芪蓟肾康方对AngII 所致大鼠肾小球系膜细胞增殖变化中JNK-AP1 影响

目的：探讨芪蓟肾康方通过JNK 信号通路对大鼠肾小球系膜细胞的影响。方法：体外培养大鼠肾小球系膜细胞,用血管紧张素域刺激系膜细胞增生,给予芪蓟肾康方黄酮干预,用酶联免疫吸附（ELISA）法检测肾小球系膜细胞上清液c-Jun氨基末端激酶（JNK）、活化蛋白1（AP-1）、纤维粘连蛋白（FN）蛋白表达;实时定量PCR 法检测JNK、AP-1 mRNA的表达。结果：与正常组比较,模型组及治疗组大鼠肾小球系膜细胞中JNK、AP-1及FN蛋白表达明显升高（P＜0.05或P＜0.01）;与模型组比较,治疗组大鼠肾小球系膜细胞中JNK、AP-1及FN蛋白表达明显降低（P＜0.05或P＜0.01）。与正常组比较,模型组及治疗组大鼠肾小球系膜细胞中JNK、AP-1 及FN mRNA 表达明显升高（P＜0.05或P＜0.01）;与模型组比较,治疗组大鼠肾小球系膜细胞中JNK、AP-1及FN mRNA明显降低（P＜0.05）。结论：芪蓟肾康方可以通过下调肾小球系膜细胞JNK、AP-1 mRNA及蛋白的表达水平,抑制JNK信号转导,降低AP-1的活性,减少FN的增殖,从而减轻GMC增生,延缓肾小球的损伤,防止肾小球的硬化。     

芪蓟肾康颗粒总多糖对大鼠肾小球系膜细胞IL-6和MCP-1的影响

目的:观察芪蓟肾康颗粒总多糖提取物对大鼠肾小球系膜细胞白介素-6(IL-6)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达的影响.探讨芪蓟肾康颗粒总多糖提取物防治肾小球硬化的作用机制.方法:应用血清药理学方法,制取芪蓟肾康颗粒总多糖高、低剂量组(生药:30,15 g·kg-1)的含药血清;用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)作为刺激因子,培养大鼠肾小球系膜细胞,使其发生增殖;用免疫酶联吸附法(ELISA法)检测系膜细胞IL-6,MCP-1蛋白表达的情况.结果:芪蓟肾康颗粒总多糖对IL-6有显著抑制作用,与AngⅡ组比较,差异显著(P＜0.01);芪蓟肾康颗粒总多糖对MCP-1有显著抑制作用,与AngⅡ组比较,差异显著(P＜0.01).结论:芪蓟肾康颗粒总多糖可能通过抑制IL-6,MCP-1的蛋白表达,抑制炎症反应,从而防治肾小球硬化.     

六味地黄汤加减联合氯沙坦钾对糖尿病肾病大鼠ACE1/Ang Ⅱ/AT1R轴及肠道菌群的影响

目的：基于血管紧张素转换酶1(ACE1)/血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)/血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)轴,探讨六味地黄汤加减防治糖尿病肾病(DKD)肾脏损伤的可能作用机制。方法：随机将50只雄性SD大鼠分为正常组8只,造模组42只,造模组大鼠高糖高脂饲料喂养6周后,予一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)35 mg·kg^-1诱导建立DKD大鼠模型。造模成功后随机分为模型组、中药组(六味地黄汤加减颗粒剂21 g·kg^-1)、西药组(氯沙坦钾33 mg·kg^-1)、中西药组(氯沙坦钾33 mg·kg^-1联合六味地黄汤加减颗粒剂21 g·kg^-1),连续灌胃8周后检测各组大鼠空腹血糖(FBG)、尿蛋白(Up)、尿素氮(Bun)、血肌酐(SCr);酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清ACE1、Ang Ⅱ、AT1R水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠肾组织ACE1、Ang Ⅱ、AT1R蛋白表达水平;苏木素-伊红(HE)、马松(Masson)、过碘酸雪夫氏(PAS)...     

Ang-（1—7）对AngⅡ诱导THP-1巨噬细胞MMP-9表达的影响

目的探讨血管紧张素（1—7）[Ang-（1—7）]对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）人单核／巨噬细胞（THP-1）基质金属蛋白酶-9（MMP-9）表达的影响及其机制。方法佛波酯（PMA）诱导THP-1单核细胞分化为巨噬细胞后分为8组：对照组、Ang-（1—7）组、AngⅡ组、Ang-（1—7）＋AngⅡ组、A-799＋Ang-（1—7）＋AngⅡ组,其中Ang-（1—7）＋AngⅡ组根据Ang-（1—7）的浓度又分为10^-8mol／L Ang-（1—7）＋AngⅡ组、10^-7mol／L Ang-（1—7）＋AngⅡ组、10^-6mol／L Ang-（1—7）＋AngⅡ组、10^-5mol／L Ang-（1—7）＋AngⅡ组。用半定量RT—PCR检测细胞MMP-9 mRNA表达的情况。结果AngH干预后较对照组MMP-9 mRNA显著增加（P〈0．05）;而Ang-（1—7）呈浓度依赖性减弱AngⅡ诱导的MMP-9 mRNA表达（P〈0．05）;加入A-799后抑制作用明显减低（P〈0．05）。结论Ang-（1—7）浓度依赖性地抑制AngⅡ诱导THP—1巨噬细胞MMP-9 mRNA表达,可能通过其特异性受体MaS来发挥作用。     

芪明颗粒对糖尿病肾病大鼠肾组织WT1、AngⅡ、ET-1的影响

目的观察芪明颗粒对糖尿病肾病模型大鼠肾组织中WT1、AngⅡ、ET-1表达的影响,研究其对糖尿病肾病的作用机制。方法选用SPF级SD大鼠50只,除空白组外各组给予链脲佐菌素单次腹腔注射造模,随机分为空白组、模型组、低剂量组、高剂量组、缬沙坦组。8周后分别用Westernblot法、ELISA法检测肾组织中WT1、ET-1、AngⅡ的表达。结果模型组肾组织WT1、AngⅡ、ET-1明显高于空白对照组(P<0.05);与模型组相比,低剂量组、高剂量组、缬沙坦组肾脏组织WT1、AngⅡ、ET-1均显著降低(P<0.05);高剂量组、缬沙坦组肾组织WT1、AngⅡ、ET-1明显低于中药低剂量组(P<0.05),中药高剂量组、缬沙坦组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论芪明颗粒可以有效的降低糖尿病肾病大鼠肾组织WT1、AngⅡ、ET-1的表达,以起到保护肾脏的作用。高剂量芪明颗粒较低剂量对肾脏有更好的保护作用。早期采用芪明颗粒对糖尿病进行干预,可以延缓肾损害的进展。为临床广泛应用芪明颗粒提供实验基础和理论依据。     

人参皂甘Rg1对AngⅡ所致心肌细胞肥大的抑制作用

 目的 探讨人参皂苷Rg1 (ginsenoside Rg1, Rg1) 对血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ, AngⅡ)所致心肌细胞肥大的影响,并初探其分子机制。方法 在培养的新生大鼠心肌细胞中加入AngⅡ 0.1　μmol· L^-1,HE染色观测细胞形态学变化,并以心肌细胞直径﹑蛋白含量和心房利钠因子（atrial natriuretic factor,ANF） mRNA的表达为肥大指标。为分析药物的作用机制,用Fura-2/AM负载心肌细胞检测细胞内游离钙浓度[Ca²⁺]i;并检测钙调神经磷酸酶（calcineurin, CaN）mRNA的表达变化。ANF 和CaN mRNA的表达采用Real-time PCR测定。结果 AngⅡ 0.1 μmol·L^-1使心肌细胞直径明显增大,蛋白质含量明显增加,并使 ANF mRNA的表达显著升高。加入Rg1 15.6、31.2和62.4 μmol·L^-1使AngⅡ所增大的心肌细胞直径分别缩短13%、33%、43% (P<0.01);并使心肌细胞蛋白含量分别减少10%、14%和19%(P<0.01),Rg1 62.4 μmol·L^-1 还显著抑制AngⅡ所上调的ANF mRNA的表达。与此同时,上述浓度的Rg1还使AngⅡ所升高的 [Ca²⁺]i分别抑制了19.3%﹑28%和38.6%(P<0.01,n=6); Rg1 62.4 μmol·L^-1还使AngⅡ所升高 CaN mRNA的表达明显降低。结论 Rg1可抑制AngⅡ诱导的心肌细胞肥大,该作用可能与其降低由AngⅡ所升高的心肌细胞[Ca²⁺]i,并由此而抑制Ca²⁺-CaN信号通路有关。     

解毒通络方含药血清拮抗AngⅡ所致大鼠血管成纤维细胞增殖的研究

目的观察解毒通络方含药血清拮抗AngⅡ所致大鼠血管成纤维细胞增殖的研究。方法体外培养大鼠血管成纤维细胞,以血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)建立血管成纤维细胞增殖模型,以卡托普利和不同浓度的含药血清进行干预,通过噻唑兰(MTT)法观察各组成纤维细胞吸光度值。结果解毒通络方含药血清浓度高于10%以上时,比卡托普利组400μg/mL浓度的拮抗作用明显提高,并且与浓度呈正相关。结论解毒通络方含药血清能够拮抗AngⅡ诱导的大鼠血管成纤维细胞增殖。     

AngⅡ对THP-1源巨噬细胞高密度脂蛋白受体表达的影响

目的研究血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）对THP-1源巨噬细胞高密度脂蛋白受体（SR-B1）表达的影响。方法运用反转录-多聚酶反应（RT-PCR）和Western blotting分别检测不同浓度AngⅡ对SR-B1mRNA与SR-B1蛋白表达的影响。结果AngⅡ能引起THP-1源巨噬细胞SR-B1mRNA与蛋白质的表达下调（P〈0.05）,并呈浓度依赖性。结论AngⅡ能抑制THP-1巨噬细胞SR-B1的表达。     

苓桂术甘汤对心肌梗死后心室重构模型大鼠AngⅡ、Ald和AT1R的影响

目的:观察苓桂术甘汤对心室重构模型大鼠AngⅡ、Ald及AT1R的影响,探讨其干预心室重构的机制。方法:冠脉结扎法复制大鼠模型2周后,各组连续给药4周,采用ELISA法检测血清AngⅡ、Ald含量,采用Western blot法检测心肌组织AT1R表达。结果:模型组与假手术组比较AngⅡ、Ald含量显著升高,AT1R表达显著增加(P<0.01);苓桂术甘汤各剂量组与模型组比较AngⅡ、Ald含量显著降低,AT1R表达显著抑制(P<0.01)。结论:苓桂术甘汤干预心室重构的机制与调控RAAS相关因子有关。     

参芪养心汤对扩张型心肌病大鼠AngⅡ-ROS-HMGB1通路的影响

目的基于血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)-活性氧簇(ROS)-高迁移率族蛋白1(HMGB1)通路探讨参芪养心汤对扩张型心肌病(DCM)大鼠心功能的影响。方法选取40只SD大鼠腹腔注射阿霉素构建DCM模型,造模成功32只,随机分为模型组、培哚普利组、美托洛尔组、参芪养心汤组,每组8只,另选8只同龄正常SD大鼠作为正常组。各组相应给予培哚普利3 mg/(kg·d),美托洛尔50 mg/kg(2次/d),参芪养心汤1.87 g/(kg·d),模型组和正常组给予等量生理盐水,持续灌胃8周。各组小鼠行心脏超声检查左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室收缩末期内径(LVESD)、左心室射血分数(LVEF)、短轴缩短率(FS);计算心脏重量指数(HWI);测定血清脑钠肽(BNP)、TNF-α、IL-1、C反应蛋白(CRP)水平;观察左室心肌组织形态学变化;放射免疫法测定心肌组织AngⅡ水平;RT-PCR法测定心肌组织血管紧张素原(AGT)、AngⅡ1型受体(AT1)、蛋白激酶C(PKC)、HMGB1、核因子κB (NF-κB)mRNA表达水平;DCFH-DA荧光法测定心肌组织ROS水平。正常组、模型组、参芪养心汤组行~(18)F-FDG Micro-PET心肌代谢显像检查。结果与正常组比较,模型组大鼠LVEDD、LVESD、HWI升高,心肌组织AngⅡ、ROS、AGT、AT1、PKC、HMGB1、NF-κB mRNA表达水平升高,血清BNP、TNF-α、IL-1、CRP水平升高(均P0.05);LVEF、FS下降(均P0.05),部分心肌摄取~(18)F-FDG降低(P0.05)。与模型组比较,用药组大鼠LVEDD、LVESD、HWI下降,心肌组织AngⅡ、ROS以及AGT、AT1、HMGB1、NF-κB mRNA表达水平下降,血清BNP、TNF-α、IL-1、CRP水平下降(均P0.05),LVEF、FS升高(均P0.05),用药组间比较;差异无统计学意义(P0.05);培哚普利组、美托洛尔组心肌组织PKC mRNA表达水平下降(均P0.05);参芪养心汤组部分心肌摄取~(18)F-FDG升高(P0.05)。大鼠左心室心肌组织AngⅡ、ROS水平、HMGB1 mRNA之间呈正相关关系(P0.01)。结论参芪养心汤能缩小DCM大鼠左心室内径,提高LVEF,改善心功能,其作用机制可能与调节AngⅡ-ROS-HMGB1通路表达有关。     

芪蓟肾康汤对AngⅡ诱导的人肾小球系膜细胞增殖及ERK1/2、p-ERK1/2的影响

目的:观察芪蓟肾康汤含药血清对人肾小球系膜细胞的增殖及胞外信号调节激酶(ERK)通路的影响,探讨芪蓟肾康汤延缓肾小球硬化的作用机制。方法:采用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导人肾小球系膜细胞增殖,采用血清药理学方法制备芪蓟肾康汤和替米沙坦含药血清。将人肾小球系膜细胞分为正常组、模型组、西药组、中药低剂量组、中药中剂量组和中药高剂量组六组,培养24、48、72 h后用4-甲偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖;培养48、72 h后用ELISA法检测的ERK1/2、pERK1/2含量。结果:与正常组相比,AngⅡ组能显著促进系膜细胞增殖,替米沙坦组和各浓度中药含药血清组均可不同程度抑制AngⅡ引起的系膜细胞增殖。AngⅡ刺激后系膜细胞中ERK1/2蛋白表达明显降低,pERK1/2蛋白的表达明显增高,替米沙坦和不同浓度中药含药血清干预后,ERK1/2蛋白水平显著升高、pERK1/2蛋白水平显著下降,其中中药高剂量组最为显著。结论:芪蓟肾汤可能通过抑制人肾小球系膜细胞增殖和ERK通路的磷酸化,从而达到延缓肾小球硬化的目的。     

广枣总黄酮对血管紧张素Ⅱ所致大鼠心肌纤维化的影响

目的：探讨广枣总黄酮（total flavones of fructus chorspondiatisTFFC）对大鼠心肌纤维化的作用及其机制。方法：采用差速贴壁法培养新生大鼠CFs,在体外建立AngⅡ诱导CFs增殖模型成功后,将模型随机分为空白组（control）：未加药物;AngⅡ组：AngⅡ（100nmol／L）;TFFC＋AngⅡ组：加入AngⅡ（100nmol／L）和不同浓度（25、50、100mg／L）的TFFC）组。采用MTT实验方法检测心肌成纤维细胞增殖,羟脯氨酸试剂盒检测胶原合成。结果：100nmol／L的AngⅡ组明显促进CFs增殖（P〈0．05）,（50、100mg／L）的TFFC组明显抑制100nmol／LAngⅡ诱导的大鼠心肌成纤维细胞增殖（P〈0．05）与胶原合成（P〈0．05）。结论：广枣总黄酮抑制血管紧张素Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞增殖及胶原合成,并成浓度依赖性。     

钩藤碱对AngⅡ诱导大鼠血管平滑肌细胞增殖的抑制作用

 目的研究钩藤碱(rhynchophylline,Rhy)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖的抑制作用及机制。方法采用细胞计数法和MTT比色法检测Rhy对AngⅡ诱导大鼠VSMCs增殖的影响;测定Rhy对AngⅡ作用的VSMCs上清液一氧化氮(nitric oxide,NO)含量和一氧化氮合酶(constitutive nitric oxide synthase,cNOS)活性的影响;实时定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测VSMCs中c-myc、NOS和高血压相关基因-1(hypertension related gene-1,rHRG-1)mRNA的表达。结果Rhy(3×10^-6～3×10^-7mol·L^-1)呈浓度依赖性地抑制AngⅡ诱导大鼠VSMCs的增殖,升高细胞上清液中NO的含量和NOS活性,降低c-myc mRNA,升高rHRG-1和NOS mRNA的表达。结论Rhy明显抑制AngⅡ诱导大鼠VSMCs的增殖,机制可能与增加VSMCs中NOS活性并促进NO的合成和释放以及下调c-myc、上调NOS和rHRG-1 mRNA的表达有关。     

地龙耐热蛋白对自发性高血压大鼠心肌血管紧张素Ⅱ水平及血管紧张素Ⅱ-1型受体表达的影响

目的探讨地龙耐热蛋白对自发性高血压大鼠(SHR)心肌血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平及AngⅡ-1型(AT1)受体表达的影响。方法采用放射免疫法测定血浆和心肌AngⅡ水平。采用免疫荧光法测定心肌AT1受体表达水平。结果模型组血浆和心肌AngⅡ水平均显著高于对照组(P<0.01),地龙耐热蛋白高剂量组、低剂量组血浆和心肌AngⅡ水平均低于模型组(P<0.05)。对照组与模型组比较,心肌细胞膜和胞浆AT1受体表达减少;地龙耐热蛋白低剂量组和高剂量组与模型组比较,心肌细胞膜和胞浆AT1受体表达均显著减少。结论地龙耐热蛋白可降低血浆、心肌AngⅡ水平,下调心肌AT1受体的表达,且其下调机制可能与降低心肌AngⅡ水平有关。     

加减抵当汤对胰岛素抵抗大鼠血浆AngⅡ含量的影响

目的:探讨加减抵当汤对胰岛素抵抗(IR)大鼠血浆AngⅡ的影响;方法:造模大鼠随机分成正常组、模型组、加减抵当汤高、中、低剂量组、罗格列酮组,治疗12周后用放射免疫法检测血浆AngⅡ及FBS、FIns、ISI、WBV、PV含量。结果:与模型组对比,加减抵当汤高、中剂量组IR大鼠血浆AngⅡ含量显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:降低IR大鼠血浆AngⅡ含量可能是加减抵当汤改善IR的机制之一。     

玄参对心室重构大鼠血管紧张素Ⅱ及其1型受体基因表达的影响

目的 探讨玄参对心室重构大鼠血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及其1型受体基因表达(AT1AmRNA)的影响.方法 采用甲状腺素致大鼠心室重构及腹主动脉不完全结扎致大鼠心室重构两种动物模型,观察玄参对心脏指数(heart weight in-dex,HWI)、心肌血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)、醛固酮(aldosterone,ALD)及血管紧张素Ⅱ受体1型基因(AT1A mR-NA)表达水平的影响.结果 与模型组相比,玄参可显著降低动物HWI,降低心肌AngⅡ,ALD含量,降低AT1A>mRNA的过量表达.结论 玄参对心室重构具有明显的改善作用,其机制可能与抑制AngⅡ,ALD生成和AT1AmBNA表达有关.     

抗纤灵方对5/6肾切除大鼠肾纤维化及ACE-AngⅡ-AT1R轴的影响

目的:探讨抗纤灵方对SD大鼠肾纤维化及肾素血管紧张素转换酶-血管紧张素Ⅱ-血管紧张素Ⅱ1型受体(ACE-AngⅡ-AT1R)轴的影响。方法:将50只SD大鼠随机分成正常组(n=10),假手术组(n=10),5/6肾切除肾纤维化手术组(n=30)。术后2周,将手术组大鼠随机分成模型组、抗纤灵组、氯沙坦钾组,各组10只。抗纤灵组给予抗纤灵方(21 g·kg~(-1)),氯沙坦钾组给予氯沙坦钾(33. 3 g·kg~(-1)),其他组给予等体积的生理盐水,每天1次,持续16周。测定生化指标血肌酐、尿素氮及24 h尿蛋白;苏木素-伊红(HE)染色观察肾组织病理改变;马松(Masson)染色观察肾纤维化程度;免疫组化检测ACE1,AT1R表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)测定ACE1,AngⅡ,AT1R蛋白表达水平。结果:与正常组和假手术组比较,模型组的血肌酐、尿素氮及24 h尿蛋白均显著增加(P 0. 01);与模型组比较,抗纤灵组及氯沙坦钾组血肌酐、尿素氮及24 h尿蛋白水平均明显降低,差异具有统计学意义(P 0. 05,P 0. 01)。HE及Masson染色显示,与模型组相比较,抗纤灵组及氯沙坦钾组肾脏纤维化程度都减轻。Western blot显示抗纤灵组及氯沙坦钾组ACE1,AngⅡ,AT1R明显低于模型组,差异有统计学意义(P 0. 01);免疫组化结果显示,ACE1,AT1R水平显示出与Western blot一样的变化。结论:抗纤灵方可延缓5/6肾切除大鼠肾纤维化的进展,该机制与抑制ACE-AngⅡ-AT1R轴的激活密切相关。     

参芪复方对GK大鼠主动脉血管紧张素Ⅱ1型受体mRNA表达的影响

目的 观察参芪复方对GK（Goto-Kakizaki）大鼠大血管病变主动脉血管紧张素Ⅱ1型受体（angiotensin Ⅱ type 1 receptor,AT1R） mRNA表达的影响。方法 67只GK大鼠随机分为GK组（18只）、模型组（16只）、阿托伐他汀组（17只）及参芪复方组（16只）,另设正常Wistar对照组（18只）。以L-NAME 0.10 mg/（mL·d）加入大鼠饮用水中复制糖尿病大血管病变模型。除正常Wistar对照组外,其他4组均喂饲高脂饲料。阿托伐他汀组及参芪复方组分别按1.60 mg/（kg·d）、1.44 g/（kg·d）灌胃相应药物,均每天1次,连续35天。采用葡萄糖氧化酶法每周测定血糖1次;给药5周后,夹心酶联免疫吸附法测定甘油三酯（TG）及总胆固醇（TC）水平,放射免疫法检测血清血管紧张素Ⅱ（angiotensin Ⅱ,AngⅡ）水平,实时定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测主动脉AT1R mRNA表达。结果 给药4周末阿托伐他汀组和参芪复方组血糖水平均较本组给药前明显降低（P<0.05）,且参芪复方组明显低于模型组同期（P<0.05）。模型组TC、TG、血清AngⅡ及主动脉AT1R mRNA水平均明显高于正常Wistar对照组（P<0.01）。给药5周后,阿托伐他汀组和参芪复方组TC、TG、AngⅡ及AT1R mRNA水平明显低于模型组（P<0.01,P<0.05）。阿托伐他汀组AT1R mRNA明显低于参芪复方组（P<0.05）。结论 参芪复方可降低GK大鼠早期大血管病变模型的血糖、血脂,减少血清AngⅡ含量及主动脉AT1R mRNA表达。AT1R可能是参芪复方治疗糖尿病大血管病变的有效靶点之一。     

电针内关穴对肥厚心肌细胞JNK信号通路的影响

目的 探讨电针内关穴对心肌肥厚(cardiac hypertrophy,CH)模型大鼠心肌细胞c Jun氨基末端激酶(c-Jun NH2-teminal kinase,JNK)信号通路的影响。方法 30只SD雌性大鼠随机分为正常组、模型组和电针组,每组10只。模型组和电针组以盐酸异丙肾上腺素3mg/(kg·d)背部皮下注射14天的方法制备CH大鼠模型;正常组注射等量生理盐水。电针组在造模的同时选取内关穴进行电针,每天1次,共14天。计算各组大鼠左心室质量指数(left ventricular weight index,LVWI)和全心质量指数(heart weight index,HWI);采用放射免疫法检测心肌组织血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量;免疫印迹法检测心肌细胞JNK和磷酸化JNK(p-JNK)蛋白表达。结果 与正常组比较,模型组大鼠LVWI、HWI升高,左心室AngⅡ含量增加,JNK及p-JNK表达升高,差异均有统计学意义(P<0.01)。电针组上述指标均明显低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 电针内关穴防治CH与调节JNK信号通路有关;电针可能是通过调节其上游神经内分泌因子来发挥作用。     

壮通饮预处理对冠心病血瘀证大鼠AngⅡ,AT-1R,Cx43及其对再灌注损伤的影响

目的:观察壮通饮(Zhuangtongyin,ZTY)对心肌缺血再灌注大鼠心肌细胞的血管紧张素Ⅱ(AngⅡ),血管紧张素Ⅱ1型受体(AT-1R),缝隙连接蛋白43(Cx43)mRNA表达水平和蛋白水平的影响,并探讨ZTY预处理在大鼠心肌缺血再灌注损伤过程中对大鼠心肌细胞的保护机制。方法:采用随机分组的方法将SPF级SD大鼠分为空白组,假手术组(只穿线,不结扎),模型组,壮通饮低、中、高剂量组(6.8,13.6,27.2 g·kg-1)和复方丹参组(0.08 g·kg-1)。连续灌药4周后,通过结扎左冠状动脉前降支30 min,再灌注60 min,建立冠心病血瘀证再灌注损伤模型,术中监测大鼠心电指标,记录心律失常发生情况,再灌注结束后,取下心脏组织,用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测大鼠心肌组织中AngⅡ,AT-1R,Cx43 mRNA的表达水平,用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠心肌组织中AT-1R,Cx43的蛋白表达水平。结果:壮通饮各剂量组和模型组比较均可以减少心肌缺血再灌注损伤模型大鼠心律失常的发生(P0.05)。与空白组、假手术组比较,模型组、壮通饮各剂量组、复方丹参组的AngⅡ,AT-1R mRNA表达均上调,Cx43 mRNA表达均下降(P0.05)。与模型组比较,壮通饮各剂量组、复方丹参组的AngⅡ,AT-1R mRNA表达均下降,Cx43 mRNA表达均上升,各剂量组之间,中剂量组AngⅡ,AT-1R mRNA下降,Cx43 mRNA表达上升最明显(P0.05)。壮通饮各剂量组与复方丹参组比较无统计学意义。空白组与假手术组比较,无显著性差异。与空白组、假手术比较,模型组、壮通饮各剂量组、复方丹参组的AT-1R蛋白表达均上调,Cx43蛋白表达均下降(P0.05)。与模型组比较,壮通饮各剂量组、复方丹参组的AT-1R蛋白表达均下降,Cx43蛋白表达均上升,各剂量组之间,中剂量组AT-1R蛋白下降,Cx43蛋白表达上升最明显(P0.05)。壮通饮各剂量组与复方丹参组对比无统计学意义。结论:ZTY对心肌缺血再灌注损伤有保护作用,降低再灌注心律失常的发生,其作用机制可能与壮通饮能调控AngⅡ-(AT-1R)-Cx43通路,导致Cx43表达上调有关。