丙戊酸钠对戊四氮致痫大鼠海马神经元凋亡的影响

目的 探讨丙戊酸钠(VAP)对戊四氮(PTZ)致痫大鼠海马神经元凋亡的影响.方法 将48只成年Wistar大鼠随机平均分为正常对照(NC)组、PTZ组和VAP组,PTZ组和VAP组大鼠腹腔注射阈下剂量的PTZ 35mg/(kg·d),直至达到点燃标准.点燃后,VAP组大鼠经腹腔注入VAP15mg/(kg·d),PTZ组大鼠经腹腔注入生理盐水,30min后,再腹腔注射PTZ诱发癫痫发作.应用免疫组化法检测大鼠海马神经元Fas、Caspase-3和Survivin的表达.结果 PTZ组大鼠海马神经元Fas、Caspase-3阳性细胞数和光密度明显高于VAP组和NC组(均P<0.01),Survivin阳性细胞数和光密度明显低于VAP组(P<0.01),但高于NC组(P<0.05);VAP组大鼠海马神经元Fas、Caspase-3阳性细胞数和光密度明显高于NC组(均P<0.05),Survivin阳性细胞数和光密度明显高于NC组(P<0.01).结论 癫痫发作可以导致大鼠海马神经元的凋亡,而丙戊酸钠有对抗癫痫发作导致细胞凋亡的作用,主要通过促进Survivin的表达和抑制Fas和Caspase-3的表达发挥作用.     

氯喹对戊四氮慢性致痫大鼠脑皮质及海马腺苷激酶表达的影响

目的 观察氯喹对戊四氮致痫大鼠皮质和海马区腺苷激酶(ADK)表达的影响,探讨ADK与癫痫发作的关系及氯喹在癫痫发生过程中的作用. 方法 30只健康雄性SD大鼠按照随机数字表法分为对照组、戊四氮(PTZ)致痫组和氯喹干预组,每组10只.观察大鼠行为学表现,记录其脑电改变,采用免疫组化法检测3组大鼠皮质和海马区ADK的表达. 结果 对照组大鼠无癫痫发作,PTZ致痫组大鼠出现Racine评分中Ⅳ～Ⅴ级严重发作,氯喹干预组大鼠出现Ⅰ～Ⅲ级发作,差异有统计学意义(P＜0.05).PTZ致痫组大鼠脑电记录呈频发高幅的痫样波,氯喹干预组大鼠脑电记录显示慢波、小棘波.PTZ致痫组大鼠脑内ADK表达明显增强,以海马区最为显著,与对照组相比差异均有统计学意义(P＜0.05).氯喹干预组大鼠脑内ADK表达降低,但距离正常水平仍有较大差距,与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 癫痫脑组织中存在ADK的表达异常,氯喹可以抑制这种表达,有效控制癫痫发作.     

戊四氮致痫对大鼠海马星形胶质细胞的影响

目的　探讨戊四氮（ＰＴＺ）致痫对大鼠海马星形胶质细胞的影响。方法　应用免疫组织化学方法观察ＰＴＺ致痫后大鼠海马内胶原纤维酸性蛋白（ＧＦＡＰ）变化的特点,同时观察了不同强度的痫性发作与ＧＦＡＰ改变的关系。结果　ＧＦＡＰ改变于ＰＴＺ致痫后１２ｈ 开始,２４ｈ 达到高峰,７２ｈ 已开始回落,并且痫性发作的强度与ＧＦＡＰ改变有一定的联系。结论　癫痫与星形细胞之间确有一定联系。     

硫丙咪胺对戊四氮致痈幼鼠海马GFAP、c—fos表达和学习认知的影响

目的：观察硫丙咪胺（Thi）对戊四氮（PTZ）致痫幼大鼠海马胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）、c-fos表达及学习认知的影响。方法：发育期SD幼鼠40只随机分为对照组、PTZ致瘸组、TM 30mg·kg^-1干预组和Thi15mg·kg^-1干预组（均n=10）。观察各组大鼠瘸样行为，水迷宫实验观察学习认知能力、免疫组化检测海马GFAP和c-fos的变化。结果：对照组无痫样发作，阿z致痫组有重度发作，Thi30mg·kg^-1干预组有轻度发作（P〈0．05）；水迷宫实验中，PTZ致痫组寻找平台潜伏时间延长和通过平台次数减少，Thi30和15mg·kg^-1干预组寻找平台潜伏时间明显缩短，通过平台次数增加明显，差异有统计学意义（P〈0．05）；PTZ致痫组GFAP和c-fos表达明显强于Thi干预组，差异有统计学意义（P〈0．05），其中Tiff30与15mg·kg^-1干预组相比差异也有统计学意义（P〈o．05）；GFAP和c—fos免疫组化表达与大鼠空间学习记忆能力呈正相关。结论：Thi可能通过抑制PTZ致瘸幼大鼠海马GFAP、c—fos表达，减轻癫痫发作程度，提高其学习认知能力。     

白藜芦醇对戊四氮致痫大鼠脑脊液、血清S1OOB蛋白的影响

目的 研究白藜芦醇(Res)对戊四氮致痫大鼠脑脊液、血清S100B蛋白的影响.方法 采用戊四氮(PTZ)腹腔注射建立慢性癫痫模型,造模成功后予以Res(15 mg/kg·d)灌胃干预10 d;采用酶联免疫吸附法测定脑脊液、血清S100B蛋白含量,海马标本行Nissl染色.结果 经28 d连续给药,18只大鼠符合Racine点燃标准,Res干预组大鼠痫性发作潜伏期明显延长,且发作时间明显低于癫痫模型组、二甲基亚砜组(P＜0.05).海马Nissl染色提示Res干预对大鼠海马CA1、CA3区神经元有保护作用(P＜0.05),而对齿状回保护作用不明显(P＞0.05).Res干预组大鼠脑脊液、血清S100B蛋白含量低于癫痫模型组、二甲基亚砜组(P＜0.05).结论 Res降低PTZ致痫大鼠脑脊液、血清S100B蛋白含量,或许减缓癫痫发作脑损伤发挥神经保护作用.     

环维黄杨星D对高血压大鼠脑缺血神经胶质原纤维酸性蛋白与神经粘蛋白表达的影响

目的 观察中药单体环维黄杨星D（CVB-D）对易卒中型肾血管性高血压大鼠（RHRSP）脑缺血再灌注不同时间神经胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）与神经粘蛋白（neurocan）表达的影响。方法 100只SD大鼠随机分成随机分为空白组10只（不作任何处理的RHRSP）、假手术组10只（仅作手术创伤分离动脉，不结扎动脉）、CVB-D治疗组40只、生理盐水对照组40只。采用环形银夹使SD大鼠的双侧肾动脉狭窄，制成RHRSP，再用线栓法制成一侧大脑中动脉闭塞（MCAO）模型。用免疫组化等方法观察CVB-D对脑缺血2h后再灌注1、7、14、30d不同时间点大鼠脑组织GFAP与neurocan表达。结果 缺血2h再灌注后．治疗组脑缺血区周围GFAP阳性表达细胞呈现先递增后减少的趋势。与对照组相比，除第1天外，第7、14、30天差异都有显著性意义（P〈0．05）。Neurocan在空白组、假手术组未见阳性细胞，缺血再灌注1d对照组出现neurocan阳性表达细胞，并且呈先递增后减少趋势。治疗组neurocan阳性表达细胞与对照组相比．除第1天外，第7、14、30天差异都有显著性意义（P〈0．05）。结论 CVB-D有促进RHRSP脑缺血损伤区神经功能的修复作用，可能与其下调神经抑制因子GFAP、neurocan的表达等机制密切相关。     

HIF-1α基因修饰神经干细胞移植对大鼠损伤脊髓NF200和GFAP表达的影响

【摘要】目的研究低氧诱导因子-1α（HI-1α）基因修饰的神经干细胞移植对大鼠脊髓损伤后神经丝蛋白200（NF200）和胶质纤维酸性蛋白（GFAP）表达的影响及意义。方法采用电控脊髓损伤打击装置制作大鼠脊髓损伤模型。按随机数字表将120只SD大鼠平均分为4组：假手术组（Sham组）,单纯损伤组（SCI组）,神经干细胞组（NSC组）和HIF-1α基因修饰NSC组（HIF—NSC组）。应用免疫组化法检测受伤脊髓中HIF-1α、NF200和GFAP的表达。结果HIF-NSC组中HIF-1αt免疫阳性细胞平均光密度值比其他各组各时间点均高（P〈O．01）,且表达高峰延迟至移植后14d;除第1天外,HIF—NSC组NF200表达比SCI组和NSC组明显增高（P〈0．05）,移植后28dNF200免疫阳性轴突数目也比SCI组和NSC组明显增多（P〈0．01）;移植后7d、14d、28dGFAP免疫阳性细胞面积均比SCI组和NSC组明显减少（P〈0．01）。结论HIF-1α基因修饰NSC移植可引起HIF-1α在损伤脊髓内有效表达,且能明显的促进NF200的表达,并能在脊髓损伤的后期抑制GFAP的表达。这提示HIF-1α基因修饰的NSC移植可减少受伤脊髓中胶质细胞的增生和胶质疤痕的形成,促进轴突再生。     

白藜芦醇对戊四氮致痫大鼠脑脊液、血清S100B蛋白的影响

目的研究白藜芦醇（Res）对戊四氮致痫大鼠脑脊液、血清S100B蛋白的影响。方法采用戊四氮（PTZ）腹腔注射建立慢性癫痫模型,造模成功后予以Res（15mg／kg·d）灌胃干预10d;采用酶联免疫吸附法测定脑脊液、血清S100B蛋白含量,海马标本行Nissl染色。结果经28d连续给药,18只大鼠符合Racine点燃标准,Res干预组大鼠痫性发作潜伏期明显延长,且发作时间明显低于癫痫模型组、二甲基亚砜组（P〈0．05）。海马Nissl染色提示Res干预对大鼠海马CAl、CA3区神经元有保护作用（P〈0．05）,而对齿状回保护作用不明显（P〉0．05）。Res干预组大鼠脑脊液、血清S100B蛋白含量低于癫痫模型组、二甲基亚砜组（P〈0．05）。结论Res降低PTZ致痫大鼠脑脊液、血清SIOOB蛋白含量,或许减缓癫痫发作脑损伤发挥神经保护作用。     

人脑梗死后细胞周期蛋白D1及细胞增殖核抗原的表达

对人脑梗死周围组织中的星形胶质细胞反应及细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）和细胞增殖核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）的表达水平进行观察，探讨人脑梗死后星形胶质细胞反应的机制。     

反义Noggin基因对成年大鼠海马内Nestin及GFAP表达的影响

目的探讨Noggin基因对成年大鼠海马内Nestin及GFAP表达的影响。方法反义寡核苷酸技术封闭内源性Noggin基因的表达,免疫组化法检测成年大鼠海马内Nestin与GFAP的表达。结果侧脑室连续4d注射Noggin基因的反义寡核苷酸后,可见海马齿状回(dentate gyrus,DG)内Nestin阳性细胞数与GFAP阳性细胞数较对照组显著增加;室下区GFAP阳性细胞数亦明显增加。结论Noggin对成年海马干细胞的分化有重要作用,内源性Noggin基因的表达可使神经干细胞向神经元方向分化。     

红藻氨酸诱导癫(癎)发作大鼠海马星形胶质细胞C-FOS基因表达的研究

目的研究癫发作大鼠海马星形胶细胞C-FOS基因表达的变化,探讨其对癫发作的维持与复发的影响。方法将83只成年雄性SD大鼠随机分为实验组58只,对照组25只。实验组在海马CA3区注射红藻氨酸(Kainicacid,KA)建立癫模型,对照组在相同部位注射等量生理盐水。利用免疫组织化学双重染色技术,分别在癫发作后1h、3h、6h、12h和24h观察大鼠海马星形胶质细胞C-FOS基因的表达。结果与对照组大鼠比较,癫模型鼠海马CA1区CFAP/C-FOS双标记阳性细胞百分率于癫发作后1h(12.70±0.03)、3h(17.10±0.05)、6h(24.92±0.04)明显升高(P<0.01),在6h达到高峰,在12h下降,但是仍较对照组高(10.71±0.06;1.59±0.02,P<0.01),在24h下降至对照组水平(2.00±0.02;2.08±0.03,P>0.05)。结论KA诱导大鼠癫发作,导致海马星形胶质细胞C-FOS基因相对持续的高表达,从而激活星形胶质细胞,产生高致性的病理环境,可能是癫发作的维持以及复发的病理生理机制之一。     

去势对戊四氮点燃大鼠癫痫模型的行为学表现

目的 研究去势对戊四氮点燃大鼠癫痫模型行为学表现的影响.方法 采用戊四氮腹腔注射制作癫痫大鼠模型,对照研究去势大鼠同正常大鼠的潜伏期及持续时间等行为学表现.结果 大鼠癫痫模型全部点燃,去势组平均潜伏期(8.09±0.89) min((-x)±SD)长于非去势组的(3.94±0.65) min((-x)±SD).发作时间也有所缩短,去势组(19.16 ±3.06) min((-x)±SD)略短于非去势组的(26.37±2.90) min((-x)±SD) (P ＜0.05).非去势组点燃时间明显短于去势组,非去势组平均点燃时间(20.83±6.15) d((-x)±s),而去势组平均点燃时间(24.6±5.64) d((-x)±SD).结论 戊四氮点燃大鼠致痫模型是一种成熟的、较为安全的癫痫模型.去势后,SD雄鼠较正常非去势SD雄鼠相比致痫潜伏期延长、持续时间缩短、发作频率及程度减轻,点燃时间也明显长于正常SD雄鼠.     

蝎毒耐热蛋白对癫痫大鼠海马组织BDNF及NPY表达的影响

目的探讨蝎毒耐热蛋白（SVHRP）对癫痫大鼠海马组织脑源性神经营养因子（BDNF）和神经肽Y（NPY）表达的影响。方法 健康成年雄性SD大鼠180只,按随机区组法随机分为3组（SVHRP组、模型组、正常组）,每组60只动物。经颈部皮下注射FeCl2诱发癫痫急性发作,选取4~5级（Racine的癫痫分级标准）癫痫发作的大鼠。HE染色观察大鼠海马组织形态,免疫印迹法及荧光免疫组织化学染色检测大鼠海马组织BDNF和NPY的表达。结果 HE染色结果显示模型组大鼠海马组织形态结果破坏严重,而SVHRP组明显改善。模型组和SVHRP组大鼠海马神经BDNF及NPY表达水平均明显低于正常组（P<0.05）,但SVHRP组BDNF及NPY 表达水平明显高于模型组（P<0.05）。结论 SVHRP能够减轻癫痫大鼠海马组织病理损伤程度,上调海马组织BDNF及NPY表达。     

Epileptiform activity induced by 4-aminopyridine in entorhinal cortex hippocampal slices of rats with a genetically determined absence epilepsy (GAERS)

Patients with absence epilepsy frequently develop convulsions later in life. We were therefore interested whether tissue from rats with a genetic absence epilepsy is more prone to seizure generation than normal animals. We compared the epileptiform activities induced by 4-aminopyridine (4-AP) induced in hippocampal–entorhinal cortex slices from genetic absence epilepsy rats of Strasbourg (GAERS, age 6 months) in which absence seizures have been present for about 4 months and from control non epileptic rats (NE). 4-AP induced short recurrent discharges in area CA1 of rat hippocampus, seizure-like events and interictal discharges in the entorhinal cortex. The various epileptiform discharges did not differ between the two strains in amplitude, duration and frequency. However, the latency for induction of different epileptiform activities by 50 μM 4-AP was significantly shorter in GAERS (about 16 min) than in NE rats (about 25 min). We also analysed differences in evoked field potentials (fp) in hippocampal area CA1 before, during and after application of 4-AP. Before application of 4-AP, responses to stimulation of Schaffer collateral were smaller in GAERS than in NE rats. Paired pulse potentiation was significantly larger in GAERS than in NE rats. 4-AP in the bath augmented the size of the evoked field potentials and this increase was larger in GAERS than in NE rats. Our findings show a greater excitability of hippocampal area CA1 in GAERS rats and a greater ability to develop 4-AP-induced epileptiform activity in combined hippocampal–enthorhinal cortex slices in GAERS than in NE rats.     

海马神经元激活物致疒间大鼠大脑皮质和海马γ-氨基丁酸受体的表达

目的 观察大鼠海马神经元在激活物作用下γ-氨基丁酸（GABA。）受体的表达,进一步探讨癫痫发病机制。方法 将大鼠海马神经尢被戊四氮（PTZ）作用后的激活物（实验组）及无血清培养基（对照组）注入大鼠侧脑室后观察其行为、脑电图（EEG）及脑组织GABA,受体表达的变化。结果 实验组大鼠注射后15～30min出现Ⅱ～Ⅲ级惊厥反应,EEG呈短程中高幅尖波、尖慢复合波;对照组的行为及EEG未见异常;各时点实验组大鼠脑组织GABA、免疫反应阳性细胞表达明显低于对照组（均P〈0．05）,对照组GABA,免疫反应阳性细胞广泛分布于大脑皮质、海马回、齿状回。结论 海马神经元激活物具有明显致痫作用,其致痫效应与GABAA受体含量下降有关。