Trophinin在人卵母细胞及着床前胚胎细胞上的表达与意义

目的 研究trophinin在人卵母细胞、着床前胚胎细胞上的表达与意义.方法 采用间接免疫荧光技术、应用激光扫描共聚焦显微镜对9个卵母细胞、16个分裂胚胎及12个囊胚进行了荧光检测.结果 trophinin蛋白在人卵母细胞、分裂胚胎以及囊胚上均有表达,且表达逐渐显著增强(P＜0.05).结论 人囊胚可能通过trophinin与表达有相同粘附分子的着床窗期子宫内膜发生同种粘附,从而在人胚胎着床过程中起重要作用.     

凋亡调节基因bcl-2及p53在早期胚胎中的表达

目的　探讨两种重要的细胞凋亡调控基因bcl-2及p53在着床前小鼠胚胎中的表达及其其对着床前胚胎发育的作用.方法　建立超排卵小鼠早孕的模型,获取着床前胚胎,采用免疫组化LSAB法,检测bcl-2及p53蛋白.结果　在小鼠2细胞、4细胞、8细胞和桑葚胚中,均检测到bcl-2和p53蛋白.结论　bcl-2和p53凋亡调控基因在小鼠着床前胚胎的表达可能与细胞碎片形成有关,对于维护胚胎正常发育,促进发育异常的胚胎细胞发生凋亡,从而提高胚胎质量有重要意义.体内增殖与凋亡处于一个动态平衡,共同调节胚胎发育凋亡调节基因bcl-2及p53在早期胚胎中的表达@李艳红@姚…     

小鼠早期胚胎质量与细胞凋亡的相关性

目的分析小鼠早期胚胎质量与细胞凋亡的关系,了解细胞凋亡调控基因在早期胚胎发育中所起的重要作用,旨在为提高胚胎质量寻找一条新途径。方法采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(Caspase)原位荧光检测和Bcl-2免疫荧光检测等凋亡检测技术,以及增殖细胞核抗原(PCNA)免疫荧光检测细胞增殖程度的技术,分别对小鼠早期形态正常的胚胎、早期发育阻滞的胚胎和有碎片的胚胎进行细胞凋亡程度和增殖程度的检测,比较其凋亡和增殖程度的差异。结果小鼠早期发育阻滞的胚胎细胞和胚胎中的碎片TUNEL阳性,Caspase活性增强,Bcl-2、PCNA表达水平降低。结论细胞凋亡与胚胎发育阻滞及胚胎中的碎片形成密切相关。     

Galectin-3和Bcl-2与胚胎停育研究进展

Galectin-3是半乳糖凝集素家族中的一员,能通过其糖识别域与细胞内糖蛋白、细胞表面分子和细胞外基质蛋白相互作用,参与胚胎着床、胚胎发生和胎盘形成等过程,与妊娠成功建立和维持密切相关。凋亡抑制蛋白Bcl-2与Galectin-3有明显的序列相似性,可能存在共同细胞凋亡通路,在人早孕过程中参与了绒毛滋养层细胞的增殖和分化、子宫内膜蜕膜化的过程,在绒毛的发生、发育、胎盘形成和组织结构改建及功能完善等方面发挥着重要作用。     

早孕小鼠胚胎着床窗口期子宫内膜mmu-miR-106b表达规律及其作用

目的：探讨mmu-miR-106b在早孕小鼠胚胎着床过程中的表达规律,阐明其对胚胎着床的调控作用。方法：应用real-time PCR和原位杂交检测mmu-miR-106b在早孕小鼠孕4 d、孕5 d及孕6 d子宫内膜中的表达;子宫内膜基质细胞转染mmu-miR-106b的模拟物和抑制剂后,MTT和流式细胞仪检测细胞的增殖凋亡情况;结合靶基因预测数据库,利用Western blot确定mmu-miR-106b在子宫内膜中的靶基因。结果：mmu-miR-106b在小鼠孕6 d子宫内膜的表达较孕4 d明显下调（P=0.039）,孕5 d着床点与着床旁组织表达无明显差异（P=0.606）,定位于子宫内膜基质细胞;上调mmu-miR-106b会促进子宫内膜基质细胞的增殖,下调其表达会促进细胞凋亡;通过miRGen、Targetscan、Pictar数据库筛查获得与胚胎着床相关的靶基因核磷蛋白1、肿瘤易感基因１０１（tumor susceptibility gene 101,Tsg101）和10号染色体缺失的同源性磷酸酶张力蛋白等,其中Tsg101的表达受到mmu-miR-106b负调控（P=0.042）。结论：mmu-miR-106b可能通过靶向Tsg101,影响胚胎着床过程中子宫内膜基质细胞增殖,对胚胎着床发挥调控作用。     

原癌基因c-myc产物在小鼠早期胚胎中的表达

0　引言　原癌基因 c- myc的表达产物 ,是一种与 DNA结合的磷酸化蛋白 ,具有转录调控因子的作用 .c- Myc蛋白通常和 Max结合 ,二者形成异二聚体后再和 DNA核心序列结合 ,控制 DNA转录 ,从而发挥基因调控的作用 [1 ] .以往研究发现c- Myc蛋白在小鼠卵母细胞、精子细胞及孕中期胚胎中存在 .利用 RT- PCR方法在着床前胚胎发育过程中可以检测到 c-myc原癌基因转录 .最早在小鼠胚胎基因组激活期即 2胚细胞期 [2 ] .早期胚胎能否表达 c- Myc蛋白 ,未见报道 .本研究用免疫组织化学 ABC法探讨了 c- Myc蛋白能否在着床前小鼠胚胎中表达 ,为 …     

子宫内膜LIF与胚泡着床和胚胎发育的关系

LIF具有抑制胚胎干细胞的分化并保持其增殖能力的作用，LIF基因在大鼠子宫内膜组织中有强烈的表达，且有极强的时段性。子宫内膜LIF基因表达与胚泡着床密切相关，并受到体内激素水平的调控，胚胎绒毛细胞LIF基因表达对促进胚胎早期发育及胎盘形成有着重要作用。     

妇产科概论——解剖、生理和组胚学

TNF-α在LPS引起小鼠宫内胎儿生长抑制和骨骼发育迟缓中的作用；新生鼠卵巢FOXO3表达水平与卵母细胞凋亡的相关性初步研究；缺氧诱导因子1和缺氧诱导因子2在人类着床前胚胎的表达；细菌脂多糖对小鼠生长发育和骨骼发育的影响；CBS在小鼠卵泡发育过程中的表达模式及其功能初探；卵泡内千细胞因子水平对卵母细胞发育、受精和卵裂影响的实验研究。     

miRNA在小鼠着床前胚胎的表达

目的:研究小鼠发育过程中miRNA表达水平的变化,探讨miRNA对着床前胚胎发育过程的作用。方法:建立小鼠超排、交配系统,收集着床前胚胎提取低分子量RNA;采用miRNA特异RT引物进行反转录,采用SYBR Green实时定量PCR技术,研究miR-125a、miR-295和miR-181b在小鼠着床前胚胎发育过程中表达水平的变化。结果:着床前胚胎发育的各阶段均表达miR-125a、miR-295和miR-181b;随着胚胎发育进程,miR-295的表达呈逐渐上升的趋势;miR-125a在卵母细胞到2细胞发育阶段呈下降趋势,以后随发育进程呈逐渐上升趋势。结论:小鼠着床前胚胎中表达miRNA,着床前胚胎的发育和分化过程可能受到miRNA的调控。     

细胞凋亡与胚胎食管发育的相关性研究

胚胎食管发育过程中存在食管壁各种细胞的不断增殖和凋亡。在胚胎发育中二者的关系受各种生长因子或相关基因的调节与控制。其中细胞凋亡因子Bcl-2、Bax、p53、HSP70等与胚胎食管发育之间的关系得到了较深入研究。这些凋亡因子的异常表达常与食管癌变、先天性食管畸形发生等相关。早期胚胎组织细胞生长发育与癌症发生具有许多相似性,深入研究细胞凋亡与胚胎发育的关系非常重要。现就细胞凋亡因子与胚胎食管的发育关系及在食管癌、食管先天畸形中的表达等方面进行综述。     

终末糖基化产物、高脂诱导内皮细胞凋亡的作用途径及葛根素的保护作用*

[目的]探讨葡萄糖和高脂诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的作用途径及葛根素的保护作用。[方法]采用终末糖基化产物、高脂共同诱导内皮细胞凋亡建立模型,并用葛根素进行干预。采用免疫细胞化学法检测Gaspase3阳性细胞数。流式细胞分析仪检测终末糖基化产物及高脂预处理后内皮细胞凋亡百分率。[结果]中浓度终末糖基化产物（AGE50ug／mol）以及氧化低密度脂蛋白（ox—LDL50mg／L）36h作用于人脐静脉内皮细胞与正常水平的内皮细胞相比,凋亡细胞数量显著增加P〈0．05,葛根素预处理12h后显著降低高糖诱导的凋亡率P〈0．05。[结论]葛根素可以抑制高糖高脂诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡,这在防治糖尿病及动脉粥样硬化并发症的过程中起到一定作用。     

细胞凋亡及凋亡相关基因bcl-2和bax在胚胎停止发育绒毛组织中的表达

目的研究细胞凋亡及凋亡相关基因bcl-2、bax在胚胎停止发育绒毛组织中的表达。方法采用TUNEL技术和免疫组织化学SP法对40例正常早孕绒毛组织和40例胚胎停止发育绒毛组织进行凋亡细胞和bcl-2、bax表达测定。结果胚胎停止发育绒毛组织中凋亡细胞显著增加,与正常早孕绒毛组织比较有显著性差异（P〈0．05）;胚胎停止发育绒毛组织中bcl-2表达低于正常早孕绒毛组织,而bax表达高于正常早孕绒毛组织,两者均有显著性差异（P〈0．05）。结论胚胎停止发育绒毛组织细胞凋亡指数显著增加,且与bcl-2的表达呈负相关,与bax的表达呈正相关。     

终末糖基化产物、高脂诱导内皮细胞凋亡的作用途径及葛根素的保护作用

[目的]探讨葡萄糖和高脂诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的作用途径及葛根素的保护作用。[方法]采用终末糖基化产物、高脂共同诱导内皮细胞凋亡建立模型，并用葛根素进行干预。采用免疫细胞化学法检测Gaspase3阳性细胞数。流式细胞分析仪检测终末糖基化产物及高脂预处理后内皮细胞凋亡百分率。[结果]中浓度终末糖基化产物（AGE50ug／mol）以及氧化低密度脂蛋白（ox—LDL50mg／L）36h作用于人脐静脉内皮细胞与正常水平的内皮细胞相比，凋亡细胞数量显著增加P〈0．05，葛根素预处理12h后显著降低高糖诱导的凋亡率P〈0．05。[结论]葛根素可以抑制高糖高脂诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡，这在防治糖尿病及动脉粥样硬化并发症的过程中起到一定作用。     

TRAIL与肿瘤关系的研究进展

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体（TRAIL）是肿瘤坏死因子超家族第三个成员,可诱导多种肿瘤细胞发生凋亡,但不会损害正常组织细胞.其特异性受体死亡受体（DR）4、DR5在多数肿瘤细胞表达,正常细胞缺失,这使得应用TRAIL进行抗肿瘤治疗成为可能.TRAIL能触发细胞凋亡通路,激活caspase家族,促进线粒体凋亡途径的启动,诱导细胞凋亡.该文就TRAIL的结构、受体及其与肿瘤的关系作一综述.     

锌指蛋白ZBED3在小鼠卵细胞中的表达及意义

目的:研究锌指蛋白(zinc finger,BED-type containing 3,ZBED3)在小鼠卵母细胞中的表达及分布,探讨ZBED3在小鼠卵细胞成熟及早期胚胎发育过程的功能?方法:运用生物信息学资源分析ZBED3在多组织中的表达情况,运用免疫印迹法和免疫组织化学术,检测ZBED3在小鼠卵细胞中的表达和分布?结果:生物信息学检索显示ZBED3 mRNA在卵细胞及受精卵中特异性表达,免疫印迹法证实ZBED3在小鼠卵母细胞中高表达,同时免疫组织化学显示阳性信号主要集中在卵母细胞胞浆中?结论:ZBED3可能在卵母细胞成熟和早期胚胎发育过程中发挥作用?     

氯氨酮减轻高血糖大鼠脑缺血所致的神经元凋亡

目的:探讨氯氨酮减轻高血糖加重脑缺血损伤的机制.方法:在正常血糖、高血糖以及氯氨酮干预条件下,制作大鼠全脑缺血15 min,再灌注0.5,1和3 h模型.通过免疫组化和免疫印迹技术对比研究细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)的磷酸化,同时采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP原位切口末端标记方法观察神经细胞凋亡.结果:正常血糖组大鼠全脑再灌注0.5 h扣带皮质和海马CA1及CA3区的ERK1/2磷酸化明显增加;在高血糖组缺血再灌注后0.5 h,扣带皮质和海马CA3区的ERK1/2磷酸化明显高于正常血糖组,持续到再灌注后的3 h;氯氨酮组可见由高血糖诱导的ERK1/2磷酸化被抑制.同时,磷酸化ERK1/2的程度与脑组织损伤结果一致.结论:高血糖可通过ERK1/2信号转导通路加重缺血性脑损伤,氯氨酮通过阻断NMDA受体,改善钙离子异常而抑制高血糖介导的ERK1/2磷酸化,从而减轻高血糖加重缺血性脑损伤.     

龙葵碱调控 Bcl-2 与 Bax 蛋白表达及 caspase-3 活性诱导HepG2 细胞凋亡的研究

目的 探讨龙葵碱诱导 HepG2 细胞凋亡的作用机制。方法 透射电镜观察凋亡细胞形态变化,原位缺口末端检测法 (TUNEL 法) 检测 DNA 断裂情况,流式细胞术检测细胞凋亡率,间接免疫荧光法激光共聚焦扫描显微术检测 Bcl-2 与 Bax 蛋白表达,比色法检测 caspase-3 活性的变化。结果 在透射电镜下观察,龙葵碱组细胞出现细胞固缩,染色质致密,核凝聚固缩,染色体断裂形成核碎块,凋亡小体形成等细胞凋亡特征形态。TUNEL 法发现龙葵碱高、中、低剂量组 HepG2 细胞均有绿色荧光,阴性对照组无荧光。流式细胞术分析表明 0.4、2、10 μmol/L 龙葵碱作用 HepG2 细胞 24 h 凋亡率分别为 4.0%、8.5%、20.1%。同时,龙葵碱升高 caspase-3 活性,下调 Bcl-2 蛋白表达,上调 Bax 蛋白表达。结论 龙葵碱通过降低 Bcl-2/Bax 的值,激活 caspase-3 酶活性诱导 HepG2 细胞凋亡。     

甲基化硒酸对人前列腺癌DU145细胞增殖与凋亡的影响

目的：观察甲基化硒酸（MSA）对DU145前列腺癌细胞增殖及凋亡的影响，并初步探讨其作用机制。方法:采用MTT比色法观察1.25、2.50和5.00 μmol•L^-1MSA对DU145细胞增殖活力的抑制作用；吖啶橙染色观察MSA诱导细胞凋亡情况；流式细胞术分析细胞周期及凋亡，并计算细胞平均凋亡指数；免疫细胞化学技术观察细胞内激活的caspase-3的表达情况。结果：经1.25、2.50和5.00　 μmol•L^-1MSA处理48　h后，DU145细胞生长抑制率分别为16.35%、38.10%和73.54%，3组间比较差异有显著性（P<0.01），随MSA浓度升高细胞生长抑制率增加，呈明显的剂量依赖性。吖啶橙荧光染色可见，经1.25、2.50和5.00　 μmol•L^-1MSA处理后的细胞呈明显凋亡形态，并随药物剂量增加凋亡细胞数增多；流式细胞术结果显示，经1.25、2.50和5.00　 μmol•L^-1MSA处理48 h后，细胞凋亡率分别为5.34%、8.71%和13.60%，3组间比较差异有显著性（P<0.05）,随MSA浓度升高细胞凋亡率升高，呈剂量依赖关系；免疫细胞化学染色结果显示，随着MSA剂量增加，细胞内激活的caspase-3表达上调。结论:MSA对DU145细胞具有明显的抗肿瘤作用，其机制可能与激活的caspase途径诱导细胞凋亡有关。     

苦参碱诱导人肝癌细胞系HepG2凋亡的研究

目的 观察苦参碱是否能诱导人肝癌细胞系HepG2凋亡及凋亡相关基因的变化。方法 0－3.0g/L苦参碱处理HepG2细胞,光镜和电镜下观察细胞形态;TUNEL法原位检测DNA断裂;流式细胞仪检测凋亡峰;AnnexinV-FITC/PI双标记检测早期凋亡;免疫组化和原位杂交法检测wp53,bcl-2,bax,c-myc,Fas等凋亡相关基因的表达,采用真彩色图像分析仪定量检测。结果 1.5-3.0g/L苦参碱可诱导HepG2凋亡,并且使凋亡相关基因wp53,bax,Fas表达上调,而抗调亡基因bcl-2,c-myc表达下调。结论 一定浓度的苦参碱可诱导人肝癌细胞HepG2凋亡,并且该凋亡与凋亡相关基因表达增强和抗凋亡相关基因表达减弱有关。     

氟对人胎肝细胞细胞周期、凋亡及p53表达的影响

目的　研究氟对人胎肝细胞 (L 0 2细胞 )细胞周期、凋亡及p5 3表达的影响。方法　体外培养的人胎肝细胞接触 4 0、 80、 16 0 μg/ml氟化钠 2 4h后 ,MTT法检测L 0 2细胞存活率 ,流式细胞术检测细胞凋亡率和周期构成比 ,Westernblot检测P5 3蛋白的表达水平。结果　高剂量氟染毒组细胞存活率显著低于对照组 (P <0 0 1) ;各染氟组S期细胞数与对照组相比均明显增多 (P <0 0 1) ,中、高剂量氟染毒组细胞凋亡率和p5 3蛋白表达量均显著高于对照组 (P <0 0 1)。结论　氟可使L 0 2细胞S期细胞数增多 ,诱导人胎肝细胞凋亡和 p5 3表达 ,并呈剂量 效应关系。