生殖系多种病原体感染与男性不育的关系

目的 探讨男性不育患者弓形体，解脲支原体，沙眼衣原体感染情况和抗精子抗体感染情况和抗精子抗体在男性不育中的作用。方法 应用多聚酶链反应（PCR）技术分别对112例男性不育病人和62例正常生育者的精液进行精浆弓形体DNWA，解脲支原体和沙眼衣原体DNA的检测，用金标免疫斑点试验检测精浆抗精子抗体（AsAb)。结果 男性不育组弓形体阳性20例（17．86％），解脲支原体阳性35例（31．25％），沙眼衣原体阳性18例（16．07％），抗精子抗体阳性33例（29．46％）。3种病原体感染率与抗精子抗体的阳性率均明显高于正常对照组（P＜0．01，且多种病原体感染患者抗精子抗体的阳性率明显高于单项感染者。结论 男性不育患者多种病原体感染后，导致抗精子抗体拉生是男性不育的重要免疫因素。     

间接免疫荧光法检测沙眼衣原体包涵体抗原的研究

目的探讨基于沙眼衣原体全菌体兔血清抗体的间接免疫荧光法检测沙眼衣原体包涵体抗原的研究。方法将6×103IFU沙眼衣原体接种于Hep-2细胞,培养72 h,PCR检测验证;以兔抗沙眼衣原体全菌体血清抗体为一抗,用免疫荧光法检测沙眼衣原体包涵体抗原,同时采用传统的Giemsa染色、Lugol′s碘染对沙眼衣原体包涵体进行鉴定,并统计和比较其包涵体的检出率。结果经PCR鉴定为阳性的沙眼衣原体感染的Hep-2细胞,间接免疫荧光检测在细胞浆中出现绿色荧光,检出率为28.84%;经Giemsa染色和Lugol′s碘染验证胞浆中存在典型的包涵体结构,检出率分别为15.19%和17.36%,与免疫荧光法比较差异有统计学意义(P0.01)。结论基于兔抗沙眼衣原体全菌体血清的间接免疫荧光法可显著提高沙眼衣原体包涵体的检出率。     

沙眼衣原体MOMP基因真核表达载体免疫小鼠的研究

目的：用pcDNA3-MOMP真核表达质粒直接免疫小鼠，观察小鼠对沙眼衣原体MOMP基因疫苗的免疫应答。方法：大量制备重组质粒pcDNA3-MOMP,给小鼠肌肉注射，每3周免疫1次，共免疫3次。用微量免疫荧光及MTT法检测小鼠血清抗体及脾细胞对沙眼衣原体的特异性增殖反应。结果：初次免疫接种后小鼠血清中检测出特异性抗体，加强免疫后抗体水平明显上升，免疫荧光滴度最高达1：256。脾细胞对沙眼衣原体的刺激指数明显高于对照组（P＜0．01）。结论：pcDNA3-MOMP在小鼠体内既可诱导体液免疫应答，又可诱导特异性细胞免疫应答。     

沙眼衣原体L2型MOMP基因真核表达载体的构建及序列分析

目的 构建携带沙眼衣原体L2型主要外膜蛋白（MOMP）基因的真核表达载体,为沙眼衣原体的DNA疫苗的研究提供材料。方法 用PCR技术扩增L2型沙眼衣原体MOMP基因片段,再将其定向插入到真核表达载体pcDNA3多克隆位点中,构建成重组表达质粒。并用酶切分析、PCR扩增及部分序列测定等方面对重组质粒进行了鉴定。结果 MOMP基因被正确地克隆到直核表达载体pcDNA3中。测序结果同文献报道的序列一致。结论 真核细胞表达载体pcDNA3－MOMP的成功构建,为进一步开展沙眼衣原体的DNA疫苗的研究奠定了基础。     

衣原体感染

应用超高倍多媒体显微仪检测泌尿生殖道沙眼衣原体——倪少娟等（广西南宁广西壮族自治区妇幼保健院检验科530003）；《中国医疗器械杂志》，2005，29（4）：308．309[应用超高倍多媒体显微仪直接镜检并动态观察衣原体，阳性标本及随机抽取的20例阴性标本与VIDAS CHL法进行比较。镜检法在365例泌尿生殖道标本中检出沙眼衣原体32例；52例标本（镜检法阳性32例，阴性20例）两种检测方法结果差异无统计学意义，P〉0．05。超高倍多媒体显微仪直接镜检法可用于泌尿生殖道沙眼衣原体感染的诊断。]     

用酶联免疫吸附试验双抗体夹心法检测阴道毛滴虫可溶性抗原的研究

用抗阴道毛滴虫的单克隆抗体ＩｇＧ（鼠）和兔抗阴道毛滴虫多克隆抗体进行ＥＬＩＳＡ试验（双抗体夹心法），检测阴道毛滴虫可溶性抗原。分别观察了单克隆和多克隆抗体的不同浓度、不同的封闭剂型、封闭时间及孵育时间等条件对本试验效果的影响。结果以单克隆抗体ＩｇＧ（鼠）２５μｇ／ｍｌ包被，用０．２５％脱脂奶粉１次性封闭０．５ｈ（３７℃），兔抗阴道毛滴虫多克隆抗体滴度１∶２００，孵育０．５ｈ为最佳条件。阴道毛滴虫可溶性抗原检出最低量为０．３μｇ。本试验与多种寄生虫的多克隆抗体均无交叉反应     

聚合酶链反应检测淋病患者生殖道合并感染沙眼衣原体

淋病是我国目前常见的性传播疾病，淋病患者合并沙眼衣原体泌尿生殖道感染在临床上也很普遍。据国外有关文献报道，美国淋病患者合并沙眼衣原体泌尿生殖道感染的发病率为12％～15％'[1]。国内在这方面的流行病学资料甚少，其主要原因是缺乏简便、可靠的衣原体实验室检测方法以及单纯从临床症状和体征上对淋病和衣原体感染进行区别具有一定的困难。近几年发展起来的聚合酶链反应（PCR）具有特异性强、敏感性高的优点，国外已相继建立了诊断沙眼衣原体的各种方法。我们用自己设计的引物建立的PCR方法对我院门诊确诊为淋病（细菌培养法）的…     

用酶联免疫吸附试验双抗体夹心法检测阴道毛滴虫可溶性 …

用抗阴道毛滴虫的单克隆抗体ＩｇＧ（鼠）和兔抗卫道毛滴虫多克隆抗体进行ＥＬＩＳＡ试验（双抗体夹心法），检测阴道毛滴虫可溶性抗原。分别观察了单克隆和多克隆抗体的不同浓度、不同的封闭剂型、封闭时间及孵育时间等条件对本试验效果的影响。结果以单克隆抗体ＩｇＧ（鼠）２５μｇ／ｍｌ包被，用０．２５％脱脂奶粉１次性封闭０．５ｈ（３７℃），兔抗阴道毛滴虫多克隆抗体滴度１：２００，孵育０．５ｈ为最佳条件。阴道毛滴虫可     

生殖系多种病原体感染与男性不育的关系

目的　探讨男性不育患者弓形体、解脲支原体、沙眼衣原体感染情况和抗精子抗体在男性不育中的作用。　方法　应用多聚酶链反应 (PCR)技术分别对 112例男性不育病人和 6 2例正常生育者的精液进行精浆弓形体 DNA、解脲支原体和沙眼衣原体 DNA的检测 ,用金标免疫斑点试验检测精浆抗精子抗体 (As Ab)。　结果　男性不育组弓形体阳性 2 0例 (17.86 % ) ,解脲支原体阳性 35例 (31.2 5 % ) ,沙眼衣原体阳性 18例 (16 .0 7% ) ,抗精子抗体阳性 33例 (2 9.4 6 % )。3种病原体感染率与抗精子抗体的阳性率均明显高于正常对照组 (P<0 .0 1) ,且多种病原体感染患者抗精子抗体的阳性率明显高于单项感染者。　结论　男性不育患者多种病原体感染后 ,导致抗精子抗体的产生是男性不育的重要免疫因素。     

间接血凝法检测孕妇血清、阴道分泌物沙眼衣原体抗体

沙眼衣原体可以引起多个部位的感染，泌尿生殖道感染是一种常见的性传播疾病，间接血凝法检测孕妇血清中的沙眼衣原体抗体能否反应孕妇泌尿生殖道的感染情况，是一个有待于解决的问题。孕妇沙眼衣原体感染对孕妇和新生儿健康的危害都比较严重，了解孕妇沙眼衣原体的感染情况可为制订预防措施提供理论依据。１　材料和方法１１　研究对象和标本采集　对４０２例于１９９５年３～１２月间每周２在山东医科大学附属医院妇产科进行产前检查的孕妇采上臂静脉血３ｍｌ，分离血清。１１４例于１９９５年４～６月间每周２就诊的孕妇采集阴道分泌物…     

毛细管聚合酶链反应快速诊断孕妇沙眼衣原体感染

毛细管聚合酶链反应快速诊断孕妇沙眼衣原体感染裘国强，杨懿霞，酆豫增沙眼衣原体（ＣＴ）感染的实验室诊断以往采用宫颈棉试子取材涂片，经姬姆萨染色查包涵体等方法，因敏感性差，已较少采用。近年来，国内外学者报道，采用直接荧光抗体法（ＤＦＡ）检测，酶免疫反应，...     

沙眼衣原体T3SS效应蛋白CT622的表达与多克隆抗体制备以及对HeLa细胞增殖的影响北大核心CSCD

目的原核表达沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)CT622蛋白,制备CT622多克隆抗体,初步探讨CT622蛋白对HeLa细胞增殖的影响,为进一步阐明CT622蛋白在沙眼衣原体致病中的作用提供实验依据。方法以Ct D型基因组为模板构建原核表达重组载体pGEX-6p-1/CT622;重组载体经IPTG诱导表达,Glutathione Sepharose 4B beads纯化GST-CT622融合蛋白,PreScission Protease酶切除GST标签后获取纯化的CT622蛋白;将纯化的CT622蛋白去内毒素处理后,经皮下免疫新西兰兔获取抗CT622抗体,采用抗原亲和纯化层析柱进行抗体纯化,BCA测定抗体浓度,SDS-PAGE鉴定多克隆抗体纯度,ELISA检测抗体效价;用不同浓度的CT622蛋白处理HeLa细胞24 h,CCK-8细胞活性检测试剂盒检测细胞存活率(%)。结果成功表达并纯化了CT622蛋白,该蛋白最佳表达条件为IPTG终浓度0.8 mol/L,30℃、180 r/min条件下诱导4 h。制备兔源性抗CT622多克隆抗体,纯化后抗CT622抗体浓度为0.75 mg/ml,纯度>70%,ELISA检测免疫兔血清抗体效价为1∶512000左右;经1~15μg/ml浓度梯度的CT622蛋白处理HeLa细胞后,其细胞存活率高于对照组。结论成功表达、纯化了沙眼衣原体CT622蛋白,制备了高效价兔源性抗CT622抗体。在一定浓度范围内,CT622蛋白能促进HeLa细胞的增殖。     

SmD1抗体检测在系统性红斑狼疮诊断中的意义

目的 研究抗SmD1抗体及其他特异性抗体在系统性红斑狼疮（SLE）诊断中的意义。方法 测定了44例SLE及136例非SEE（包括干燥综合征、未分化结缔组织病、强直性脊柱炎、类风湿关节炎）患者血清中的自身抗体。利用免疫印迹法测定抗SmD1抗体、抗核小体抗体（ANuA）和抗SSA60000抗体，间接免疫荧光法测定抗核抗体（ANA）和抗双链DNA（dsDNA）抗体．免疫斑点法检测抗Sm抗体。结果 抗SmD1抗体在SLE患者中的阳性率为47.7％，高于抗Sm抗体阳性率18．2％，差异有统计学意义（P〈0．05），而且其抗SmD1抗体的特异性达97.1％。结论 抗SmD1抗体在狼疮的诊断中有很高的特异性，敏感性也高于抗Sm抗体。5种特异性抗体在SLE诊断中有明显的互补作用，联合检测可明显提高其对SLE诊断的敏感性。     

衣原体的肺部感染

一、概述衣原体（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ）家族仅有衣原体一个属（ｇｅｎｕｓ），包括４个衣原体种（ｓｐｅｃｉｅｓ），即沙眼衣原体（Ｃｈｌａｍｙｄｉａｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ），鹦鹉热衣原体（Ｃ．ｐｓｉｔａｃｉ），肺炎衣原体（Ｃ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）和牛衣原体...     

性病门诊非淋菌性尿道炎4种病原体检测分析

非淋菌性尿道炎（NGU）由沙眼衣原体（CT）、解腺支原体（UU）、人型支原体（MH）等病原弓I起，是目前西方国家最常见的性传播疾病（ST）。近年来，国内STDIc诊中NGU日趋增多，其多种病原体混合感染日益引起人们的关注l’，2］。为了了解抚州地区NGU病原感染情况，我们于1995年7月～1997年12月对460例门诊疑似NGU患者同时进行了CT免疫检测和UU、MH、淋球菌（NG）培养，结果报告如下。互资料和方法1．l资料460例患者均为我中心疑为非淋菌性尿道炎或淋菌性尿道（宫颈）炎经药物治疗后症状持续存在者，男322例，女138例，年龄9—…     

2008年广西南宁市部分男男性行为者健康体检情况分析

目的了解南宁市男男性行为者（MSM）的艾滋病性病感染情况,促进南宁市MSM人群艾滋病、性病防治工作。方法2008年4—6月,对南宁市452名MSM进行调查,采血检测乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）和抗体（抗一HBs）、丙型肝炎病毒抗体（抗-HCV）、艾滋病病毒抗体（抗-HIV）、梅毒抗体;采集口腔拭子做GON培养,尿道拭子做沙眼衣原体（CT）检测。结果抽血检查452人,HBsAg阳性率为14．60％,抗-HBs阳性率为0．66％,抗-HIV阳性率为1．99％,梅毒阳性率为8．85％;尿道CT检查110人,阳性率4．55％;口腔淋球菌检查144人,阳性率11．11％。结论男男性行为人群性传播疾病感染率较高,应继续加大力度开展健康促进活动。     

E型沙眼衣原体主要外膜蛋白多克隆抗体的制备、鉴定和初步应用

目的 表达E型沙眼衣原体主要外膜蛋白(MOMP)并制备其兔源多克隆抗体.方法 诱导表达实验室构建的MOMP/pGEX6p-1重组质粒,通过胶回收进行目的蛋白的纯化.MOMP免疫新西兰家兔制备多克隆抗体,ELISA法测定抗体效价,Western印迹、细胞免疫荧光方法鉴定抗体的特异性.结果 在大肠埃希菌中成功表达融合蛋白谷胱甘肽巯基转移酶(GST)-MOMP.ELISA法检测抗体的效价达到1∶12 800,Western印迹结果显示抗体可与原核表达的MOMP特异性结合,细胞免疫荧光检测结果显示抗体可与体外培养的沙眼衣原体特异性结合.结论 成功表达了E型沙眼衣原体的MOMP,并制备了高效价、高特异性的抗MOMP抗体,为沙眼衣原体的检测和临床研究提供依据.

Abstract：

Objective To express major outer membrane protein (MOMP) of Chlamydia trachomatis E and to prepare rabbit polyclonal antibody. Methods The recombinant plasmid MOMP/ pGEX6p-l prepared by our lab was introduced into E. coli. The protein was expressed and purified by gel recycling, then was injected into New Zealand rabbits to produce polyclonal antibodies. Enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) was used to detect the titer of antibody. The antibody specificity was identified by Western blot and immunofluorescence. Results The fusion recombinant protein glutathione S-transferase (GST)-MOMP was successfully expressed in E. coli. The titer of antibody recombinant protein detected by Western blot and to the endogenous MOMP of Chlamydia trachomatis in vitro detected by immunofluorescence. Conclusions The recombinant MOMP is successfully expressed and the MOMP antibody with high titer and high specificity is obtained. which will be helpful for Chlamydia trachomatis detection and related clinical research.     

沙眼衣原体细胞培养法在临床诊断中的应用

泌尿生殖道沙眼衣原体感染是近年来在我国发病率迅速上升的性传播疾病之一。它引起的疾病范围广泛，并能导致诸如盆腔炎及异位妊娠等严重并发症。因此，如何正确诊断该病就显得十分必要。实验室诊断方法能够发现有症状或无症状感染者的病原体，国内已开展的有聚合酶链反应（PCR）法、直接免疫荧光法（DFA）、酶免疫法（EIA）和细胞培养等。我们开展沙眼衣原体细胞培养已有十几年，[第一段]     

蛋白芯片技术对自身免疫性抗体的检测及评价

目的 探讨蛋白芯片技术检测自身抗体的临床价值。方法 用酶联免疫吸附试验（ELISA）、蛋白芯片法检测抗dsDNA、抗Ro-60／SSA、抗Ro-52／SSA、抗SSB、抗Jo-1、抗磷脂IgG抗体．用间接免疫荧光法（IIF）、蛋白芯片法检测抗核抗体（ANA），分别统计两种方法检测均阳性、均阴性和单阳性的标本数目．并进行评价。结果 芯片法检测ANA的灵敏度为89％、特异度为60％．芯片法对其他6种自身抗体检测的灵敏度为70．0%～87．5%、特异度为92．7％～98．9％。结论 蛋白芯片法检测自身抗体与常规方法比较，特异度较高，有待进一步改善技术提高其灵敏度。     

司巴沙星治疗男性非淋菌性尿道炎临床疗效观察

1997年10～12月，我们用司巴沙星治疗由沙眼衣原体和解肥支原体引起的男性非淋菌性尿道炎49例，并与美满霉素进行了疗效对比观察，现将结果报告如下。l资料与方法1．Ill＄床资料98例人选患者系从1997年10月～12月间，在我所性病门诊就诊的1087例患者中，根据典型临床表现和尿道分泌物沙眼衣原体、解服支原体培养确诊的男性非淋菌性尿道炎患者。合并有淋病及其它并发症者未列人本项观察。患者年龄20—47岁，平均29．7岁，病期2～对天，平均10．2天，均有非婚性交史。l周内曾用抗生素治疗者和女性患者未纳人本实验。1．2药物和方法司巴沙星（…