糖肾汤对大鼠肾小球系膜细胞表达基质金属蛋白酶的影响

目的：观察糖肾汤对高糖培养下肾小球系膜细胞表达基质金属蛋白酶(MMP2)、3mRNA的作用。方法：用糖肾汤含药血清作用于体外高糖培养的肾小球系膜细胞体系，采用逆转录-多聚合酶链反应(RT-PCR)法测定MMP2、MMP3mRNA表达。结果：高糖刺激后MMP2mRNA表达明显下降，经糖肾汤干预后有不同程度的上升，而高糖和糖肾汤均对MMP3mRNA无影响。     

真武汤对人胎肾小球系膜细胞外基质作用的实验研究

采用血清药理学方法,探讨真武汤对人胎肾小球系膜细胞外基质（ＥＣＭ）不同成分的作用,为真武汤防治中肾小球硬化的临床应用提供实验依据。结果真武汤能够明显降低ＥＣＭ成分中层粘连蛋白（ＬＮ）和Ⅳ型胶原（Ｃｏｌ Ⅳ）的含量的。表明真武汤对ＥＣＭ的增殖具有明显的抑制作用。     

宁血益肾颗粒对肾小球系膜细胞凋亡及bax和bcl-2表达的影响

目的 :探讨宁血益肾颗粒对肾小球系膜细胞凋亡及凋亡相关基因bax、bcl- 2表达的影响 ,以阐明其治疗系膜增生性肾病有效的作用机制 ,为临床利用该药治疗以系膜增生为核心病理环节的多种肾脏疾病提供实验理论依据。方法 :采用肾小球系膜细胞培养方法进行体外研究 ,用不同剂量的宁血益肾颗粒刺激 4～ 6代系膜细胞 16小时 ,MTT法测定系膜细胞增殖指数 ;TUNEL法定量观察凋亡细胞 ;流式细胞术检测凋亡相关基因bax、bcl- 2的表达。结果 :加入宁血益肾颗粒 16小时后 ,系膜细胞出现了典型的凋亡征象 ,诸如细胞内深棕色颗粒形成、核固缩、碎裂等 ;凋亡率显著高于对照组 (P <0 .0 1) ;同时血尿停各组bax、bcl- 2表达亦明显高于对照组 (P <0 .0 1或P <0 .0 5 )。观察其对凋亡、凋亡相关基因的影响 ,为中医治疗以系膜增生为主要病理改变的多种肾脏疾病 (原发性系膜增生性肾病、紫癜性肾炎、IgA肾病、狼疮性肾病等 )提供新的实验依据。结论 :宁血益肾颗粒可能通过调控bax和bcl- 2基因表达诱导系膜细胞凋亡 ,促进肾小球增殖性病变消散。     

大黄素对大鼠肾小球系膜细胞增殖及IL-6的影响

目的:观察大黄素对大鼠肾小球系膜细胞增殖及系膜细胞分泌IL-6的影响。方法:应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定系膜细胞的增殖及ELISA法检测系膜细胞中IL-6的含量,观察大黄素对其的影响。结果:大黄素可明显抑制大鼠系膜细胞的增殖及降低系膜细胞对IL-6的分泌,与模型组比较有显著性差异(P<0.01)。结论:提示大黄素可明显抑制肾小球系膜细胞增生,减少细胞外基质的生成,从而减轻与延缓肾小球硬化,其机制可能与减少肾小球系膜细胞分泌IL-6有关。     

补肾活血中药对系膜增生性肾小球肾炎大鼠肾组织基质金属蛋白酶及组织抑制剂表达的影响

目的:研究补肾活血中药对系膜增生性肾小球肾炎大鼠肾组织基质金属蛋白酶及组织抑制剂表达的影响。方法:取雄性SD大鼠54只,实验设正常对照组、模型组、补肾活血法药物干预组,每组分2周、4周、8周时间点,每个时间点6只大鼠。肾组织切片分别行HE和PAS染色,进行常规病理学检查。免疫组化检测肾组织基质金属蛋白酶(MMP-2)、TIMP-2、MT1-MMP、TGF-β1的表达。流式细胞术检测肾皮质MMP-2、TIMP-2、MT1-MMP和TGF-β1蛋白表达。结果:模型组大鼠随病程进展肾小球逐渐增大,系膜基质增多,肾小球基底膜增厚。免疫组化染色显示模型组较对照组MMP-2、MT1-MMP表达减少,而药物干预组较模型组表达减少程度轻;模型组较对照组TIMP-2、TGF-β1表达增多,而药物干预组较模型组表达增多程度轻。流式细胞仪检测显示,4周和8周模型组MMP-2的相对值较对照组降低,在统计学上差异具有显著性(P<0.05或P<0.01),而各期模型组TIMP-2和TGF-β1的相对值较对照组升高,MT1-MMP的相对值较对照组降低,差异具有显著性(P<0.01)。结论:系膜增生性肾小球肾炎肾组织MMP-2表达降低、活性...     

消斑愈肾剂对大鼠肾小球系膜细胞细胞外基质影响的研究

近年来随着对肾小球渐进性损伤机制认识的不断深入 ,肾小球系膜细胞、细胞外基质及各种细胞因子在肾功能进行性减退过程中所起的重要作用倍受关注。抑制MC增殖 ,减少ECM的堆积 ,拮抗细胞因子的不良作用 ,已成为防治肾小球硬化 ,延缓肾脏纤维化病情进展的重要环节。过敏性紫瘕性肾炎是儿童期重要的继发性肾小球疾病 ,约占儿童期肾小球疾病的 7% ,其中约 12 %可发展至终末肾功衰竭。本研究采用体外培养的大鼠MC技术和血清药理学方法 ,利用血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )作为一种刺激因子作用于体外培养的肾小球系膜细胞 ,观察了具有益气活血、清热…     

益肾蠲湿合剂对肾小球系膜细胞外基质影响的研究

目的观察中药复方益肾蠲湿合剂对肾小球系膜细胞(GMC)分泌细胞外基质的抑制作用。方法将含低、中、高剂量益肾蠲湿合剂的药物血清和10%血清-DMEM培养液共同培养GMC 24,48和72 h,分别收集细胞培养上清,用Elisa法检测培养上清中纤维连结蛋白(FN)、层黏连蛋白(LN)及Ⅳ型胶原(ColⅣ)含量。结果益肾蠲湿合剂的药物血清可抑制体外培养的GMC分泌FN、LN和ColⅣ,其抑制程度与药物浓度有一定的量效关系,即随药物浓度的增加对GMC分泌FN、LN和ColⅣ的抑制率也相应增加。结论中药复方益肾蠲湿合剂对体外培养的GMC分泌FN、LN和ColⅣ有明显的抑制作用,提示抑制GMC分泌细胞外基质是本复方治疗慢性肾炎的重要机制之一。     

愈肾颗粒不同药对配伍对肾小球系膜细胞基质金属蛋白酶-2及其抑制剂-2的影响

目的:考察黄芪、太子参(益气摄血组),牡丹皮、丹参(凉血化瘀组),紫草、益母草(解毒化瘀组)3组药对对大鼠肾小球系膜细胞基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及基质金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)m-RNA表达的影响.方法:应用血清药理学方法,制取中药药对的含药血清.以血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)作为刺激因子,培养大鼠肾小球系膜细胞,使其发生增殖.应用反转录多聚酶链反应技术(RT-PCR)观察各组间MMP-2,TIMP-2的基因表达情况.结果:益气摄血组对TIMP-2抑制作用显著,与模型组比较有显著性差异;其他2组虽有抑制趋势,但无统计学意义.3组药对对MMP-2的影响均无统计学意义.结论:黄芪、太子参可通过抑制TIMP-2的基因表达,发挥防治肾小球硬化的作用.     

防己茯苓汤加减对TNF-α诱导的大鼠肾小球系膜细胞增殖及PAI-1含量的影响

目的观察防己茯苓汤加减方是否具有干预肿瘤坏死因子(TNF-α)诱导后肾小球系膜细胞增殖的作用及对纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)的影响。从而为临床运用此方治疗慢性肾脏病提供实验依据。方法采用大鼠肾小球系膜细胞培养进行体外研究,用TNF-α刺激系膜细胞增殖,再加入不同浓度防己茯苓汤加减方提取液对细胞进行干预,用MTT法测定细胞增殖,流式细胞仪分析细胞周期,用ELISA法测定细胞培养液中肾小球系膜细胞纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)的含量。结果加入防己茯苓汤加减方提取液后,系膜细胞的增殖程度受到显著抑制(P<0.05),流式细胞仪DNA图示S期细胞数显著减少(P<0.05)。细胞培养液中PAI-1的表达受到抑制(P<0.05)。结论防己茯苓汤加减方对TNF-α诱导后肾小球系膜细胞的增殖具有抑制作用,并可影响肾小球系膜细胞PAI-1的表达,进而调整细胞外基质(ECM)的合成与降解。     

姜黄素对高脂血症大鼠肾皮质TGF-β1 mRNA与MMP-2mRNA表达的影响

目的:探讨姜黄素防治高脂血症致肾脏损害的作用机理。方法:喂食高脂饲料造成大鼠高脂血症致肾脏损害模型,姜黄素(高、中、低剂量)同时干预给药12周,实验结束后,分别检测大鼠肾皮质TGF-β1mRNA和MMP-2mRNA的表达。结果:姜黄素高、中剂量组肾皮质TGF-β1mRNA表达较模型对照组显著减少,且姜黄素高剂量组显著少于低剂量组(P<0.01);姜黄素高剂量组肾皮质MMP-2mRNA表达较模型对照组明显增多,且明显多于低剂量组(P<0.01)。结论:姜黄素能减少肾皮质TGF-β1mRNA表达,提高肾皮质MMP-2mRNA表达,呈量效依赖关系,从而有效地防治高脂血症致肾脏损害。     

防己茯苓汤加减对大鼠肾系膜细胞增殖及基质金属蛋白酶-2的影响

目的:观察防己茯苓汤加减方是否具有干预肿瘤坏死因子诱导后肾小球系膜细胞增殖的作用及对基质金属蛋白酶MMP-2的影响.方法:采用大鼠肾小球系膜细胞培养进行体外研究,用肿瘤坏死因子(TNF-α)刺激系膜细胞增殖,再加入不同浓度防己茯苓汤加减方提取液对细胞进行干预,用MTT法测定细胞增殖,流式细胞仪分析细胞周期,用ELISA法测定细胞培养液中肾小球系膜细胞基质金属蛋白酶(MMP-2)的含量.结果:加入防己茯苓汤加减方提取液后,系膜细胞的增殖程度受到显著抑制(P＜0.05),流式细胞仪DNA图示S期细胞数显著减少(P＜0.05).细胞培养液中MMP-2的表达增强(P＜0.05).结论:防己茯苓汤加减方对肿瘤坏死因子诱导后肾小球系膜细胞的增殖具有抑制作用,并可影响肾小球系膜细胞MMP-2的表达,进而调整细胞外基质(ECM)的合成与降解.     

肺纤方对博莱霉素大鼠肺纤维化模型基质金属蛋白酶1、2及组织金属蛋白酶抑制剂1、2的影响

目的:观察肺纤方抗大鼠肺纤维化肺基质重建的作用。方法:气管内注入博莱霉素制造大鼠肺纤维化模型,观察造模后14、28、45d模型组、假手术组、肺纤方组、泼尼松组血清基质金属蛋白酶1、2及其抑制物组织金属蛋白酶抑制剂1、2的变化。结果:肺纤方可以显著降低血清基质金属蛋白酶1、2及组织金属蛋白酶抑制剂1、2。结论:肺纤方具有抗大鼠肺纤维化基质重建作用。     

芪蓟肾康颗粒总多糖对大鼠肾小球系膜细胞IL-6和MCP-1的影响

目的:观察芪蓟肾康颗粒总多糖提取物对大鼠肾小球系膜细胞白介素-6(IL-6)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达的影响.探讨芪蓟肾康颗粒总多糖提取物防治肾小球硬化的作用机制.方法:应用血清药理学方法,制取芪蓟肾康颗粒总多糖高、低剂量组(生药:30,15 g·kg-1)的含药血清;用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)作为刺激因子,培养大鼠肾小球系膜细胞,使其发生增殖;用免疫酶联吸附法(ELISA法)检测系膜细胞IL-6,MCP-1蛋白表达的情况.结果:芪蓟肾康颗粒总多糖对IL-6有显著抑制作用,与AngⅡ组比较,差异显著(P＜0.01);芪蓟肾康颗粒总多糖对MCP-1有显著抑制作用,与AngⅡ组比较,差异显著(P＜0.01).结论:芪蓟肾康颗粒总多糖可能通过抑制IL-6,MCP-1的蛋白表达,抑制炎症反应,从而防治肾小球硬化.     

中风病急性期痰热证与MMP-1和MMP-3表达的影响＊

目的 研究缺血性中风病急性期痰热证与MMP-1和MMP-3表达的相关性,其相关性研究能否形成微观辨证的依据。方法 筛选发病7天内就诊于中国中医科学院西苑医院的缺血性中风痰热证患者45名,非痰热证44名,对每例患者分别作出痰湿证、气虚证、血瘀证、内风证、阴虚证和内火证的量化诊断,并用ELISA法检测血清中MMP1和MMP-3的含量。结果 痰热证组和非痰热证组MMP-1和MMP-3的表达均无明显差异。结论 MMP-1和MMP-3不能作为痰热证的微观指标,需进一步寻找微观指标对中风病痰热证证候诊断及疗效评价提供更加客观支持。     

基质金属蛋白酶-2在DHR心脏中的表达及麝香保心丸的影响

目的探讨基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在脱氧皮质酮-盐型高血压大鼠(DHR)心脏微小血管重塑中的作用及麝香保心丸对其的影响。方法18只雄性SD大鼠切除左侧肾脏后1周,随机等分为三组。建立DOCA-HDR模型,5周后检测心脏血管密度以及MMP-2因子的表达量。结果在DHR左心室心内膜下心肌中存在微小动脉密度增加和毛细血管密度减少,MMP-2mRNA和MMP-2/TIMP-2的蛋白表达上调;麝香保心丸不能抑制血压升高,但能减轻微小血管损害,下调MMP-2mRNA和蛋白表达,MMP-2的表达同微小血管密度间具有良好的相关性。结论DHR心脏中存在微小血管病变,MMP-2/TIMP-2表达可能参与微小血管病变的病理过程,麝香保心丸可能通过调节MMP-2表达产生对DOCA-高血压大鼠心脏的微小血管损害的保护作用。     

MMP-2、MMP-9在葡萄胎组织中的表达以及意义

目的探讨MMP-2、MMP-9在葡萄胎组织中的表达情况,以确定二者预测葡萄胎恶变的可能。方法收集41例清宫术后病理诊断为葡萄胎患者的首次清宫组织,并收集17例正常早孕（〈12周）无其他疾病、要求终止妊娠的绒毛组织作为对照组。将组织分为正常绒毛组（17例）、葡萄胎组（29例）、侵葡组（12例）,观察MMP-2、MMP-9在侵蚀性葡萄胎、葡萄胎以及正常绒毛表达强度。蛄果MMP-2、MMP-9在侵葡组、葡萄胎组以及正常绒毛组的灰密度值依次为70．93±8．87／86．91±8．81,102．40±7．13／109．38±5．60．105．64±5．30／111．27±4．33,侵葡组MMP-2,MMP-9的阳性表达明显高于其他2纽（P均〈0．01）,但葡萄胎组与正常绒毛组相比无显著性差异（P〉0．05）;在侵葡组的表达中MMP-2和MMP-9呈正相关。结论MMP-2、MMP-9高表达可能在葡萄胎、侵蚀性葡萄胎发生发展过程中有促进作用,能促进葡萄胎组织的恶变。在含有高危因素的葡萄胎恶变患者中,MMP-2、MMP-9的表达明显升高,联合检测MMP-2、MMP-9对预测葡萄胎的恶变具有-定的临床意义,有可能成为临床预测葡萄胎恶变的重要指标。     

槲皮素对U937细胞迁移和侵袭能力及MMP-2,MMP-9表达的影响

目的:观察槲皮素(quercetin)对人急性髓系白血病(human acute myeloid leukemia)U937细胞增殖、凋亡、黏附力、迁移和侵袭能力及基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2),基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)表达的影响。方法:体外培养U937细胞,分别以0,10,20,40μmol·L-1槲皮素处理24,48,72 h,细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测槲皮素对U937细胞增殖的抑制作用。实验随机分为空白组,槲皮素10,20,40μmol·L-1组。末端脱氧核苷酸转移酶介导的d UTP缺口末端标记测定法(TUNEL)检测U937细胞凋亡情况;细胞黏附实验检测U937细胞黏附力;划痕修复实验检测U937细胞迁移能力;transwell小室体外侵袭实验检测U937细胞侵袭能力;蛋白质印迹法(Western blot)检测U937细胞MMP-2,MMP-9蛋白表达。结果:槲皮素可抑制U937细胞的增殖。与空白组比较,槲皮素10,20,40μmol·L-1组明显升高U937细胞凋亡指数(P0.05,P0.01)。与空白组比较,槲皮素10,20,40μmol·L-1组明显降低U937细胞黏附率,迁移率,侵袭细胞数及MMP-2,MMP-9蛋白表达(P0.05,P0.01)。结论:槲皮素可显著抑制U937细胞迁移和侵袭能力,其机制可能与其抑制MMP-2和MMP-9表达有关。     

肾衰康颗粒治疗慢性肾功能衰竭疗效分析

目的:观察肾衰康颗粒治疗慢性肾功能衰竭(CRF)的临床疗效。方法:将76例随机分为对照组和治疗组各38例,两组均给予优质低蛋白饮食和对症支持治疗,治疗组加服肾衰康颗粒,2个月为一疗程,连续观察3个疗程。每半月测血肌酐、尿素氮及内生肌酐清除率,并观察两组治疗前后主观症状得分。结果:治疗组用药前后肾功能变化均值与对照组同期相比有显著性差异(P<0.05)。结论:肾衰康颗粒可延缓肾衰进展,为有效治疗药物。