杂色曲霉素体对人胚肺细胞致恶性转化作用的研究

目的：研究杂色曲霉素对人肺组织的致癌作用。方法：以组织培养方法研究了杂色曲霉素体外对人胚肺细胞致恶性转化作用。发现染色曲霉素处理４周后，体外培养的人胚肺细胞增殖旺盛，并出现细胞异型性变化，并可见复层交叉生长的转化灶。杂色曲霉素处理２４周，处理细胞可在软琼脂培养基上集落，杂色曲霉素１μｇ／ｍｌ、３μｇ／ｍｌ组平均集落数分别为１５．３、１６．１个／皿。结论：杂色曲霉素可诱发体外增减的人胚肺细胞发生恶化     

杂色曲霉素对小鼠肝脏细胞凋亡和增殖影响的研究

目的探讨杂色曲霉素(ST)对小鼠肝细胞凋亡和增殖的影响.方法采用动物实验和流式细胞光度方法定量检测灌喂不同剂量的ST和ST作用不同时间对小鼠肝细胞凋亡和增殖的影响.结果经口灌喂不同剂量的ST(3μg/kg,30μg/kg,300μg/kg,3 000μg/kg)12 h,ST处理小鼠肝细胞的凋亡率均明显高于对照组(P<0.01).在3～300μg/kg剂量范围内,ST剂量与凋亡率之间存在明显的量效正相关(r=0.642,P<0.01).同时,灌喂剂量为3 000μg/kg的ST后6～48 h,随ST处理后时间的延长,肝细胞凋亡的增长率也明显增高(r=0.722,P<0.01).另外,ST尚有一定抑制肝细胞的增殖的作用,但量效关系不明显,相同剂量ST(3 000μg/kg)处理小鼠后不同时间(6～48 h)与其对肝细胞增殖指数抑制率之间存在正相关(r=0.469,P=0.021).结论经口给予ST可诱导、促进肝细胞的凋亡并在一定程度上对肝细胞的增殖显示抑制作用.     

人胚肺细胞的体外培养及生物学特性

本文在长期培养人胚肺细胞的过程中，对体外培养细胞的生长曲线，不同代次细胞染色体数目分析以及细胞的冻存和复苏存活率等生物学特性作了初步研究.结果表明：体外培养的人胚肺细胞符合二倍体细胞的生长曲线，形态为成纤维细胞.检测不同代次培养细胞中的染色体数目，其中２ｎ＝４６条的占８７～９０％，长期冻存的细胞，复苏后２４ｈ接种存活率大多在９０％以上.体外培养的人胚肺细胞符合二倍体细胞的生物学特征，液氮中冻存的种子细胞可长期作为实验对象.     

全反式维甲酸对转移性人肺癌细胞亚系恶性表型的影响

目的：研究全反式维甲酸（ＲＡ）对克隆化人肺癌高转移细胞亚系（ＰＧＣＬ３）恶性表型的影响。方法：在体外用５μｍｏｌ／Ｌ和１０μｍｏｌ／ＬＲＡ处理ＰＧＣＬ３细胞５ｄ后，观察其对肿瘤生长、粘附、运动、侵袭能力和裸鼠体内实验性转移的影响。结果：上述肿瘤恶性表型指标均受到不同程度的抑制，其抑制作用在ＲＡ高浓度组更加明显。结论：ＲＡ可抑制高转移癌系的恶性表型，为ＲＡ治疗恶性肿瘤，特别是转移性恶性肿瘤提供了实验依据。     

胡麻油烟冷凝物致人胚肺二倍体细胞恶性转化的实验研究

目的研究胡麻油烟冷凝物致人胚胎二倍体细胞恶性转化作用.方法以人胚肺二倍体细胞株为靶细胞,建立体外转化系统,以胡麻油烟冷凝物作为受试物染毒人胚肺二倍体细胞,观察细胞转化情况,并对转化细胞进行生物学性状检测和鉴定.结果实验剂量范围内的胡麻油烟冷凝物（25～400μg/mL）能够诱导人胚肺二倍体细胞发生失去接触抑制性、饱和密度增大、血清需求降低,ConA凝集能力增强、锚着依赖性丧失等多种与肿瘤形成相关的表型改变,并且剂量-反应关系明显（r=0.972,P＜0.01）.结论胡麻油烟冷凝物具有诱导人胚肺二倍体细胞转化的作用.     

人乳头瘤病毒16型DNA转化人胚肺细胞的实验研究

人乳头瘤病毒(HPV)的16,18,31,33型等与宫颈癌的发病有关,其中HPV16与宫颈癌关系密切。为进一步研究HPV16的致癌性,我们用克隆的HPV16 DNA(2μg/10~5细胞)转染体外培养的人胚肺细胞,并进行了细胞存活时间、血清依赖性、着壁依赖性、间接免疫酶检测、HPV16 DNA、同源序列检测、染色体核型等生物学的研究。结果表明,转染细胞存活时间延长、在软琼脂培养基中形成集落、HPV16特异抗原得以表达、HPV16 DNA的同源序列存在于细胞中。表明本实验用HPV16DNA转染的人胚肺细胞具备转化细胞的某些特征,HPV16有使人胚肺细胞转化的作用。     

自然转化的人胚肺细胞对几种不同病毒敏感性的研究

本文报道了自然转化的人胚肺细胞对腺病毒-3型,疱疹病毒-2型,红斑性肢痛症相关痘病毒,呼肠病毒-Ⅱ型的敏感性试验,结果发现这些病毒在这株细胞上均可引起特征性的病变,这为病毒性疾病的诊断提供了一个新的细胞系统.     

黑素瘤细胞诱导人胚上皮干细胞的恶性转化

目的:探索体外肿瘤微环境中正常成体干细胞是否可以发生恶性转化而具有相关肿瘤学特性.方法:利用共培养池建立黑素瘤A-375细胞诱导表皮干细胞转化的模型,应用相差显微镜观察诱导前后表皮干细胞形态变化,免疫荧光法检测诱导后表皮干细胞E-钙黏着蛋白、肿瘤相关抗原P53突变蛋白的表达变化和双层软琼脂实验鉴定诱导后表皮干细胞克隆形成能力情况.结果:7 d后与黑素瘤细胞A-375直接接触共培养的表皮干细胞开始克隆样生长,细胞E-钙黏着蛋白表达下降,部分细胞表达P53突变蛋白,软琼脂培养克隆形成率为0.55%.结论:表皮干细胞经黑素瘤细胞直接诱导后,可以具有肿瘤细胞的相关生物学特性.结果表明,肿瘤微环境可以造成干细胞自我更新能力的失控.     

P53基因突变、人乳头瘤病毒16，18型感染与肺鳞癌发病的关系

应用单链构象多态性分析多聚酶链反应ＥＢ染色法（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ－ＥＢ）对４０例肺癌组织标本的Ｐ５３基因序列５～８外显子突变进行分析，同时应用ＰＣＲ方法检测上述标本及１８例肺良性疾病组织标本中ＨＰＶ１６、１８型ＤＮＡ相关序列，旨在分析二者在肺鳞癌发病中的作用及相互关系，并就肺鳞癌与Ｐ５３基因结构和功能异常的关系进行初步探讨。     

紫草素对肺腺癌A549细胞的生长抑制作用及其机制研究

目的观察紫草素抑制人肺腺癌A549细胞的增殖及其机制。方法用不同浓度紫草素处理A549细胞,CCK-8方法检测紫草素对A549细胞生长增殖的抑制作用;细胞周期检测试剂盒测定细胞周期的变化;Western blot法检测磷酸化Akt蛋白（pAkt）的表达。结果紫草素能够抑制人肺腺癌A549细胞的增殖;诱导A549细胞凋亡;阻滞细胞G1期向S期的发展。pAkt蛋白表达量在紫草素处理48 h后明显减少。结论紫草素可以抑制肺腺癌A549细胞的增殖,诱导凋亡,机制可能与紫草素抑制PI3K/Akt信号途径有关。     

人胚脾LAK细胞体外抗肿瘤作用的实验研究

本文对人胚脾ＬＡＫ细胞的制备及其体外抗肿瘤作用进行了实验研究，为临床推广应用提供了可行性的依据。实验表明，在红细胞低渗休克法，溶血盐法，淋巴细胞分离液分离法中，以最后一种方法制备人胚脾ＬＡＫ前体细胞的效果最佳。用重组白细胞介素２诱导的人胚脾ＬＡＫ细胞在培养的第５～８ｄ对Ｋ５６２靶细胞的细胞毒活性最高，达６５．１％；而对Ｒａｊｉ靶细胞的细胞毒活性较低，在培养的第５ｄ为２６．７％。由此可见，人胚脾ＬＡＫ细胞对Ｋ５６２和Ｒａｊｉ两种肿瘤细胞均有杀伤活性。     

鸡胚不同发育时期MyoD,生肌素及乙酰胆碱受体基因的表达

目的：探讨胚胎发育过程中鸡肢体骨骼肌生肌因子与乙酰胆碱受体基因的时相表达及相互关系。方法：采用Northern印迹杂交检测不同发育阶段鸡胚和雏鸡肢体骨骼肌组织MyoD、生肌素、AChRα亚基、α肌动蛋白和原癌基因fos等在转录水平的表达。结果：各种因子及结构蛋白在鸡肢体骨骼肌发育过程中呈现各自独特的表达模式。结论：在鸡不同发育时期，生肌因子MyoD、生肌素，α肌动蛋白在肢体骨骼肌表达时相与躯干肌表达时相不完全相同；生肌因子与AChRα亚基的表达同受神经植人影响，发育早期AChR表达不依赖生肌素，可能受MyoD家族其它成员或另类因子的调节。     

RC-160对肺癌细胞株作用特性的研究

采用流式细胞术,MTT法等观察RC-160对NCI-H446作用的量效关系,时效关系及其对细胞生长周期的影响。结果RC-160对NCI-H446细胞的抑制作用具有量效性和时效性,其IC50值为251μg/ml,流式细胞术表明细胞在G2+M期阻滞。提示RC-160可抑制NCI-H446细胞的增殖,对小细胞肺癌治疗的良好前景。     

人胚肺细胞制备甲型肝炎抗原的研究

为生产甲型肝炎抗原,作者提出了一种新方法。采用人胚肺细胞代替2BS,接种HAV后进行离心培养和旋转培养。结果表明本法生产HAAg优于常规法:1.此种细胞价廉易得,对HAV敏感;2.HAV的增殖周期由2～3周缩短至7～10d;3.HAAg的产量增加近1倍。     

用甲壳素膜培养的鼠胚脊髓神经元生长形态的扫描电镜研究

目的：在组织培养条件下人工构筑神经组织的组织化构型，以对其生长形态及临床价值进行研究。方法：以甲壳素膜为支持物，做原代大鼠鼠胚脊髓神经组织的体外培养，标本置扫描电子显微镜下观察。结果：甲壳素膜和培养细胞之间有较强的相容性，能使神经元和胶质细胞比较充分地展示出多种组织化结构的形态特点。结论：甲壳素膜的组织相容性和可塑形性将使其在修复神经损伤和神经移植中获得广泛的应用。     

肺泡Ⅱ型细胞的分离培养及年龄对其增殖的作用

目的：建立肺泡Ⅱ型细胞的分离培养方法，研究年龄对其增殖的影响。方法：应用梯度离心和贴壁培养分离大鼠肺泡Ⅱ型细胞，比较幼年、中年和老年大鼠培养肺泡Ⅱ型细胞的增殖能力。结果：证明该分离方法最终每只鼠可收获（１．１±０．６）×１０７个细胞，细胞活力９４．１％，肺泡Ⅱ型细胞纯度为（９１．６±２．４）％。肺泡Ⅱ型细胞的增殖能力均呈现幼年组＞中年组＞老年组的变化。结论：成功地建立肺泡Ⅱ型细胞的分离培养方法。老年大鼠肺泡Ⅱ型细胞增殖能力下降。     

维甲酸对人肺腺癌细胞系分化作用的实验研究

为阐明癌症发生的内在机制和探索肿瘤分化治疗与基因治疗的合适途径，作者应用１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ全反式维甲酸诱导人肺腺癌细胞系ＧＬＣ－８２，观察到（１）细胞体外生长速度减慢，堆叠性生长消失，细胞出出现空泡，细胞逐渐衰老和死亡；（２）双层软琼脂中细胞集落形成爱到明显抑制；（３）细胞ＤＮＡ合成能力降低；（４）细胞周期出现向Ｇ１／Ｇ０期移行的特征性动力学改变；（５）细胞分化和凋亡的效应器因子－谷氨酰胺转移酶     

红花苏木汤剂对胎鼠生长发育的影响

本文对怀孕的大鼠在受孕第八天起，连续３天、６次灌胃红花苏木汤剂，当孕鼠流产后再次支配使其受孕，观察二胎鼠的生长发育状况。本实验未显示出红花苏木汤剂对胎鼠有致畸作用。