人乳头瘤病毒DNA6B／11,16,18在喉鳞癌组织中的表达

为了证实人乳头瘤病毒亚型的感染与喉鳞癌的关系，采用原位杂交技术，荧光素标记ＨＰＶ ６Ｂ／１１，１６，１８ＤＮＡ为探针，分别为３２例福尔马林固定，石蜡包埋的喉鳞癌进行ＨＰＢ ６Ｂ／１１，１６，１８型检测。结果显示：ＨＰＶ１６型ＤＮＡ阳性，ＨＰＶ１８型阳性９例，ＨＰＶ６Ｂ／１１阴性。提示：喉鳞癌的发生与ＨＰＶ１６，１８型感染有关。     

人乳头瘤病毒DNA 6B/11、16、18在喉鳞癌组织中的表达

为了证实人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）亚型的感染与喉鳞癌的关系，采用原位杂交技术，荧光素标记ＨＰＶ６Ｂ／１１、１６、１８ＤＮＡ为探针，分别对３２例福尔马林固定、石蜡包埋的喉鳞癌进行ＨＰＶ６Ｂ／１１、１６、１８型检测。结果显示：ＨＰＶ１６型ＤＮＡ阳性１４例（４６％），ＨＰＶ１８型阳性９例（２８％），ＨＰＶ６Ｂ／１１阴性。提示：喉鳞癌的发生与ＨＰＶ１６、１８型感染有关。     

PCR检测宫颈病变组织和配偶尿道分泌物HPV的研究

目的 检测宫颈病变组织人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）感染对其配偶泌尿生殖道的受染情况。方法 应用聚合酶链反应对４３例女性宫颈病变组织和配偶尿道分泌物进行ＨＰＶ６．１１型和ＨＰＶ１６．１８型检测。结果 宫颈病变组织和配偶尿道分泌物ＨＰＶ６．１１型检出率分别为２７．９１％和１１．６３％;ＨＰＶ１６．１８型检出率分别为５１．１６％和３７．２１％。配偶尿道分泌物与宫颈病变组织ＨＰＶ６．１１同型检出率为４１．６７％     

应用PCR技术检测尖锐湿疣患者HPV感染

取尖锐湿疣的３０例患者外阴湿疣标枉和宫颈分泌物及同期非尖锐湿疣患者宫艰苦泌物，用聚合酶链反应技术检测其中ＨＰＶ６．１１ＤＮＡ和ＨＰＶ１６．１８ＤＮＡ。结果表明，尖锐湿疣患者宫颈人乳头瘤病毒检出率显著高于非尖锐湿疣患者，以ＨＰＶ６．１１为主，ＨＰＶ１６．１８在二者之间无差别。提示外阴尖锐湿疣主要由ＨＰＶ６．１１感染引起，应用ＰＣＲ技术检测湿疣组织中ＨＰＶ ＤＮＡ可为痢疾诊断提供客观依据。     

喉癌组织乳头状瘤病毒的检测

应用聚合酶链反应对成人型喉癌，喉癌旁组织及颈部淋巴结组织进行乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）检测，发现２０例喉癌组织中有１６例呈ＨＰＶ－６，１１例阳性，１例ＨＰＶ－１６，１８例阳性，２例癌旁１ｃｍ内组织有１例ＨＰＶ－６，１１阳性，２例癌旁２ｃｍ外组织均呈ＨＰＶ－６，１１，１６，１８阴性，３例淋巴结病是检查有癌转移，均主ＨＰＶ－６，１１型阳性。     

复发尖锐湿疣中人乳头瘤病毒相关序列的检测

用聚合酶链反应及其产物斑点杂交技术，对２９例复发尖锐湿疣中人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）相关序列进行检测和分型，结果显示复发尖锐湿疣中：ＨＰＶ６：６５．５％，ＨＰＶ１１：２４．１％，ＨＰＶ１６：３１．０％，ＨＰＶ６／１１：１３．８％，ＨＰＶ６／１６：１０．４％，ＨＰＶ１８未检测出来，所用探针以外的型别：３．４％。     

用多聚酶链反应探讨宫颈人乳头瘤病毒感染

目的了解温州地区ＨＰＶ感染与宫颈炎的关系，为防治该病提供依据。方法用多聚酶链反应（ＰＣＲ）检测１２８例慢性宫颈炎及４８例正常宫颈标本组织中的人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）ＤＮＡ，并对ＨＰＶ进行１６、１８型别分析。结果慢性宫颈炎组ＨＰＶ检出率为３２．９％（４２／１２８），ＨＰＶ１６、１８及双重感染（１６＋１８）各占其中的５４％（２３／４８）、１１．９％（５／２４）、１１．９％（５／２４），对照组．ＨＰＶ的检出率为６．３％（３／４８）。两组ＨＰＶ阳性检出率有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。结论ＨＰＶ感染，尤其ＨＰＶＩ６感染与慢性宫颈炎相关，但与年龄大小无关。     

原位杂交法检测喉癌组织中人乳头状瘤病毒的研究

采用原位核酸杂交技术，地高辛标记人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）６Ｂ／１１，１６／１８型ＤＮＡ作探针，对４４例喉癌石蜡包埋标本中ＨＰＶ－ＤＮＡ同源序列进行了检测，同时用１６例喉息肉石蜡包埋标本作为对照。结果显示：ＨＰＶ６Ｂ／１１杂交阳性者在喉癌组为８／４４（１８．２％），喉息肉组为２／１６，（１２．５％）（Ｐ〉０．０５），ＨＰＶ１６／１８杂交阳性者在喉癌组为１９／４４（４３．２％），喉息肉组为２／１６（１     

外阴癌的HPV检测及预后的关系

目的研究人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）感染与外阴癌的发病和预后的关系。方法将外阴癌病理存档蜡块切片脱蜡，以ＰＣＲ方法扩增其中可能存在的ＨＰＶ－ＤＮＡ（６／１１型和１６／１８型），经琼脂糖凝胶电泳，置紫外光反射仪下观察结果。结果在４９例外阴癌原发灶中，ＨＰＶ－ＤＮＡ１６／１８型的检出率为２６．５％，６／１１型的检出率为２．０％；ＨＰＶ－ＤＮＡ１６／１８型阳性外阴癌的术后生存率好于ＨＰＶ－ＤＮＡ１６／１８型阴性外阴癌。结论一部分外阴癌的发病与ＨＰＶ感染有关，这一部分外阴癌的预后较好；另一部分外阴癌的发病与ＨＰＶ感染无关，但其预后较差。     

原位杂交法检测喉癌组织中人乳头状瘤病毒的研究

采用原位核酸杂交技术，地高辛标记人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）６Ｂ／１１，１６／１８型ＤＮＡ作 探针，对４４例喉癌石蜡包埋标本中ＨＰＶ－ＤＮＡ同源序列进行了检测，同时用１６例喉息肉石蜡包埋 标本作为对照。结果显示：ＨＰＶ ６Ｂ／１１杂交阳性者在喉癌组为 ８／４４（１８． ２％），喉息肉组为２／１６ （１２．５％）（Ｐ＞０．０５）；ＨＰＶ １６／１８杂交阳性者在喉癌组为 １９／４４（４３．２％），喉息肉组为 ２／１６ （１２．５％）（Ｐ＜０．０５）。提示：ＨＰＶ １６／１８型感染与喉癌的发生有密切关系，是喉癌发病学中一个不 容忽视的致癌因素。     

腮腺肿瘤中HPV37种亚型的分布

目的探讨腮腺肿瘤(Parotid Gland Tumor)与人乳头状瘤病毒(Human Papillomavirus,HPV)感染及其亚型的相关性。方法采用核酸分子快速导流杂交基因芯片分型技术(Hybri Max)对59例腮腺肿瘤石蜡包埋组织标本进行37种HPV亚型检测,并以20例健康志愿者的正常口腔黏膜组织为对照。结果腮腺肿瘤石蜡包埋组织标本HPV总检出率为57.6%(34/59),对照组均为阴性(0/20),两组比较差异有统计学意义(χ2=20.234,P<0.05);腮腺良性、恶性肿瘤组织中HPV阳性率分别为59.6%(31/52)和42.9%(3/7),两组HPV阳性率比较差异无统计学意义(χ2=0.189,P>0.05);腮腺肿瘤组中HPV感染亚型以高危亚型为主(80.7%),其中以HPV16、18、52型为主(61.4%);腮腺肿瘤组中HPV单一亚型、多重亚型均可感染,但以混合亚型感染为主(52.9%)。结论腮腺肿瘤的发生可能与HPV感染有相关性。腮腺肿瘤中HPV高、低危亚型均可感染,以高危亚型HPV16、18、52型感染为主。     

Studies on the interrelationship of Chinese laryngeal carcinoma and human papillomavirus

ＳｔｕｄｉｅｓｏｎｔｈｅｉｎｔｅｒｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｏｆＣｈｉｎｅｓｅｌａｒｙｎｇｅａｌｃａｒｃｉｎｏｍａａｎｄｈｕｍａｎｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｕｓ￥（赵舒薇）（费声重）（郭志祥）（陆书昌）（潘子民）ＺｈａｏＳｈｕｗｅｉ，ＦｅｉＳｈｅｎｇｚｈ...     

219例阴道镜拟诊宫颈HPV亚临床感染患者的病理诊断和HPV-DNA检测分析

目的探讨电子阴道镜检查和HPV-DNA检测对宫颈人乳头瘤病毒亚临床感染（SPI）的诊断价值。方法对2000年3月至2008年4月在海南医学院附属医院妇产科门诊经阴道镜检查拟诊宫颈SPI的219例患者行病理检查,同时行HPV6/11、16/18型DNA的检测。结果 219例阴道镜拟诊宫颈SPI患者中,病理确诊为HPV感染209例,阴道镜的诊断符合率为95.4%。HPV-DNA阳性191例,HPV-DNA检测阳性率为87.2%,其中HPV6/11型阳性126例,HPV16/18型阳性62例,混合感染3例。病理诊断为单纯HPV感染患者133例,其中HPV6/11型115例,HPV16/18型18例,而病理诊断为HPV感染合并宫颈上皮内瘤变（CIN）患者58例,其中HPV6/11型11例,HPV16/18型44例,混合感染3例。结论阴道镜检查是一种早期发现宫颈SPI的简便、有效的方法。宫颈单纯HPV感染的主要亚型为HPV6/11型,HPV感染合并CIN的主要亚型为HPV16/18型。     

人乳头瘤病毒DNA载量与尖锐湿疣复发的相关性

目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)DNA载量与尖锐湿疣(CA)复发的关系.方法采用实时荧光定量PCR技术,对31例初发性和32例复发性CA患者的疣体组织进行HPV6/11和HPV16/18 DNA的定量检测.结果 63例CA中,62例HPV6/11DNA阳性,阳性率98.4%.初发性CA HPV 6/11DNA载量为1.4×103～6.7×107copies/ml,平均(8.4×106±1.7×107)copies/nl;复发性CA HPV 6/11DNA载量为1.2×104～3.6×108copies/ml,平均(2.9×107±6.7×107)copies/ml.在62例HPV6/11阳性中,有7例HPV16/18 DNA同时阳性,占11.3%,其中初发性CA 2例,复发性CA 5例,初发性CA HPV 16/18 DNA载量为1.9×103～1.6×104copies/ml,平均(8.7×103±9.6×103)copies/ml,复发性CA HPV 16/18 DNA载量为1.4×105～1.7×107copies/ml,平均(5.7×106±7.1×106)copies/ml.复发性CA的HPV6/11和HPV16/18 DNA载量高于初发性CA,差异均具有显著性(P＜0.05).HPV6/11 DNA的载量随着复发次数以及病程的增加而升高,呈正相关,相关系数r分别为0.37和0.30.结论 HPV DNA病毒载量与CA复发之间存在着一定的相关性.     

人乳头状瘤病毒和EB病毒在子宫颈上皮内瘤变中的表达

目的:探讨人乳头状瘤病毒(HPV)和EB病毒(EBV)在子宫颈上皮内瘤变(CIN)中的表达.方法:采用原位杂交对130例CIN(CIN1 50例,CIN2 40例,CIN3 40例)、子宫颈癌10例、子宫颈湿疣样病变10例、子宫颈正常黏膜10例的HPV(高危型16/18、低危型6/11)和EBV进行检测.结果:HPV16/18在CIN1、CIN2、CIN3的阳性表达率分别是44.0%、37.5%和62.5%,子宫颈癌为8/10,子宫颈湿疣样病变为10/10,子宫颈正常黏膜为3/10,差异有统计学意义(P<0.01).HPV6/11在CIN1、CIN 2、CIN3的表达率分别是36.0%、52.5%和70.0%,在子宫颈癌中的表达是6/10,子宫颈湿疣样病变9/10,子宫颈正常黏膜3/10,差异有统计学意义(P<0.01).HPV16/18和HPV6/11在CIN1、CIN2、CIN3中联合表达率分别为26.0%、22.5%和50.0%,子宫颈癌为6/10,子宫颈湿疣样病变为7/10,子宫颈正常黏膜为2/10,差异有统计学意义(P<0.01).EBV在CIN1、CIN2、CIN3的阳性表达率分别是24.0%、12.5%和22.5%,子宫颈癌为3/10,子宫颈湿疣样病变为0/10,子宫颈正常黏膜为0/10,差异无统计学意义(P>0.05).结论:HPV感染是引起CIN的主要致病因子,临床上往往是多种亚型混合感染.EB病毒在CIN和子宫颈癌表达的意义仍有争议.     

宫颈癌患者石蜡标本中人乳头瘤病毒的检测与分型

采用非放射性同位素检测技术，对来源于子宫颈癌患者的石蜡包埋组织标本进行四种常见生殖道HPV（HPV6，11，16，18）的检测和分型。结果表明，在受检的10例宫颈癌患者石蜡标本中，HPV阳性检出率为100%，其中HPV16型3例（30%），和HPV18例6例（60%），HPV6和HPV11型未检测到，表明宫颈癌感染HPV主要为HPV16及18型。     

HPV感染在尖锐湿疣及外阴和宫颈上皮内瘤变病变中的分布

目的探讨HPV感染在尖锐湿疣和上皮内瘤变(包括外阴和宫颈)病变中的分布情况。方法通过HPV基因分型检测对330例尖锐湿疣和250例上皮内瘤变病变进行了HPV6、11、42等低危型及16、18、31、33、39、45、52、56、58等高危型DNA检测。结果 330例的尖锐湿疣组织中:274例为HPV6/11型(83.0%),46例为HPV16/18型(13.9%);250例上皮内瘤变病变组织中,8例为HPV6/11型(3.2%),167例为HPV16/18型(66.8%)。结论尖锐湿疣感染的HPV类型以HPV6、11为主,上皮内瘤变病变HPV类型以HPV16、18为主。     

A high throughout assay for human papillomavirus genotypes with fluorescence polarization

Objective To develop a simple, cheap, quick, accurate and practical method for a high throughout genotypes assay of human papillomavirus (HPV) DNA.Methods Crude DNA was extracted by a simplified proteinase K digesting method. HPV common conservative primers: GP5 /6 system was used to amplify HPV DNA in 127 samples of condylomata acuminatum (CA) and cervical scrapes by PCR, then the PCR product was assayed using a template directing terminator incorporation (TDI) and genotypes were detected with fluorescence polarization (FP). Major HPVs type-specific probes (HPV6, 11, 16, 18, 31, 33, 35 and 58) designed by us were hybridized with the specific PCR products and a special fluorescent ddNTP terminator was directly added to the end of the probe under direction of specific PCR products.The results were measured with FP and compared with the results of the DNA sequence.Results Compared with the results of DNA sequencing, the results detected with fluorescence polarization were all correct. The proposed method could detect more than one type of HPV infection,but DNA sequencing method could not. The positive rate of HPV was 100% in 78 CA biopsies.Among them, there were 14 HPV double infections [HPV6B and 11(9 cases), HPV11 and 16(4),HPV11 and 18(1)], 5 HPV triple infections [HPV6B,11 and 16(4), HPV11,16 and 18(1)], and one HPV quadruple infection (HPV6B, 11,16 and 18). The positive rate of HPV was 77% in the 49cervical scrapes. Six HPV double infections [HPV6B and 11(2), HPV11 and 16(1), HPV6B and 16(1), HPV16 and 18(1), HPV18 and 58 (1)], 3 HPV triple infections [HPV6B, 11 and 16(2),HPV11,16 and 18(1)] and one HPV quadruple infection (HPV6B,11,16 and 18) were detected incervical cancer scrapes.Conclusions The proposed method allowed a high throughout, special, simple, rapid, automatic and economical detection of HPV-DNA genotyping without a use of labeling probes. It can detect multiple HPV genotype infection and will be and useful tool in HPV genotype screening.     

用生物素标记的DNA探针检测尖锐湿疣和宫颈癌中的人类乳头瘤病毒DNA序列

用生物素标记的HPV6/11DNA和HPV16/18DNA探针,对尖锐湿疣和宫颈癌标本进行原位杂交。结果大多数尖锐湿疣含HPV6/11DNA,所以尖锐湿疣的主要致病因子是H2V6/11.HPV6/11DNA阳性细胞主要位于上皮的表层,少数位于深层。个别合并HPV16/18感染,或仅为HPV16/18所感染的病人恶变的可能性大。大多数宫颈癌病人含HPV16/18DNA,提示宫颈癌的主要致病因子为HPV16/18。一些病人合并HPV6/11感染。在未找见HPV16/18DNA的病例中,可能存在其它致癌因子。     

湘潭地区尖锐湿疣人乳头瘤病毒感染的分型研究

目的了解湘潭地区尖锐湿疣(Condyloma Acuminatum,CA)患者感染人乳头瘤病毒(hunan papilooma virus,HPV)的基因类型及分布。方法分别用原位杂交(In situ hybridization,ISH)和免疫组化(immunohistiochemistry,IHC)方法对临床和/或病理组织学诊断CA的266例病例进行检测。结果 IHC检测HPV-P阳性166例,HPV-16阳性32例,总阳性率为65.41%(174/266),阳性细胞主要分布在棘细胞上层及颗粒细胞层;ISH检测HPV6/11阳性235例,HPV16/18阳性42例,HPV16/18阳性的42例中有24例合并有HPV6/11阳性。ISH总阳性率为95.11%(253/266),HPV6/11、HPV16/18同时感染57.14%,阳性细胞广泛出现在棘层中上层、颗粒层及角化不全细胞核内。结论本地区CA以HPV6/11感染为主,少数为高危型HPV16/18型;有较高的混合感染率。两种检测方法相比较,原位杂交技术阳性率和阳性细胞数均显著高于免疫组化技术,因此是诊断和研究CA的较好和先进的方法。