3种旋毛虫成虫永久标本染色方法的比较

目的探讨制作旋毛虫成虫染色标本的最佳方法。方法分别使用乙醇硼砂卡红、醋酸卡红、固绿3种染色法制作旋毛虫成虫标本。结果乙醇硼砂卡红染色的标本,颜色鲜艳,结构清晰,另外两种染液染色效果不佳。结论乙醇硼砂卡红染色可用于旋毛虫成虫永久标本的制作。     

旋毛虫肌幼虫囊包不染色标本的制作

在医学寄生虫学实验教学中,制作旋毛虫肌幼虫囊包标本通常采用染色封制法,梭形囊包明显,但如果分色过程掌握不好,虫体轮廓不清。作者尝试制作旋毛虫肌幼虫囊包不染色封制标本,用于教学实践取得良好效果。介绍如下。 旋毛虫肌幼虫囊包取自感染旋毛虫幼虫的猪横纹肌。操作工具:眼科剪,眼科镊,载玻片,大瓶皿,显微镜,吸管,玻片标本盘等。试剂:甲醛,蒸馏水,乙醇,水杨酸甲酯,中性树胶。 将感染旋毛虫幼虫的肌肉剪成碎块,夹在两张载玻片之间,轻轻加压、捆扎,置于10％甲醛固定12～24 h。解开载玻片后再浸泡1～2h,充分固定。倾去甲醛,用蒸馏水洗3次,每     

旋毛虫孔雀绿染色标本制作

孔雀绿是一种弱碱性胞核染料 ,也是一种很好的指示剂。纪伟华等[1] 用孔雀绿染色法制作的带绦虫妊娠节片标本 ,子宫与周围组织清楚。旋毛虫标本常通过卡红或苏木精染色制作永久标本[2 ] ,作者首次用孔雀绿染色法制作旋毛虫标本。1　材料和方法1.1　材料1.1.1　成虫　每只小鼠感染 5 0 0条肌幼虫 ,第 6d禁食 1d ,于第 7d处死 ,取出小肠并纵行剪开 ,无菌生理盐水洗去肠内容物 ,将小肠剪成 2～ 3cm长的小段 ,放入盛有 3 7℃预温的无菌生理盐水的大平皿内 ,置 3 7℃恒温培养箱中孵育 2h～ 3h ,成虫从肠壁钻出 ,反复用无菌生理盐水漂洗、沉淀收集…     

旋毛虫孔雀绿染色标本制作

孔雀绿是一种弱碱性胞核染料，也是一种很好的指示剂。纪伟华等用孔雀绿染色法制作的带绦虫妊娠节片标本，子宫与周围组织清楚。旋毛虫标本常通过卡红或苏木精染色制作永久标本，作者首次用孔雀绿染色法制作旋毛虫标本。     

丝虫病血液检查的新方法

用潘氏毛细管从手指取血0.1毫升,在离心管中与3%的醋酸液2毫升混合,静置2～3小时,或者以3,000转/分的速度离心3分钟,用巴氏管吸取沉渣,在1～2张脱脂载玻片上均匀地摊成4.5×2.5毫米大小的薄层。待标本干燥后(最好放置到次日),用甲醇固定2～3分钟,用天青-曙红(吉氏液)染色10～20分钟,在低倍镜下检查,用油镜鉴别微丝蚴的种类。作者用此法检查582人,发现12人有班氏丝虫、常现盖头丝虫、马来丝虫的微丝蚴。对此12人同时用厚血滴染色法检查,只发现     

酒精对旋毛虫感染性幼虫杀伤作用的实验研究

目的研究酒精对旋毛虫感染性幼虫的杀伤作用。方法在体外模拟胃内环境条件下,旋毛虫肌幼虫用不同浓度酒精处理不同时间后用美蓝-伊红-硼砂(M.E.B.)染液鉴定肌幼虫的死活;将酒精处理后的肌幼虫经口接种小鼠,观察幼虫在小肠中发育为成虫的数量及生殖力。结果肌幼虫在酒精中的存活时间随酒精浓度的升高而缩短,肌幼虫在45°酒精中30min的死亡率为100%(96/96),而肌幼虫在65°酒精中10min的死亡率为100%(90/90)。肌幼虫用30°、25°、20°酒精分别处理2h、4h、4h时,染色法表明幼虫的存活率分别为57.6%(76/132)、98.6%(70/71)及100%(136/136),但接种小鼠后未在小肠和肌肉中发现成虫和幼虫;含幼虫的小鼠肌肉经35°、30°、25°酒精处理0.5h、2h、4h后接种小鼠,从小肠和肌肉中亦未回收到虫体。结论20°以上酒精对旋毛虫肌幼虫有较强的杀伤作用,虽然酒精处理后的肌幼虫仍是活的,但已丧失了感染性。结果提示,生食或半生食肉类及肉制品时适量饮用白酒对预防旋毛虫感染有一定作用。     

应用脑脊液细胞沉淀技术提高抗酸菌检出率的研究

目的 评价应用脑脊液（CSF）细胞离心沉淀方法在检测CSF标本抗酸杆菌（AFB）诊断结核性脑膜炎（结脑）中的应用价值。方法 应用CSF细胞离心沉淀器，将CSF中的有形成分直接离心涂布于载玻片上，进行抗酸染色，在显微镜下检测AFB。结果 应用此方法检测112份结脑病人CSF标本，AFB的检出率为67．8％（76/112），显著高于常规方法AFB检出率（P〈0．001）。对照组的32例CSF标本均未检查出AFB。结论 CSF细胞离心沉淀技术检测CSF标本AFB的敏感性远高于常规方法，有较高的临床应用价值。     

旋毛虫肌幼虫囊包染色标本制作方法的改进

目的探讨旋毛虫肌幼虫囊包染色标本的制作方法。方法采用醋酸卡红染色法制作旋毛虫肌幼虫囊包标本。结果醋酸卡红染色的标本,囊包轮廓清晰,囊内幼虫透明度及清晰度高,体态自然,立体感较强。结论醋酸卡红染色可用于旋毛虫肌幼虫囊包永久标本的制作。     

用硝酸银染色对大平并殖吸虫精子形态的观察

以日本淡水蟹(Geothelphusa dehaani)体内的大平并殖吸虫囊蚴20个感染大鼠,40～50d后收集肺中的成虫。对成虫睾丸用空气干燥法制备染色体的同时,亦采用涂片法。涂片用醋酸酒精固定。部分固定的睾丸亦用空气干燥法铺开,以改良的硝酸银染色法染色。为了检测精子的核,滴加propidiumiodide于有盖片的玻片标本上,用荧光显微镜检查阳性部位,照像后用曲线仪测量照片上精子的长度。结果发现,硝酸银染色后精子的长度为273.4±22.7μm,整个精子粗略分为头和尾,     

组织切片间接免疫酶染色法诊断旋毛虫病的初步研究

国内应用组织切片间接免疫酶染色法诊断旋毛虫病尚未见报告,本研究用经福尔马林固定、石蜡包埋的人工感染旋毛虫的大鼠膈肌进行间接免疫酶染色法诊断旋毛虫病。 材料和方法 1 抗原片的制备 取人工感染旋毛虫10个月的大鼠横膈肌肉,剪成小块,以10％中性福尔马林固定,以后经水冲洗、逐级酒精脱水、二甲苯透明,再     

应用单克隆抗体胶乳结合物凝集试验快速检查猪肉旋毛虫幼虫

检查猪肉旋毛虫幼虫,以膈肌小样本(<1g)直接镜检,虽然简单有效,但不能检出每克组织少于3条幼虫的样本。每人每天至多只能查60头猪。而传统消化法需时17h,其后仍需仔细作镜检。本文作者用消化一胶乳凝集法取代旋毛虫镜检法,并比较了两法检测102份猪肉标本的效果。每份猪膈肌标本制成0.05g的样本5份,在玻片上加压后用解剖显微镜检查旋毛虫幼虫。另取样本2g,用胃蛋白酶消化2h,释出幼虫,然后镜检旋毛虫幼虫。不论结果如何,均将全部沉淀物移入微量离心管,离心沉淀物经超声粉碎,其上清液用于胶乳凝集试验。     

结膜吸吮线虫显微结构描述与子宫蒂功能分析

目的通过光学显微镜观察结膜吸吮线虫(Thelazia callipaeda,T. cp)雌雄成虫标本,分析雌虫"子宫蒂"特殊结构与功能的关系,为寄生虫形态学研究和虫种鉴定积累资料。方法翻开结膜吸吮线虫患者眼睑,用棉签粘取活动虫体,置生理盐水载玻片上,光学显微镜下观察虫体形态。然后用酒精固定虫体,分段定位拍照,采用Adobe Photoshop软件拼接处理,得到完整虫体照片,描述其显微结构,并对子宫蒂功能进行了分析。结果通过显微摄影获得清晰的T. cp雌雄成虫完整结构照片,清楚地显示虫体形态及各内部器官之间的比邻关系。雄虫中段可见条索状密集排列的精原细胞,其末端可见呈半透明状的交合刺。在雌虫中段子宫内,可见大量相互缠绕在一起的幼虫;虫体后段的输卵管内可见不同发育期虫卵,其中多数为卵细胞,部分已发育成含蚴卵或幼虫;卵巢呈条索状,位于虫体末端,内含大量卵原细胞;在虫体前段的生殖道内,规律地排列着数十条呈螺旋状盘曲的幼虫。结论本研究详细观察描述了T.cp雌雄成虫显微结构,包括从卵原细胞发育成卵细胞、含蚴卵以及幼虫的形态特点,认为T.cp雌成虫"子宫蒂"的特殊结构,与其幼虫在产道内规律排列的机制密切相关。     

结膜吸吮线虫显微结构描述与子宫蒂功能分析北大核心CSCD

目的通过光学显微镜观察结膜吸吮线虫(Thelazia callipaeda,T. cp)雌雄成虫标本,分析雌虫"子宫蒂"特殊结构与功能的关系,为寄生虫形态学研究和虫种鉴定积累资料。方法翻开结膜吸吮线虫患者眼睑,用棉签粘取活动虫体,置生理盐水载玻片上,光学显微镜下观察虫体形态。然后用酒精固定虫体,分段定位拍照,采用Adobe Photoshop软件拼接处理,得到完整虫体照片,描述其显微结构,并对子宫蒂功能进行了分析。结果通过显微摄影获得清晰的T. cp雌雄成虫完整结构照片,清楚地显示虫体形态及各内部器官之间的比邻关系。雄虫中段可见条索状密集排列的精原细胞,其末端可见呈半透明状的交合刺。在雌虫中段子宫内,可见大量相互缠绕在一起的幼虫;虫体后段的输卵管内可见不同发育期虫卵,其中多数为卵细胞,部分已发育成含蚴卵或幼虫;卵巢呈条索状,位于虫体末端,内含大量卵原细胞;在虫体前段的生殖道内,规律地排列着数十条呈螺旋状盘曲的幼虫。结论本研究详细观察描述了T.cp雌雄成虫显微结构,包括从卵原细胞发育成卵细胞、含蚴卵以及幼虫的形态特点,认为T.cp雌成虫"子宫蒂"的特殊结构,与其幼虫在产道内规律排列的机制密切相关。     

一种快速、简便制作旋毛虫幼虫永久标本的方法

经甲醛、乙醇、冰醋酸溶液固定,固绿染色液染色制作旋毛虫肌幼虫标本,方法简单,制作快速,幼虫虫体清晰可见,整体色调柔和,易于观察,可长期保存。     

蠕形螨标本制作方法探讨

本文用分离皮脂中的蠕形螨制作长久性保存标本和染色标本 ,效果较好 ,报告如下。方法溶脂剂 +戊二醛 :取含有蠕形螨的皮脂放入含 10 %洗洁精 (市售上海白猫牌 )和 5 %戊二醛的试管中 ,搅匀后静置 5min,15 0 g离心后弃上清 ,重复 3次 ,沉淀物中收集各期虫体 ,用戊二醛固定 ,备用。二甲苯 +缓冲液 :取含有蠕形螨的皮脂 ,置含有二甲苯和磷酸缓冲液 (PBS,p H7.4 )分离液相的试管中 ,搅匀后静置 5min,离心 (同上 )去上清 ,沉淀物移入 3%～ 5 %戊二醛液固定 10～ 15 min,用 PBS洗涤、离心 ,沉淀物备用。制片与染色 :上述洗脱分离的沉淀物用甘油…     

阴道毛滴虫标本制作的改良方法

按常规染色方法制作阴道毛滴虫染色玻片标本效果尚不理想。王文兰 (王文兰 .阴道毛滴虫姬氏染色法的改进 .寄生虫学与寄生虫病杂志 ,1985 ,3:3.)对阴道毛滴虫姬姆萨液染色法进行改进。多年来 ,我们对阴道毛滴虫姬姆萨液染色玻片标本制作方法进行了摸索 ,采取涂薄片后用低热度电吹风快速干燥 ,制作的标本结构清晰 ,效果稳定。　　按陈佩惠 (陈佩惠主编 :人体寄生虫学 ,第 4版 .北京 :人民卫生出版社 ,1995 :2 86～ 2 87.)的方法制作肝 胨 糖培养基 ,从医院门诊取回标本接种 ,36ｈ后虫体分裂旺盛时涂片制作标本效果最佳。留少许上清液和沉淀…     

一种免疫显性的53kDa旋毛虫肌肉幼虫排泄-分泌抗原的分子克隆和表达

应用基因工程技术对旋毛虫排泄-分泌(ES)抗原进行分子克隆,并对表达蛋白的性质和相应基因进行了分析。人工感染小鼠获得旋毛虫成虫和肌肉内幼虫,新生幼虫由体外培养成虫中收集。用异硫氰酸胍分离虫体DNA和总RNA,Poly(A)mRNA经Oligo-dT层析纯化。用Poly(A)mRNA合成双链cDNA,插入λgtll噬菌体,体外包装     

简易痰标本处理和DNA提取的聚合酶链反应检测

采用简易痰标本处理,将痰液加4倍体积4％NaOH液,室温液化5分钟,取1ml 15000r/min离心25分钟,沉淀加双蒸水打匀,15000r/min离心10～15分钟,重复洗一次;简易DNA提取(上述沉淀加DNA提取液50μl打匀,沸水浴10分钟,取上清液5μl)、二温循环PCR扩增123bp检查痰标本中结核菌。对同份痰标本同时进行涂片抗酸染色及培养。     

介绍一种无菌分离和体外培养旋毛虫成虫的简便方法

现有研究表明，旋毛虫成虫、新生蚴和肌肉幼虫，在形态和免疫反应等方面既有共同性，又有很大的不同。分别研究它们的抗原成份，进而分离、纯化具有保护作用的抗原组份，在旋毛虫免疫研究中具有重要意义。若要进行这方面的研究，首先就要有无菌分离和培养虫体的好方法。鉴...     

斑点ELISA法诊断旋毛虫病

近年来斑点 ELISA 已用于疟疾、包虫病、囊虫病,血吸虫病的诊断,并用于检测并殖吸虫病循环抗原,均取得较好的效果。本文报道用此法作旋毛虫病的免疫诊断。一、材料和方法(一)抗原 1％旋毛虫幼虫可溶性抗原的制备按曾宪荣法。解剖感染旋毛虫2月以上的大鼠,将肌肉绞碎,人工消化收集反复冲洗纯净的浓集幼虫,经研磨至显微镜下观察不到虫体碎片,反复冷浸,离心沉淀,弃去