TNF-α对日本血吸虫雌虫产卵影响的体外试验研究

50d龄的日本血吸虫雌成虫在合不同浓度的肿瘤坏死因子（TNF－α）培养液中培养72h，观察其产卵情况，结果表明，TNF－α具有刺激雌虫产卵的作用，在10－40ng／ml范围内产卵量随TNF－α剂量增加而增高。TNF－α为40ng／ml时，雌虫产卵量达高峰。TNF－α为80ng／ml时，雌虫产卵量无继续增高趋势，提示TNF－α可在一定浓度范围内刺激日本血吸虫雌虫产卵。     

血管紧张素Ⅱ及其受体拮抗剂在系膜细胞培养中对结缔组织生长因子表达的影

目的：研究血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）及其受体拮抗剂Ｌｏｓａｒｔａｎ对系膜细胞（ＭＣｓ）结缔组织生长因子（ＣＴＧＦ）表达的影响。方法：分离培养ＳＤ大鼠肾小球系膜细胞。培养的系膜细胞中分别加入不同浓度的ＡｎｇⅡ（１０＾－９、１０＾－７、１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ）,及１０＾－７ｍｏｌ／Ｌ ＡｎｇⅡ＋１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ Ｌｏｓａｒｔａｎ,作用７２ｈ后,采用反转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术测定ＭＣｓ ＣＴＧＦ ｍＲＮＡ水平变化。结果：ＡｎｇⅡ能促进ＭＣｓ ＣＴＧＦ ｍＲＮＡ表达,且呈剂量依赖性;Ｌｏｓａｒｔａｎ能部分降低ＡｎｇⅡ对ＣＴＧＦ ｍＲＮＡ表达的诱导。结论：ＡｎｇⅡ可能通过促进ＭＣｓ ＣＴＧＦ的表达而促进了肾纤维化的进展;Ｌｏｓａｒｔａｎ可以部分抑制ＡｎｇⅡ对ＣＴＧＦ ｍＲＮＡ表达的诱导,从而可能有益于延缓肾     

EGF对用或未用MNNG诱导的日本血吸虫成虫培养细胞生长？…

目的 研究表皮生长因子（ＥＧＦ）对用或未用甲基硝基亚硝基胍（ＭＮＮＧ）诱导的日本血吸虫成虫培养细胞的促生长、增殖作用。方法 将联合法接种培养至第３天的日本血吸虫成虫培养细胞，一部分在含ＥＧＦ终浓度分别为０、０．５、１、２、４、８、１２、１６、２０、２４、２８ｎｇ／ｍｌ的附加２０％小牛血清及常量抗菌素的ＲＰＭＩ－１６４０培养基中培养；另一部分，先用含ＭＮＮＧ终浓度为３μｇ／ｍｌ附加２０％小牛血清和常     

TNF—α对IFN—γ抗弓形虫效应中的作用的影响

应用＾３Ｈ－尿嘧啶（＾３Ｈ－Ｕ）特异性标记弓形虫在小鼠腹腔巨噬细胞（ＭＰＭ）内的增殖实验，观察了ＴＮＦ－α及ＴＮＦ－α在ＴＮＦ－γ诱导的ＭＰＭ抗弓形虫效应中的作用。结果表明：单独用高浓度ＴＮＦ－α只能诱导ＭＰＭ轻微的抗弓形虫效应（１９％左右），而与亚刺激量的ＴＮＦ－γ相结合几乎可以完全抑制弓形虫的增殖；抗ＴＮＦ－α可消除ＴＮＦ－γ诱导的ＭＰＭ的抗弓形虫的效应，其作用只发生在ＴＮＦ－γ诱导ＭＰＭ的最     

病毒性肝炎和肝硬化患者IL－6、TNF－α的变化

为研究白细胞介素－６（ＩＬ－６）、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）在肝炎和肝硬化（ＬＣ）患者中的作用。检测了１５例正常人，１８例急性病毒性肝炎（ＡＨ），３７例慢性肝炎（ＣＨ），２０例ＬＣ患者血清及外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）的ＩＬ－６、ＴＮＦ－α水平。结果以ＣＨ患者ＩＬ－６、ＴＮＦ－α水平最高（血清及ＰＢＭＣ的ＩＬ－６水平分别为７２．１±３２．９４Ｕ／ｍｌ，１４０．７±３３．５Ｕ／ｍｌ；血清及ＰＢＭＣ的ＴＮＦ－α水平为３．９７±１．３８ｎｇ／ｍｌ，６．３５±１．４１ｎｇ／ｍｌ）。恢复期或稳定期ＴＮＦ－α和ＩＬ－６水平明显低于急性期或活动期（Ｐ＜０．０１）。ＣＨ患者肝组织学活动指数（ＨＡＩ）分数与ＰＢＭＣＩＬ－６和ＴＮＦ－α水平呈正相关（γ分别为０．８９，０．６８；Ｐ＜０．０５）。提示ＩＬ－６和ＴＮＦ－α是肝脏损害重要的炎症介质，介导肝细胞损害。     

自体骨髓移植后血清TNF—α,IFN—α活性研究

应用ＴＮＦ－α和ＩＦＮ－α依赖细胞ＭＴＴ比色分析法，研究了５例自体骨髓移植（ＡＢＭＴ）病人血清中ＴＮＦ－α、ＩＦＮ－α活性，。处于完全缓解期的急性粒细胞性白血病（ＡＭＬ）血清中ＴＮＦ－α生显著的高于正常成人（ＰＢｓ）组（Ｐ〈０．０５）；ＩＦＮ－α活性明显低于ＰＢｓ组（Ｐ〈０．０１）。ＡＢＭＴ前血清中的ＴＮＦ－α、ＩＦＮ－α活性显著高于ＡＢＭＴ后９－１０天（Ｐ〈０．０５）和２１天（Ｐ〈０．０５）；与     

蒿甲醚对日本血吸虫糖原,蛋白质,硷性磷酸酶和…

感染日本血吸虫尾蚴３２－３５ｄ的小鼠１次ｉｇ蒿甲醚（Ａｒｔ）３００ｍｇ．ｋｇ＾－＾１后２４ｈ，其体内♀，♂血吸虫的糖原含量较对照组减少约５０％，７２ｈ后则分别减少６４．１％和７７．９％。给药后７２ｈ，♀，♂虫的蛋白质含较对照组分别减少６８．．１％和４９．３％。给药２４ｈ，♀，♂虫的硷性磷酸酶（ＡＫＰ）活力的抑制率约为２５％，７２ｈ后，♀虫的ＡＫＰ进一步被抑制，抑制率达６１．６％。酸性磷酸酶（ＡＣＰ     

肿瘤坏死因子与肾小球系膜细胞的关系

本文在体外培养的大鼠系膜细胞中，加入ｒＴＮＦα，观察培养的系膜细胞ＤＮＡ合成的变化，以及其合成和分泌ＴＮＦα及ＥＴ－１的变化；并通过一侧大鼠肾动脉内注射ｒＴＮＦα，观察肾脏的病变。结果证明，ＴＮＦα对系膜细胞有促进增生的作用，并使系膜细胞的自分泌功能增强。     

IFN-γ联合TNF-α活化小鼠腹腔巨噬细胞抗不同毒力株弓形虫的作用

目的： 比较ＩＦＮ－γ联合ＴＮＦ－α体外活化的小鼠腹腔巨噬细胞（ＭΦ） 对强毒株ＲＨ株及弱毒株Ｆｕｋａｙａ株的抗虫作用。方法： 体外以ＩＦＮ－γ与ＴＮＦ－α联合活化昆明系小鼠腹腔ＭΦ,观察其对入侵的ＲＨ株及Ｆｕｋａｙａ株速殖子的抗虫作用, 测定培养上清中ＮＯ的水平。结果： 在以ＩＦＮ－γ１００Ｕ＋ ＴＮＦ－α１００Ｕ 活化的ＭΦ中, 入侵２４ｈ 后的ＲＨ株弓形虫速殖子被完全杀灭, 而Ｆｕｋａｙａ 株速殖子则缓慢增殖, 且前者培养上清中ＮＯ水平显著高于后者。结论：ＩＦＮ－γ活化的ＭΦ对入侵的ＲＨ 株和Ｆｕｋａｙａ株速殖子的抗虫作用存在差异,这可能与ＮＯ的水平有关。     

日本血吸虫初产卵体外培养的研究(英文)

目的　观察日本血吸虫未成熟虫卵超免疫血清对虫卵胚胎发育及雌虫生殖力影响的效果。方法　本研究通过体外培养系统 ,观察日本血吸虫成虫离体产卵及虫卵发育全过程中形态学特点的变化 ,检测抗未成熟虫卵超免疫血清对虫卵胚胎发育及雌虫生殖力的影响。结果　在含正常兔血清的培养基中 ,初产卵经 12～ 14天培体外培养后 ,能完成发育至成熟期 ,对照组雌虫每周产卵总数为 176 5 7个 (n =2 0 )。但在含有抗未成熟虫卵超免疫兔血清的培养基中 ,雌虫产卵数量较正常兔血清培养对照组有显著降低 (P <0 0 0 1) ;在培养后第 10天 ,试验组雌虫即停止产卵 ,部分初产卵卵胚的发育和成熟过程被完全阻断 ;免疫荧光染色显示 ,抗卵免疫血清可作用于卵胚细胞及雌虫卵黄腺、肠腔内膜组织。结论　体外培养结果表明 ,日本血吸虫未成熟虫卵抗原诱导的免疫应答 ,在抗虫卵胚胎发育及抗雌虫生殖产卵中起重要作用。     

IFN-γ联合TNF-α活化小鼠腹腔巨噬细胞抗不同毒力株弓形虫的作用

目的： 比较ＩＦＮ－γ联合ＴＮＦ－α体外活化的小鼠腹腔巨噬细胞（ＭΦ） 对强毒株ＲＨ株及弱毒株Ｆｕｋａｙａ株的抗虫作用。方法： 体外以ＩＦＮ－γ与ＴＮＦ－α联合活化昆明系小鼠腹腔ＭΦ,观察其对入侵的ＲＨ株及Ｆｕｋａｙａ株速殖子的抗虫作用, 测定培养上清中ＮＯ的水平。结果： 在以ＩＦＮ－γ１００Ｕ＋ ＴＮＦ－α１００Ｕ 活化的ＭΦ中, 入侵２４ｈ 后的ＲＨ株弓形虫速殖子被完全杀灭, 而Ｆｕｋａｙａ 株速殖子则缓慢增殖, 且前者培养上清中ＮＯ水平显著高于后者。结论：ＩＦＮ－γ活化的ＭΦ对入侵的ＲＨ 株和Ｆｕｋａｙａ株速殖子的抗虫作用存在差异,这可能与ＮＯ的水平有关。     

TGFα—PE40诱导人肝癌SMMC—7721细胞的凋亡

目的　探讨基因重组转化生长因子α－绿脓杆菌外毒素融合蛋白（ＴＧＦα－ＰＥ４０,简称ＴＰ４０）体外诱导人肝癌细胞株ＳＭＭＣ－７７２１凋亡的作用。方法以不同浓度的ＴＰ４０作用于体外培养的肝癌细胞,用流式细胞仪、电子显微镜和琼脂糖电泳的方法分析和检测细胞凋亡。结果在０．０１ｎｇ／ｍｌ浓度时,ＴＰ４０作用于培养肝癌细胞２０小时后,肿瘤细胞的凋亡率为５．６０％;０．０５ｎｇ／ｍｌ时,凋亡率为１７．２２％;０．１ｎｇ／ｍｌ时,凋亡率为 ３７．０４％。电镜显示出典型的细胞核固缩、碎裂征象,琼脂糖电泳呈特征性的“梯状”带。结论　低浓度ＴＰ４０可作为细胞凋亡诱导剂用于肝癌治疗。     

人基因重组IFN-γ对滑膜细胞分泌TNF-α作用机制的研究

目的：研究ＩＦＮ－γ对滑膜细胞分泌ＴＮＦ－α的影响。方法：滑膜用胶原酶消化分离后获得的原代单个滑膜细胞（ＤＳＳＣ），加入不同剂量的ＩＦＮ－γ观察脂多糖（ＬＰＳ）存在或不存在下，不同时间（２４小时，４８小时，７２小时）滑膜细胞分泌ＴＮＦ－α的情况，并观察了ＩＦＮ－γ对培养的滑膜纤维母细胞样细胞（ＳＦＣ）在４８小时中分泌ＴＮＦ－α的影响，用ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法来检测培养细胞上清液中ＴＮＦ－α的含量，     

青蒿琥酯对日本血吸虫生殖作用的影响

目的观察青蒿琥酯对日本血吸虫成虫生殖的影响。方法小鼠感染日本血吸虫尾蚴后第20d灌服青蒿琥酯300mg/kg,给药后3周解剖小鼠,用灌注法收集成虫,计算减虫率;取肝右叶做石蜡切片,观察虫卵肉芽肿;剩余肝脏溶解后计数虫卵;收集无损虫体进行体外培养,观察虫卵形态,并计数产卵量;取完好的虫体做石蜡切片,HE染色后镜下观察生殖器官的发育。结果给药组小鼠体内雌虫产卵量与对照组存在显著的差异,体外培养结果与体内产卵结果相一致。给药组小鼠体内的雌虫的卵巢发育缓慢,比对照组的小,且卵巢内多为未成熟的卵细胞。结论青蒿琥酯能抑制雌虫卵巢的发育,降低或抑制雌虫的产卵量,具有抗日本血吸虫雌虫生殖的作用,能有效的减轻血吸虫病的病情和控制传播。     

哮喘患者外周血肿瘤坏死因子—α水平及影响因素

测定了２０例哮喘患者及１５例正常人的外周血肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）水平，并分离哮喘患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＮＣ）于体外加药培养，结果显示，哮喘患者外周血ＴＮＦ－α水平明显高于正常人，其在哮喘发病中具有重要意义，植物血凝素（ＰＨＡ），抗原可激发ＰＢＭＮＣ产生ＴＮＦ－α，治疗浓度氨茶碱可抑制ＰＢＭＮＣ分泌ＴＮＦ－α。     

TNF-α对IFN-γ抗弓形虫效应中的作用的影响

应用３Ｈ－尿嘧啶（３Ｈ－Ｕ）特异性标记弓形虫在小鼠腹腔巨噬细胞（ＭｏｕｓｅＰｅｒｉｔｏｎｅａｌＭａｃｒｏｐｈａｇｅ，ＭＰＭ）内的增殖实验，观察了ＴＮＦ－α及ＴＮＦ－α在ＩＦＮ－γ诱导的ＭＰＭ抗弓形虫效应中的作用。结果表明：单独用高浓度ＴＮＦ－α只能诱导ＭＰＭ轻微的抗弓形虫效应（１９％左右），而与亚刺激量的ＩＦＮ－γ相结合几乎可以完全抑制弓形虫的增殖；抗ＴＮＦ－α可消除ＩＦＮ－γ诱导的ＭＰＭ的抗弓形虫的效应，其作用只发生在ＩＦＮ－γ诱导ＭＰＭ的最初阶段     

重组质粒pGEX—6P—1／Sj—FABPc的构建及在大肠杆菌中的表达

目的 构建基因工程菌株、获得重组蛋白Ｓｊ－ＦＡＢＰｃ（日本血吸虫脂肪酸结合蛋白）。方法 用ＰＣＲ法从日本血吸虫ｃＤＮＡ文库中扩增Ｓｊ－ＦＡＢＰｃ基因片段，再将该片段重组于ｐＧＥＭ－Ｔ中并进行ＤＮＡ测序鉴定，经酶切后将目的片段构建成重组质粒ｐＧＥＸ－６Ｐ－１／Ｓｊ－ＦＡＢＰｃ，转化于大肠杆菌ＢＬ２１，ＩＰＴＧ诱导表达。用Ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ＾ＴＭ ４Ｂ亲和层析柱对表达产物进行纯     

脂多糖致肺血管内巨噬细胞形态和功能的改变

目的探讨肺血管内巨噬细胞（ＰＩＭ）在感染性急性肺损伤（ＡＬＩ）发病中的作用。方法仿Ｍｏｒｔｏｎ法灌洗肺血管床，贴壁法分离猪ＰＩＭ，并用光镜、电镜观察鉴定；胸腺细胞增殖法测脂多糖（ＬＰＳ）刺激前后ＰＩＭ培养上清白细胞介素１β（ＩＬ－１β）活性，酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）法测肿瘤坏死因子α（ＴＮＦ－α）、白细胞介素６（ＩＬ－６）、白细胞介素８（ＩＬ－８）含量。结果刺激后的ＰＩＭ伪足增长、增多，溶酶体和吞噬体亦增多；释放ＴＮＦα、ＩＬ－１β、ＩＬ－６、ＩＬ－８增多，峰值分别出现在刺激后的１ｈ、２ｈ、４ｈ和６ｈ。与刺激前相比，Ｐ＜０．０１。结论改良的Ｍｏｒｔｏｎ法能成功分离猪ＰＩＭ；ＬＰＳ刺激后的ＰＩＭ吞噬分泌功能活跃，其中ＴＮＦα、ＩＬ－１β升高最早，提示其在ＡＬＩ发病早期起重要作用；而ＩＬ－６、ＩＬ－８升高较晚，可能在ＡＬＩ发病后期起重要作用     

低分子肝素对aFGF促平滑肌细胞增殖作用的双相调节

探讨酸性成纤维细胞生长因子（ａＦＧＦ）与低分子肝素（ＬＭＷＨ）合用对主动脉平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）增殖的影响。方法：在培养的兔ＡＳＭＣ中加入ａＦＧＦ及ＬＭＷＨ后，观察其对ＡＳＭＣ＾３Ｈ－Ｔ胸腺嘧啶脱氧核苷）掺入率的影响。结果：在培养的兔ＡＳＭＣ中加入ａＦＧＦ（１０ｎｇ／ｍｌ）后，ＡＳＭＣ的ＣＰＭ值明显增大，表明ａＦＧＦ具有促进ＡＳＭＣ增殖的作用。当在ａＦＧＦ为１０ｎｇ／ｍｌ的培养液中，加入ＬＭＷＨ后     

肺纤维化大鼠肺泡巨噬细胞释放肿瘤坏死因子—α和血小板…

目的 动态观察博莱霉素（ＢＬＭ）致大鼠肺纤维化过程中肺泡巨噬细胞（ＡＭ）释放肿瘤坏死因子－α－（ＴＮＦ－α）和血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）的变化。方法 采用ＥＬＩＳＡ法测定ＴＮＦ－α；采用生物性法测定ＰＤＧＦ。结果 （１）ＡＭ释放ＴＮＦ－α于灌注ＢＬＭ后第３天开始升高，第７天达高峰，１４天后虽有下降，但仍显著高于对照组；（２）ＡＭ释放的ＰＤＧＦ于灌注ＢＬＭ后第３天升高，第７天达高峰，第１４天后下降