慢性乙型肝炎患者HBV基因分型和耐药突变的分析

目的利用PCR-反向点杂交(PCR-RDB)技术检测乙型肝炎病毒(HBV)基因分型及耐药位点突变情况,为临床制定抗病毒治疗方案提供参考依据,帮助降低疾病进展风险。方法收集2017年7月至2019年6月南昌市第九医院的542例慢性乙肝患者,采用PCR-RDB法检测HBV基因型和耐药突变位点情况。结果本研究中542例CHB患者,共检出B基因型450例(83.0%,450/542),C基因型68例(12.6%,68/542),检出BC基因型、BD基因型和其他基因型分别为13(2.4%,13/542)、8(1.5%,8/542)、3(0.6%,3/542)。同时,检出184例患者发生耐药突变,耐药检出率为33.9%(184/542),其中B基因型151例,耐药检出率为33.6%(151/450),C基因型22例,耐药检出率为32.4%(22/68),B、C基因型在耐药检出率方面无统计学差异(P0.05)。分析结果显示,HBV对拉米夫定、替比夫定、阿德福韦酯和恩替卡韦4种药均具有耐药性,发生耐药突变例数分别为152(82.6%)、151(82.1%)、50(27.2%)和27(14.7%),同时检出20种耐药突变模式,单个位点突变以rt204 I/V突变检出率最高(33.7%,62/184),多个位点突变以rt204 I/V+rt180 M突变检出率最高(22.3%,41/184)。结论江西地区慢性乙肝患者HBV基因型主要以B、C基因型为主,核苷(酸)类似物相关HBV耐药突变模式复杂多样,且耐药检出率较高。     

1704例慢性乙型肝炎患者拉米夫定耐药相关基因突变分析

目的对慢性乙型肝炎(CHB)患者进行拉米夫定(LAM)多位点耐药突变检测。方法提取病毒核酸,对聚合酶链反应扩增产物进行测序,采用DNA STAR(Lasergene)软件分析测序结果。结果共对1 704例CHB患者进行耐药突变检测,检出的主要突变类型为rtM204V/I,约占60.1%,约36.1%的患者合并rtL180M突变,1.3%的患者合并rtV173L突变。结论rtM204V/I是LAM耐药突变的主要类型,可合并rtL180M或rtV173L突变;准确检测各类型耐药突变对临床用药具有重要的指导意义。     

拉米夫定耐药慢性乙型肝炎患者HBVP区基因突变模式与临床特征

目的分析慢性乙型肝炎患者在拉米夫定（LAM）治疗过程中出现耐药后,HBVP区基因突变模式及临床特征。方法对2009年4月～2009年12月在石家庄市第五医院就诊的116例临床诊断为LAM耐药慢性乙型肝炎患者进行HBVP区基因序列测定。结果116例临床诊断为LAM耐药患者血清HBVDNA水平为（5．34±1．21）log10拷贝／mL,ALT为（135±89）U／L,60．7％（70／116）的患者出现ALT升高。116例患者均出现基因耐药突变,共有7种突变模式,94．8％（110／116）发生YMDD基序突变,其中单纯YMDD突变占22．4％（26／116）,YMDD联合rtLl80M突变占72．4％（84／116）,5．2％（6／116）发生单纯rtLl80M突变。rtM204V联合rtLl80M突变的发生率为87．5％（56／64）,rtM204I联合rtLl80M突变的发生率为69．4％（50／72）,差异有显著统计学意义（P=0．04）。LAM耐药时,4种突变类型即rtM204I、rtLl80M＋rtM204V、rtLl80M＋rtM2041和rtLl80M＋r[IⅥ204V／I患者血清HBeAg、HBVDNA、ALT水平之间差异无统计学意义,P值分别为0．63,O．72,0．82。结论YMDD基序突变是LAM耐药后HBVP区基因突变的主要模式,rtM204V多以联合rtLl80M突变的形式存在,LAM耐药后患者肝组织损伤程度以及病毒复制水平可能与HBVP区突变类型无关。     

阿德福韦酯治疗拉米夫定耐药慢性乙型肝炎的疗效

目的比较阿德福韦酯单药及其联合拉米夫定治疗拉米夫定耐药的慢性乙型肝炎的疗效。方法对30例阿德福韦酯联合拉米夫定及29例阿德福韦酯单药治疗拉米夫定耐药的慢性乙型肝炎患者的疗效进行分析,比较2组患者HBV-DNA转阴率、HBeAg阴转率、HBeAb转换率、ALT复常率。结果 HBV-DNA的阴转率联用组在治疗12、24、48、72周时分别为36.7%、46.6%、73.3%、76.7%;单药组分别为34.4%、44.8%、65.5%、51.7%,2组之间比较在72周时差异有统计学意义（P〈0.05）,而在48周之前2组HBV-DNA的阴转率比较差异无统计学意义（P〉0.05）。治疗72周时,联合组的HBeAg阴转率为39.9%,要显著高于单药组的17.2%（P〈0.05）。ALT复常率比较在12周时联合组的63.3%显著高于单药组的31.0%（P〈0.05）。结论阿德福韦酯单药或联合拉米夫定均是治疗拉米夫定耐药慢性乙型肝炎的有效方法,联合治疗的疗效要优于单药治疗。     

慢性乙型肝炎患者拉米夫定耐药后的后续抗病毒治疗

目的探讨慢性乙型肝炎患者拉米夫定耐药后采用α-干扰素或（和）α1胸腺肽进行后续抗病毒的治疗效果.方法66例拉米夫定耐药患者,分治疗组和对照组.治疗组36例,用α-干扰素或（和）α1胸腺肽治疗1个月后停用拉米夫定,然后继续用α-干扰素或（和）α1胸腺肽治疗,共6个月.对照组30例,直接停用拉米夫定,不用其他抗病毒药.定期进行血清肝功能和病毒学指标检测.结果治疗组肝功能复常率、HBV DNA阴转率和HBeAg/抗-HBe转换率均明显高于对照组,治疗组HBVDNA阴转率最高为27.8%,HBeAg/抗-HBe转换率最高为25.0%.结论慢性乙型肝炎患者拉米夫定耐药后采用α-干扰素或（和）α1胸腺肽进行后续抗病毒治疗是有益的.     

太仓市慢性乙型肝炎患者耐药突变和基因型分布研究

目的：研究太仓地区慢性乙肝患者耐药突变和基因型分布情况,及 HBV 基因型与耐药突变的相关性。方法选择太仓地区350例慢性乙型肝炎患者,在使用核苷（酸）类药物抗病毒前,检测患者耐药突变及基因型情况,分析患者耐药突变与基因型的相关性。结果350例慢性乙肝患者,HBV 基因型分布：B 基因型172例,占49.14％;C 基因型164例,占46.85％;其中 D基因型9例,占2.57％;B、C 混合型基因型有5例,占1.42％;未发现其他基因型。本研究共检出58例耐药突变患者,其中 B 基因型22例,C 基因型35例,D 基因型1例,B、C 混合基因型患者未发现耐药突变。耐药突变位点：与拉米夫定相关的耐药突变36例（10.28％）,与阿德福韦相关的耐药突变16例（4.57％）,与恩替卡韦相关的耐药突变6例（1.71％）。结论太仓地区慢性乙肝患者 HBV 基因型以 B、C 型为主,2种基因型占90％以上,两种基因型比例相似。C 基因型患者发生耐药突变的比例较 B 基因型高,拉米夫定相关的耐药突变比例最高。建议对用药史不明确、复发再治疗的慢性乙肝患者,在接受核苷（酸）类药物治疗前进行耐药检测,选择针对性治疗方案。     

乙型肝炎基因分型同耐药位点突变的关系研究

目的：探讨耐药位点突变与乙型肝炎病毒(HBV)基因分型及其他临床信息的相关性。方法以358例慢性乙型肝炎(CHB)患者为研究对象,采用聚合酶链反应(PCR)-反向点杂交法检测耐药位点及基因分型。收集患者血清 HBV DNA 载量、丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平,以及乙型肝炎病毒 e 抗原(HBeAg)、性别、年龄、核苷(酸)类似物用药时间等临床资料。结果所有标本均成功扩增阳性条带。HBV 基因型以 B 型(267例)为主,其次为 C 型(81例)、D 型(10例)。使用核苷(酸)类似物的311患者中完全野生型269例,未用药的47例患者均未见耐药突变。耐药位点突变以204及180/204位点突变为主。耐药突变与患者性别、年龄、血清 HBV DNA 载量、病毒基因型、ALT 水平及 HBeAg 无明显相关性(P >0.05);用药时间越长,耐药突变率越大(P <0.05);180位点突变与204位点突变有一定相关性(P <0.05)。结论PCR-反向点杂交技术可有效检测 HBV 基因型及突变位点,可有效指导临床用药。     

不同基因型乙型肝炎病毒患者拉米夫定治疗期间YMDD突变株的变化分析

目的研究不同基因型乙型肝炎病毒（HBV）患者拉米夫定治疗期间酪氨酸-蛋氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸（YMDD）突变株的变化。方法采用实时荧光聚合酶链反应（PCR）技术和基因测序法分别对115例接受拉米夫定治疗的乙型肝炎患者血清进行乙型肝炎病毒基因（HBV DNA）水平、YMDD突变株及基因型检测。结果拉米夫定治疗时间〈12个月、12~24个月及〉24个月患者的HBV DNA阳性率分别为75%、35%、16%,YMDD变异率分别为22%、54%、100%。对115例乙型肝炎患者进行HBV基因分型发现,B型占17%,C型占75%,B、C混合型占8%;其中,B型、C型患者中YMDD变异率分别为21%、19.5%,B、C混合型患者中未发现YMDD变异。HBV DNA与HBV的YMDD变异率无明显相关性（P〉0.05）。结论拉米夫定治疗期间,HBV的YMDD变异不受病毒基因型的影响。     

拉米夫定对前C区变异乙肝的治疗与乙肝病毒基因分型的研究

目的：探讨前C区变异的乙型肝炎患者基因型与拉米夫定疗效的关系。方法：随机选择80例HbeAg阴性、血清丙氨酸氨基转氨酶异常的慢性乙型病毒性肝炎患者，检测其HBV基因分型，并给予拉米夫定治疗。于治疗后第1，3，6，9，12个月分别检测患者肝功能及乙肝病毒定量变化，治疗9个月后再次检测乙肝病毒基因分型。结果：前C区变异乙型肝炎患者HBV基因分型：B型6．25％，C型26．25％，D型52．5％，E型8．75％，CD混合型5％，F型1．25％。HbeAg阴性乙型肝炎患者口服拉米夫定HBVYMDD突变株（YIDD／YVDD）多发生于HBV基因型D型、C型。前C区变异多发生于HBV基因型D型。结论：前C区变异多发生于HBV基因型D型，C型、D型对拉米夫定疗效依次降低。     

拉米夫定联合水飞蓟宾治疗对E抗原阳性的慢性乙型肝炎患者相关血液指标的影响

目的：应用拉米夫定联合水飞蓟宾治疗 E 抗原阳性的慢性乙型肝炎,通过治疗前后的相关血液指标变化判断疗效,为个体化治疗提供依据。方法选取 E 抗原阳性慢性乙型肝炎患者226例,按肝功能损伤程度分为轻度组55例、中度组94例和重度组77例,均给予口服拉米夫定100 mg,每日1次及服用水飞蓟宾70 mg,每日3次,疗程6个月。分别对治疗前后的相关血液指标进行分析。结果治疗6个月后,轻度组及中度组患者血清 ALT 复常率、E 抗原阴转率及 HBV-DNA 阴转率有不同程度的改善,而重度组上述指标则均显著提高（P ＜0．05）。结论拉米夫定联合水飞蓟宾治疗更能有效抑制 HBV-DNA 的复制,明显促进血清 ALT 复常率及提高 E 抗原阴转率,尤其是肝功能损伤程度重者;在一定程度上提高治疗慢性乙型肝炎的疗效。     

拉米夫定抗HBV治疗过程中HBV-DNA的反弹规律及变异研究

目的　观察拉米夫定抗HBV治疗过程HBV DNA的反弹规律及变异情况。方法　单一采用拉米夫定 (1 0 0mg/d)治疗 83例有活动性病毒复制的慢性乙型肝炎患者 (CHB) ,应用荧光全定量PCR检测CHB治疗前和治疗 2、6、1 2、1 8个月后血清HBV DNA的含量 ,应用UniArray技术检测YMDD位点突变。结果　根据HBV DNA含量的下降、波动、反弹分 3种类型 :A类 2 8例 ,HBV DNA含量呈直线下降 ,无HBV基因突变 ;B类 2 3例 ,HBV DNA含量先下降、后反弹、波动、再下降 ,无HBV基因突变 ;C类 32例 ,HBV DNA含量先下降、后反弹、波动、再持续上升 ,有 2 7例HBV基因突变 ,其中YIDD突变 1 0例 ,YVDD突变 1 4例 ,YIDD和YVDD同时突变 3例。结论　拉米夫定抗HBV DNA治疗 2个月左右疗效十分显著 ;2至 6个月HBV DNA含量呈低水平波动 ;6至 1 2个月易出现反弹、波动 ;1 2个月后变异株形成趋势明显。     

Serum cytokine levels in patients with chronic hepatitis B according to lamivudine therapy

Background: Cytokines are known to play critical roles in the pathogenesis of chronic hepatitis B (CHB). However, the relationship between cytokines and treatment responses to drugs for CHB is not clearly defined yet. We measured the serum cytokine levels of interleukin (IL)‐1α, IL‐1β, IL‐2, IL‐4, IL‐6, IL‐8, IL‐10, vascular endothelial growth factor, interferon‐γ, tumor necrosis factor‐ (TNF‐α), macrophage/monocyte chemotactic protein 1, and epidermal growth factor to elucidate the cytokine expression pattern according to the patients' responses to lamivudine. Methods: Fifty‐eight specimens from 27 CHB patients and 98 specimens from healthy individuals were tested for 12 kinds of cytokines. The patients were grouped as: before treatment, ongoing treatment, duringmaintaining remission, and patients with viral breakthrough owing to resistance against lamivudine. The Evidence Investigator (Randox, Antrim, UK), a protein chip analyzer, was used to quantify serum cytokines. Results: Among 12 cytokines, IL‐6, IL‐8, IL‐10, and TNF‐α were significantly elevated in patients with resistance against lamivudine compared with patients maintaining response. IL‐8, IL‐10, and TNF‐α levels also weak to moderate correlated with ALT and HBV‐DNA concentrations. Conclusions: Serum cytokine levels would reflect the pathological differences of the individual treatment phases and may become useful indices in monitoring the treatment response of CHB. J. Clin. Lab. Anal. 25:414–421, 2011. © 2011 Wiley Periodicals, Inc.     

拉米夫定联合阿德福韦酯治疗失代偿期乙型肝炎肝硬化的临床分析

目的 探讨拉米夫定联合阿德福韦酯治疗失代偿期乙型肝炎肝硬化的临床疗效.方法 68例失代偿期乙型肝炎肝硬化患者在综合护肝及对症治疗基础上,治疗组22例,给予拉米夫定100 mg/d联合阿德福韦酯10 mg/d口服;对照A组23例,给予阿德福韦酯10 mg/d口服;对照B组23例,给予拉米夫定100 mg/d口服,治疗6个月.治疗前后都观察肝功能、血清乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV DNA)水平以及变化.结果 拉米夫定和阿德福韦酯联合治疗组与对照A组和对照B组HBVDNA阴转率分别为81.8%、47.8%和43.5%,联合治疗组明显优于对照组A组及B组(P<0.05);肝功能Child-Pugh评分分别为(6.8±1.4)分、(7.2±61.5)分和(7.4±1.9)分,联合治疗组明显优于两个对照组(P<0.05).结论 拉米夫定联合阿德福韦酯抗病毒治疗失代偿期乙型肝炎肝硬化优于单独使用拉米夫定或阿德福韦酯治疗,且不易产生耐药性,并可起互补作用,患者能长期稳定病情.     

深圳地区乙型肝炎病毒基因分型和预存耐药变异的研究

目的：了解深圳地区临床慢性 HBV 感染患者的 HBV 基因型和预存耐药变异情况。方法应用 PCR 结合反向点杂交法检测244例临床慢性 HBV 感染血清样本的基因型和预存耐药变异情况。结果244例慢性 HBV 感染症状的患者中,共发现有3种 HBV 基因型,其中 B 型143例,占58.6％;C 型100例,占41％;D 型1例,占0.4％;244例慢性 HBV 感染症状的患者中,有38例检出 HBV 预存耐药变异,预存耐药变异的总检出率为15.57％,其中与拉米夫定耐药相关的为22例（9.01％）,与阿德福韦酯耐药相关的为16例（6.56％）。结论深圳地区 HBV 基因型以 B、C 型为主,慢性 HBV 感染者其预存耐药率较高。对慢性 HBV 感染者进行 HBV 基因分型及预存耐药检测,对预测疾病进展及指导个体化治疗具有重要意义。     

基因芯片技术在乙肝病毒分型和耐药突变检测中的应用

目的探讨基因芯片技术在乙肝病毒(HBV)分型和耐药突变检测中的应用。方法采用基因芯片法检测105例HBV病毒携带者血清标本,观察HBV基因分型特点及针对核苷酸类药物的耐药突变情况,并结合受试者荧光定量PCR病毒载量、血清HBV标志物及病理检测结果进行分析。结果 105例HBV病毒携带者C型63例(60.0%),B型、C型混合型16例(15.2%),B型26例(24.8%),各基因型构成差异有统计学意义(P0.05)。C型HBV-DNA载量对数值、HBe Ag阳性率与B型比较差异有统计学意义(P0.05)。病理活检结果显示炎症分期G3~G4期、纤维化分级S3~S4级C型乙肝病毒携带者所占比重高于B型,差异有统计学意义(P0.05)。共检出耐药突变28例(26.67%);204I居多,占11.4%,180M+204V+204I突变共7例,占6.67%。临床耐药种类表现为拉米夫定耐药26例,阿德福韦耐药2例。结论基因芯片技术对乙肝病毒分型及耐药突变检测具有重要的作用。     

鸭乙型肝炎病毒耐药株的慢性感染研究

目的:建立鸭乙型肝炎病毒(DHBV)耐药株的慢性感染动物模型。方法:将DHBV野生株及耐药株质粒转染细胞,培养上清接种雏鸭。连续定量检测血清DHBV DNA;印迹杂交检测肝内病毒复制中间体;观察肝组织病理变化。结果:野生株组的病毒滴度和慢性感染率均高于耐药株组;肝组织中检测到DHBV的复制中间体与cccDNA,可见轻度炎症病理改变。结论:DHBV耐药株可形成慢性感染。     

非霍奇金淋巴瘤患者乙型肝炎病毒感染状况与预后的关系

目的：探讨非霍奇金淋巴瘤（NHL）患者乙型肝炎病毒（HBV）感染状况及预后的关系。方法：回顾性分析67例非霍奇金淋巴瘤患者HBV病毒表面抗原（HB sA g）的表达、肝功能变化及拉米夫定的作用,同时与67例非原发性肝癌实体瘤患者及67例普通人群做对比。结果：67例NHL患者HB sA g阳性率为23.9%,明显高于本地区普通人群（9.0%）及非原发性肝癌实体瘤患者（10.4%）;HB sA g阳性的NHL组中,化疗后肝损害发生率（68.8%）与HB sA g阴性患者发生率（29.4%）之间差异有显著性（P〈0.05）;拉米夫定在预防病毒复活时起到重要作用。结论：NHL患者HB sA g阳性率高于本地非原发性肝癌实体瘤患者（其他肿瘤组）及普通人群组,拉米夫定可在一定程度上预防HBV的再激活;HBV感染者在化疗时应加强保肝并密切监测肝功能的变化。     

Lamivudine for chronic hepatitis B

Lamivudine (Epivir^®, GlaxoSmithKline) was approved by the US Food and Drug Administration for the treatment of adult patients with chronic hepatitis B in 1998, and has since been shown to be of benefit to selected patients with chronic hepatitis B. Drug resistance is the main issue encountered during therapy, with lamivudine resistant mutants emerging at a rate of approximately 15 to 30% per year of therapy. These mutants are associated with relapse of hepatitis, and occasionally hepatic decompensation. Despite this, therapeutic indications and guidelines for lamivudine therapy have now been drawn up, which indicate that lamivudine will be the first line therapy for hepatitis B e antigen-positive chronic hepatitis B patients, although its role in hepatitis B e antigen-negative patients remains controversial.