加贝酯对大鼠肝脏缺血再灌注损伤细胞因子的作用和影响

【目的】观察细胞因子在大鼠肝脏缺血再灌注损伤中的变化和加贝酯（GM）对其的作用、影响及可能的机制。【方法】采用Pringle＇s法建立大鼠肝脏缺血再灌注模型,将40只SD大鼠随机分成四组,每组10只：A组（手术对照组）、B组（缺血再灌注组）、C组（加贝酯处理组）、D组（盐水对照组）。光镜观察肝脏病理组织学变化,测定血清中天冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、肿瘤坏死因子－α（TNF-α）及白介素6（IL－6）的含量。【结果】肝脏缺血再灌注损伤时,AST、ALT、TNF-α、IL－6含量显著地升高,并出现明显的病理学改变;而加贝酯处理后上述改变均明显减轻,其差异有显著性（P〈0．05）。【结论】肝缺血再灌注损伤后,产生大量的炎性细胞因子,而加贝酯通过其细胞保护作用、减少炎性细胞因子的产生及减轻炎症反应而产生肝保护作用。     

硫化氢对肝硬化大鼠肝脏缺血再灌注后TNF-α和IL-1β表达的影响

[目的]探讨硫氢化钠（NaHS）预处理对肝硬化大鼠肝脏缺血再灌注后肝功能变化的影响及对肝组织肿瘤坏死因子α（T N F-α）和白介素-1β（IL-1β）表达的影响。[方法]30只肝硬化大鼠随机分为3组（n＝10）,包括假手术组（Sham组）,肝脏缺血再灌注损伤组（HIRI组）和NaHS预处理组（NaHS组）。再灌注末取腔静脉血检测肝功能指标：谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）浓度。取部分肝组织酶联免疫吸附法（ELISA）检测 TNF-α和IL-1β表达情况。[结果]再灌注末,HIRI组、NaHS组 ALT、AST、TNF-α和IL-1β表达明显高于Sham组, NaHS组低于 HIRI组,且差异均有显著性（ P ＜0．05）。[结论]NaHS预处理能提高肝硬化大鼠抵抗肝脏缺血再灌注损伤的能力,其机制可能是通过抑制炎症反应实现。     

米诺环素对兔骨关节炎模型中TGF-β1表达的影响及意义

[目的]探讨米诺环素局部给药对骨关节炎软骨形态以及转化生长因子β1（TGF-β1）表达的影响及其作用机制。[方法]成年新西兰大白兔32只,随机分为四组,每组各8只。正常对照组（A组）,不予任何处理。其余三组均采用膝关节腔内木瓜蛋白酶注射的方法复制出右膝关节骨性关节炎（OA）模型。造模成功后,模型对照组（B组）右膝关节每日注射0．4mL双蒸水;而米诺环素小剂量组（C组）于右膝关节每日注射0．65％米诺环素溶液0．4mL（总量0．26mg）。米诺环素大剂量组（D组）于右膝关节每日注射1．30％米诺环素溶液0．4mL（总量0．52mg）。后三组均注射4周,4周后处死所有实验兔,于解剖显微镜下行右膝关节面软骨退变大体评分,取标本作病理切片HE染色,光镜下观察关节软骨的一般形态,以免疫组化方法观察软骨中TGF．p1的表达。[结果]各组关节面软骨退变大体评分均明显高于A组（P〈0．01）,且B组高于C组（P〈0．01）,C组高于D组（P〈0．05）;光镜下软骨的一般形态及TGF131的表达,A组无异常,TGF_p1少量表达,B组损伤重,TGF-β1的表达增高（P〈0．01）,C、D组较B组有明显改善,且D组优于C组,TGF-β1的表达随米诺环素剂量的增加而增高（P〈0．05）。[结论]关节内注射米诺环素可减轻关节软骨退变,其作用与TGF-β1的表达增高密切相关,提示TGF-β1在骨关节炎软骨退变过程中发挥了重要的调节作用。     

早期肠内营养对重型颅脑损伤大鼠胃黏膜能量代谢的影响

[目的]研究早期肠内营养对重型颅脑损伤大鼠胃黏膜能量代谢的影响。[方法]建立大鼠重型颅脑损伤模型，随机分为早期肠内营养组（A组）、单纯损伤组（B组）和正常对照组（C组）。采用高效液相色谱法检测伤后6h、12h、24h、48h、72h胃黏膜组织及其线粒体内腺苷酸池含量的变化。[结果]B组各时相点胃黏膜组织及其线粒体内三磷酸腺苷（ATP）与总腺苷酸含量显著低于C组（P〈0．05或P〈0．01），胃黏膜组织能荷（EC）无明显变化，胃黏膜线粒体能荷水平在伤后6h、72h显著低于C组（P〈0．05或P〈0．01）。而A组胃黏膜组织及其线粒体内ATP与总腺苷酸含量较B组显著增加（P〈0.05或P〈0．01），胃黏膜线粒体能荷水平在伤后72h较B组显著增高（P〈0．05）。[结论]重型颅脑损伤可导致胃黏膜组织及其线粒体内能量代谢紊乱，早期肠内营养可能通过有效增加胃黏膜的能量贮备，来实现保护胃黏膜的作用，从而减轻急性胃黏膜损伤的程度。     

硫化氢对肝纤维化大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用

【目的】探讨硫化氢（H2 S）对肝纤维化大鼠肝脏缺血再灌注损伤（HIRI）的保护作用。【方法】32只SD大鼠通过胆总管结扎法建立大鼠肝纤维化模型,随机分为4组：①假手术组（Sham组）,② HIRI组,③硫化氢钠（NaHS）预处理组（NaHS组）,④NaHS预处理＋ PI3K抑制剂组（LY294002组）。检测各组谷草转氨酶（Aspartate transaminase ,AST）、谷丙转氨酶（Alanine aminotransferase ,ALT）、超氧化物歧化酶（Super‐oxide Dismutase ,SOD）、丙二醛（Malondialdehyde ,MDA）水平;取左肝外叶组织,透射电镜观察肝细胞细胞中自噬泡情况;Western Blot技术检测各组细胞自噬相关蛋白Beclin1、LC3B及Akt表达水平。【结果】与Sham组比较,其他三组AST 、ALT、MDA水平均显著升高（ P ＜0．05）,其中NaHS组较 HIRI组损伤减轻（ P ＜0．05）,LY294002组较NaHS组损伤加重（ P ＜0．05）,SOD 改变与之相反。与Sham组比较,其他各组自噬泡均增多,其中NaHS组较HIRI组自噬体减少,LY294002组较NaHS组自噬体增多,自噬相关基因表达发生相应的改变。【结论】外源性H2 S对肝纤维化大鼠HIRI发挥保护作用的机制之一,可能是通过PI3K／Akt信号通路抑制细胞自噬作用来实现的。     

应激状态下急性酒精中毒大鼠胃黏膜损伤模型的建立

[目的]建立应激状态下急性酒精中毒胃黏膜损伤的动物模型。[方法]采用析因实验设计，将96只Wistar大鼠分为应激组（A组）、酒精中毒组（B组）、应激后酒精中毒组（C组）、空白对照组（D组）。A组和C组大鼠倒立8h，之后给B组和C组大鼠灌入56度白酒，直到大鼠出现酒精中毒症状为止。A组、D组大鼠灌入等量生理盐水。分别于酒精中毒后2h、24h、48h处死8只大鼠，观察胃黏膜的病理变化，并进行胃黏膜损伤评分。[结果]B组与A组、C组胃黏膜损伤评分差异均有统计学意义（P〈0．05）；且不同时间点胃黏膜损伤评分差异亦有统计学意义（P〈0．05）；不同处理方法和时间因素有交互作用。[结论]倒立8h后酗酒法能成功地建立应激状态下急性酒精中毒大鼠胃黏膜损伤的模型，并出现胃黏膜损伤的征象。     

蛋白酶抑制剂对肝缺血-再灌注损伤的保护作用

目的：探讨蛋白酶抑制剂及中性粒细胞在肝缺血－再灌注损伤中的作用。方法：采用大鼠部分肝缺血－再灌注模型，将健康雄性SD大鼠32只随机分为4组，手术对照组（A组），肝缺血90分钟组（B组），肝缺血90分钟，再灌注120分钟组（C组），肝缺血90分钟，再灌注120分钟加缺血前30分钟静注乌司他丁组（D组），观察动物肝组织病理切片；分别测定血浆中天冬氨酸转氨酶（AST），丙氨酸转氨酶（ALT），乳酸脱氢酶（LDH）浓度，测定肝组织中髓过氧化物酶（MPO）含量，结果：光镜下B，C2组与A组比较，肝小叶结构紊乱，肝血窦和中央静脉有程度不同的淤血，有的肝血窦变窄，内皮细胞及肝细胞普遍水肿变性；C组肝细胞坏死较B组明显；D组上述改变明显减轻，血浆中肝功能酶学指标显著升高（B，C组与A组比较，P均＜0．05），肝组织中MPO活性升高，以再灌注120分钟组为著（C组与A组比较，P＜0．01），D组血浆中ALT，AST，LDH和MPO含量均较C组明显下降，结论：肝缺血－再灌注时，聚集，黏附在肝组织中的大量中性粒细胞通过释放蛋白酶造成肝损伤，蛋白酶抑制剂乌司他丁能明显减轻这种损伤，保护肝功能。     

超敏C反应蛋白及脂联素与2型糖尿病大血管病变的相关性研究

[目的]分析2型糖尿病（DM）合并大血管病变及无大血管病变与血清超敏c反应蛋白（hs—CRP）及脂联素水平的相关性。[方法]79例2型糖尿病患者，按有无大血管病变分为伴大血管病变组（A组）40例，无大血管病变组（B组）39例。另选40例健康者作正常对照组（C组），均检测血清hs—CRP，脂联素及空腹血糖（FBG）、空腹胰岛素（FINS）、血脂等指标。[结果]A组血清hs—CRP高于B组及C组（P〈0．05，P〈0．01），B组明显高于C组（P〈0．01），A组脂联素水平明显低于B组及C组（均P〈0．01），B组明显低于C组（P〈0．01）。相关分析提示血清hs—CRP与脂联素有相关性（P〈0．01）。[结论]hs～CRP，脂联素对于DM患者发生大血管病变的预测具有重要意义。     

双虎清肝颗粒对四氯化碳诱发肝纤维化大鼠TGF-β1-smads信号通路的干预作用及肝脏组织学的影响

【目的】探讨双虎清肝颗粒对四氯化碳诱发肝纤维化大鼠TGF-β1-smads信号通路的干预作用及肝脏组织学的影响。【方法]Sprague-Dawley大鼠60只,分为正常对照组（A组）、模型组（B组）、双虎清肝颗粒小、中、大剂量组（C1,c2,c3组）、水飞蓟素对照组（D组）。除A组外,均经皮下注射四氯化碳8周,后各治疗组给予不同剂量双虎清肝颗粒8周,D组予水飞蓟素8周,ELISA法检测大鼠血液TGF-13l,免疫组化检测smad3及smad7在肝组织内的表达及定位,肝组织作常规HE及Masson染色,观察脂肪变、炎症及纤维化程度。【结果】TGF-β1：与B组比较C1、C2、C3、D组（P〈O．05）,A组（P〈O．01）。smad3：与B组比较C1、C2、C3、D组（P〈0．05）,A组（P〈0．01）。Smad7：与B组比较C1、C2、c3、D组（P〉0．05）,A组P〈0．01。组织学：A组无异常;B组明显的纤维化和脂肪变性表现;C1、c2、c3、D组：不同程度的纤维化和脂肪变表现,从C1开始至C3程度逐渐减轻,D组和C3组接近。各组大鼠肝纤维化病变半定量：与B组比较,各组大鼠（P〈O．05）。【结论】双虎清肝颗粒能够通过抑制TGF-β1,及smad3的生成而显著改善四氯化碳所诱发的肝纤维化大鼠肝脏组织学的变化并且有量效关系。     

慢性乙型肝炎患者血清补体C3b水平的研究

目的探讨慢性乙型肝炎患者血清补体C3b水平及其临床意义。方法选择乙型肝炎病毒（HBV）感染的慢性乙型肝炎患者140例,据患者血清中HBV e抗原（HBeAg）和丙氨酸氨基转氨酶（ALT）水平,将其分为6组：A组（HBeAg阳性,ALT正常）、B组（HBeAg阴性,ALT正常）、C组（HBeAg阳性,ALT轻、中度升高）、D组（HBeAg阳性,ALT高度升高）、E组（HBeAg阴性,ALT轻、中度升高）、F组（HBeAg阴性,ALT高度或重度升高）。另将20例健康者作为对照组。HBeAg采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法,HBV-DNA采用荧光定量聚合酶链反应（PCR）法,ALT采用速率法,补体C3b采用ELISA-生物素亲和素抗体夹心法测定。结果 D组与F组患者血清C3b、ALT、天冬氨酸氨基转氨酶（AST）水平显著高于A、B、C、E组（P〈0.05）;而D组与F组比较,患者血清C3b、AST水平均无统计学差异（P〉0.05）。对照组受检者血清C3b水平显著低于A、B、C、D、E、F组（P〈0.05）。C3b水平与ALT、AST、HBsAg存在正相关（P〈0.05）,而与HBeAg和HBV-DNA无显著相关（P〉0.05）。结论补体C3b水平与HBV的感染及肝细胞损伤程度有关,而与病毒复制的活跃程度无关,可作为感染和预后的辅助检测指标。     

盐酸戊乙奎醚对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用

【目的】探讨盐酸戊乙奎醚对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响及作用机制。【方法】通过大鼠肝脏缺血再灌注损伤模型,检测大鼠血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天冬氨基酸转移酶（AST）,肝组织匀浆丙二醛（MDA）的变化。观察光镜下肝脏病理形态改变。【结果】经盐酸戊乙奎醚处理的C组血清ALTAST和MDA的浓度明显低于B组（对照组）而高于A组（假手手术组）;C组光镜下肝脏病理形态改变较B组轻微。【结论】盐酸戊乙奎醚对大鼠肝脏缺血再灌注损伤有保护作用。     

维拉帕米和Na+/H+通道阻滞剂对大鼠肝脏热缺血再灌注损伤的影响及其机制

[目的]研究维拉帕米(VP)和5-N-乙基-异丙基阿米洛利(EIPA)单独及联合作用对大鼠肝脏热缺血再灌注损伤保护作用及其机制.[方法]50只SD大鼠随机分成空白组(A组),缺血再灌注组(B组),EIPA 缺血再灌注组(C组),维拉帕米 缺血再灌注组(D组),EIPA VP 缺血再灌注组(E组),每组10只.缺血前10 min自尾静脉注入药物.制备95%肝脏缺血模型,缺血30 min,再灌注2 h后取静脉血、肝脏标本,比较各组之间的肝功能(ALT, AST),肝组织匀浆XOD活性,肝组织Ca2 浓度以及肝组织形态学变化.[结果]VP和EIPA组各项检测指标与缺血再灌注组比有显著性差异,联合用药组与单独用药组比较有显著性差异(P＜0.05).[结论]维拉帕米和EIPA预处理能减轻肝脏缺血再灌注损伤,联合用药有协同保护作用,效果更明显.     

依达拉奉对大鼠肝缺血再灌注过程中TNF-α表达的影响

[目的]通过检测TNF-α的表达变化,研究依达拉奉对肝缺血再灌注(I/R)损伤的逆转作用.[方法]将80只Wistar大鼠随机分为实验组和对照组,建立常温下部分肝缺血再灌注损伤动物模型.在肝缺血再灌注损伤开始前1h和开始时对实验组大鼠给予依达拉奉注射液,对照组给予同等容量的生理盐水.再灌注0、1、2、4h测定肝脏过氧化...     

Gabexate mesilate, a synthetic protease inhibitor, reduces ischemia/reperfusion injury of rat liver by inhibiting leukocyte activation.

OBJECTIVE: To investigate whether gabexate mesilate, a synthetic protease inhibitor with anticoagulant properties, prevents hepatic damage by inhibiting leukocyte activation, we examined its effect on ischemia/reperfusion injury of rat liver in which activated leukocytes play a critical role. DESIGN: Prospective, randomized, controlled study. SETTING: Research laboratory at a university medical center. SUBJECTS: Male Wistar rats weighing 220 to 280 g. INTERVENTIONS: Hepatic damage was evaluated by changes in bile flow and serum transaminase concentrations after ischemia/ reperfusion. Rats received continuous intravenous infusions of gabexate mesilate (10 mg/kg/hr) or intravenous administration of an inactive derivative of activated factor X (Xa), a selective inhibitor of thrombin generation (3 mg/kg), immediately before the induction of ischemia in the median and left lobes of the liver. To determine whether gabexate mesilate inhibits leukocyte activation, we examined the effects of gabexate mesilate on hepatic concentrations of tumor necrosis factor-alpha and rat interleukin-8 and on hepatic myeloperoxidase activity after ischemia/reperfusion. MEASUREMENTS AND MAIN RESULTS: Hepatic dysfunction, observed after 60 mins of ischemia/reperfusion, showed a reduction in bile flow. The ischemia/reperfusion-induced decrease in bile flow was prevented by administration of gabexate mesilate. Serum transaminase concentrations increased after hepatic ischemia/reperfusion, peaking 12 hrs after reperfusion. Gabexate mesilate significantly inhibited the ischemia/reperfusion-induced increase in serum transaminase levels seen 12 hrs after reperfusion. Although an inactive derivative of factor Xa inhibited the increases in serum levels of fibrin and fibrinogen degradation products 6 hrs after reperfusion, it did not prevent ischemia/ reperfusion-induced liver injury. Hepatic levels of tumor necrosis factor-alpha, rat interleukin-8, and myeloperoxidase were significantly increased after ischemia/reperfusion. These increases were significantly inhibited by gabexate mesilate but unaffected by an inactive derivative of factor Xa. CONCLUSION: Gabexate mesilate reduced ischemia/reperfusion-induced hepatic injury not by inhibiting coagulation, but by inhibiting leukocyte activation.     

利多卡因对兔肺缺血再灌注损伤的保护作用

[目的]探讨利多卡因对兔肺缺血再灌注损伤的保护作用及可能机制.[方法]建立兔肺缺血再灌注动物模型.健康家兔30只,随机分为3组：A组为假手术组、B组为缺血再灌注组、C组为利多卡因处理＋缺血再灌注组,每组10只,每组分别于再灌注60 min时测定血浆丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、血红素氧合酶-1.[结果]再灌注60 min后,B和C组的肺组织W/D及IQA都较A组显著升高（P均〈0.01）,而C组的肺组织W/D及IQA都明显低于B组（P均〈0.01） B和C组的肺组织HO-1活性明显高于A组（P均〈0.01）,而与B组相比,C组的肺组织HO-1活性明显升高（P均〈0.01）.肺组织湿干重比（W /D）,光镜观察肺组织形态结构变化并测定肺损伤定量评价指标（IQA）.与A组相比,B组W/D、血浆MDA含量以及IQA显著升高（P均〈0.01）,而SOD含量显著降低（P〈0.01）.与B组相比,C组W/D、血浆MDA含量以及IQA明显降低（P均〈0.01）,而SOD含量明显升高（P〈0.01）.[结论]利多卡因可能通过抑制氧自由基损伤和通过增强肺组织HO-1活性而对肺缺血再灌注损伤产生保护作用.     

磷丙泊酚钠后处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用及bcl-2/bax蛋白表达的影响

目的研究磷丙泊酚钠后处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用及可能机制。方法 48只Sprague-Dawley大鼠,随机分4组,即假手术组（S组）、对照组（C组）、丙泊酚组（P组）、磷丙泊酚钠组（F组）。每组再根据再灌注2 h或4 h分为2个亚组,分别为S2h、C2h、P2h、F2h亚组和S4h、C4h、P4h、F4h亚组,每个亚组6只大鼠。肝脏缺血1 h后恢复再灌注,S组和C组再灌注开始给予生理盐水静脉泵注,P组给予丙泊酚静脉泵注,F组给予磷丙泊酚钠静脉泵注。于肝脏缺血1 h和再灌注结束后,取血测定血清中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）,同时取左肝石蜡包埋切片测定B淋巴细胞瘤/白血病-2（bcl-2）蛋白、bcl-2相关X蛋白（bax）含量,苏木精-伊红染色后观察形态学,计数坏死肝细胞比例评价损伤程度。结果 C2h、P2h、F2h和C4h、P4h、F4h亚组血清ALT、AST值,坏死细胞比例和肝组织bcl-2和bax蛋白含量分别高于S2h、S4h亚组（P〈0.05）,P2h、F2h和P4h、F4h亚组ALT、AST值、坏死细胞比例和肝组织bax蛋白含量低于C2h、C4h亚组（P〈0.05）,bcl-2蛋白含量分别高于C2h、C4h亚组（P〈0.05）。结论磷丙泊酚钠对肝脏缺血再灌注损伤有保护作用,其保护机制可能和调控bcl-2、bax蛋白的表达有关。     

丙氨酰-谷氨酰胺二肽对大鼠创伤性脑损伤后应激性肝损害的干预作用

【目的】探讨丙氨酰-谷氨酰胺二肽（Ala-Gln）对创伤性脑损伤（TBI）大鼠应激性肝损害（HSI）的干预作用。【方法】将60只健康雄性Wister大鼠随机分为假手术对照组（A组）、TBl组（B组）,和Ala-Gin干预组（C组）。C组再分四个亚组分别于致伤后不同时间点3～24h给予Gln干预,各组大鼠均于伤后48h处死取材,检测血清丙氨酸转氨酶（ALT）和天门冬氨酸转氨酶（AST）,测定肝组织超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）水平,观察肝脏组织病理学改变。【结果】B组的ALT、AST较A组明显升高,SOD值明显低于A组,MDA显著高于A组,肝脏组织病理学可见变性、坏死等改变;c组各时点ALT、AST及MDA均较B组显著下降,SOD值明显升高,肝脏组织病理学改变显著改善,且伤后早期干预效果明显。【结论】TBI后可出现肝损伤,应用Ala-Gln对TBI后的肝损伤具有干预作用,且此保护作用可能通过改善肝组织的氧化应激状态完成,并具有显著的时效相关性。     

己酮可可碱对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响

目的:探讨TNF-α抑制剂己酮可可碱对大鼠肝脏缺血再灌注损伤(HIRI)的影响.方法:持续阻断肝固有动脉1 h后再灌注1 h,建立SD大鼠HIRI模型.24只雄性SD大鼠随机分成4组:生理盐水腹腔预处理假手术组(A)、己酮可可碱腹腔预处理假手术组(B)、生理盐水腹腔预处理HIRI组(C)、己酮可可碱腹腔预处理HIRI组...