有机酸对单核-内皮细胞粘附作用的影响

目的探讨氯原酸(CHA)、抗坏血酸(AA)、柠檬酸(CA)和苹果酸(MA)4种有机酸对单核-内皮细胞(MC-EC)粘附作用的影响,为开发利用天然食物成分有机酸防治动脉粥样硬化提供科学依据.方法通过原代培养人脐静脉内皮细胞(EC),观察氧化修饰的低密度脂蛋白(oxLDL)(100mg/L),不同剂量(10、20、40mg/L)CHA、AA、CA和MA4种有机酸+oxLDL(100mg/L),以及单纯CHA和AA3个剂量,分别与EC共培养12h后MC-EC的粘附率.结果正常对照组MC-EC的基础粘附率是(11.35±1.27)%;oxLDL组粘附率为(37.25±5.63)%,显著高于正常组(P<0.01);有机酸+oxLDL各组MC-EC粘附率与oxLDL组比较,有不同程度的降低,其中3个剂量组的CHA+oxLDL和AA+oxLDL的降低率分别为CHA60.81%、72.66%、100.96%,AA34.29%、65.06%、95.76%,呈剂量依赖性;CA+oxLDL只有高剂量组的MC-EC粘附率显著低于oxLDL组(P<0.05),MA+oxLDL3个剂量组无明显作用.单纯CHA和AA各个剂量组的MC-EC粘附率略低于正常对照组,但差异不显著.结论CHA和AA对oxLDL诱导的MC-EC粘附作用具有明显的抑制效应,CA作用较弱,而MA作用不明显.     

有机酸对人血管内皮细胞的保护作用

目的：探讨氯原酸（CHA）、抗坏血酸（AA）、柠檬酸（CA）和苹果酸（MA）4种有机酸对人血管内皮细胞的保护作用。方法：通过人脐静脉内皮细胞培养,从形态、生长状况和乳酸脱氢酶（LDH）释放方面,观察预先4h、与oxLDL同时加入、加oxLDL3h后加入有机酸3种情况,以及3个不同剂量（10、20、40mg/L)的有机酸＋oxLDL(100mg/L)对内皮细胞的作用。结果:oxLDL对内皮细胞具有明显的损伤作用,细胞生存率低于正常对照组,LDH释放率高于正常组。预先和同时加入CAH、AA、CA、和MA各组对oxLDL引起的内皮细胞损伤具有不同程度的保护作用,而后加入有机酸各组对oxLDL引起的内皮细胞损伤没有影响。3个剂量的CHA和AA＋oxLDL各组,以及CA和MA＋oxLDL的高剂量组的细胞生存率均高于oxLDL组,LDH释放率均低于ocxLDL组,呈明显的剂量效应关系。结论、氯原酸、抗坏血酸、柠檬酸和苹果酸4种有机酸对oxLDL诱导的内皮细胞损伤具有不同程度的预防性保护作用,其中以氯原酸和抗坏血酸的作用最佳,柠檬酸次之,苹果酸最终。     

急性脑梗死患者预后不良的预测分析

目的探讨血清单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、高迁移率蛋白B1(HMGB1)、脂联素(APN)和氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)水平对急性脑梗死(ACI)患者预后不良的预测价值。方法选取山东国欣颐养集团淄博医院2018年10月至2020年12月收治的165例ACI患者作为观察组, 另选同期体检健康者147例作为正常对照组, 检测两组血清MCP-1、HMGB1、APN和ox-LDL水平;观察组出院后随访3个月, 采用改良Rankin量表评分将其分为预后良好组和预后不良组, 比较两组血清MCP-1、HMGB1、APN、ox-LDL水平, 采用Logistic多元回归和受试者工作特征(ROC)曲线分析ACI患者预后不良的影响因素和血清MCP-1、HMGB1、APN和ox-LDL水平对ACI患者预后不良的预测价值。结果观察组血清MCP-1、HMGB1和ox-LDL水平高于正常对照组[(322.61 ± 65.27)ng/L比(163.18 ± 15.12)ng/L、(6.61 ± 3.54)μg/L比(2.90 ± 0.41)μg/L、(481.11 ± 177.67)mg/L比(247....     

山楂对人血管内皮细胞的作用

目的 :　探讨山楂对人血管内皮细胞的保护作用及其机制。方法 :　通过原代培养人脐静脉内皮细胞 (EC) ,从细胞形态学、细胞生长状态、细胞内乳酸脱氢酶 (LDH)释放、内皮细胞对单核细胞 (MC- EC)的粘附作用、以及低密度脂蛋白脂质过氧化 (TBARS)值测定方面 ,观察不同剂量山楂对氧化修饰的低密度脂蛋白 (Ox LDL)引起的 EC损伤的影响和对 EC的直接作用。结果 :　Ox LDL对 EC具有明显的损伤作用 ,Ox LDL组的细胞存活率低于正常对照组 (P<0 .0 5) ,细胞内 LDH释放率和 MC- EC粘附率均高于正常对照组 (P<0 .0 5) ;山楂可以有效地抑制 Ox LDL对 EC的损伤作用 ,三个剂量的山楂 +Ox LDL各组的细胞存活率均显著高于 Ox LDL 组 (P<0 .0 5) ,LDH释放率、MC- EC粘附率及 TBARS值均显著低于 Ox LDL组 (P<0 .0 5) ,呈剂量效应关系。单纯山楂组的中、高剂量组 MC- EC粘附率均显著低于正常对照组 (P<0 .0 5)。结论 :　山楂可以有效地保护人内皮细胞免受 Ox LDL的损伤 ,其机制与山楂的抗氧化作用和对 EC的直接作用有关     

染料木黄酮对ox-LDL诱导人静脉平滑肌细胞MCP-1表达的影响

目的: 研究染料木黄酮(Gen)对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉血管平滑肌细胞(hUVSMC)单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)mRNA和蛋白表达的影响。方法: 以hUVSMC为对象,采用逆转录聚合酶链反应和酶联免疫吸附试验观察不同浓度Gen(1.0×10-5、3.0×10-5、9.0×10-5 mol/L)对ox-LDL诱导的MCP-1 mRNA和蛋白表达的影响。结果:三种浓度的Gen均能明显降低ox-LDL诱导的hUVSMC MCP-1mRNA 和蛋白的表达,且高剂量与生理浓度的17b-雌二醇有相近的作用。结论:染料木黄酮能下调ox-LDL诱导的hUVSMC MCP-1mRNA和蛋白的表达,这可能是染料木黄酮抗动脉粥样硬化的重要机制之一。     

维生素E和β胡萝卜素对巨噬细胞氧化修饰低密度脂蛋白的影响

目的 :　研究维生素 E(VE)、β胡萝卜素 (βC)对巨噬细胞 (MΦ )介导的低密度脂蛋白 (LDL)氧化修饰能力的影响。方法 :　于培养成熟的 MΦ中分别加入不同剂量的 VE(40、1 0 0、2 0 0 μmol/L)和 βC(0 .5、1 .0、2 .0 μmol/L) 37℃孵育 2 4 h,通过测定培养物上清液中硫代巴比妥酸反应物 (TBARS)、荧光物质 (Lipofusin)、LDL电泳迁移率 (Rf)及共轭二烯 (Dienes)的形成 ,反映LDL的氧化修饰程度。结果 :　体外补充 VE可以显著降低培养物上清液中 TBARS、荧光物质以及共轭二烯的形成 ,明显抑制 LDL的电泳迁移率 ,随剂量增大作用加强 ;βC低剂量组 (0 .5μmol/L)可显著降低培养物上清液中 TBARS、荧光物质以及共轭二烯的形成 ,明显抑制 LDL的电泳迁移率 ,其余各组无明显影响。结论 :　 VE、βC均可抑制 MΦ介导 LDL氧化修饰的能力 ,并具一定的量效关系 ,提示在 MΦ氧化修饰 LDL的可调节因子中 ,抗氧化营养素是一种有效措施     

维生素C在低密度脂蛋白氧化修饰中作用的体外实验

目的：研究维生素C（VC）在预防低密度脂蛋白（LDL）氧化修饰中的作用。方法：在Cu^2 介导的无细胞体系中分别加入VC10,50,100,200μmol/L,巨噬细胞体中分别加入VC50,100,200μmol/L,以维生素（200μmol/L）为阳性对照,不添加维生素C组（VC0）为阴性对照,测定荧光物质（lipofusin),硫代巴比妥酸反应物质（TBARS）,LDL电泳迁移率（Rf),氧化型低密度脂蛋白（Ox-LDL),LDL氧化过程中的停滞时间等LDL的氧化修饰情况。结果：Cu^2 介导的无细胞体系中,高剂量VC（100,200μmol/L）在3,6,9h均能发挥其抗氧化作用,抑制TBARS,Ox-LDL生成,而VC低剂量（10,50μmol/L）则无此作用,相反在3h表现出促Ox-LDL生成作用,在巨噬细胞体系中,高剂量组（100,200μmol/L)能显著降低荧光物质,TBARS和LDL电泳迁移率（Rf),延长LDL氧化过程中的停滞时间,并存在剂量反应关系。结论：VC在LDL氧化修饰中具有双重作用,低剂量时能促进LDL氧化,高剂量时表现出抗氧化作用。     

镁对人体低密度脂蛋白氧化修饰的影响

目的 :　观察镁对人体低密度脂蛋白 (LDL)氧化修饰的影响。方法 :　一次性密度梯度超速离心法制备人天然 LDL,共轭二烯法检测 Mg2 +对 Cu2 +介导的 LDL氧化反应敏感性的影响 ,硫代巴比妥酸反应物 (TBARS)法检测 Mg2 +对 Cu2 +和内皮细胞介导的 LDL氧化修饰程度的影响。结果 :　 1 .LDL+Cu2 + +Mg2 +各剂量组 LDL氧化反应潜伏期较 LDL+Cu2 +组明显延长 ;2 .LDL+Cu2 + +0 .3mmol/L Mg2 +组和 LDL+Cu2 + +0 .6mmol/L Mg2 +组 TBARS低于 LDL+Cu2 + 组 ,P<0 .0 1 ;3.在内皮细胞介导的 LDL氧化体系中 ,补 Mg2 + 各剂量组 TBARS低于空白对照组 ,LDL+Mg2 +各剂量组 TBARS低于 LDL组 ,差异均具有显著性 (P<0 .0 5)。结论 :　在一定实验条件下 Mg2 +可阻断 LDL的氧化反应     

山楂总黄酮对人血管内皮细胞的作用

目的 探讨山楂总酮对人血管内皮细胞的保护作用及其机理。方法 通过原代培养人脐静脉内皮细胞（EC），从细胞形态学、细胞生长状况、细胞内乳酸脱氢酶（LDH）释放、内皮细胞对单核细胞（MC－EC）的粘附作用，以及低密度脂蛋白脂质过氧化（TBARS值）测定等，观察不同剂量（25，50，100mg／L)山楂总黄酮对氧化型低密度脂蛋白（oxLDL）诱导的EC损伤的影响和对EC的直接作用。结果 oxLDL对EC具有明显的损伤作用，oxLDL组的细胞生存率低于正常对照组（P＜0．05），LDH释放和MC－EC粘附率均高于正常对照组（P＜0．05）；山楂黄酮可以有效地抑制oxLDL对EC的损伤，3个剂量的山楂黄酮＋oxLDL组的细胞生存率均显高于oxLDL组（P＜0．05），LDH释放率、MC－EC粘附率和TBARS值均显低于oxLDL组（P＜0．05），呈剂量－效应关系。单纯山楂黄酮组的中、高剂量组MC－EC粘附率均显低于正常对照组（P＜0．05）。结论 山楂黄酮可以有效地保护内皮细胞免受oxLDL的损伤，其机理与山楂黄酮的抗氧化作用和对EC的直接作用有关。     

代谢综合征患者炎症反应C反应蛋白对单核细胞趋化蛋白-1表达的影响

目的 探讨代谢综合征(MS)炎症因子超敏C反应蛋白(hs-CRP)与血浆单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达的关系.方法 收集62例MS患者和正常健康人群(NS)52例,检测hs-CRP及MCP-1水平,分析hs-CRP和MCP-1相关性.计算稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR).体外分离培养外周血单核细胞,以不同浓度CRP刺激单核细胞,用定量PCR测定MCP-1表达变化.结果 与NS组比较,MS组hs-CRP及MCP-1水平明显升高,差异有统计学意义(均P＜0.01),两者呈正相关(r =0.653,P＜0.05)；血清hs-CRP及MCP-1水平与胰岛素抵抗指数呈正相关；CRP对外周血单核细胞中MCP-1的表达呈浓度依赖性,当CRP浓度增加到176nmol/L后,其升高程度进入平台期,比未刺激组高105％.结论 MS患者随着炎症反应程度的加重,胰岛素抵抗程度增强,MCP-1水平升高可能与由于hs-CRP水平增加所致.     

抗氧化维生素对内皮细胞增殖及凋亡的影响

目的：　观察氧化低密度脂蛋白（ｏｘＬＤＬ）对内皮细胞增殖与凋亡的影响以及抗氧化维生素（维生素Ｅ、维生素Ｃ及β－胡萝卜素）对内皮细胞的防治效应。方法：　在体外培养的小牛主动脉内皮细胞中分别加入不同浓度的抗氧化维生素,作用１２ｈ 后,再与终浓度为０．１ｇ Ｐｒ／Ｌ的ｏｘＬＤＬ共同培养２４ｈ,采用噻唑蓝比色分析法和流式细胞仪分析法对贴壁内皮细胞进行检测,分别观察抗氧化维生素对经ｏｘＬＤＬ作用的内皮细胞的形态、生长增殖、细胞周期及凋亡的影响。结果：　（１）维生素Ｅ和维生素Ｃ能显著减轻ｏｘＬＤＬ对内皮细胞形态的损伤作用;β－胡萝卜素作用稍弱。（２）三种抗氧化维生素均可降低ｏｘＬＤＬ对内皮细胞生长增殖的抑制作用,使其抑制率降低。（３）三种抗氧化维生素均可促进内皮细胞由Ｇ１ 期进入ＤＮＡ合成的Ｓ期,促进内皮细胞的增殖并阻止内皮细胞凋亡的发生。结论：　维生素Ｅ、维生素Ｃ及β－胡萝卜素均可减轻ｏｘＬＤＬ在形态、增殖及凋亡等方面对内皮细胞的损伤作用,这可能是抗氧化维生素加速内皮细胞损伤后修复、促进内皮细胞增殖,从而发挥其抗动脉粥样硬化形成的部分机制。     

抗氧化维生素对氧化密度脂蛋白作用的主动脉内皮细胞脂质过氧化损伤？…

为深入探讨抗氧化维生素（维生素Ｅ、维生素Ｃ及β－胡萝卜素）对氧化低密度脂蛋白（ｏｘＬＤＬ）损伤内皮细胞的防治作用及可能机理,我们以体外培养的小年主支脉内皮细胞为模型,在培养的主动脉内皮细胞中加入不同剂量的抗氧化维生素,共同培养１２ｈ,再与终浓度为０．１ｇ／Ｌ的ｏｘＬＤＬ继续培养２４ｈ,取贴壁细胞及培养液,通过硫代巴比妥酸荧光比色法（ＴＢＡ）和单核细胞（ＨＬ６０）粘附计数法观察不同浓度的抗氧化维生素     

Tomato waste: a potential source of hydrophilic antioxidants

Waste obtained from six genotypes of tomato was subjected to evaluation as potential sources of hydrophilic antioxidants on the basis of content of total phenolics (TPh; from 11.7 to 18.6 mg/g), total flavonoids (TFl; from 7.62 to 12.1 mg/g) and ascorbic acid (AA; from 0.51 to 1.89 mg/g), and antioxidant activities. The antioxidant activities of tomato waste extracts were evaluated using 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity, ferrous ion chelating activity (CA) and reducing power (RP) assay. The O(2) tomato waste extract was found to have the strongest antioxidant activity in scavenging DPPH radicals (effective concentration, EC(50) = 0.18 mg/ml). The Saint Pierre tomato waste extract showed the best performance in RP assay (EC(50) = 1.57 mg/ml). The Rutgers tomato waste extract exhibited a strongest CA (EC(50) = 1.49 mg/ml). The linear correlation analysis produced moderate-to-high correlation coefficients between the antioxidant activities and TPh, TFl and AA.     

Methionine-Loading Rapidly Impairs Endothelial Function,by Mechanisms Independent of Endothelin-1: Evidence for an Association of Fasting Total Homocysteine with Plasma Endothelin-1 Levels

Objective: Homocysteinemia is associated with elevated oxidative stress and impaired endothelial function. In the present study we examined the impact of oxidative stress in the development of endothelial dysfunction in both chronic and acute (methionine-induced) homocysteinemia in humans. We also examined the role of endothelin-1 (ET-1) in the development of endothelial dysfunction in these two conditions.

Methods: In this double-blind placebo controlled study, 28 subjects of both genders (14 with homocysteinemia and 14 healthy controls) underwent methionine-loading (100mg/Kg body weight) in a standard juice, containing vitamins C (2g) plus E (800IU) (n = 14) or no vitamins (placebo group, n = 14). Forearm vasodilatory response to reactive hyperemia, plasma total homocysteine (tHcy), oxidized LDL (ox-LDL), ET-1 and soluble vascular cell adhesion molecule (sVCAM-1), were evaluated at baseline and 4 hours post methionine loading (4hPML).

Results: Chronic homocysteinemia was associated with increased oxLDL (p < 0.01), higher ET-1 (p < 0.05) and impaired endothelial function (p < 0.01). However, oxLDL (but not ET-1) was increased 4hPML in the placebo group, an effect prevented by antioxidant vitamins. The development of severe endothelial dysfunction 4hPML was not however prevented by antioxidants. In linear regression analysis, fasting tHcy was an independent predictor of baseline oxLDL (p = 0.0001), but not of ET-1 levels. On the contrary, oxLDL was the main predictor of ET-1 (p = 0.008), suggesting that tHcy may increase ET-1 by enhancing the production of oxLDL.

Conclusions: Both chronic and acute methionine-induced homocysteinemia are associated with elevated oxidative stress status. Although ET-1 is increased in chronic homocysteinemia, it does not participate in the rapid development of endothelial dysfunction after methionine loading. These findings suggest that despite its potential role in chronic homocysteinemia, ET-1 has a limited contribution to the development of endothelial dysfunction in acute, methionine-induced homocysteinemia in humans.     

镁对氧化低密度脂蛋白致内皮细胞损伤的保护作用

为探讨镁对内皮细胞的保护作用 ,用一次性密度梯度超速离心法制备人低密度脂蛋白 (LDL) ,以共轭二烯法和改良八木法检测Mg2 +(0 3、0 6、1 2和 2 4mmol L)对Cu2 +介导LDL氧化反应潜伏期和氧化修饰程度的影响。另将传至 2～ 3代的人脐静脉内皮细胞分为正常对照组、ox LDL对照组、补镁组和ox LDL +Mg2 +组 ,改良八木法测定细胞脂质过氧化物水平 ,黄嘌呤氧化法测定细胞外SOD活性 ,DTNB法测定含硒和不含硒GSH Px活性。结果显示 ,(1)Mg2 +各剂量组明显延长Cu2 +介导LDL氧化反应潜伏期 ,0 3和 0 6mmol LMg2 +显著降低TBARS的生成 ;(2 )与ox LDL组相比 ,ox LDL +Mg2 +各剂量组TBARS生成量显著下降 ,SOD活性显著升高 ,含硒GSH Px酶活力显著升高 ,不含硒GSH Px活力显著升高。提示镁抑制LDL的氧化修饰 ,补镁能降低细胞脂质过氧化物水平 ,增强抗氧化酶的的活性     

抗氧化维生素对氧化低密度脂蛋白作用的主动脉内皮细胞脂质过氧化损伤的影响

为深入探讨抗氧化维生素（维生素Ｅ、维生素Ｃ及β－胡萝卜素）对氧化低密度脂蛋白（ｏｘＬＤＬ）损伤内皮细胞的防治作用及可能机理,我们以体外培养的小牛主动脉内皮细胞为模型、在培养的主动脉内皮细胞中加入不同剂量的抗氧化维生素,共同培养１２ｈ,再与终浓度为０．１ｇ／Ｌ的ｏｘＬＤＬ继续培养２４ｈ,取贴壁细胞及培养液,通过硫代巴比妥酸荧光比色法（ＴＢＡ）和单核细胞（ＨＬ６０）粘附计数法观察不同浓度的抗氧化维生素对ｏｘＬＤＬ损伤的内皮细胞脂质过氧化及单核细胞粘附性的影响。结果表明,抗氧化维生素各组细胞培养液中丙二醛（ＭＤＡ）含量以及内皮细胞粘附的ＨＬ６０细胞数均明显低于ｏｘＬＤＬ组,提示维生素Ｅ、维生素Ｃ及β－胡萝卜素三种抗氧化维生素均可减轻ｏｘＬＤＬ对内皮细胞的脂质过氧化损伤,阻止单核细胞的粘附。这些可能是抗氧化维生素防治动脉粥样硬化的重要机理之一。