神经生长因子对糖尿病大鼠背根神经节神经细丝蛋白变化的 …

观察神经生长因子对糖尿病神经病变的治疗作用。方法采用免疫组织化学染色结合电子计算机图像分析技术，测定糖尿病大鼠根神经节的结构蛋白－神经细丝蛋白的相对含量。结论：ＮＧＦ可促进感觉神经结构蛋白的表达，有益于糖尿病周转神经病变的恢复。     

关节炎大鼠背根神经节细胞的膜电生理学特征

目的:研究炎症大鼠背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)细胞的膜电生理学特征,试图解释炎症痛敏的机制.方法:应用全细胞膜片箝电流箝制技术,对急性分离的大鼠DRG细胞进行电流箝制.以完全弗氏佐剂诱发大鼠关节炎,分别取炎症痛急性期(24～72 h)和慢性期(2～3周)大鼠腰5、腰6 DRG细胞进行研究.结果:炎症痛急性期小型DRG细胞与对照组比动作电位的阈值增加8%(P＜0.01),小型及中型DRG细胞的动作电位的时程加宽75%和68%(P＜0.01),小细胞的细胞膜固有电阻增加25%(P＜0.05);炎症痛慢性期大鼠小DRG细胞动作电位的阈值增加(7%,P＜0.01),时程增加23%(P＜0.01),固有电阻下降24%(P＜0.01),而中型DRG细胞膜电特性无显著变化.结论:DRG细胞动作电位的时程加宽,促进了伤害性信息引起DRG细胞突触前膜Ca2+内流介导的递质释放,这可能是引发动物炎症痛敏的主要原因.     

电针对糖尿病神经痛大鼠背根神经节磷酸化P38丝裂原活化蛋白激酶的干预作用

目的 观察电针对糖尿病神经痛大鼠背根神经节磷酸化（DRG）P38丝裂原活化蛋白激酶（p-p38MAPK）表达的影响。 方法 将20只健康雄性SD大鼠随机分为空白组（n=6）、造模组（n=14）,造模组大鼠采用单次腹腔注射链脲佐菌素（65mg/kg）建立糖尿病神经痛模型,造模成功的12只大鼠随机分为模型组和电针组（n=6）;电针组于2周后介入电针,取双侧足三里和昆仑穴,1次/日,30 min/次,干预1周。测大鼠造模前、模后1周、模后2周、模后3周机械痛阈（PWT）,采用免疫荧光法检测大鼠腰4至腰6背根神经节中p-p38MAPK阳性细胞表达。 结果 1）与空白组比较,模后1周模型组和电针组大鼠PWT无显著性差异,模后2周、模后3周模型组大鼠PWT显著降低（P＜0.05）;与模型组比较,模后3周电针组大鼠PWT显著升高（P＜0.01）;2）与空白组比较,模型组大鼠腰4至腰6背根神经节上的p-p38MAPK阳性细胞个数表达显著升高（P＜0.05）;与模型组比较,电针组大鼠腰4至腰6背根神经节上的p-p38MAPK阳性细胞个数表达显著降低（P＜0.05）。 结论 电针对糖尿病神经痛大鼠有良好的镇痛效果,其机制可能和抑制背根神经节神经元上p-p38MAPK阳性细胞表达相关。     

电针对糖尿病大鼠背根神经节辅助激活因子PGC-1α表达的影响

目的 观察电针对糖尿病大鼠背根神经节辅助激活因子PGC-1α的表达的影响.方法 制作糖尿病大鼠模型,造模后第8周,将大鼠随机分为模型组、电针组、正常组,每组10只,电针治疗14d后,取3组大鼠L4～6背根神经节,用逆转录聚合酶链反应与Western-Blot法检测PGC-1α mRNA表达及PGC-1α蛋白表达水平.结...     

髓核突出导致大鼠痛觉改变及背根神经节交感神经芽生

目的 观察单纯自体髓核突出情况下是否可以造成背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)内交感芽生现象的发生,并引起大鼠痛阈变化.方法 雄性SD大鼠110只,按随机数字表法分为正常组、手术组和假手术组,正常组10只,手术组、假手术组术后2、5、7、14、20 d5个时间点,各时间点10只.手术组将鼠尾近端椎间髓核取出后移植于大鼠L5 DRG表面,制成无机械性压迫的单纯髓核突出模型.假手术组仅通过手术暴露L5 DRG,并不进行髓核移植.不同时间点监测大鼠的机械性痛阈与热痛阈,并处死、灌注固定.将固定后的术侧DRG取出、切片,用酪氨酸羟化酶(TH)抗体进行交感神经免疫组化染色,光学显微镜拍照后通过图像处理软件检测DRG内交感神经的数量、密度.结果 手术组大鼠自体髓核移植术后,有明显行为学改变,大鼠术侧后足机械性痛阈和热痛阈明显降低,术后7、14、20 d痛阈水平均明显低于假手术组和正常组(P＜0.05).同时,手术组术侧DRG内交感神经数量在术后5、7、14、20 d均显著高于假手术组和正常组(P＜0.01).术后20 d,手术组DRG内交感神经数量[(19.70 ±2.67) mm/mm2]明显高于假手术组[(2.75 ±2.20) mm/mm2]和正常组[(1.11 ±1.07)mm/mm2,P＜0.01].结论 大鼠通过单纯自体髓核刺激DRG即可引起DRG内交感神经芽生,并可以引起同侧肢体痛阈降低.     

糖尿病大鼠背根神经节神经元TTX-R钠离子通道电流变化及意义

目的:通过研究大鼠糖尿病神经病理性疼痛(DNP)中背根神经节(DRG)神经元TTX-R钠离子通道特征的变化,以探讨此疾病引起痛觉过敏可能的发生机制。方法:8只SD大鼠腹腔注射链尿佐菌素诱导制作糖尿病神经病理性疼痛模型(DNP组),取L5⁶DRG,贴壁消化法行神经元培养,电生理全细胞膜片钳记录离子通道电流;8只同月龄大鼠为正常对照。结果:大鼠糖尿病神经病理性疼痛小直径DRG神经元TTX-R INa电流密度较对照组增高。与对照组比较激活曲线向超极化移动3.9 mV(P<0.05),DNP组具有重复放电的神经元的比率增加。结论:大鼠糖尿病神经病理性疼痛小直径DRG神经元TTX-R钠通道电流的变化是痛觉过敏形成的原因之一。     

周围神经损伤后大鼠背根神经节细胞NMDA受体表达的可塑性改变

目的 观察外周神经切断后初级感觉神经元内N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体表达的改变。方法 采用免疫细胞化学技术显示背根节内NMDAR1（NMDAR1-LI）阳性细胞数。结果 坐骨神经切断后大鼠腰段背根节内NMDAR1的表达显著下调。结论 外周神经损伤后，初级感觉神经元NMDA受体发生可塑性改变，提示脊髓内谷氨酸递质活动的改变。     

坐骨神经缺损1周背根神经节组织中microRNA的表达变化

目的：研究大鼠坐骨神经缺损后背根神经节中microRNA（miRNA）的表达变化。方法：采用miRNA芯片检测神经缺损0 d（对照组）和7 d（实验组）背根神经节组织中miRNA的表达情况,应用Real time Taqman PCR对芯片结果进行验证。结果：实验组与对照组比较发生上调1.4倍和下调〉1%以上的miRNA分别有13个和5个,Real time TaqmanPCR检测的4个miRNA的表达变化与芯片一致（上调：miR-21,miR-221;下调：miR-500,miR-551b）。结论：大鼠坐骨神经缺损1周后背根神经节组织中miRNA的表达谱发生改变。     

神经病理性痛大鼠背根神经节P2X3受体表达及电生理学特性的改变

目的 观察坐骨神经缩窄性损伤(CCI)致神经病理性痛后大鼠背根节神经元P2X3受体的表达和电生理学特性的变化.方法 应用免疫组化技术观察CCI后不同时间相应节段(L4、L5、L6)脊髓及背根神经节P2X3受体表达的变化;全细胞膜片钳技术观察CCI后不同时间L4、L5、L6节段背根节神经元ATP反应电流的变化.结果 CCI后7、14 d,损伤同侧L4、L5、L6节段背根节P2X3免疫阳性神经元数量明显增加,而且染色加深,相应节段的脊髓背角浅层P2X3免疫反应性亦明显增加.CCI后7、14 d,损伤同侧相应节段背根节产生ATP快反应电流的细胞数量明显增加,电流幅度亦增强.应用非选择性P2X受体拮抗剂Suramin能明显抑制ATP反应电流.结论 坐骨神经缩窄性损伤致神经痛后同侧对应节段的背根节神经元P2X3受体表达明显增加,ATP快反应电流明显增强.     

加巴喷丁对糖尿病神经病理痛大鼠背根神经节磷酸化信号转导和转录激活因子3表达的影响

目的：观察加巴喷丁（gabapentin, GBP）对糖尿病神经病理痛大鼠背根神经节磷酸化信号转导和转录激活因子3（p-STAT3）表达的影响。方法80只成年健康雄性SD大鼠,随机分为正常组（Control 组）、糖尿病神经病理痛组（ DNP组）、生理盐水＋DNP组（ SC＋DNP组）和加巴喷丁＋DNP组（ GBP＋DNP组）,每组20只。采用链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病神经病理痛大鼠模型;SC＋DNP组和GBP＋DNP组于STZ注射15天起分别腹腔注射生理盐水或GBP 50 mg/kg,1次/d,连续7天;采用行为学测试测定STZ注射前1天及注射后3、7、10、14、21、28天大鼠缩足反射机械刺激阈值（PWMT）和缩足反射热辐射潜伏期（PWTL）,免疫组化方法检测大鼠背根神经节（DRG）中p-STAT3的表达。结果与Control 组比较, DNP组PWMT〔（3．8±0．84） g〕降低、PWTL〔（5．9±0．94） s〕缩短,DRG中p-STAT3蛋白的表达上调（P＜0．05）;与DNP组比较, SC＋DNP组大鼠在腹腔注射生理盐水后,PWMT〔（4．03±0．5） g〕、PWTL〔（6．2±0．7） s〕和p-STAT3蛋白的表达无明显改变（P＞0．05）;与DNP组和SC＋DNP组比较, GBP＋DNP组PWMT〔（8．4±0．87） g〕升高,PWTL〔（10±1．2） s〕延长, DRG中p-STAT3蛋白的表达下调（P＜0．05）。结论 GBP能减轻大鼠糖尿病神经病理痛,其机制可能与抑制p-STAT3的表达水平有关。     

Electrophysiological and relevant morphological properties of neurons in toad dorsal root ganglion

Summary Intracellular recordings were performed on isolated preparations of toad dorsal root ganglion (DRG). Of the 87 neurons examined, 83 were of type A cells and 4 of type C cells. The conduction velocity (CV) of type A cells ranged from 2.55 to 35.19 m/s with a mean of 11.18±0.78 m/s (x ± s x), while that of type C cells ranged from 1.34 to 2.43 m/s with a mean of 2.11±0.22 m/s (x ± s x). On the basis of tne characteristics of Ap configuration, these 87 cells can be classified into three groups: H neuron (24/87); F neuron (50/87) and F-H neuron (13/87). The Sizes of DRG cells were examined by measuring of HRP labelled cells in part of the experiment. By comparing the size of F and H cell with tneir CV, we proposed a revised view which is against the public opinion concerning the relation between tne size and CV of DRG cells.     

罗哌卡因对CCI模型鼠DRG神经元GABA 激活膜电流的影响

目的观察罗哌卡因对坐骨神经慢性压榨损伤(CCI)模型大鼠的背根神经节(DRG)神经元γ-氨基丁酸(GABA)激活膜电流的影响,探讨罗哌卡因可能存在的镇痛机制。方法运用全细胞膜片钳技术,分3组记录CCI模型大鼠手术侧、手术对侧及假手术组急性新鲜分离的DRG神经元在预灌流罗哌卡因30s后,GABA受体激活电流(IGABA)的变化。结果 (1)与手术对侧、假手术组及对照组比较,CCI模型大鼠手术侧组的热缩足潜伏期显著缩短(P<0.05);(2)CCI手术对侧组DRG神经元上不同浓度(0.1~1 000μmol/L)GABA激活电流幅值显著大于手术侧组和假手术组;(3)预灌流罗哌卡因(0.1~1 000μmol/L)后CCI模型大鼠手术侧组、手术对侧及假手术组DRG神经元对100μmol/L GABA激活电流均表现为不同程度的增强作用,并且CCI手术对侧组的增强幅度显著大于手术侧组和假手术;(4)预灌流100μmol/L的罗哌卡因后CCI模型大鼠手术侧组DRG神经元GABA(0.1~1 000μmol/L)激活电流的量效曲线左移,两EC50之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论罗哌卡因对CCI模型大鼠DRG神经元GABA激活电流具有增强作用,可能是罗哌卡因产生麻醉和镇痛作用的原因之一。     

背根节压迫大鼠脊髓背角广动力神经元电生理学特性研究

目的探讨大鼠腰4、5背根神经节慢性压迫（chronic compression of dorsal root ganglion,CCD）损伤后,脊髓背角广动力（widedynamicrange,WDR）神经元电生理学特性的改变。方法健康SD大鼠随机分为正常组和CCD组（每组12只）,分别检测机械痛敏和热痛敏行为,并利用在体细胞外电生理学方法记录脊髓背角WDR神经元放电。结果CCD术后大鼠出现了机械痛敏和热痛敏行为。与正常组大鼠相比,CCD组大鼠脊髓背角WDR神经元兴奋性增高,表现为有自发放电的神经元比例增加、放电频率增加,对外周感受野轻刷、钳夹等刺激的反应性增强。36．36％（12／33）的CCD组大鼠WDR神经元对Aβ纤维刺激出现后放电现象。结论大鼠腰4、5背根节慢性压迫后引起WDR神经元的兴奋性增加,其可能参与神经病理性疼痛的发生。     

乌头碱对受损背根节神经元自发放电的作用

目的：研究钠通道失活门抑制剂乌头碱(aconitine)对受损背根节(DRG)神经元不同模式的背景放电的作用．方法：在大鼠DRG慢性压迫模型上记录A类单纤维自发放电,观察和分析乌头碱作用下动作电位峰峰间期序列(isi)的变化及特征．结果：在大鼠L5DRG浸浴乌头碱(10～200μmol／L)后,80％簇放电(bursting)和70％不规则放电(irregular)逐渐转化为持续的周期放电;91％周期放电(period)只表现为放电频率的不断增加,并没有发生放电模式的转化．对于静息的神经元,乌头碱则不能引发放电．结论：在阻断钠通道失活门之后,受损DRG神经元的自发放电可以发生模式转化,并且乌头碱对DRG神经元的作用具有活动依赖性．     

慢性压迫背根节神经元肾上腺素能敏感性的间接偶联机制

进一步研究损伤初级感觉神经元交感－感觉偶联作用的神经机制。方法：利用背根节慢性压压模型,采用离体灌流ＤＲＧ和单纤维记录神经元的自发放电。结果：当外源性去甲肾上腺素（ＮＥ,１０μｍｏｌ／Ｌ）浸浴损伤ＤＲＧ时,在９５个神经元中有８５个有自发放电的神经元产生明显反应。８５个神经元中,４４个呈现单纯兴奋效应;２１个表现先兴奋后抑制效应;６个出现兴奋－抑制交替振荡现象;１４个表现抑制效应;６个出现兴奋－抑制     

炎性痛大鼠脊髓和背根节P2X_3受体的表达变化

目的观察足底皮下注射角叉菜胶致炎后大鼠行为学及脊髓背角和背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)P2X3受体表达的变化。方法通过热辐射刺激法及von Frey纤维丝测定大鼠痛阈,应用免疫组化技术观察足底皮下注射角叉菜胶后不同时间其相应节段(L4～L6)脊髓及背根神经节P2X3受体表达的变化。结果足底皮下注射角叉菜胶后动物出现热痛敏和机械性痛敏,热痛阈和机械痛阈均下降,于12 h达最低,72 h后恢复至正常水平。免疫组化显示相应节段(L4～L6)脊髓背角P2X3受体免疫反应在注射角叉菜胶24 h后明显增强(P<0.01),72 h表达强度最高,168 h恢复至正常,并且相应节段背根神经节P2X3受体阳性神经元数12 h开始明显增加(P<0.01),持续至72 h,168 h恢复至正常。结论角叉菜胶所致炎性痛大鼠,脊髓背角和背根神经节P2X3受体活化,表达明显上调,表明P2X3受体在炎性痛的发生、发展中起重要作用。     

Effect of acetylcholine on membrane potential in toad dorsal root ganglion neurons and its underlying ionic basis

Intracellular recordings were made to investigate the responses of membrane potential to acetylcholine (ACh) on neurons in isolated toad dorsal root ganglion (DRG). In the 73 neurons examined, 67 were of type A, and the remaining 6 of type C cell. The resting membrane potential of these two types of cells was −67.5±1.3 mV (× ±SE). During the application of ACh (4 × 10^-4–6 × 10^-4 mol/L), the changes in membrane potential were as follows: 1) hyperpolarization, with amplitude of 9.1±3.0 mV (X ± SE; n = 23); 2) depolarization, with amplitude of 12.9 ±2.2 mV (X ±SE; n = 20); 3) biphasic response, i.e., hyperpolarization with amplitude of 8.0±2.4 mV (X±SE) followed by depolarization with amplitude of 10.9±2.1 mV (X±SE) (n=24); no effect (n=6). The hyperpolarization induced by ACh was blocked by superfusion with atropine (1.3 × 10^-5 mol/L; n = 23), while ACh depolarization was blocked by the mixture of d-tubocurarine (1.4 × 10^-5 mol/L) and hexamethonium (1.4 ×10^-5 mol/L) (n = 18). When ACh caused hyperpolarization, the membrane conductance wascin reased by 13.8% and the reversal potential was about -96 mV (n=3). TEA (20 mmol/L) superfusion enhanced ACh depolarization amplitude by 48.2 ±3.2 % (× ± SE;n = 6), and depressed ACh hyperpolarization amplitude by 79.4 ±4.3 % (× ± SE; n= 8).MnCl₂ (4 mmol/l) superfusion decreased the amplitudes of ACh depolarization and hyperpolarization by 54.2 ±7.2 % (X ±SE; n= 5) and by 69.2±6.4 % (X±SE; n = 14) respectively. These results suggest that the depolarization and hyperpolarization induced by ACh are mediated by nicotinic and muscarinic receptors on the soma of toad DRG neurons separately, and it seems that ACh hyperpolarization involves activation of calcium-activated potassium conductance.     

缺氧对小鼠背根神经节细胞IK电流的影响

目的:探讨氧感受过程参与对钾通道调制的假设。方法:应用新鲜分离的小鼠背根神经节小细胞,采用全细胞膜片钳记录IK电流。结果:当小细胞缺氧时,钾通道在3 min之内即可发生变化,表现为绝大多数(86%,6/7)细胞的IK减弱,1个细胞(14%,1/7)的IK电流增强;缺氧1 min时IK减弱,3 min时产生最大抑制。当测试电位从 10 mV至 70 mV时,急性缺氧显著性降低IK,IK电流密度降低最大幅度从(304.4±122.9)降为(253.9±106.4)pA.pF-1,但IK稳态激活曲线无明显变化。结论:急性缺氧抑制小鼠背根神经节小细胞IK电流,而IK电流的抑制作用可能是外周神经细胞对缺氧的一种适应和保护机制。