黏液型铜绿假单胞菌对抗生素的耐药性分析

目的探讨黏液型铜绿假单胞菌（PA）的耐药性和耐药特征,指导临床合理使用抗菌药物。方法采用湖南天地人微生物分析系统对辽阳市二院2009年1月～2012年12月临床分离的95株黏液型铜绿假单胞菌耐药情况进行数据分析。结果黏液型铜绿假单胞菌对美洛培南100.0%敏感,其余抗菌药物的耐药率为2.1%～35.8%;2009年～2012年黏液型铜绿假单胞菌对除美洛培南以外的其他抗生素耐药性有上升趋势。结论黏液型铜绿假单胞菌对抗生素体外药敏试验耐药性较低,但由于产生生物膜,体内呈耐药现象。临床治疗选药时必须考虑黏液型铜绿假单胞菌在体内存在生物膜的影响因素,应加强监测,指导临床合理使用抗生素并控制医院耐药菌感染的流行。     

黏液性铜绿假单胞菌的耐药性分析

目的：分析铜绿假单胞菌（ PAE）对抗菌药物的耐药情况,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法应用K-B法分别测试110株黏液型和110株非黏液型铜绿假单胞菌对常用的13种抗菌药物的敏感性,并进行统计分析。结果黏液型铜绿假单胞菌对美洛培南、头孢他啶、头孢吡肟、头孢曲松、庆大霉素的敏感率明显高于黏液型铜绿假单胞菌,差异有统计学意义（ P ＜0>．05）,对亚胺培南、阿米卡星、妥布霉素、哌拉西林、哌拉西林-他唑巴坦、环丙沙星、氨曲南、左氧沙星的敏感性差异无统计学意义（ P ＞0．05）。结论黏液型PA体外药敏试验耐药性较低,但体内用药治疗效果不佳,而使用体外药敏试验敏感药物与能抑制细菌表面生物膜作用的药物联合使用,治疗效果较为明显。     

铜绿假单胞菌生物膜耐药性研究进展

在铜绿假单胞菌引起的疾病中生物膜形成是极为常见的现象．生物膜的形成与该菌所致相关感染的难治性联系密切．因此铜绿假单胞菌生物膜耐药屏蔽的研究已成为医学、药学、微生物学等众多领域关注的课题。本文从铜绿假单胞菌生物膜结构、耐药机制及其清除策略等方面综述了近年在铜绿假单胞菌生物膜耐药性研究中的现状。     

黏液型铜绿假单胞菌耐药性分析

目的:了解我院分离的黏液型铜绿假单胞的耐药特性,探讨其耐药机理,为临床治疗选药提供依据.方法:应用K-B法分别测试40株黏液型和40株非黏液型铜绿假单胞菌对常见12种抗生素的耐药性,并进行统计分析.结果:黏液型铜绿假单胞菌对12种抗生素的耐药率为10%～35%,非黏液型铜绿假单胞菌的耐药率为40%～60%.结论:黏液型铜绿假单胞菌的体外耐药性较弱,且明显弱于非黏液型铜绿假单胞菌的耐药性,但因其存在生物膜,体内用药时耐药率较高,因此临床培养鉴定出铜绿假单胞菌时,应注意是否为黏液型,以便临床医生选择合适的药物进行治疗.     

大环内酯类药物对铜绿假单胞菌生物膜形成的影响

采用聚碳酸酯过滤膜或聚丙烯酰胺膜制备铜绿假单胞菌生物膜,计数滤膜菌落并用扫描电镜观察,研究大环内酯类及抗铜绿假单胞菌药物对铜绿假单胞菌生物形成的影响。结果表明与未经药物作用的滤膜菌落计数比较,阿尔霉素2mg/L和红霉素2mg/L可使生物膜内细菌由10^10CFU/cm^2降至10^3.3和10^3.7CFU/cm^2;阿奇霉素（2mg/L)分别与头孢他啶（0．0625mg/L)、亚胺培南（0．5mg/L）、美洛培南（0．25mg/L）、阿米卡星（0．0625mg/L )、环丙沙星（0．004mg/L）合用后,生物膜内细菌降至10^1.5-10^3.8CFU/cm^2;红霉素与上述药物合用后,生物膜内细菌降至10^2.8-10^5.5CFU/cm^2;麦迪霉素32mg/L、抗铜绿假单胞菌药物单用或两者联合应用,菌量为10^8.1-10^11.5CFU/cm^2。扫描电镜观察与菌落计数结果一致。表明红霉素、阿奇霉素能抑制铜绿假单胞菌生物膜的生成;麦迪霉素及五种抗铜绿假单胞菌药物对生物膜的形成无抑制作用。     

50株铜绿假单胞菌的耐药性

目的 评价铜绿假单胞菌对头孢吡肟和其它药物的耐药性。方法 应用SCEPTOR系统和纸片法进行药敏测定。结果 50株铜绿假单胞菌的耐药率较高,对13种试验药物中,耐药率40％以上有8种,头孢西丁等3种达100％,最低是亚胺培南为14％,平均为58．8％。结论 铜绿假单胞菌的耐药率较高,故主张联用抗生素。严重的铜绿假单胞菌感染,应使用亚胺培南。     

铜绿假单胞菌生物膜的研究进展

铜绿假单胞菌引起的感染性疾病中,常常因为生物膜的形成造成疾病的反复和难以治愈,患者在遭受巨大痛苦的同时,引起了众多研究者的注意。通过对铜绿假单胞菌生物膜结构、致病机制等方面进一步研究,可能发现有效清除铜绿假单胞菌生物膜的方法,从而为临床治疗铜绿假单胞菌引起的感染性疾病提供科学的依据。     

铜绿假单胞菌生物膜耐药性机制及防治

铜绿假单胞菌依靠藻酸盐聚集为具有三维空间结构的生物膜 ,在生物膜内 ,细菌之间通过接合作用来实现信息的传导。红霉素能抑制鸟甘酸二磷酸甘露糖脱氢酶 ( guanosinediphospho -d -mannosedehydrogenase ,GMD)的产生 ,并呈剂量依赖性 ,大环内酯类抗生素能有效地增强多形中性粒细胞 (polymorphonuclearleukocytes ,PMNs)对铜绿假单胞菌生物膜的吞噬作用 ,并能抑制菌毛的颤动     

铜绿假单胞菌耐药性分析

目的 了解临床分离的铜绿假单胞菌的耐药性及变化趋势.方法 对2003-2006年分离的984株铜绿假单胞菌进行药敏性统计分析.结果 铜绿假单胞菌最敏感的抗生素为亚胺培南(总耐药率为11.0%),抗菌作用最差的抗生素为头孢呋辛钠(总耐药率为80%).铜绿假单胞菌对抗生素的耐药性总体呈上升趋势.结论 合理使用抗生素,延缓耐药菌的产生速度.     

盐酸氨溴索联合环丙沙星抗铜绿假单胞菌成熟生物膜作用研究

目的构建铜绿假单胞菌发光菌株,建立铜绿假单胞菌生物膜(biofilm,BF)模型,研究盐酸氨溴索对铜绿假单胞菌成熟BF的影响及与环丙沙星合用是否具有协同杀菌作用。方法将携带绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的质粒转染铜绿假单胞菌,平板培养法培养铜绿假单胞菌BF,建立铜绿假单胞菌BF体外模型,经盐酸氨溴索作用后,扫描电镜(scanning elec-tron microscope,SEM)观察盐酸氨溴索对BF形态结构的影响,荧光显微镜定性观察盐酸氨溴索对BF内活菌的作用,通过发光菌株荧光强度定量分析盐酸氨溴索单独作用以及与环丙沙星联用后BF内活菌量。结果盐酸氨溴索作用后电镜观察可见黏液样物变稀疏,不规则。盐酸氨溴索浓度大于0.49mg/mlBF内活菌数减少(F=18,P<0.05);盐酸氨溴索与环丙沙星存在协同作用(F=15.1,P<0.05),且随着盐酸氨溴索浓度升高协同作用增强。结论盐酸氨溴索破坏铜绿假单胞菌成熟BF形态结构,减少其内活菌数;盐酸氨溴索与环丙沙星存在协同作用,增强其杀菌能力。     

抗藻酸盐血清对黏液型铜绿假单胞菌生物被膜杀菌活性的影响

目的 :研究抗藻酸盐血清与加替沙星联用对黏液型铜绿假单胞菌生物被膜杀菌活性的影响。方法 :采用MTT方法测定黏液型铜绿假单胞菌生物被膜活菌数 ,用微量稀释法测定抗菌药物最低生物被膜清除浓度(MBEC)。结果 :1∶1抗藻酸盐血清与 1×MIC ,4×MIC和 8×MIC加替沙星联用可以使细菌生物被膜中的活菌数量 (单位为lgcfu·cm-2 )分别从 ( 6 .6 3± 0 .85 ) ,( 6 .48± 1.12 )和 ( 5 .73± 1.10 )显著降低至 ( 5 .76± 0 .90 ) ,( 5 .0 2±0 .93)和 ( 4.70± 0 .6 2 ) ,使加替沙星对铜绿假单胞菌的MBEC从 8μg·mL-1降低至 4μg·mL-1。结论 :抗藻酸盐血清与加替沙星联用后 ,能够增强抗菌药物对黏液型铜绿假单胞菌生物被膜的杀菌活性。     

EDTA-2Na联合抗菌药物对铜绿假单胞菌的体外抑菌及生物膜抑制作用研究

目的 探讨乙二胺四乙酸二钠(ethylenediaminetetraacetic acid disodium,EDTA-2Na)联合抗菌药物对铜绿假单胞菌的体外抑菌及生物膜抑制作用。方法 对临床分离的10株亚胺培南耐药铜绿假单胞菌、8株黏菌素耐药铜绿假单胞菌和8株阿米卡星耐药铜绿假单胞菌,通过微量肉汤稀释棋盘法检测EDTA-2Na分别与亚胺培南、黏菌素和阿米卡星联用以及各自单用时对相应耐药菌株的最小抑菌浓度(minimal inhibititory concentration,MIC),并通过计算部分抑菌浓度指数(fractional inhibitory concentration index,FICI)评价联合抑菌效果;结晶紫生物膜试验检测EDTA-2Na分别与亚胺培南、黏菌素和阿米卡星联用及各自单用时对相应耐药菌株生物膜的抑制作用,通过测量A595值评价抑制生物膜效果。结果 EDTA-2Na与亚胺培南、黏菌素和阿米卡星联用后对相应耐药菌株的抑菌作用表现为协同或相加,对生物膜也具有明显的协同抑制作用。结论 EDTA-2Na联合抗菌药物对铜绿假单胞菌具有良好的体外抑菌作用及抑制生物膜作用。     

抗藻酸盐血清对粘液型铜绿假单胞菌生物被膜杀菌活性的影响

目的研究抗藻酸盐血清与加替沙星的联合作用对粘液型铜绿假单胞菌生物被膜杀菌活性的影响.方法采用MTT方法测定粘液型铜绿假单胞菌生物被膜活菌数,用微量稀释法测定抗生素对其的最低生物被膜清除浓度(MBEC).结果11抗藻酸盐血清与1×MIC、4×MIC和8×MIC加替沙星联用可以使细菌生物被膜中的活菌数从6.63±0.85、6.48±1.12和5.73±1.10 1g(cfu/cm2)显著降低至5.76±0.90、5.02±0.93和4.70±0.621g(cfu/cm2),使加替沙星对铜绿假单胞菌的最低生物被膜清除浓度从8μg/ml降低至4μg/ml.结论抗藻酸盐血清与加替沙星联用后,能够增强抗生素对于生物被膜的杀菌活性.     

克拉霉素和头孢硫脒对铜绿假单胞菌生物被膜的体外作用

目的探讨克拉霉素和头孢硫脒对铜绿假单胞菌(PA)生物被膜的影响。方法选取临床分离的呼吸道PA7株,用平板法培养细菌生物被膜,银染色法鉴定;微量稀释法检测克拉霉素和头孢硫脒对PA的最低抑菌浓度(MIC);噻唑兰法鉴定活菌数;结晶紫染色法观察不同浓度药物对PA粘附性影响。结果1/16MIC、1/4MIC克拉霉素可减少细菌对硅胶膜粘附(P<0.05),且可显著增强1/4MIC、1/2MIC的头孢硫脒对铜绿假单胞菌生物被膜的抑菌活性(F=20.193,P<0.01)。结论克拉霉素与头孢硫脒联合应用对生物被膜铜绿假单胞菌呈抗菌协同作用。     

铜绿假单胞菌生物被膜研究进展

铜绿假单胞菌是临床上常见的机会致病菌和耐药菌之一,它的感染常伴随着生物被膜的产生,进而造成严重的慢性感染和持续性感染。由于铜绿假单胞菌生物被膜的产生使其产生耐药性,并能够逃避宿主免疫系统的攻击,因此传统治疗方法很难将其去除。以生物被膜为靶标开发新型抗感染药物可以降低病原菌的耐药性,有望发展成1种新的治疗方法。本文总结了铜绿假单胞菌生物被膜的形成过程、主要成分的结构、生物合成过程及其功能,并对已经报道的靶向生物被膜的新型药物进行了总结。     

克拉霉素对铜绿假单胞菌生物被膜的影响

目的 :研究克拉霉素对铜绿假单胞菌生物被膜生物特性的影响。方法 :采用结晶紫染色法测定生物被膜中细菌的粘附性 ;浓度梯度渗透法测定生物被膜的渗透性 :采用卡唑 /乙醇法测定克拉霉素对藻酸盐的合成抑制作用。结果 :采用平板法 7d可建立稳定的生物被膜 ,1/4MIC克拉霉素与 8×MIC加替沙星联合应用后光密度值由 ( 0 .12 6± 0 .0 11)显著的降低至 ( 0 .114± 0 .0 12 ) ,4μg/ml组、8μg/ml组、16 μg/ml组加替沙星的渗透浓度 ( μg/ml)可由 ( 1.2 10± 0 .0 91)、( 2 .911± 0 .112 )、( 5 .911± 0 .2 13)显著的增加至 ( 1.730± 0 .132 )、( 3.911±0 .111)、( 7.90 2± 0 .35 4) ;80 μg/ml、40 μg/ml、2 0 μg/ml、10 μg/ml克拉霉素组生物被膜中藻酸盐的含量 ( μg/108CFU)由 ( 10 .0 7± 0 .5 5 )显著的降低至 ( 2 .34± 0 .2 1)、( 4 .91± 0 .16 )、( 7.2 2± 0 .36 )、( 8.82± 0 .5 0 )。结论 :克拉霉素可降低铜绿假单胞菌生物被膜中细菌的粘附性 ,增强加替沙星在生物被膜中的渗透能力 ,抑制铜绿假单胞菌藻酸盐的合成。     

Determination of ethylenediamine tetraacetic acid in injection forms by ion-pair chromatography

A high performance liquid chromatographic method was developed for the determination of ethylenediamine tetraacetic acid (EDTA) in injection forms. The method consists of direct extraction of the samples with ethyl acetate; the organic layers were evaporated to dryness and further diluted to a 0.025% (w/v) copper nitrate in order to achive the formation of the EDTA–copper solution complex. The chromatographic separation was performed on a C8 Hypersil column. The mobile phase consisted of a mixture of acetonitrile–0.015 M tetrabutylammonium hydroxide (10:90, v/v), (pH* 7.0) pumped at a flow rate of 1.5 ml min⁻¹. The UV detector was operated at 300 nm. Correlation coefficients of the calibration graphs were better than 0.9995, relative standard deviation was less than 2.5%. Detection limit of EDTA was found to be 1.97 μg ml⁻¹.