uPAR可能促进鼻咽癌细胞的侵袭和转移     

uPAR 表达对肝癌细胞株SMMC-7721体外及体内侵袭转移能力的影响

目的 探讨尿激酶型纤溶酶原激活剂受体（uPAR）的表达对肝癌细胞株SMMC-7721体外和体内侵袭和转移能力的影响。方法利用流式细胞荧光激活分选（FACS）技术从SMMC-7721中分选出uPAR阳性（uPAR+）细胞株和uPAR阴性（uPAR-）细胞株,再用Boyden小室肿瘤细胞体外侵袭实验以及裸鼠体内转移实验,来比较两组肝癌细胞株的体外及体内侵袭和转移能力的差别。结果从SMMC-7721分选出的uPAR+组和uPAR-组的纯度分别为90%和97%,两组体外侵袭实验显示,uPAR+组透过基膜的细胞数较uPAR-组明显增多（P<0.05）,两组在裸鼠肝内转移实验显示,uPAR+组发生肝内转移、胆管及门脉癌栓较uPAR-组明显增加（P<0.05）。结论uPAR的表达和SMMC -7721的体外及体内侵袭转移能力密切相关,uPAR的表达可能赋予了肝癌细胞株强大的侵袭转移能力。     

尿激酶型纤溶酶原激活剂对鼻咽癌侵袭和转移的影响

目的　研究尿激酶型纤溶酶原激活剂 (uPA )在鼻咽癌侵袭和转移中的作用。方法　应用逆转录聚合酶反应 (RT -PCR )方法检测uPA在鼻咽癌细胞系 (CNE -2Z)及其克隆株 (CNE -2Z -H 5、CNE -2Z -H 5 -9)中的表达 ;应用酶联吸附法(ELISA )测定uPA在CNE -2Z、CNE -2Z -H 5、CNE -2Z -H 5 -9中的分泌量 ;采用异质黏附抑制实验 ,观察uPA在鼻咽癌细胞侵袭和转移过程中的作用。结果　uPA在CNE -2Z -H 5 -9中表达水平最高 ,在CNE -2Z中表达水平最低 ,在CNE -2Z -H 5中表达水平处于前两者之间 ;抗uPA抗体抑制CNE -2Z -H 5 -9的异质黏附能力。结论　uPA可能促进鼻咽癌细胞的侵袭和转移     

uPA基因启动子区低甲基化在鼻咽癌侵袭转移中的作用

目的探讨uPA基因启动子区低甲基化状态与鼻咽癌侵袭转移的关系。方法用甲基化特异性PCR及RT－PCR法检测分析鼻咽癌及鼻咽部慢性炎症组织中uPA基因甲基化状态及其基因表达情况,分析uPA基因低甲基化与鼻咽癌侵袭转移的关系。结果58例鼻咽癌组织中有51例为uPA基因低甲基化,其余7例为高甲基化,而鼻咽部慢性炎症组织中uPA基因均为高甲基化;低甲基化的鼻咽癌组织中均见uPA mRNA强表达,而高甲基化的鼻咽癌和鼻咽部慢性炎症组织中仅见uPAmRNA弱表达或无表达。结论鼻咽癌中uPA基因的高表达与其基因启动子区低甲基化有关,uPA基因低甲基化可能与鼻咽癌的侵袭转移有关。     

原发性肝癌介入治疗对尿激酶型纤溶酶原激活剂及其受体表达的影响

  目的 探索原发性肝癌介入治疗前后尿激酶型纤溶酶原激活剂（urokinase plasminogen activator, uPA）及其受体（urokinase plasminogen activator receptor, uPAR）表达的变化，分析uPA及uPAR在人类原发性肝癌发生发展中的作用，并为uPA及uPAR表达水平对介入治疗原发性肝癌的效果评价价值提供可靠的理论依据。方法 对48例已确诊的原发性肝癌患者在介入治疗前后分别取静脉血、癌组织和肝正常区组织标本，应用ELISA、RT-PCR方法，分别检测介入治疗前后uPA／uPAR在血清、肝癌组织与正常肝组织中的表达变化。结果 介入治疗前uPA／uPAR 在血清内的表达量明显高于对照组，两组间的差异有统计学意义（P＜0.01）；肝癌组织中uPA／uPAR mRNA明显高于正常区肝组织，两组间的差异有统计学意义（P＜0.01），且介入治疗后肝癌组织中uPA／uPAR mRNA的表达量较治疗前明显降低，两组间的差异有统计学意义（P＜0.05），但未降至正常。结论 uPA／uPAR 的过量表达与原发性肝癌的发生有关，uPA／uPAR的mRNA表达水平对介入治疗原发性肝癌的效果评价有一定的参考价值。     

uPA基因启动子区低甲基化在鼻咽癌侵袭转移中的作用

目的 探讨uPA基因启动子区低甲基化状态与鼻咽癌侵袭转移的关系。方法用甲基化特异性PCR及RT－PCR法检测分析鼻咽癌及鼻咽部慢性炎症组织中uPA基因甲基化状态及其基因表达情况,分析uPA基因低甲基化与鼻咽癌侵袭转移的关系。结果58例鼻咽癌组织中有51例为uPA基因低甲基化,其余7例为高甲基化,而鼻咽部慢性炎症组织中uPA基因均为高甲基化;低甲基化的鼻咽癌组织中均见uPA mRNA强表达,而高甲基化的鼻咽癌和鼻咽部慢性炎症组织中仅见uPA mRNA弱表达或无表达。结论鼻咽癌中uPA基因的高表达与其基因启动子区低甲基化有关,uPA基因低甲基化可能与鼻咽癌的侵袭转移有关。     

PAI-1在鼻咽癌细胞系(CNE-2Z)及其克隆株(CNE-2Z-H5,CNE-2Z-H5-9)中表达和意义

目的:探讨尿激酶激活剂抑制剂-1(Plasminogenactivatorinhibitor-1,PAI-1)在不同淋巴道转移能力的鼻咽癌细胞系(CNE-2Z)及其克隆株(CNE-2Z-H5,CNE-2Z-H5-9)中的表达和意义。方法:应用逆转录聚合酶反应(RT-PCR)方法检测PAI-1在基因转录水平的表达;使用异质粘附、侵袭抑制实验观察PAI-1在鼻咽癌细胞侵袭和转移过程中的作用。结果:PAI-1在CNE-2Z,CNE-2Z-H5中均有转录,但无显著性差异;PAI-1在CNE-2Z-H5-9中无转录。抗PAI-1抗体对CNE-2Z-H5-9异质粘附、侵袭无影响。结论:PAI-1可能抑制鼻咽癌的侵袭和转移。     

阿米洛利对高转移肺癌细胞侵袭能力和uPA 系统的影响*

目的:观察阿米洛利对人高转移肺癌细胞 PGCL3 体外侵袭能力和尿激酶型纤溶酶原激活物（urokinase-type plasminogen activator,uPA ）系统的影响。方法:不同浓度（25 μmol/L、50 μmol/L 和100μmol/L）的阿米洛利作用于PGCL3 细胞6h 后,用Transwell 小室法检测对细胞侵袭能力和运动能力的影响。阿米洛利作用 24 h 后,用发色底物法检测对细胞分泌的 uPA 和纤溶酶原激活物抑制剂-1（plasminogen activator inhibitor- 1,PAI-1）活性的变化。RT-PCR 检测阿米洛利对细胞uPA 、尿激酶型纤溶酶原激活物受体（urokinase-type plasminogen activator receptor ,uPAR）和PAI-1 mRNA 表达的影响。Western blot 检测阿米洛利对细胞uPA 、细胞外调节蛋白激酶2（extracellular regulated protein kinase 2,ERK 2）和ras蛋白表达情况的影响。结果:侵袭实验和运动实验结果均显示,经
阿米洛利处理后,穿膜细胞数明显减少,在100μmol/L 时,对侵袭和运动的抑制率分别为（37 .7±4.1）%和（64 .9±4.9）%,与对照组相比具有显著性差异（P<0.01 ）。同时,细胞分泌的 uPA 和PAI-1 活性降低,当浓度达到 100μmol/L 时,差异具有统计学意义（P<0.05 ）。从25 μmol/L 开始,阿米洛利就可显著抑制PAI-1 mRNA 的表达,当达 100μmol/L 时可明显下调uPA mRNA 的表达,但各浓度对uPAR mRNA的表达均无影响。随着阿米洛利浓度的增加,uPA 蛋白表达量逐渐减少,但对 ras和ERK 2 蛋白表达量无明显影响。结论:阿米洛利能够抑制高转移肺癌细胞PGCL3 的侵袭和运动,其作用机制与抑制uPA 和PAI-1 的活性和表达有关,有成为抗肿瘤转移药物的潜力。      

uPA-uPAR系统在肿瘤评估与治疗中的研究进展

尿激酶型纤溶酶原激活剂-尿激酶型纤溶酶原激活剂受体(uPA-uPAR)系统是一种细胞外蛋白水解酶系统,该系统可激活纤溶酶,进而引发一系列蛋白水解级联反应,在肿瘤细胞的侵袭与转移中发挥重要作用。这为uPA-uPAR系统各组分成为多种恶性肿瘤的潜在预后生物标志物和治疗靶点提供了可能,本文主要介绍了近年来基于uPA-uPAR系统的恶性肿瘤诊断、治疗及预后评价策略。     

PAI-1对鼻咽癌侵袭和转移的影响

目的探讨尿激酶激活剂抑制剂-1(PAI-1)对鼻咽癌侵袭和转移的影响。方法以高低不同淋巴道转移能力的鼻咽癌细胞系(CNE-2Z)及其克隆株(CNE-2Z—H5，CNE-2Z—H5—9)作为研究材料；应用逆转录聚合酶反应(RT—PCR)方法检测PAI-1表达水平；应用酶联吸附法(ELISA)测定PAI-1在3种细胞中的蛋白表达量；通过侵袭抑制实验观察PAI-1在鼻咽癌的侵袭和转移过程中的作用。结果PAI-1在CNE-2Z、CNE-2Z—H5中均有表达，但无显著性差异；PAI-1在(2NE-2Z—H5—9中无表达。抗PAI-1抗体对CNE-2Z—H5—9侵袭无影响。结论PAI-1可能抑制鼻咽癌的侵袭和转移。     

肝癌患者血浆、组织中凝血及纤溶因子的表达及其临床意义

背景与目的:研究表明凝血及纤溶因子改变与恶性肿瘤的发生、发展密切相关。本研究检测组织因子(tissuefactor,TF)、尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase-typeplasminogenactivator,uPA)及其受体(urokinase-typeplasminogenactivatorreceptor,uPAR)在肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)组织中及血浆中的表达并探讨其临床意义。方法:应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测肝细胞癌患者50例及对照组30例非癌患者的血浆TF、uPA和uPAR水平;50例肝癌中随机选取27例取其肝癌组织、癌旁组织,以27例非癌患者肝组织为对照,利用RT-PCR法分别检测TF、uPA、uPARmRNA的阳性率及相对表达强度,并结合临床病理资料进行分析。结果:肝细胞癌患者血浆TF、uPA及uPAR水平均较对照组升高[(409.4±13.0)pg/mlvs.(318.8±69.1)pg/ml,(1.63±0.52)ng/mlvs.(1.20±0.40)ng/ml,(1.36±1.00)ng/mlvs.(0.68±0.28)ng/ml],均有显著性差异(P<0.05)。肝细胞癌患者血浆TF水平在低分化组、肿瘤较大组及合并肝硬化组均显著升高(P<0.05),血浆uPA水平只在合并肝硬化组升高(P<0.05)。肝细胞癌患者血浆TF、uPA和uPAR水平在有淋巴结转移、肝外脏器转移及门脉癌栓组较无转移及无癌栓组升高(P<0.05)。TF、uPA、uPARmRNA在肝细胞癌组织中阳性率及相对表达强度分别为62.96%(17/27)、70.37%(19/27)、77.78%(21/27)及0.57±0.27、0.96±0.46、0.78±0.32,均显著高于癌旁组织及非癌患者肝组织,均有显著性差异(P<0.05);TF、uPA、uPARmRNA在有肝内转移及门脉癌栓组的阳性率及相对表达强度均高于无肝内转移及门脉癌栓组(P<0.05)。经Pearson检验,肝细胞癌患者TF、uPA和uPARmRNA表达呈正相关(TF/uPA:r=0.37,P<0.01,TF/uPAR:r=0.53,P<0.01,uPA/uPAR:r=0.36,P<0.01)。经Cox多因素分析三者均为独立预后因素[TF(χ2=6.05,P=0.014),uPA(χ2=4.29,P=0.038),uPAR(χ2=4.40,P=0.036)]。结论:TF、uPA及uPAR可能在肝细胞癌的侵袭转移过程中起协同作用;三者可能与肝癌患者预后有关。     

Expression of urokinase plasminogen activator, its receptor and type-1 inhibitor in malignant and benign prostate tissue

The plasminogen activation (PA) cascade participates in degradation of extracellular matrix during cancer invasion. We have studied the expression of urokinase-type plasminogen activator (uPA) mRNA, uPA receptor (uPAR) mRNA and immunoreactivity, and type-1 plasminogen activator inhibitor (PAI-1) mRNA and immunoreactivity in 16 prostate adenocarcinomas and 9 benign prostate hyperplasias. uPA mRNA and uPAR mRNA expression were found in 9 and 8 of the adenocarcinomas, respectively, and in 7 and 6 of the benign hyperplasias, respectively. In both malignant and benign lesions, expression of these 2 mRNAs was predominantly seen in cells identified as macrophages, which in most of the carcinomas (approximately 90%) were located in the interstitial tissue between the tumor cell islands, while in most of the benign hyperplasias they were located in the lumen of the glands and were in only a few cases (approximately 30%) found in the interstitial tissue. uPAR immunoreactivity correlated with the mRNA expression and was, in addition, found in neutrophils. PAI-1 mRNA was detected in 13 of the 16 carcinomas and in 8 of the 9 benign hyperplasias, located in scattered fibroblast-like cells in both groups, in some vascular structures and in a few macrophages located in the interstitial tissue of both malignant and benign lesions. A similar expression pattern was found for PAI-1 immunoreactivity. In 8 of the 16 carcinomas, all 3 components were present, and in several areas colocalization was observed in stromal cells in close proximity to cancer cell islands. No immunoreactivity and/or mRNA expression of uPA, uPAR or PAI-1 was observed in cancer cells or in other epithelial cells in any of the cases.