银染PCR—SSCP检测大肠癌p53基因突变

采用银染ＰＣＲ－ＳＳＣＰ法检测肠癌细胞株及３０例新鲜肠癌Ｐ５３基因突变。结果发现ＬＯＶＯ细胞ｐ５３基因外显子５、６、７发生突变，ＬＳ１７４Ｔ细胞Ｐ５３基因的外显子５、８发生突变，３０例新鲜肿瘤标本ｐ５３基因外显子５、６、７、８的突变例数各为４、０、４、４例。大肠癌Ｐ５３基因突变热点为外显子５、７、８。     

反义P^53基因对人肺癌细胞生长蛋白表达的影响

Ｐ＾５３基因的突变浊肿瘤发生的重要事件之一，利用能表达反义Ｐ＾５３基因的逆转录病毒载体导入人肺癌细胞系ＧＬＣ－８２细胞，抑制其突变的Ｐ＾５３基因表达。并与导入的空载体ＰＤＯＲ－ｎｅｏ和未导入的ＧＬＣ－８２细胞作比较，用ＤＮＡ杂交证实重组子转入细胞，通过细胞生长曲线观察细胞生长情况，利用免疫组化法和流式细胞仪测定观察Ｐ＾５３蛋白表达，结果表明，反义Ｐ＾５３基因对ＧＬＣ－８２细胞生长速度及突变的Ｐ＾５     

应用PCR—SSCP研究胆道肿瘤P53基因的突变

应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法检测了１２例胆道肿瘤（胆管瘤７例，胆囊癌３例，壶腹癌２例）的Ｐ５３基因第５，７外显示，结果发现２例胆管癌和１例胆囊癌Ｐ５３基因有突变，采用免疫组化方法对２２例胆管癌和８例癌旁组织Ｐ５３蛋白产物进行了检测，染色阳性者分别为１１例（５０)和０。结果提示胆道肿瘤的发生与Ｐ５３基因的突变有关。     

p53基因与肝癌的研究进展

Ｐ５３基因在细胞的分化调控中，主要通过细胞分裂制动基因的激活以及程序性细胞死亡系统的启动，控制细胞增殖。而Ｐ５３基因的突变，会阻碍其正常的生物学功能的发挥，使细胞生长繁殖失控，引起细胞的转化及癌变。原发性肝癌的性与Ｐ５３基因的突变密切相关，并以２４９位密码子的特异性突变和其他位点的散发性突变两种形式存在。２４９位密码子的特异性突变与黄曲霉素Ｂ１的作用以及乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒的诱发等多种因素有     

大肠癌组织中PCNA定量和Bcl-2,P53蛋白的表达及其意义

Ｂｃｌ－２基因是一个阻遏细胞凋亡基因,其编码的Ｂｃｌ－２蛋白能阻止细胞凋亡,该蛋白的异常表达与恶性肿瘤发生发展及预后有密切关系［１,２］。Ｐ５３为肿瘤抑制基因,该基因突变和其编码的Ｐ５３蛋白过度表达与恶性肿瘤的生物学行为和预后有较密切的关系［３,４］...     

大肠肿瘤的多基因,多位点突变

大肠肿瘤的多基因,多位点突变的进行性积累对其发生、发展及演进起着十分重要的作用,该过程涉及众多原癌基因如ｒａｓ的激活和抑癌基因Ｐ~５３的灭活~［１］。本文采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术对２５例大肠肿瘤组织中的Ｐ~５３基因５～８外显子及Ｋｉ,Ｎ－ｒａｓ基因第１外显子点突变进行检测,旨在探讨多基因,多位点突变对大肠肿瘤的诊断及预后价值。１对象与方法收集１９９６年１１月～１９９７年１２月,吉林省人民医院及白求恩医科大学第三临床学院外科切除大肠癌及癌旁正常组织标本各２５例,存在于一８０℃冰箱,均经病理证实,并结…     

50例白血病P53基因点突变的检测

用银染ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法检测５０例不同类型的白血病Ｐ５３基因点突变,结果２５例髓系白血病中２例有Ｐ５３基因点突变且均为ＡＭＬ－Ｍ２ａ型,１１例淋巴细胞白血病中２例有Ｐ５３基因点突变,都是Ｂ系淋巴细胞白血病。４例Ｐ５３基因点突变患者,一般情况差,对化疗不敏感,预后不佳。结果显示：Ｐ５３基因点突变导致功能失活在白血病发病过程中起一定作用并可作为判断预后的参考指标。     

细胞凋亡与肝细胞癌

细胞凋亡是细胞分化与发育过程中 ,受一系列基因调控而发生的主动性死亡。它是多细胞生物体内普遍存在的一种生命现象。某些致病因子可使细胞凋亡的基因调控失常 ,以致细胞凋亡减少或增加 ,破坏机体细胞的自稳状态 ,从而导致疾病的发生。而肿瘤的发生是逐渐演变的过程 :促发、促进、进展 ,包括癌前期细胞的形成和生长。促发阶段由致癌物诱发 ,导致细胞重要的基因或染色体突变 ,也可无原因 (自发性 )。大多数研究者认为 :癌变始发于单个细胞后不断分裂增殖形成克隆 ,在肿瘤促进剂作用下形成肿瘤 ,克隆中的细胞可能进一步突变 ,成为多增殖性的…     

肿瘤抑制基因PTEN的研究

PTEN基因亦称MMAC1基因，是一种新发现的肿瘤抑制基因，它的蛋白产物具有指磷酸酶活必琪 主要作用底物是磷脂酰肌醇-3，4，5-三磷酸（PIP3）。PIP3是控制细胞正常生长途径中的关键性组分，负责刺激细胞生长以及抑制肿瘤细胞的生长，已发现这种基因在人体多种肿瘤组织中可发生突变，导致对肿瘤的生长失去抑制作用。     

P53及其蛋白产物在膀胱癌中过度表达的临床意义

Ｐ５３及其蛋白产物在膀胱癌中过度表达的临床意义北京医学高等专科学校医院陶然王金瑞抑癌基因Ｐ５３是目前克隆得到的多种抑癌基因之一，其突变、缺失、灭活可诱发包括膀胱癌在内的多种肿瘤。Ｐ５３过度表达与膀胱癌的病理分期、病理分级、肿瘤复发和转移及预后的关系目...     

膀胱肿瘤P53基因突变临床意义

用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ对３０例福尔马林固定，石蜡包埋膀胱肿瘤标本进行研究。结果：ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法检测出Ｐ５３基因突变１０例，Ⅰ级１例，Ⅱ组４例，Ⅲ组５例，符合病理诊断及随访资料，Ｐ５３基因未突变组与突变组在病理分级、临床分期和生存时间上差异显著（Ｐ〈０．０５）。     

突变型p53在胃癌中的表达及临床意义

目的 研究突变型ｐ５３基因在人胃癌组织中的表达及临床意义。方法 分别应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ及原位分子杂交技术,检测４１例胃癌组织和２６例癌旁非病变粘膜ｐ５３基因点突变及ｍＲＮＡ过表达情况。结果 人胃癌组织存在ｐ５３基因突变和ｍＲＮＡ过表达率明显高于癌旁非病变粘膜（Ｐ〈０．０５）。肿瘤组织分化越差,ｐ５３突变率越高,ｍＲＮＡ过表达的分布越广泛（Ｐ〈０．０５）。发生ｐ５３基因突变的胃癌病人较未发生者更易发生淋巴结转移（Ｐ〈０．０５）。结论 胃癌的发生、发展与ｐ５３基因突变有关,检测胃癌组织中ｐ５３突变情况可为胃癌的诊断、分期及预后评估提供可靠依据。     

P53基因与人类血液系统恶性肿瘤

Ｐ５３基因与人类血液系统恶性肿瘤许小平综述阎影，丁方杰审校早期的一些实验观察到Ｐ５３基因的表达产物Ｐ５３蛋白可以协同激活的ｒａｓ基因促进正常细胞转化，故把Ｐ５３基因也列为癌基因的一种￣［１］。１９８９年Ｆｉｎｌａｙ等￣［２］的研究证明与细胞癌变有关的...     

结直肠癌p53基因点突变和蛋白表达的研究

目的了解中国人结直肠癌ｐ５３基因的突变谱，探讨聚合酶链反应－单链构象多态（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）银染技术用于研究结直肠癌中ｐ５３基因突变的可行性。方法应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染技术检测４１例结直肠癌ｐ５３基因突变，以ＡＢＣ免疫组织化学染色检测结直肠癌Ｐ５３蛋白的表达。结果３４％（１４／４１）的病例显示有ｐ５３基因突变，其中外显子５，６，７和８各有４，１，５和４例突变。２０例有Ｐ５３蛋白异常表达，阳性率为４９％。结论导致Ｐ５３蛋白异常堆积的ｐ５３基因突变是结直肠癌的一种常见的分子结构改变，可能在结直肠癌的发生和发展中起着重要的作用。ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染技术是一简便、快速、有效的检测基因点突变的方法     

以PCR－SSCP分析和核苷酸序列直接测定技术检测人类白血病p53基因点突变

以多聚酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）分析（技术研究）３６例不同类型的白血病ｐ５３抗癌基因点突变，结果在１４例淋巴细胞白血病中发现３例有ｐ５３基因片段的泳动变位。进一步对其中的１例急性淋巴细胞白血病进行核苷酸序列直接测定，显示在第７外显子的２５７位编码子核昔酸由ＣＴＧ突变为ＣＡＧ、氨基酸由天冬氨酸突变为缀氨酸。２２例髓系白血病未发现有ｐ５３基因的点突变。结果提示ｐ５３抗癌基因点突变导致功能失活在淋巴细胞白血病的发病中可能起一定的作用。     

DNA甲基化

DNA甲基化是指甲基基团与DNA的CpG二核苷酸的胞嘧啶核苷共价结合,它对哺乳动物基因及胚胎的正常发育具有重要意义,但也给基因带来额外负担。肿瘤细胞在整体低甲基化同时伴某些特殊部位的超甲基化使原来正常的甲基化成份频繁破坏,甲基化发生在肿瘤抑制基因的启动子区时将抑制该基因从而使细胞正常生长失控或导致突变。DNA甲基化在DNA修复和基因稳定性方面都有作用,DNA甲基转移酶家族的发现在甲基化研究领域开辟了一个新时期。     

肿瘤抑制基因P16与恶性血液病的研究现状

Ｐ１６基因是一种肿瘤抑制基因，已定位于人类染色体９Ｐ２１，编码的核磷酸蛋白Ｐ１６能调节周期素Ｄ＝ＣＤＫ４，防止细胞增生，已发现在大多数恶性血液病及恶性肿瘤中有Ｐ１６基因的缺失或突变。     

P53基因与肿瘤细胞凋亡

Ｐ５３基因调节Ｇ１／Ｓ、Ｇ２／Ｍ关卡功能丢失，会增加基因组不稳定性及人类对肿瘤的遗传易感性：Ｐ５３基因调节凋亡功能丢失，会引起肿瘤的恶性演进。Ｐ５３基因治疗可以增强放疗及化疗疗效，改善病人预后，Ｐ７３基因的发现为Ｐ５３基因治疗提供了新的希望。     

DNA甲基化

DNA甲基化是指甲基基团与DNA的CpG二核苷酸的胞嘧啶核苷共价结合，它对哺乳动物基因及胚胎的正常发育具有重要意义，但也给基因带来额外负担。肿瘤细胞在整体低甲基化同时伴某些特殊部位的起甲基化使原来正常的甲基化成份频繁破坏，甲基化发生在肿瘤抑制基因的启动子区时将抑制剂基因从而使细胞正常生长失控或导致突变。DNA甲基化在DNA修复和基因稳定性方面都有作用，DNA甲基转移酶家族的发现在甲基化研究领域开辟了一个新时期。     

银染单链构象多态性技术检测原发性肝癌p53基因的突变

建立银染单链构象多态性技术检测原发性肝癌ｐ５３基因突变。方法用银染及单链构象多态性技术检测１６９例原发性肝癌的癌变及癌旁正常组织Ｐ５３基因第７，８外显子的突变，并进行了ＤＮＡ顺序，鉴定突变位点。４例患者Ｐ５３基因Ｅ７中第２４９叫密码子第３号碱基发生了Ｇ：Ｃ→Ｔ：Ａ的颠换，２例患者Ｅ８中第２７３号密码子第１号碱基发生了Ｃ：Ｇ→Ｔ：Ａ的转换，总的突变率达３８％；６例Ｐ５３基因突变的癌变组织中乙型肝炎病