芪归银方对抗生素体外抑制多重耐药铜绿假单胞菌作用的影响

目的:探讨芪归银方含药血清联合抗生素对多重耐药铜绿假单胞菌的体外抑制作用。方法:运用二倍稀释法检测单用抗生素、空白血清、含药血清及血清联合抗生素的体外抑菌情况。结果:空白血清对多重耐药铜绿假单胞菌无体外抑菌作用,含药血清则具有明显的体外抑菌作用;抗生素联合含药血清较单纯抗生素和抗生素联合空白血清的抑菌情况有明显差异。结论:芪归银方含药血清能够降低抗生素的MIC值、MBC值,提高抑菌率,含药血清与抗生素具有体外协同抑菌作用。     

基于多肽阵列技术探讨芪归银方对多重耐药铜绿假单胞菌感染大鼠的干预作用

目的利用多肽阵列技术探讨芪归银方对多重耐药铜绿假单胞菌感染大鼠抗原抗体反应的影响。方法雄性SD大鼠36只,采用随机数字表法分为空白组、模型组、芪归银方组共3组各12只。参考文献建立多重耐药铜绿假单胞菌腹腔感染大鼠模型。采用多肽阵列检测各组大鼠血清对金属酶VIM-1、SPM-1和超广谱内酰胺酶TEM-1 3种具有代表性的耐药蛋白抗体表达,比较各组之间的差异。结果空白组大鼠血清对耐药蛋白VIM-1的重叠多肽片段产生不同程度的抗体反应,而铜绿假单胞菌感染后,血清抗体反应的明显变化表明,多肽片段指征的耐药蛋白VIM-1的抗原决定簇能够激发大鼠的免疫反应。芪归银方组大鼠中,针对表位7～11和36-40的抗体表达强度大于空白和模型组的抗体表达强度(均P 0.05);模型组中,针对53-54和56-58表位的抗体反应强度降低(均P 0.05),而芪归银方组的抗体反应虽较正常组为低,但高于模型组大鼠(P0.05);与空白组比较,模型组和芪归银方组大鼠均产生针对23-25表位的较强抗体反应,两者之间比较差别不大(P 0.05);而模型组对80-81表位产生显著的抗体反应,但在空白组和芪归银方组中则无明显反应(均P 0.05)。空白组大鼠血清对耐药蛋白SPM-1的重叠多肽片段产生不同程度的抗体反应,但各组间差别不大(均P 0.05)。感染刺激大鼠产生新的更多地针对13-15和39-40表位的抗体,然而,相较于空白组和芪归银方组产生的针对16-19和82-85抗原的免疫反应,模型组大鼠则产生的抗体反应更弱(P 0.05)。铜绿假单胞菌感染后刺激大鼠免疫系统并且产生更强的针对多肽19-21、26-27、52-55和66-70的反应。3组大鼠血清中抗体针对的阳性表位数目差别不大(均P 0.05);芪归银方组对TEM-1蛋白19-21和52-55表位的抗体反应强于模型组和空白组(均P 0.05)。结论芪归银方能够通过刺激感染后大鼠产生抗耐药蛋白VIM-1、SPM-1和TEM-1的保护性抗体,达到提高多重耐药铜绿假单胞菌感染大鼠免疫应答的目的。     

复方清热颗粒对铜绿假单胞菌外排泵影响的实验研究

目的 探讨中药复方清热颗粒剂对耐环丙沙星铜绿假单胞菌外排泵耐药机制的影响.方法 建立急性耐环丙沙星铜绿假单胞菌腹腔感染兔动物模型,予复方清热颗粒药液灌胃,空白对照组则给予等量蒸馏水灌胃.末次给药后无菌心脏取血,离心分离出含药血清和空白血清.应用外排泵抑制剂(CCCP)选择出外排泵阳性的耐环丙沙星铜绿假单胞菌9株,应用琼脂对倍稀释法测出在有含药血清、空白血清、复方清热颗粒、泵抑制剂的情况下环丙沙星对上述9株铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度(MIC)变化.结果 中药复方清热颗粒含药血清可以降低环丙沙星对铜绿假单胞菌的MIC值.结论 复方清热颗粒含药血清可抑制铜绿假单胞菌的外排泵,从而改善铜绿假单胞菌对环丙沙星的耐药.     

铜绿假单胞菌亚胺培南耐药株的临床分布及耐药性检测

目的：了解铜绿假单胞菌耐亚胺培南株的临床分布与耐药特性，为抗生素的合理使用提供相关依据。方法：以常规方法及API20NE系统分离鉴定铜绿假单胞菌，以K－B法检测其药物敏感性。结果：耐亚胺培南铜绿假单胞菌主要分离自痰样本（65.3%)，其次为伤口分泌物（13.3%)、血液（8.0%)、尿液（6.7%)。临床病区分布依次为ICU病房（60.0%)、呼吸内科（13.3%)、干部病房（10.7%)、外科病房（9.3%)。与亚胺培南敏感的铜绿假单胞菌相比，对环丙沙星、庆大霉素、哌拉西林、头孢他啶、氨曲南等抗生素的耐药性均有显著提高。对复方磺胺、阿米卡星、氯霉素无显著性差异。结论：耐亚胺培南铜绿假单胞菌在临床感染样本中分布广泛，其耐药性比亚胺培南敏感的铜绿假单胞菌的耐药性更为严重，应重视其临床检测与监控。     

262株铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶检测及耐药性分析

目的了解临床分离的铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶（MBL）的情况并分析其耐药性,指导临床合理选用抗生素。方法采用法国生物梅里埃公司API板条鉴定细菌,K-B法测定其耐药性。双纸片协同法检测铜绿假单胞菌产生的金属β-内酰胺酶（MBL）。结果临床分离的262株铜绿假单胞菌中耐亚胺培南46株,占17．6％（461262）,产金属β-呐酰胺酶32株,占所分离铜绿假单胞菌的12．2％（32／262）。产酶株对亚胺培南,头胞噻肟,哌拉西林,复方新诺明,环丙沙星和丁胺卡那呈高度耐药;对头孢他啶,头孢吡肟,头孢哌酮惭巴坦,氨曲南部分耐药,对多粘菌素B耐药率0．0％。结论临床感染铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺取MBL）检出率升高,产酶株对临床常用的多种抗生素具有更高耐药性。     

复方清热颗粒对铜绿假单胞菌外排泵作用机制的实验研究

目的探寻中药复方清热颗粒对耐环丙沙星铜绿假单胞菌外排泵影响的作用机制。方法建立急性耐环丙沙星铜绿假单胞菌腹腔感染兔动物模型,复方清热颗粒药液灌胃,每日2次,连续5d。末次给药后60min无菌心脏取血,离心分离出含药血清。应用外排泵抑制剂（CCCP）选择出外排泵阳性的耐环丙沙星铜绿假单胞菌9株,应用复方清热颗粒含药血清和环丙沙星（CIP）进行干预,将干预前后的铜绿假单胞菌分别行增菌培养,提取外膜蛋白,行蛋白电泳,紫外凝胶成像后分析外膜蛋白中OprM量的变化来推测复方清热颗粒对铜绿假单胞菌外排泵的作用机制。结果复方清热颗粒含药血清作用前后铜绿假单胞菌外膜蛋白O-prM量的变化相近。结论复方清热颗粒含药血清可抑制铜绿假单胞菌的外排泵,但不能改变其外排泵的含量。     

铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药分析

目的：分析我院2004年1月～2010年5月铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药情况,为临床合理选用抗菌药物提供参考。方法：采用kirby—Buner纸片扩散法对临床分析的650株铜绿假单胞菌进行抗生素敏感性测定。结果：铜绿假单胞菌以下呼吸道和尿路感染为主,耐药率最低为美洛培南占6．6％,而亚胺培南的耐药率有增高趋势,占16.1％。结论：铜绿假单胞菌亚胺培南耐药菌珠对常用抗菌药物耐药性更强,多重耐药现象十分严重,合理运用抗菌药物可控制和减缓细菌耐药性的增长。     

铜绿假单胞菌产诱导型β内酰胺酶检测及其对20种抗生素的耐药性分析

目的了解佛山地区铜绿假单胞菌临床分离产诱导型β内酰胺酶及其耐药性。方法采用美国DADE产Micro Scan Auto Scan-4型微生物分析仪及其NC21鉴定及药敏板和符合NCCLS标准的Ver Sion 22分析软件，对128株铜绿假单胞菌检测产诱导型B内酰胺酶和对20种抗生素的敏感性。结果（1）铜绿假单胞菌对头孢他啶、哌拉西林／三唑巴坦、环丙沙星、阿米卡星、头孢吡肟、亚胺培南的敏感性高达57．0％-80．0％之间。妥布霉素、哌拉西林、庆大霉素次之，而其他头孢菌素敏感性低下。（2）128株铜绿假单胞菌产诱导型β内酰胺酶者115株（89．8％），在产诱导型β内酰胺酶菌株中，哌拉西林／三唑巴坦、头孢他啶、哌拉西林、安曲南诱导铜绿假单胞菌产诱导型β内酰胺酶的出现率为53．9％～80．0％。（3）产诱导型β内酰胺酶株对哌拉西林／三唑巴坦、阿米卡星、头孢吡肟、头孢他啶、环丙沙星、妥布霉素等抗生素的敏感性显著高于不产诱导型β内酰胺酶株，而氨苄西林／舒巴坦、复方新诺明的敏感性则完全相反（P〈0．05）。结论佛山地区抗生素诱导铜绿假单胞菌产诱导型β内酰胺酶率较高，哌拉西林／三唑巴坦、头孢他啶、哌拉西林、安曲南是强诱导剂，对于产酶菌株可选择环丙沙星、阿米卡星或联合使用耐酶的抗生素。     

儿童呼吸道革兰阴性杆菌感染状况及耐药性分析

目的:了解儿童呼吸道革兰阴性杆菌感染状况及耐药情况。为临床合理用药提供参考。方法:对本院2012年1~11月儿科呼吸道感染患者的痰标本进行培养鉴定和药敏试验结果进行回顾性分析。结果:918份标本中共检出病原菌507株,检出率为55.2%。其中革兰阴性杆菌224株,占44.2%,以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、产气肠杆菌和铜绿假单胞菌为主,分别占39.7%、11.6%、10.3%、8.0%和6.7%。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对阿莫西林、哌拉西林、头孢噻吩耐药率均大于80%,对美诺培南、亚胺培南100%敏感。铜绿假单胞菌对氨苄西林的耐药率最高(93.3%),对美诺培南、亚胺培南全部敏感。结论:临床应重视病原菌的检测和耐药性监测,临床治疗应根据药敏结果合理选择抗菌素,防止多药耐药菌的增加。     

痰热清注射液联合碳青霉烯类药物对分离自脓毒症患者的多重耐药铜绿假单胞菌的作用分析

目的 探究痰热清注射液联合碳青霉烯类药物对分离自脓毒症患者的多重耐药铜绿假单胞菌的体外抑菌作用。方法 收集临床分离自脓毒症患者的8株多重耐药铜绿假单胞菌,采用微量肉汤稀释法分别检测痰热清注射液、美罗培南和亚胺培南的最低抑菌浓度（MIC值）,采用微量棋盘稀释法检测痰热清注射液分别与美罗培南和亚胺培南的联合抑菌效果。结果 8株菌中除PA1223均为碳青霉烯类药物中介外,其他几株均表现为耐药。通过棋盘稀释法对痰热清注射液与碳青霉烯类药物的联合用药检测,痰热清注射液、美罗培南和亚胺培南的MIC值较单药时均明显降低,其FICI指数均表现为协同或相加的作用。结论 痰热清注射液与碳青霉烯类药物具有一定的联合抑菌效果。     

健脾化痰方对胃癌细胞PD-L1表达的影响

目的:探讨健脾化痰方对胃癌细胞PD-L1表达的影响,初步探讨其干预肿瘤免疫逃逸的机制。方法:40只大鼠随机分为生理盐水对照组及健脾化痰方高、中、低剂量组,每组10只,采用灌胃方法,制备不同浓度含药血清。各组含药血清处理胃癌细胞(SGC-7901)24 h。采用流式表面标记技术检测SGC-7901细胞上PD-L1的表达,采用免疫荧光染色法进行验证。结果:与对照组比较,健脾化痰方低、中、高浓度含药血清处理的胃癌细胞SGC-7901,24 h后PD-L1表达明显下降,平均荧光强度表达量明显降低,P<0.01,且程剂量依赖型,免疫荧光染色法可进一步验证其结果。结论:健脾化痰方含药血清能降低胃癌细胞SGC-7901中PD-L1表达,且程剂量依赖型,其可能通过这一机制干预肿瘤的免疫逃逸,起到抗肿瘤作用。     

益气补肾方对胃癌细胞侵袭转移能力的影响

目的 探讨益气补肾方对胃癌细胞SGC-7901侵袭转移能力的影响.方法 将胃癌SGC-7901细胞接种于RPMI-1640培养液中,益气补肾方水溶液配制成1、2、4、8、16、32、64mg/ml 7个终浓度,设肿瘤细胞为空白对照组,在96孔板内每个剂量6个平行孔,重复3次,37℃、5％CO2培养箱孵育48h.采用MTT法检测不同浓度益气补肾方对SGC-7901细胞增殖的抑制率;采用RT-PCR法检测其对SGC-7901细胞基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶抑制酶-2(TIMP-2)的基因表达活性的影响. 结果 不同浓度的益气补肾方对SGC-7901细胞都有一定的抑制作用,以16mg/ml和32mg/ml浓度抑瘤作用较好,抑制率分别为53.17％和56.47％;MMP-2 mRNA在32mg/ml组同空白对照比较,差异有统计学意义(P＜0.05),并且16mg/ml组也能下调MMP-2 mRNA的表达,但差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 益气补肾方能明显抑制胃癌细胞SGC-7901侵袭转移能力,且以32mg/ml浓度最好.     

胃热消炎合剂对人胃癌细胞SGC-7901增殖影响的机制研究

目的研究胃热消炎合剂对人胃癌细胞SGC-7901增殖的影响。方法取对数生长期的人胃癌细胞SGC-7901进行体外实验,其中空白血清组加入含10%正常血清培养,低剂量含药血清组加入含2.5%药物血清+7.5%正常血清培养,中剂量含药血清组加入含5%药物血清+5%正常血清培养,高剂量含药血清组加入含10%药物血清培养,胃热消炎合剂含药血清通过给大鼠灌胃的方式获得。分别采用CCK-8法、EdU染色法和免疫荧光法检测各组细胞增殖情况,采用RT-PCR法检测各组细胞增殖信号通路p53-p21的相关基因p21、p53、CyclinD1、CDX2、CDK7mRNA的表达情况,采用Western blot法检测各组细胞中p21、p53、CyclinD1、CDX2蛋白表达水平。结果各含药血清组SGC-7901细胞增殖受到明显抑制,且呈浓度依赖性。各含药血清组p21、p53 mRNA表达水平均明显高于空白血清组(P均<0.05),CyclinD1 mRNA表达水平均明显低于空白血清组(P均<0.05),且呈浓度依赖性;各组CDX2、CDK7mRNA表达水平比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。各含药血清组p21蛋白表达水平均明显高于空白血清组(P均<0.05),且呈浓度依赖性;低剂量含药血清组和中剂量含药血清组p53蛋白表达水平均明显高于空白血清组(P均<0.05),而高剂量含药血清组p53蛋白表达水平明显低于空白血清组(P<0.05);各组CyclinD1、CDX2蛋白表达水平比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论胃热消炎合剂可能通过作用于细胞周期来抑制人胃癌细胞SGC-7901增殖,其可能具有预防和治疗早期胃癌的作用。     

复方补肾活血颗粒对人骨髓间充质干细胞增殖及Wnt/PI3K-AKT信号通路相关蛋白表达的影响

目的 观察复方补肾活血颗粒药物血清对人骨髓间充质干细胞(HBMSCs)增殖的影响,探讨其干预骨质疏松症(OP)的作用机制.方法 从OP患者骨髓中分离培养HBMSCs,流式细胞仪检测HBMSCs表型和细胞周期;将HBMSCs分为正常组、2％空白血清组、2％药物血清组、5％空白血清组、5％药物血清组、8％空白血清组和8％药...     

泄浊除痹方对高尿酸血症患者中医临床症状的影响

目的观察泄浊除痹方对高尿酸血症患者中医临床症状的影响。方法将66例高尿酸血症患者(脱落7例,剔除1例)随机分成泄浊除痹方组28例和空白对照组30例,泄浊除痹方组口服泄浊除痹方颗粒剂,每日1剂,分2次服用。空白对照组不用药物治疗,仅进行临床观察。两组均观察20天,于观察前后检测血尿酸,采集患者中医临床四诊资料进行中医症状评分。结果两组患者治疗后血尿酸水平均较治疗前有所下降,差异有统计学意义(P<0.05)。泄浊除痹方组与空白对照组治疗前后差值比较差异有统计学意义(P<0.05)。泄浊除痹方组痰涎、神疲乏力、四肢沉重、小便黄赤、大便稀溏等中医临床症状积分较治疗前有所降低,小便清长症状积分较治疗前有所增加(P<0.05)。空白对照组患者各中医临床症状积分治疗前后比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论泄浊除痹方对高尿酸血症痰湿阻滞患者相关中医临床症状有一定改善作用。     

健肾方含药血清培养成骨细胞移植对骨质疏松性骨折愈合过程中VEGF动态变化的影响

目的:研究健肾方含药血清培养成骨细胞移植对骨折愈合过程中血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达的影响。方法:制备4种含药血清,包括健肾方高、低剂量含药血清、福善美含药血清及空白大鼠血清,分别运用4种血清培养乳鼠成骨细胞,并建立骨折模型,将建模后大鼠分5组,分别是模型组、生理盐水组、福善美含药血清合并成骨细胞治疗组、健肾方低剂量含药血清合并成骨细胞治疗组、健肾方高剂量含药血清合并成骨细胞治疗组,治疗采用移植含药血清培养的成骨细胞到骨折部位,用荧光定量PCR方法检测骨折愈合部位VEGFmRNA表达情况。结果:福善美含药血清合并成骨细胞治疗组、健肾方低剂量含药血清合并成骨细胞治疗组、健肾方高剂量含药血清合并成骨细胞治疗组的血管内皮生长因子VEGFmRNA的表达明显增加,与模型组比较差异有统计学意义(P0.05);健肾方低剂量含药血清合并成骨细胞治疗组与健肾方高剂量含药血清合并成骨细胞治疗组比较差异无统计学意义,但它们与福善美含药血清合并成骨细胞治疗组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论:健肾方含药血清合并成骨细胞移植到骨折部位能显著增加VEGFm-RNA的表达,初步认为其促进骨折愈合的作用与促进VEGFmRNA的表达有关。     

安肺益肾方对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠肺功能的影响

目的 观察安肺益肾方对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺功能和肺组织损伤的干预作用.方法 健康Wistar大鼠72只,采用随机数字表法分为安肺益肾方大、中、小剂量组,氨茶碱组、模型组、正常对照组,每组12只,除正常对照组外,其余各组大鼠采用熏香烟加气管注入内毒素法建立COPD大鼠模型.造模成功后,安肺益肾方大、中、小剂量组分别给予生药2.4、1.2、0.6g/kg;氨茶碱组给药15mg/kg;模型组和正常对照组灌胃等量0.5％羧甲基纤维素溶液;每天灌胃1次,连续4周.各组随机取8只大鼠,测定肺功能,包括第0.2s用力呼气量(FEV0.2)、第0.2s用力呼气量与用力肺活量比值(FEV0.2/FVC)及呼气阻力(Re)、吸气阻力(Ri);取大鼠右肺HE染色,观察各组大鼠肺组织病理变化.结果 与正常对照组比较,模型组FEV0.2/FVC、FEV0.2显著降低,Re、Ri显著升高(P＜0.01).与模型组比较,安肺益肾方大、中、小剂量组、氨茶碱组均能显著提高FEV0.2/FVC,降低Re(P＜0.01);安肺益肾方大剂量组提高FEV0.2(P＜0.05);安肺益肾方中剂量组提高FEV0.2,降低Re(P＜0.01);安肺益肾方中剂量组FEV0.2/FVC高于安肺益肾方大、小剂量组,FEV0.2高于小剂量组(P＜0.05),Re、Ri低于安肺益肾方大、小剂量组.安肺益肾方能减轻COPD模型大鼠肺组织病理炎性浸润,减少肺大泡的形成.结论 安肺益肾方能改善COPD模型大鼠的肺功能,改善模型大鼠肺组织损伤.     

化浊解毒方含药血清对胃癌细胞VEGF及COX-2表达的影响

目的:研究化浊解毒方对胃癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)及环氧合酶-2(COX-2)表达的调控作用。方法:以不同剂量的化浊解毒方给Wistar大鼠灌胃制备含药血清,然后以含药血清培养胃癌细胞,共同培养2代后,分别用免疫组化法检测VEGF、COX-2的表达情况。结果:化浊解毒方高、中、低剂量组胃癌细胞中VEGF、COX-2的表达减弱,与对照组比较,差异均有显著性意义(P<0.01);而且高剂量组表达减弱更为明显,与低、中剂量组与较,差异均有非常显著性意义(P<0.01)。结论:化浊解毒方对胃癌细胞VEGF及COX-2的表达有抑制作用。     

益气清热方对Ⅰ型幽门螺杆菌感染裸鼠胃黏膜p53、bcl-2表达的影响

目的 观察益气清热方对Ⅰ型幽门螺杆菌(Hp)感染的干预作用及机制.方法 将100只雄性裸鼠随机分为正常组、模型组、黄芪组、黄芩组、益气清热方组,每组20只.正常组及模型组予生理盐水,其余分别给予黄芪、黄芩及益气清热方药液,每日0.2ml/10g.第14天,除正常组外,其余各组予浓度108cfu/ml的Hp菌液灌胃,每天1.3ml,两周后处死,观察胃黏膜p53、bcl-2的表达情况. 结果 与正常组比较,模型组胃黏膜p53、bcl-2表达明显增加(P＜0.01);与模型组比较,3个药物组均能显著降低p53、bcl-2表达(P＜0.05或P＜0.01),而3个药物组间比较,益气清热方组明显为优(P＜0.05或P＜0.01).结论 益气清热方对Ⅰ型Hp感染裸鼠胃黏膜p53、bcl-2表达有一定的抑制作用,可能是通过对凋亡基因的调控,降低过高的细胞凋亡率,减轻Hp对胃上皮细胞的损害.