高效液相色谱法测定动物试样中氟桂嗪(Flunarizine)

本文报道了用HPLC测定动物试样中的氟桂嗪。方法:取试样(血浆、血清、10%脑组织浆)1ml于10ml离心管中,加0.2M醋酸盐缓冲溶液(pH 9.0)3ml,加内标溶液(脑益嗪10ng/μCH_3oH)20μl,充分混匀后,加0.1N NaOH 90μl调节溶液的pH为9.0～9.1,再加正庚烷4ml混匀,然后进行离心分     

血小板5—羟色胺的荧光测定法

本实验利用5-羟色胺(5-HT)在强酸中与邻苯二甲醛(OPT)反应,产生一种特异性荧光缩合物,建立了血小板5-HT 荧光测定法。我们用该方法测定10名健康人血小饭内及血浆中5-HT 的浓度(619±282ng/10~9血小饭,61±19ng/ml 血浆),不同动物(家兔、豚鼠和犬)的血小板5-HT 浓度(16.3、0.228及1.92μg/10~9血小板)以及各种诱导剂诱导的正常人血小板5-HT 的释放率。     

硝酸异山梨醇酯的血浆浓度测定

本文报道从血浆一步提取测定硝酸异山梨醇酯(ISDN)血药浓度的电子捕获-气相层析法,可供生物利用度和药物代谢动力学研究用的几千个样品的测定。1ml血浆与内标(5μl三硝酸甘油的乙酸乙酯溶液,1μg/ml)混和并与重蒸汽油(10ml)旋转振摇5分钟,离心分层,将上层汽油层完全转移至具塞试管中。于40°、氮气流下蒸发汽油至50μl。取2μl注入气相层析仪。电子捕获(~(63)Ni)气相层析仪为6尺×2.5mm(内径)新玻璃柱,用0F_1(3.5%)涂于Gas Chrom Q担     

反相离子对HPLC法测定人血浆中的氟喹诺酮类药物

本文建立了用反相离子对 HPLC 法测定血浆中三种氟喹诺酮类广谱抗生素药物——诺氟沙星(Ⅰ)、阿米氟沙星(amifloxacin,Ⅱ)和依诺沙星(Ⅲ)的方法。样品制备取血浆样品1ml,加50μl 内标液(吡哌酸,50μg/ml),稍加涡旋后,再加50μl 高氯酸(60％,w/v),并同时涡旋30s,离心(10000×g)10min,取上清液20μl 注入色谱柱中进行测定。色谱条件不锈钢柱(100×2mm,id)匀浆填充5μm 的 ODS Hypersil 作为固定相;流动相为乙腈/水(25:75),其中含10mmol/L Na_2HPO_4、10mmol/L 十二烷基硫酸钠和5mmol/L 溴化四丁基铵,以磷酸调 pH 值至2.0;流速0.5ml/min;荧光检测280nm/418nm。     

HPLC法同时测定血清中苯巴比妥、乙胺嗪和苯妥英

作者用快速、准确、灵敏的HPLC法对血清中苯巴比妥、乙胺嗪、苯妥英及其代谢产物5-(4-羟基苯) -5-苯妥英(HPPH)进行了同时测定.仪器:112型溶剂交换泵.160型UV检测器(检测波长214nm).层析预柱用十八烷基硅烷(ODS)填充(45×4.6mm,id),层析柱用5μm的球形ODS填充(250×4.6mm,id).方法:取50μl含0.5μg 5-(4-甲苯基)-5-苯妥英(内标)的乙腈液加到50μl的血清或血浆中,搅拌10s,然后离心2min,将上清液转入另一试管中,再离心30s,使沉淀颗粒分离完全.取5～10μl的上清液注入     

用柱切换HPLC法测定大鼠、狗及人血浆中的氢氯噻嗪

已有的 HPLC 测定生物液体中氢氯噻嗪(Ⅰ)浓度的方法大多需繁琐的样品处理步骤,采用本文方法,血浆样品可直接注入色谱系统作全自动分析。溶液的制备分别配制1.0mg/ml 的(Ⅰ)和内标氢氟噻嗪(Ⅱ)的甲醇溶液作为贮备液,于-20℃保存。将(Ⅰ)的贮备液用10mmol/L 的磷酸盐缓冲液(pH7.2)稀释至100μg/ml,并以空白血浆(先离心去微粒)进一步稀释制得血浆标准液。以相同缓冲液稀释内标液至1500ng/ml。血浆样品室温解冻后离心(3000rpm,10min)去微粒,将150μl 血浆标准液或样品液与150μl 内标液混合,采用自动进样器将100～200μl 混合液注入 HPLC 仪。色谱系统包括提取柱(两个串联的Guard-Pak C_(18)柱,柱长0.4cm)和串联Guard-Pak C_(18)保护柱的分析柱(HypersilODS,5μm,4.6×250mm),分别联于六孔     

高效液相色谱法测定人血浆中头孢克肟浓度

目的:建立HPLC方法测定人血浆中头孢克肟的浓度。方法:取100μl血浆样品,加乙腈混匀离心,上清液进样;用C18分析柱,以0.02mol/L磷酸氢二钾缓冲液(用磷酸调pH=7.00):乙腈=1:1(V/V)为流动相,流速1.0ml/min,柱温25℃,紫外检测波长288nm,用峰面积定量。结果:标准曲线在0.125～4μg/ml范围内线性关系良好(r=0.9999)最低检测浓度为0.125μg/ml;回收率为100.7%～109.3%,日内RSD﹤5%,日间RSD﹤8%。结论:本法简便,准确,精密,快速,进样量少,可满足临床血药浓度测试要求。     

反相高效液相色谱法测定人血浆中盐酸头孢替安的浓度

目的建立测定人血浆中盐酸头孢替安浓度的反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定法,为临床盐酸头孢替安的药物浓度测定和药动学研究提供科学的分析技术。方法采用安捷伦EclipseXDBC18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,以乙腈:20mM的KH2PO4缓冲液=19:81为流动相,流速1.0ml/min,检测波长254nm,进样量:20μl;血浆样品经乙腈沉淀去蛋白处理后取上清液直接进样。结果该法线性范围为0.4～150.8μg/ml,线性方程为Y=16.21X+1.03,r2=0.9991(n=7),检测浓度为0.2μg/ml,平均绝对回收率为(93.2%±4.6%)(n=18),精密度RSD均小于10%。结论本法简便灵敏,专属性好,适用于临床盐酸头孢替安血药浓度测定和人体药动学研究。     

高效液相色谱法测定盐酸氯丙嗪注射液的含量

目的 采用高效液相色谱测定盐酸氯丙嗪注射液的含量.方法 采用C18(4.6 mumx 250 mm5 μm)色谱柱;流动相:0.1 mol/L磷酸二氢钾(用磷酸调节pH 3.0)-乙腈(55∶45);检测波长254 nm;流速:1.0 ml/min;进样量:20μl;柱温:35℃.结果 在该色谱条件下,盐酸氯丙嗪在4.99～49.91μl/ml范围内呈良好的线性关系,(r =0.9999,n=8).结论 所建立的方法灵敏、准确、简便,可作为盐酸氯丙嗪注射液的含量测定方法.     

高效液相色谱法测定盐酸氟西汀的含量

目的建立测定盐酸氟西汀含量的高效液相色谱法。方法选用Agilent Eclipse XDB-C8柱(4.6 mm×250mm,5μm);流动相:四氢呋喃-甲醇-三乙胺缓冲液(取三乙胺10ml,置1 000ml量筒中,加水980ml,用磷酸调节pH值至6.0)(301060);流速为1.0ml/min;检测波长:227nm;进样量:10μl;柱温:25℃。结果方法的线性范围为55.17~165.51μg/ml(r=0.999 9);最低检测限:0.15μg/ml;回收率在99.9%~100.0%之间,重复性RSD为0.1%(n=6)。结论方法简便灵敏,结果准确可靠,可用于盐酸氟西汀的质量控制。     

HPLC法测定三黄片中盐酸小檗碱的含量

目的建立HPLC法测定三黄片中盐酸小檗碱的含量.方法选用Inertsil ODS-3C 18 (250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,0.033mol·L -1 KH 2 PO 4 溶液-乙腈(65∶35)为流动相,检测波长为265nm,流速1.0ml·min -1 ,进样量20μl.结果盐酸小檗碱在0.2～1.6μg·ml -1 浓度范围内线性关系良好.回归方程A=4.212×10 6 C-1.009×10 5 (r=0.9998).结论所用方法简便、快速,结果准确.     

LC/MS法测定犬血浆中的水飞蓟宾浓度

目的建立犬血浆中水飞蓟宾浓度的LC-MS测定方法。方法取犬血浆400μl,加200μl磷酸氢二钠(0.1mol.L-1)和50μl内标萘酚(10mg·mL-1),3ml乙醚萃取后取上清液挥干,100μl甲醇复溶,离心并取10μl进行LC-MS测定。色谱条件:色谱柱为ODS-C18柱(2.1mm×150mm,5μm,Phenomenex,USA),流动相为甲醇:2%乙酸水=55∶45,流速为0.2ml.min-1;质谱条件:电喷雾离子化(ESI)方式,以选择性负离子方式检测,水飞蓟宾和内标萘酚的选择检测离子质荷比分别为m/z481.00([M-H]-)和m/z142.92([M-H]-)。结果水飞蓟宾的线性范围为25～8000μg.L-1,定量下限(LOQ)为25μg.L-1。准确度、精密度及回收率均符合有关要求。结论本方法专属性强,检测限低,灵敏度高,线性关系良好,方法简便快捷、经济,适用于水飞蓟宾药代及毒代动力学研究。     

当归及其成分阿魏酸对大鼠血小板聚集和5-HT释放的影响

本文报告当归及其成分阿魏酸对大鼠血小板聚集性和5-HT释放反应的影响。结果表明,当归水剂在试管内当浓度为200～500mg/ml,阿魏酸0.4～0.6mg/ml时抑制ADP和胶原诱导的大鼠血小板聚集。静脉注射当归20g/kg 5分钟后对ADP和胶原诱导的大鼠血小板聚集有明显的抑制作用。阿魏酸钠0.2g/kg和0.1g/kg静脉注射时分别抑制ADP和胶原诱导的大鼠血小板聚集。用³H-5HT标记血小板,观察血小板聚集和释放反应的关系。当归水剂500mg/ml和阿魏酸钠1～2mg/ml对凝血酶诱导的血小板聚集有明显抑制作用,同时也抑制³H-5HT从血小板中释放。     

HPLC法测定体液中氨溴索浓度及其药代动力学参数

建立了 HPLC测定人血浆及尿中盐酸氨溴索含量的方法 :Hypersill C18柱 (4.6mm× 2 50 mm,5μm) ,乙腈 -甲醇 - 0 .0 1 mol/L磷酸盐缓冲液 -四氢呋喃 (35∶ 35∶ 2 7.5∶ 2 .5,V/V)为流动相 ,流速 1 .5ml/min,检测波长 2 4 2 nm。结果表明 :最低检测浓度为 5ng/ml,血药浓度在 1 0～ 32 0 ng/ml范围内线性良好 ,尿药浓度在 0 .2 5～ 8.0μg/ml范围内线性良好 ,氨溴索生物半衰期为 (4.2 1± 0 .93) h。     

大鼠血清及组织中阿霉素和阿霉素醇的反相离子对HPLC法

用反相高浓度离子对HPLC法,以柔红霉素为内标,建立大鼠血清及组织(脑、心、肾、肝、肺、小肠和脾脏)中阿霉素及其代谢产物阿霉素醇浓度的测定方法。本法简便,重现性好,可用于常规分析。血清样品提取:取1ml大鼠血清置15ml硅烷化玻璃离心管中,加50μl浓度为2或10μg/ml的盐酸柔红霉素30%甲醇-水溶液。振荡混匀,加3ml 乙腈,振荡30s 后,离心20min(4℃,3000 r/min)。上清液移     

血浆中美托洛尔的快速手性分离

本文建立了血浆中美托洛尔(Ⅰ)的直接手性分离方法。色谱条件采用Chiralcel OD分析柱(250×4.6 mm,id),RCSS硅胶预柱,流动相为异丙醇-正己烧-二乙胺(25:75:0.05,v/v),流速1.0 ml/min,荧光检测225 nm/295 nm。样品制备于每份0.5～1.0 ml血浆中加入100μl 1mol/L NaOH,涡旋10s,加正己烧3ml,振摇10min,离心(2000g,10min),水层于CO_2和甲醇混合液中冷冻,有机层于60℃挥去溶剂,残渣用50μl外标(S-烯丙洛尔)溶液(2μg/ml;溶剂为正己烷-异丙醇,5:1,v/v) 溶解,涡旋15s,进样     

用HPLC法直接分离Saterinone对映体

saterinone 外消旋体1-[4-氰基-1,2-二氢-6-甲基-2-氧代吡啶基-5)-苯氧基]-3-(4-(2-甲氧苯基)哌嗪-1]丙烷-2-醇,是治疗慢性心脏闭锁不全的新药,已在实验动物和人体进行了药动学研究。为了检查药理活性,合成了R-(+)(Ⅰ)和S-(-)(Ⅱ)对映体。近期有应用了灵敏方法测定体液中saterinone 外消旋体的报道。本文介绍用HPLC 法直接分离和测定其对映体纯度及服用外消旋体药物后人体血浆中对映体的比率。测定条件:合成样品用甲醇溶解并稀释到5μg/ml,直接进样;血浆样品取血浆1 ml加1 mol/L NaOH 50μl,用二氯甲烷3 ml萃取15 min 并离心10 min,将二氯甲烷层移入另一瓶中蒸干,用100μl 甲醇溶解进样。色谱条件:Chiralcel OD~(TM)柱250×4.6 mm     

一种测定全血、血清和血浆内5-羟色胺的快速HPLC-ED法

已有的测定全血、血清或血小板丰富血浆(PRP)内的5-HT 含量的荧光法和放射免疫或酶标分析虽灵敏,但程序复杂,故均不适于常规使用。本法将血样品以过氯酸脱蛋白处理,取上清液即可测定,具有快速简便、重复性好和灵敏等优点。测定用带有TL-3检测器的LC-50液相色谱仪,层析柱为μBondapak C_(18)(内径30 cm×3.9mm,粒子大小10μm)。流动相为含8%甲醇的0.009 mol/l 枸橼酸和0.082 mol/l 醋酸     

血小板过氧化物酶反应技术

我们对血小板过氧化物酶(Platelets pe-roxidase,PPO)反应的固定技术作了改进,证实了以0.5％戊二醛固定30分钟较佳。孵育液配制用H_2O_2的浓度以介于1％～0.5％之间为宜。现将结果报告如下。材料和方法血小板的收集和固定:取正常人静脉血5ml,置塑料试管内,在室温下用普通离心机离心500转/分,分离出血浆分装两只试管,再2000转/分离心15～20分钟,弃上清液,留试管底血小板团。一管用0.5％戊二醛(0.1M磷酸缓冲液配制,PH7.2)固定30～35分钟,另一管用1％戊二醛固定15分钟。再将血小板凝块切成1~(mm)×0.5~(mm)薄片。0.1M磷酸缓冲液洗3次,每     

用改进的HPLC法同时测定人体血清中的卤泛曲林和去丁基卤泛曲林

曾有报道用 HPLC 同时测定人血清中的卤泛曲林(HAL)和去丁基卤泛曲林(BHAL),但分析时间长,内源性物质与BHAL 几乎同时出峰,对测定有干扰。本文报道的方法迅速、分辨率更高。实验采用 757 可变波长 UV-VIS 检测器。Ultrasphere C_8 柱(5μm,25cm×4.6mm)。内标为2,4-二氯-9-(2-二氯基-1-羟基)乙基-6-三氟甲基菲盐酸盐。流动相为乙腈∶水(75∶25,v/v)与0.2%(w/v)十二烷基硫酸钠和0.2%(v/v)冰醋酸。在含0.5ml 血清的试管中,加入内标50μl(游离碱4μg/ml),乙腈1ml,沉淀出蛋白质,涡流混合20s,1200g 离心10min,将上清液移至 C_8-键合洗脱柱,用真空仪抽入柱体,脂乙腈洗柱后,药物被1.0ml 混合液[1.0mol/L 盐酸∶乙腈,1∶9(v/v)]洗脱下。用硅试管收集洗脱液,洗脱液中加入NH_4OH 1.0ml,CH_2Cl_2 6.0ml,旋转器上旋转25min,1000g 离心5min,分出有机相,在40℃通氮下挥发至干,践留物用150μl 流动相溶解,取25μl 注入 HPLC 柱。