紫草素对大鼠离体胸主动脉舒张作用及机制研究

<正>紫草为紫草科植物的干燥根,性甘寒清热,入心肝二经,有凉血活血解毒清热的作用,提示其可能具有作用心血管系统的特性。紫草的有效化学成分主要包括脂溶性很强的萘醌类色素和水溶性成分[1-2],其中,紫草素是从紫草科植物     

黄芩苷对离体大鼠胸主动脉的舒张作用及机制

研究黄芩苷对大鼠离体胸主动脉环的舒张作用并探讨其可能的机制。记录去甲肾上腺素(NE)和KCl预收缩的大鼠离体主动脉环张力变化,观察黄芩苷的舒血管作用及不同工具药对其影响。实验发现黄芩苷对NE和KCl引起的去内皮和内皮完整大鼠胸主动脉环的收缩均有舒张作用;L-硝基精氨酸甲酯、亚甲蓝不能抑制黄芩苷对大鼠胸主动脉环的舒张作用,吲哚美辛能显著抑制;钾离子通道阻断剂4-氨基吡啶、四乙基胺、BaCl2不能抑制黄芩苷对胸主动脉环的舒张作用,格列苯脲能抑制黄芩苷的舒张作用;无钙环境下,黄芩苷预处理对NE收缩有明显抑制作用。因此,黄芩苷具有浓度依赖性血管舒张作用,此作用具有内皮依赖性和非内皮依赖性特点,内皮依赖性收缩可能与前列环素途径有关,非内皮依赖机制可能与KATP通道及钙离子通道有关。     

白杨素对大鼠矽肺纤维化的干预作用

目的 探讨白杨素对矽肺大鼠肺纤维化的干预作用。方法 SPF级雄性SD大鼠30只,随机分为5组：正常对照组、矽肺模型14 d组、矽肺模型56 d组、白杨素治疗14 d组和白杨素治疗56 d组。模型组大鼠予以气管灌注二氧化硅悬液(50 mg/只)造模,白杨素治疗组大鼠在造模后每天灌胃白杨素(50 mg·kg^-1)。采用肺功能仪对大鼠肺功能相关指标进行检测;HE染色观察大鼠肺组织的病理形态改变;天狼猩红染色观察大鼠肺组织中I、III型胶原的分布情况;试剂盒检测大鼠血清和肺泡灌洗液中转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的分泌水平,以及大鼠肺组织中的羟脯胺酸(hydroxyproline, HYP)的含量。结果 与对照组相比,矽肺模型14、56 d组大鼠肺部潮气量、每分钟通气量、呼吸频率均下降,气道狭窄指数均上升;肺组织中炎症细胞浸润均加重、矽结节数量均增多;Ⅰ、Ⅲ型胶原分布均增多;肺组织中HYP含量、肺泡灌洗液和血清中TGF-β1含量均升高。与模型组相比,白杨素治疗14、56 d组大鼠肺功能损害均减轻;肺组织中炎症...     

钙通道阻滞剂对甲亢性高血压大鼠胸主动脉舒张反应的影响

目的探讨T型和L型钙通道阻滞剂对甲亢性高血压大鼠离体胸主动脉舒张反应的影响。方法大鼠皮下每天注射甲状腺素(T4)0.5mg.kg-1的剂量或等体积的生理盐水维持16d,制备甲亢性高血压大鼠模型组和对照组。采用甲亢性高血压大鼠模型组和对照组的大鼠离体胸主动脉血管环标本,观察T型钙通道阻滞剂mibefradil(mibe)和L型钙通道阻滞剂diltiazem(dilt)对两组大鼠胸主动脉血管环舒张反应的影响。结果与对照组相比,甲亢性高血压大鼠体重明显下降而心率和收缩压明显升高;胸主动脉血管细胞外膜明显增厚,平滑肌细胞核变大并排列不规则。甲亢性高血压疾病时,T型和L型钙通道阻滞剂对胸主动脉的舒张作用明显增强。结论甲亢性高血压病理状态下,胸主动脉T型和L型钙通道的功能增强,可能成为治疗甲亢性高血压的药物靶点。     

阿魏酸对离体大鼠冠状动脉的舒张作用及机制探讨

目的探讨阿魏酸(ferulic acid,FA)对离体大鼠冠状动脉的舒张作用及机制。方法采用微血管张力法,测定FA对静息及预收缩大鼠离体冠状动脉舒张作用;观察内皮对FA舒张作用的影响;探讨FA舒张作用与细胞外钙内流和内钙释放的关系;应用钙激活K~+通道(K_(Ca))阻断剂四乙胺(TEA)、ATP敏感K~+通道(K_(ATP))阻断剂格列苯脲(Gli)、内向整流K~+通道(KIR)阻断剂氯化钡(BaCl_2)、电压依赖性K~+通道(K_V)阻断剂4-氨基吡啶(4-AP)、NOS抑制剂L-硝基精氨酸甲酯(L-NAME)、环氧酶抑制剂吲哚美辛(Indo)等工具药,探究FA舒张大鼠离体冠状动脉的作用机制。结果 FA对大鼠离体冠状动脉静息张力无明显影响;浓度依赖性的舒张KCl(60 mmol·L~(-1))、U46619(1μmol·L~(-1))、PE(10μmol·L~(-1))预收缩的大鼠冠状动脉(P<0.05);内皮对FA舒张作用无明显影响(P>0.05);FA能够明显抑制外钙依赖性和内钙释放引起的血管收缩(P<0.05);4-AP(1mmol·L~(-1))能抑制FA的舒张作用,TEA、Gli、BaCl_2、LNAME、Indo无明显影响(P>0.05)。结论 FA对离体大鼠冠状动脉的舒张作用可能与血管平滑肌细胞上KV通道激活、细胞肌浆网内钙释放、外Ca~(2+)通道的阻滞有关,与K_(Ca)、K_(ATP)、K_(IR)通道无关,也不依赖于内皮功能。     

螺内酯对离体大鼠胸主动脉环舒张功能的作用和机制

目的研究螺内酯(spironolactone,SPT)对离体血管平滑肌张力影响,同时探讨SPT的作用机制。方法离体血管平滑肌张力记录法,应用SPT,观测其对Sprague Dawley(SD)大鼠离体胸主动脉环的作用及不同工具药的影响。结果 SPT对KCl(30 mmol.L-1)和NE(1μmol.L-1)预收缩的血管环具有浓度依赖的舒张作用,对内皮完整和去内皮血管环舒张作用无差异,该舒张作用为非内皮依赖性。Na+/H+交换阻滞剂氨氯吡咪(amiloride,AM,1μmol.L-1)对SPT的舒血管作用有抑制作用。在KCl预收缩基础上,加入钾通道阻断剂氯化钡(BaCl2,2μmol.L-1)、四乙胺(TEA,0.2 mol.L-1)、四氨基吡啶(4-AP,1 mmol.L-1)均不能抑制SPT的舒血管效应,ATP敏感钾通道(KATP)格列苯脲(Gli,10μmol.L-1)能抑制SPT对血管的舒张作用。在无钙的生理盐溶液中,SPT对CaCl2收缩血管有明显抑制作用。结论 SPT舒张血管的作用具有浓度依赖性,其作用机制可能与抑制Na+/H+交换、ATP敏感钾通道(KATP)以及钙离子内流有关。     

维药唇香草挥发油对大鼠离体胸主动脉的舒张作用及其机制

目的:研究唇香草挥发油(VOZ)的舒张血管作用及其作用机制.方法:采用BL-420生物机能实验系统,描记VOZ对二唑[4,3-a]喹喔啉-1-酮(OQD)、四乙基氯化铵(TEA)、格列苯脲(Gliben)和氯化钡(BaCl2)预处理内皮去除组和内皮完整组血管张力变化及无钙高钾液中钙离子收缩曲线.结果:VOZ对去氧肾上腺素(PE)预收缩的血管环具有浓度依赖的舒张作用,内皮去除组和内皮完整组血管舒张差异无统计学意义(P＞0.05),半数最大效应浓度(EC50)为219.66 mg·L-1.ODQ、TEA、Gliben和BaCl2分别预处理不能抑制VOZ的血管舒张效应(P＞0.05).VOZ对无钙高钾液中钙离子收缩曲线均有显著的抑制作用(P＜0.05),其最大浓度抑制率为44.4％.但VOZ不能抑制无钙液中PE引起的内钙释放(P＞0.05).结论:VOZ具有非内皮和浓度依赖的舒张血管作用,其机制可能与抑制外钙内流干扰胞质内钙离子平衡有关.     

L—NNA对大鼠与豚鼠离体主动脉的作用

一氧化氮(NO)是一种重要的血管活性因子,通过激活平滑肌细胞内鸟苷酸环化酶而产生血管舒张作用,它还参与高血压、动脉粥样硬化及冠心病等心血管疾病的病理机制,与NO的前体左旋精氨酸(LArg)结构类似的物质如L-N~G-monomethylarginine(L-NMMA)能够选择性地抑制NO合成酶,减少NO的生成,从而对心血管系统产生一系列的影响。L-N~G-nitro-arginine(L-NNA)也是L-Arg的衍生物,关于它对脑血管、冠状动脉的作用已有报道。本文研究的是它对大鼠、豚鼠离体主动脉的作用。     

考察野黄芩素和白杨素的溶解度和稳定性

目的:考察野黄芩素和白杨素在纯水溶液中的溶解度以及在HBSS溶液中的稳定性,为药物的代谢研究和样品制备提供依据。方法:以药物在50%甲醇中的溶解度为标准,建立药物在纯水中的溶解度曲线,并考察药物在HBSS溶液中含量随时间变化的曲线,作为判断药物稳定性的依据。野黄芩素和白杨素的含量采用高效液相色谱法进行测定。结果:野黄芩素在0μM～102.4μM范围内可完全溶解,在7 d内0μM～25μM范围性质稳定。白杨素在0～25.6μm范围内可完全溶解,在2 d内0μM～25μM范围性质稳定,在7 d内0μM～12.5μM性质稳定。结论:野黄芩素和白杨素均在20μM的HBSS溶液溶解性和稳定性最好。     

白杨素对高糖损伤血管内皮的影响

目的探讨急性高糖条件下,白杨素(chrysin,Ch)对血管内皮舒张功能的影响。方法 (1)采用离体血管环实验,设立正常对照组(control)、白杨素处理组(Ch),观察正常糖浓度时,白杨素对大鼠离体主动脉的舒张作用;设立正常糖浓度组(NG,11 mmol·L~(-1) Glu)、高糖实验组(HG,44 mmol·L~(-1) Glu)、甘露醇对照组(M,11 mmol·L~(-1) Glu+33 mmol·L~(-1) Man)和白杨素急性给药组(HG+Ch,44 mmol·L~(-1) Glu+chrysin 1.0μmol·L~(-1) ),观察急性高糖孵育后,白杨素对大鼠离体主动脉舒张功能的影响。(2)采用HUVEC细胞系,设立正常糖浓度组(NG,5.5 mmol·L~(-1) Glu)、高糖实验组(HG,33.3 mmol·L~(-1) Glu)、甘露醇对照组(M,5.5 mmol·L~(-1) Glu+27.8 mmol·L~(-1) Man)以及不同浓度白杨素处理组(Ch 25、50μmol·L~(-1) ),观察白杨素对高糖孵育HUVEC细胞存活率的影响,并检测各组NO释放量。结果 (1)正常糖浓度时,白杨素能浓度依赖性地舒张大鼠主动脉环,其Emax和EC50为(58.94±9.61)%、51.9μmol·L~(-1) (P<0.01);高糖浓度时,HG组ACh诱导的血管舒张反应性明显降低,其Emax与EC50值分别下降至(32.12±3.92)%、78.0μmol·L~(-1) (P<0.01),但硝普钠(SNP)诱导的血管舒张无变化;白杨素急性干预后,可以明显改善高糖对ACh诱导的血管内皮依赖性舒张功能的损伤,其Emax与EC50值分别为(70.7±3.87)%和0.852μmol·L~(-1) (P<0.01)。(2)HUVEC高糖处理后,细胞存活率降低至(82.56±3.97)%,白杨素(25、50μmol·L~(-1) )干预后能浓度依赖地增强HUVEC的细胞存活率,其细胞存活率可分别增至(103.4±4.78)%、(107.6±11.58)%;并且能提高高糖处理后细胞培养液NO的释放量。结论白杨素可以保护急性高糖损伤的血管内皮舒张功能,并增加内皮NO释放。     

髂内动脉和腹壁下动脉在肾移植供肾动脉损伤中的应用

目的探讨髂内动脉和腹壁下动脉在肾移植供肾动脉损伤中的应用。方法采用腹壁下动脉进行极动脉、副肾动脉的重建,采用髂内动脉及其分支对供肾动脉属于2、3支类型的肾脏进行血管重建。结果术后患者均未发生外科并发症。2例术后发生急性排斥反应,经用抗胸腺细胞球蛋白治疗后,血肌酐逐渐下降。1例于1个月时降至正常。1例徘徊在180.0μmol/L,3个月后恢复正常。术后随访12个月彩超显示各支动脉均通畅,移植肾血液供应丰富、均匀。结论采用髂内动脉和腹壁下动脉体外重建供肾动脉的方法,可有效修复肾动脉畸形以及肾动脉过短的供肾,是一种安全可行的血管重建的方法,血管并发症较低,可有效应用于肾移植。     

Effect of engineered nanoparticles on vasomotor responses in rat intrapulmonary artery

Pulmonary circulation could be one of the primary vascular targets of finest particles that can deeply penetrate into the lungs after inhalation. We investigated the effects of engineered nanoparticles on vasomotor responses of small intrapulmonary arteries using isometric tension measurements. Acute in vitro exposure to carbon nanoparticles (CNP) decreased, and in some case abolished, the vasomotor responses induced by several vasoactive agents, whereas acute exposure to titanium dioxide nanoparticles (TiO₂NP) did not. This could be attributed to a decrease in the activity of those vasoactive agents (including PGF_2α, serotonin, endothelin-1 and acetylcholine), as suggested when they were exposed to CNP before being applied to arteries. Also, CNP decreased the contraction induced by 30 mM KCl, without decreasing its activity. After endoplasmic reticulum calcium stores depletion (by caffeine and thapsigargin), CaCl₂ addition induced a contraction, dependent on Store-Operated Calcium Channels that was not modified by acute CNP exposure. Further addition of 30 mM KCl elicited a contraction, originating from activation of Voltage-Operated Calcium Channels that was diminished by CNP. Contractile responses to PGF_2α or KCl, and relaxation to acetylcholine were modified neither in pulmonary arteries exposed in vitro for prolonged time to CNP or TiO₂NP, nor in those removed from rats intratracheally instilled with CNP or TiO₂NP. In conclusion, prolonged in vitro or in vivo exposure to CNP or TiO₂NP does not affect vasomotor responses of pulmonary arteries. However, acute exposure to CNP decreases contraction mediated by activation of Voltage-Operated, but not Store-Operated, Calcium Channels. Moreover, interaction of some vasoactive agents with CNP decreases their biological activity that might lead to misinterpretation of experimental data.     

Autoradiographic localization of [H]nicardipine binding sites in the human renal artery

In the present study the pharmacological profile and the anatomical distribution of dihydropyridine-type Ca²⁺ channels were analyzed in sections of the human renal artery by the use of combined radioligand binding and autoradiographic techniques with [³H]nicardipine as a ligand. The binding of [³H]nicardipine to sections of renal artery was time-, temperature- and concentration-dependent belonging, at least in the range of radioligand concentrations used, to a single class of high-affinity binding sites. The dissociation constant (K_D) value was 0.3 nM and the maximum density of binding sites (B_max) was 248 ± 16 fmol/mg tissue. The pharmacological profile of [³H]nicardipine binding to sections of human renal artery was consistent with the labeling of dihydropyridine-type Ca²⁺ channels. In fact, dihydropyridine derivatives were the most powerful competitors of [³H]nicardipine binding, whereas phenylalkilamine, benzothiazepine or non-selective channel modulators were weak or ineffective competitors. Light microscopic autoradiography revealed the highest density of [³H]nicardipine binding sites in the tunica media of the renal artery, probably within smooth muscle cells. A smaller accumulation of the radioligand occurred in the tunica adventitia, whereas the tunica intima did not show specific binding. These results indicate that light microscope autoradiography techniques associated with radioligand binding may represent a useful tool for analyzing the localization of receptors or targets of drug action within the arterial wall.     

A novel dihydropyridine with 3-aryl meta-hydroxyl substitution blocks L-type calcium channels in rat cardiomyocytes

Rationale

Dihydropyridines are widely used for the treatment of several cardiac diseases due to their blocking activity on L-type Ca^2 + channels and their renowned antioxidant properties.

Methods

We synthesized six novel dihydropyridine molecules and performed docking studies on the binding site of the L-type Ca^2 + channel. We used biochemical techniques on isolated adult rat cardiomyocytes to assess the efficacy of these molecules on their Ca^2 + channel-blocking activity and antioxidant properties. The Ca^2 + channel-blocking activity was evaluated by confocal microscopy on fluo-3AM loaded cardiomyocytes, as well as using patch clamp experiments. Antioxidant properties were evaluated by flow cytometry using the ROS sensitive dye 1,2,3 DHR.

Results

Our docking studies show that a novel compound with 3-OH substitution inserts into the active binding site of the L-type Ca^2 + channel previously described for nitrendipine. In biochemical assays, the novel meta-OH group in the aryl in C4 showed a high blocking effect on L-type Ca^2 + channel as opposed to para-substituted compounds. In the tests we performed, none of the molecules showed antioxidant properties.

Conclusions

Only substitutions in C2, C3 and C5 of the aryl ring render dihydropyridine compounds with the capacity of blocking LTCC. Based on our docking studies, we postulate that the antioxidant activity requires a larger group than the meta-OH substitution in C2, C3 or C5 of the dihydropyridine ring.     

代谢综合征大鼠肝肾功能和肾动脉形态结构的变化

目的 探讨代谢综合征大鼠肝肾功能的变化和肾动脉形态结构的改变.方法 分别用普通及高果糖饲料喂养大鼠（60只）10周,然后取血及解剖观察,了解大鼠肝肾功能和肾动脉形态结构的变化.结果 对照组大鼠和MS组大鼠血清ALT、AST、UA、BUN、CR浓度随着喂养时间延长均有上升趋势,但MS组大鼠上升速度明显快于对照组大鼠,表现出肝肾功能损害,与临床上MS病例类似;与对照组相比较,MS组大鼠肾动脉内膜呈不均一增厚、结构紊乱,中膜平滑肌细胞向内膜增生,内弹力膜有不同程度破坏、断裂,中膜层弹力纤维增厚,结构紊乱,平滑肌细胞增生明显,内中膜明显增厚,出现了MS病例所呈现的病理改变.结论 代谢综合征大鼠有轻度的肝肾功能损害,肾动脉内中膜有异常改变.     

彩色多普勒超声用于肾动脉狭窄的诊断分析

目的：探讨和研究彩色多普勒超声用于肾动脉狭窄的诊断价值。方法58例肾动脉狭窄患者,均采用彩色多普勒超声进行检查,对肾动脉收缩期峰值流速(PSV)、肾内段动脉阻力指数(RI)、肾脏长轴等进行测定,以肾动脉造影结果为对比参考,评价彩色多普勒超声用于肾动脉狭窄诊断的准确性。结果本次58例患者中共113根肾动脉进行检查,与肾动脉造影结果相比,敏感性60.0%,特异性83.3%,阳性预测值83.0%,阴性预测值60.6%;将113根肾动脉分为健侧组48根,患侧组65根,患侧组的肾脏长轴、PSV、RI与健侧组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论肾动脉彩色多普勒超声检查对于肾动脉狭窄的诊断结果准确度较高,但敏感性一般,用于介入治疗后的疗效评价效果较好,值得在临床上推广和应用。     

顽固性高血压肾动脉造影的临床研究

目的探讨肾动脉造影对肾动脉狭窄（RAS）的顽固性高血压的诊断价值。方法选取2012年11月～2014年3月本院收治的50例临床上高度怀疑RAS的顽固性高血压患者,分别行DSA和彩色多普勒超声检查。结果DSA检查结果：50例中,45例被诊断为RAS,且狭窄面积多〉50%,其中轻度8例,中度21例,重度16例,诊断率为90%;彩色多普勒超声诊断结果：25例被诊断为RAS,其中轻度6例,中度11例,重度8例,诊断率为50%,DSA对RSA的诊断率高于彩色多普勒超声（P〈0.05）。彩色多普勒超声诊断为RAS的25例患者中,有19例与DSA检查符合,其诊断符合率为76%,误诊率为24%。结论对临床上高度怀疑RAS的顽固性高血压患者行肾动脉造影,能准确诊断肾动脉狭窄情况,降低误诊、漏诊率,从而使患者得到及时有效的治疗,对保障患者的生活质量与生命安全有重要意义。     

超选择性肾动脉栓塞治疗肾出血的分析

目的探讨超选择性肾动脉栓塞治疗肾出血的临床效果。方法对8例肾出血患者分别采用聚乙烯醇（PVA）颗粒、明胶海绵、弹簧圈进行栓塞,分析其临床及影像资料。结果8例栓塞术成功,2例栓塞后出现患侧腰痛、低热。无严重手术相关并发症发生,术后随访无再次出血。结论超选择性肾动脉栓塞是肾出血微创、安全、有效止血的方法及对策。     

肾茶提取物抑制小鼠草酸钙结石作用研究

目的研究肾茶提取物的抗结石作用。方法小鼠饲饮含乙二醇和氯化铵的水建立草酸钙肾结石模型，测定肾脏、尿液中草酸和钙的含量。肾脏病理切片观察，进行草酸钙结晶的评分。结果肾茶提取物能明显降低肾结石小鼠尿液及肾组织中草酸和钙含量，减少草酸钙结晶在肾组织中的沉积。结论实验结果提示，肾茶提取物可能通过降低尿液草酸钙浓度，抑制结晶在肾脏的沉积而发挥作用。