解整合素金属蛋白酶19/ADAM19在子痫前期胎盘组织中的表达及其对滋养细胞分泌MMPs的调节

目的通过对子痫前期及正常孕妇胎盘组织中解整合素金属蛋白酶19（ADAM19）的检测及ADAM19对绒毛滋养细胞分泌MMP2,9的调节,探讨ADAM19与子痫前期发病的关系。方法应用免疫组织化学（免疫组化）链霉素抗生物素-过氧化物酶法、免疫印迹技术和RT-PCR技术检测24例正常胎盘组织及46例子痫前期（其中26例为重度子痫前期,20例为轻度子痫前期）胎盘组织中ADAM19蛋白及mRNA的表达;用明胶酶谱方法检测抗ADAM19抗体作用后滋养细胞MMP2,9的分泌变化。结果胎盘组织中,ADAM19主要分布在多种滋养层细胞中,包括细胞滋养层细胞、合体滋养层细胞一和些绒毛间质结缔组织细胞、毛细血管中,其阳性信号不仅定位于细胞膜上,在细胞质中也有分布。正常胎盘中ADAM19的蛋白表达量为0.372±0.016,重度和轻度子痫前期组ADAM19蛋白定量分别为0.766±0.029和0.693±0.041,轻、重度子痫前期组分别与正常组比较,差异均有统计学意义（P〈0.01）,轻度子痫前期与重度子痫前期比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。ADAM19mRNA在正常组胎盘中的量为0.205±0.084,在重度和轻度子痫前期组中分别为0.481±0.057和0.454±0.033,轻、重度子痫前期组分别与正常组比较,差异均有统计学意义（P〈0.01）,轻度子痫前期与重度子痫前期比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。在体外培养的滋养层细胞中,100μg/L浓度的抗ADAM19抗体在作用12h即可以抑制滋养细胞MMP2,MMP9的分泌,其作用呈浓度依赖。结论子痫前期胎盘组织中ADAM19过表达可能与子痫前期的发生和发展有关;在子痫前期的发生中,ADAM19可能是在妊娠早期抑制滋养细胞的浸润而导致胎盘浅着床的。     

自然流产绒毛中Bax、Bcl-2表达情况的研究

目的　研究促 /抑凋亡基因Bax/Bcl- 2在自然流产绒毛中的表达以探讨其对自然流产发生发展的作用。方法　对 4 0例早孕人工流产病例 (对照组 )和 4 0例早孕自然流产病例 (观察组 )的绒毛组织进行分析 :用免疫组织化学方法 (S -P法 )检测促 /抑凋亡基因Bax和Bcl- 2的表达。结果　对照组绒毛组织中Bax表达率为 2 0 2 1%± 3 70 % ,Bcl- 2为 2 0 91%±7 6 9% ;观察组绒毛组织中Bax表达率为 5 0 4 6 %± 11 70 % ,与对照组相比 ,差异具有高度显著性 (P <0 0 1) ,Bcl- 2为 2 3 34%± 7 78% ,与对照组相比 ,差异无显著性 (P <0 0 5 )。即 :人工流产组和自然流产组绒毛组织中都有一定量的Bax、Bcl- 2表达 ,自然流产组中Bax基因的表达增强。结论　Bax基因对自然流产的发生发展起着重要的作用     

解整合素-金属蛋白酶12与自然流产的相关性研究

目的探讨解整合素-金属蛋白酶12与自然流产的相关性。方法利用时间分辨检测技术,对1160例孕妇血清中ADAM12进行了检测,其中正常妊娠组1064例,自然流产96例。结果正常妊娠组血清中ADAM12含量随孕龄的进展稳定增加,自然流产组ADAM12含量明显低于同孕周正常妊娠组,差异有统计学意义(P0.05)。结论孕妇ADAM12的检测在预测自然流产方面有较高的准确性,在异常妊娠检测方面有较大的临床价值。     

早孕绒毛滋养细胞FasL表达异常与自然流产的关系

通过比较正常早孕与自然流产者滋养细胞表面FasL表达,进一步从分子免疫学角度探讨自然流产的发病机理。方法：用特异性的FasL抗体进行免疫组化染色,并通过高清晰彩色病理免疫组化测量系统对其定量分析,SSPS对两组进行比较。结果：自然流产组滋养细胞表面FasL表达面积及强度均明显低于正常早孕组,两者间差异有显著性意义。结论：滋养细胞表面FasL表达减少,引起母胎间的免疫耐受的破坏,是导致自然流产的一重量免疫病因,诱导FasL的产生或调节母胎间的免疫耐受将为临床治疗自然流产提供新的方向。     

早期自然流产胎盘绒毛基质金属蛋白酶-2表达增强

早期自然流产(early spontaneous abortion)是指妊娠12周内胚胎或胎儿在宫内停止发育而排出的病理性妊娠,发生率占全部自然流产的62%以上。胎盘形成过程中,滋养层细胞对子宫蜕膜的侵入及对子宫螺旋小动脉的“血管重铸”是胎盘建成的关键步骤。基质金属蛋白酶(matrix metallopro-teinases,MMPs)是一组含有Zn2 能降解绝大多数细胞外基质(extracellular,ECM)的肽链内切酶。研究证实,MMP-2和9是恒河猴滋养层细胞侵入子宫内膜和胎盘形成的关键因子[1],但对人早期自然流产过程中的表达情况尚未见报道。本研究首次采用明胶酶谱法研究早期自然流…     

紧密连接蛋白Occludin在早孕绒毛组织中的表达及其意义

背景：Occludin蛋白是否在人早孕期胚泡植入中发挥作用,目前尚不能确定。 目的：探讨紧密连接蛋白Occludin在早孕绒毛组织中的表达及意义。 方法：早孕的正常人流绒毛组织和稽留流产绒毛组织各30例,用半定量RT-PCR,Western blot和免疫组化表达等各方法验证紧密连接蛋白Occludin在各组绒毛组织中的表达。 结果与结论：紧密连接蛋白Occludin主要表达在于绒毛外的合体滋养细胞的胞浆,胞核和少许间质,细胞滋养细胞Occludin表达低。半定量RT-PCR,Western blot和免疫组化表达等各方法验证紧密连接蛋白Occludin在正常人流和稽留流产绒毛组织中均有表达,前者的表达低于后者,但差异无显著性意义(P > 0.05)。说明紧密连接蛋白Occludin在绒毛组织有表达,细胞滋养细胞Occludin低表达可能是细胞滋养细胞极性消失的原因之一,参与细胞滋养细胞浸润能力形成,但胚胎发育停滞并不单是细胞滋养细胞侵润能力不足引起。     

CXCR2在不明原因自然流产患者绒毛和蜕膜组织中的表达

目的研究CXCR2在不明原因自然流产患者绒毛及蜕膜组织中的表达情况。方法应用免疫组织化学染色和图像分析技术,观察CXCR2在不明原因自然流产患者（病例组）和正常人工流产者（对照组）绒毛及蜕膜组织中的表达情况;HE染色后光镜下观察不明原因自然流产患者绒毛与蜕膜组织的形态学变化。结果免疫组化染色结果显示：两组CXCR2蛋白主要表达于绒毛的滋养层、蜕膜组织中的腺体,病例组绒毛滋养层和腺体CXCR2蛋白表达均强于对照组,两组比较,有显著性差异（P〈0.01）。病例组蜕膜细胞CXCR2蛋白呈阳性表达,对照组呈阴性;HE染色可见不明原因自然流产患者绒毛组织的滋养层变薄、滋养层细胞变性甚至坏死、滋养层嗜酸性增强、绒毛中轴纤维化程度增强;蜕膜组织中蜕膜细胞连接松散、蜕膜细胞空泡化、蜕膜组织中有大量炎细胞浸润。结论 CXCR2可能通过与其配体白细胞介素-8结合而参与不明原因自然流产的病理过程。     

白血病抑制因子在正常早孕、稽留流产蜕膜绒毛中表达的初步临床研究

目的探讨白血病抑制因子（LIF）在正常早孕、稽留流产蜕膜绒毛组织中的表达,及其与稽留流产发生的关系。方法采用免疫组化技术-链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶连接（SP）法对白血病抑制因子（UF）在2组妇女绒毛蜕膜组织中的表达进行组织学定位和表达强弱度分析。通过病理图像分析仪对图片进行观察,并运用所附分析系统软件测量各组平均光密度值（IOD）。采用放射免疫法检测正常早孕妇女（正常早孕组,20例）、稽留流产患者（稽留流产组,25例）血清人绒毛膜促性腺激素（β—hCG）及孕酮（P）水平。结果（1）孕酮及hCG水平在2组孕妇间的比较：正常早孕组孕妇血清中孕酮、hCG水平分别为（37．5±15．2）ng／mL、（9005,8±2134．9）mIU／L,稽留流产组孕妇分别为（19．1±11．6）ng／mL、（3120．3±1213．2）mIU／L,两组孕妇血清孕酮、hCC水平比较,有显著性（P〈0．01）;（2）LIF平均相对含量在2组孕妇蜕膜、绒毛组织中的比较：正常早孕组孕妇分别为0．38±0．15,0．36±0．11;稽留流产组孕妇分别为0．20±0．17,0．18±0．13。正常早孕组与稽留流产组比较,差异有显著性（P〈0．05）。结论LIF在稽留流产蜕膜绒毛组织中的表达量降低,可能是导致hCG及孕酮分泌下降,最终造成稽留流产的原因之一。     

瘦素、纤连蛋白对早孕绒毛滋养细胞分泌基质金属蛋白酶的影响

目的探讨瘦素、纤连蛋白对早孕绒毛滋养细胞分泌基质金属蛋白酶的影响及其作用。方法从孕6-8周的人工流产胚胎绒毛中分离、纯化出细胞滋养细胞(CTB)体外培养,在transwell上室CTB培养液中分别加入不同浓度lep-tin,在transwell下室中加入50μg/mlFN,采用明胶酶谱分析法检测培养液中CTB分泌的MMP-2、MMP-9值并进行比较。结果FN组、协同组分泌的MMP-2,9显著高于对照组(P0.05),协同组又高于单加leptin或FN组(P0.05)。结论leptin、FN均具有促进CTB分泌MMPs的作用,且leptin与FN协同作用,更加强了CTB对MMPs的分泌,从而参予调控CTB的浸润能力。     

绒毛中TRAIL及其受体的表达与不明原因反复自然流产的相关性的探讨

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体TRAIL及其受体在不明原因早期反复自然流产患者(URSA)绒毛中的表达及二者的相关性。方法选择实验组妊娠45～60 d的URSA患者15例,对照组健康人工流产15例。两组分别取绒毛组织采用免疫组化法检测TRAIL及其受体的表达,进行方差分析和t检验比较两组绒毛组织中TRAIL及其受体蛋白表达水平的差异。结果实验组绒毛组织中TRAIL及其受体DR4、DR5蛋白表达较强,而诱骗受体DcR1及DcR2蛋白与正常对照相比表达较少,P值均小于0.05。结论TRAIL及其受体可能是造成自然流产的机制之一。     

ADAM12与PAPP-A联合检测与自然流产相关性研究

目的探讨解整合素-金属蛋白酶12(ADAM12)和妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)联合检测与自然流产的相关性。方法利用时间分辨检测技术,对2756例孕妇血清中ADAM12和PAPP-A进行了检测,其中正常妊娠组2660例,自然流产96例。结果正常妊娠组血清中ADAM12和PAPP-A含量随孕龄的进展稳定增加,自然流产组ADAM12和PAPP-A含量明显低于同孕周正常妊娠组,差异有统计学意义(P0.01)。结论孕妇ADAM12和PAPP-A联合检测在预测自然流产方面有较高的准确性,在异常妊娠检测方面有较大的临床价值。     

629例难免流产患者绒毛染色体分析及病因研究

目的收集难免流产患者绒毛染色体核型结果,探讨绒毛染色体异常原因。方法收集629例早孕难免流产绒毛染色体结果并分类;采取问卷调查,分析对绒毛染色体畸变的影响。结果①绒毛染色体正常348例（55．3％）,异常281例（44．7％）。数目异常246例,结构异常35例。②绒毛染色体异常的122对夫妻的外周血染色体中异常核型25例,占10．3％。③绒毛染色体异常组女方的生活／工作环境、不良孕产史、每周工作时间、每周熬夜频率、每天电脑使用时间、酗酒与绒毛染色体正常组有差异（P〈0．05或P〈0．01）。结论①染色体数目异常在异常绒毛染色体核型中比例最高,是导致胚胎早期难免流产的主要原因。②染色体发生突变是绒毛染色体异常的主要来源。（9工作／生活环境、高不良孕产次与绒毛染色体异常相关。     

miR-145 suppressed human retinoblastoma cell proliferation and invasion by targeting ADAM19

MicroRNAs (miRNAs) play critical roles in retinoblastoma (RB) initiation and progression, aberrant expression of miR-145 had been frequently reported in cancer studies. However, the role and mechanism of its function in RB is still unclear. In this study, our data showed that miR-145 was downregulated in RB tissues and cell lines. Overexpression of miR-145 suppressed RB cell proliferation, migration and invasion in vitro. ADAM19 was identified as a direct target of miR-145. Silencing of ADAM19 significantly inhibited RB cell proliferation, migration and invasion. In addition, a reverse correlation between miR-145 and ADAM19 expression was noted in RB tissues. Taken together, these findings suggested that miR-145 functions as a tumor suppressor in RB by directly targeting ADAM19. miR-145 could be an anticancer therapeutic target for RB patients.     

染色体多态性与不孕不育及自然流产关系的探讨

目的通过研究染色体多态性进一步了解其对不孕不育及自然流产的影响。方法对1409例门诊病人进行染色体核型分析。结果45例染色体多态性中9号臂间倒位21例，占46．7％；15ps＋5例，占11．1％；小Y8例；大Y7例，16号染色体和1号染色体次缢痕增加各2例。结论染色体多态性可能与不孕不育及自然流产具有相关性，临床医生在遗传咨询中应重视。     

套式聚合酶链反应检测自然流产组织中人细小病毒B19

目的进一步了解我国胎儿人细小病毒Ｂ１９的感染状况及其与自然流产之间的关系。方法用所建立的套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对５０例新鲜的和６６例石腊包埋的自然流产组织及２５例同期健康孕妇人工流产组织进行人细小病毒Ｂ１９ＤＮＡ检测。结果显示病例组有３４例阳性，阳性率为２９．３％，而正常对照组有１例阳性，阳性率为４％。经统计学检验有显著性差异。结论可能人细小病毒Ｂ１９感染与自然流产有一定关联。人细小病毒Ｂ１９可能是致自然流产的重要因素之一     

539例流产绒毛的荧光原位杂交技术结果分析

目的探讨荧光原位杂交技术在检测染色体数目异常与自然流产的关系及影响因素。方法应用荧光原位杂交技术对539例早期自然流产绒毛进行染色体数目异常检查及其与患者的年龄、流产次数之间的联系。结果539例流产绒毛标本中,共检测出133例染色体数目异常,其中常染色体三体最多,共计81例（60.9％）;性染色体数目异常22例（16.5％）;多倍体30例（22.5％）;绒毛染色体数目异常与正常年龄组和高龄组之间的比较,高龄组异常发生率高;而流产次数3次及3次以上的染色体数目异常发生率（29.5％）高于流产次数为2次及2次以下者（20.3％）。结论染色体数目异常是胚胎停育流产的重要因素,其中以常染色体三体为主;胚胎停育与孕妇年龄有关;对于流产次数3次及3次以上的流产患者,建议检查绒毛染色体数目异常很有必要。