乳腺癌中Survivin蛋白的表达与细胞凋亡的关系

目的探讨Survivin蛋白在乳腺癌中的表达及其与浸润、转移、细胞凋亡的关系。方法采用免疫组化S-P法检测12例正常乳腺、7例乳腺导管内癌、41例乳腺浸润性导管癌组织中Survivin蛋白的表达(其中24例有淋巴结转移,24例无淋巴结转移),并用TUNEL法测定细胞凋亡指数。结果正常乳腺、乳腺导管内癌、乳腺浸润性导管癌中Survivin蛋白表达的阳性率分别为25%(3/12)、57.14%(4/7)、70.73%(29/41)。在三种组织中Survivin蛋白的表达有上升趋势,但缺乏统计学意义(P>0.05)。Survivin蛋白的表达与乳腺癌的淋巴结转移有密切关系(P<0.05),与组织学类型、年龄无明显关系(P>0.05)。乳腺癌中Survivin蛋白的表达水平与癌细胞的凋亡指数成负相关(P<0.05)。结论Survivin参与乳腺癌的发生发展,Survivin蛋白的异常表达对细胞凋亡起一定抑制作用,其过度表达提示乳腺癌预后不良。Survivin蛋白表达在有淋巴结转移的乳腺癌中比无淋巴结者明显增高,有统计学意义(P<0.05)。     

miR-539对乳腺癌细胞增殖与凋亡的调控作用研究

目的：研究miR-539对乳腺癌细胞增殖和凋亡的调控作用。方法采用荧光定量PCR检测乳腺癌细胞(MCF-7、MDA-MB-453、ZR-75-30)和正常乳腺上皮细胞(MCF-10A)中miR-539表达的差异;通过转染miR-539-mim-ics在MCF-7细胞中上调miR-539的表达,并通过MTT和TUNEL实验检测miR-539对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响。结果与正常乳腺上皮细胞相比,乳腺癌细胞中miR-539的表达显著降低( P<0．01)。与空白对照组和阴性对照组相比,过表达miR-539能显著降低过表达组乳腺癌MCF-7细胞的增殖能力并增加其对地塞米松诱导凋亡的敏感性(P<0．01)。结论 miR-539能够抑制乳腺癌细胞增殖并促进其凋亡,有望作为乳腺癌基因治疗的靶点。     

CDK9抑制剂F200对乳腺癌细胞MCF7凋亡的影响

目的研究细胞周期依赖性激酶（cell cycle dependent kinase,CDK）CDK9抑制剂F200对乳腺癌细胞MCF7凋亡的影响。方法 MCF7细胞培养于含0.01 mg·mL^-1人重组胰岛素及10%胎牛血清的RPMI 1640培养液中,待对数生长期时接种细胞进行实验,24 h贴壁后给药：分为阴性对照组（0.5%DMSO）、阳性对照组（R-Roscovitine 5.66μM）及药物组（F200 0.1μM,0.71μM）,给药48 h后利用TUNEL法染色观察细胞凋亡DNA断裂情况及细胞凋亡形态学变化、流式细胞技术检测细胞的凋亡比率、免疫印迹法检测凋亡标志蛋白PARP的表达情况。结果 TUNEL结果显示,随着F200浓度增加,细胞出现明显的固缩变圆,细胞核可见深染致密颗粒,细胞核质分界明显等凋亡表现;流式细胞仪结果显示,0.71μM的F200能够诱导32.6%的细胞凋亡;Western Blot结果显示,随着F200浓度增加,PARP蛋白剪切水平明显增加。结论 F200能有效促进乳腺癌细胞MCF7的凋亡。     

乳腺癌原癌基因HER-2反义寡脱氧核苷酸-叶酸诱导乳腺癌细胞凋亡的研究

目的:研究乳腺癌原癌基因HER-2反义寡脱氧核苷酸(ASODN)对乳腺癌细胞SK-Br-3凋亡和蛋白表达的影响。方法:采用DNA原位末端标记染色和Annexin-V荧光标记法检测ASODN-叶酸(FA)对乳腺癌细胞凋亡的影响,免疫组化检测p185蛋白的表达。结果:与空白对照组比较,ASODN-FA组凋亡指数、早期凋亡细胞阳性率、p185表达平均光密度值2组分别为(4.60±1.76)%、(17.37±2.78)%,(2.75±1.09)%、(18.62±1.80)%,0.31±0.06、0.11±0.02(P<0.05)。结论:HER-2A-SODN可诱导乳腺癌细胞SK-Br-3的早期和晚期凋亡,p185蛋白表达降低。     

PD98059对乳腺癌细胞的抗癌效应

目的 研究PD98059对乳腺癌细胞株的抗肿瘤效应。方法用50 μmol·L^-1PD98059处理乳腺癌细胞系MCF-7(ER＋/PR＋)和MDA-MB-435s(ER－/PR－)1 h后，采用逆转录酶 聚合酶链反应(RT-PCR)检测AP-1、cyclin D1的mRNA水平，采用Annexin V/PI法检测细胞凋亡，PI染色流式细胞仪检测细胞周期。结果PD98059明显抑制两种乳腺癌细胞的AP-1和cyclin D1的mRNA水平，促进两种细胞的凋亡，并阻滞两种细胞的G1/S期转换。结论PD98059对乳腺癌细胞具有明显的抗肿瘤效应，可能成为乳腺癌靶向性化疗新药。     

人参皂甙Rg3对乳腺癌MCF-7线粒体凋亡途径的影响

目的探讨20(R)–人参皂甙Rg3(SPG-Rg3)对人乳腺癌MCF-7细胞的诱导凋亡作用及其可能机制。方法人乳腺癌细胞MCF-7细胞株分为空白对照组、实验对照组及SPG-Rg3多个浓度组。利用MTT法观察人参皂甙Rg3对MCF-7细胞生长的抑制作用,并计算出IC-50,进一步确定其有效浓度;流式细胞术检测人参皂甙Rg3作用后MCF-7细胞周期的变化;利用AnnexinV-EGFP/PI双染法,检测人参皂甙Rg3诱导MCF-7细胞凋亡情况;免疫细胞化学染色检测MCF-7细胞凋亡与Fas、FasL蛋白表达的关系。结果 SPG-Rg3作用48h的IC-50为244.54μg/mL。流式细胞仪检测Rg3使MCF-7的S期细胞比率明显增加(P<0.01),凋亡率明显增加(P<0.01)。免疫细胞化学显示Rg3能使MCF-7细胞胞浆内细胞色素C增加(P<0.01)。结论 SPG-Rg3能诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡,其机制可能与诱导线粒体释放细胞色素C有关。     

Antitumor and Apoptosis Induction Effects of Paeonol on Mice Bearing EMT6 Breast Carcinoma

Paeonol is a major phenolic micromolecular component of Moutan cortex Radicis, a traditional Chinese Medicine. It has shown antitumor effects in previous studies; however, the underlying mechanisms remain unknown. This study investigated the mechanism by giving treatments of placebo, cyclophosphamide, paeonol of 150 and 300 mg/kg to 4 groups of mice bearing EMT6 breast cancer. Apoptosis in tumor cells were confirmed by morphology analysis, including hematoxylin, eosin staining and TUNEL staining. The results showed that the weight of EMT6 breast tumor was significantly reduced in the groups treated with both 150 and 300 mg/kg of paeonol. Immunohistochemical and Western blot results showed that the expression of Bcl-2 was down-regulated while the expression of Bax, caspase 8 and caspase 3 was up-regulated respectively. These results suggest that paeonol exhibits antitumor effects and the mechanism of the inhibition is via induction of apoptosis, regulation of Bcl-2 and Bax expression, and activation of caspase 8 and caspase 3.     

密集方案新辅助化疗对乳腺癌细胞凋亡的影响

目的:探讨密集方案新辅助化疗临床效果及对乳腺癌细胞凋亡的影响.方法:44例乳腺癌患者随机分成CEF14组和CEF21组,分别接受CEF14方案和CEF21方案新辅助化疗,观察其临床结果;使用TUNEL法观察各组标本化疗前后细胞凋亡指数,以分析不同密度化疗方案对乳腺癌细胞凋亡的影响.结果:最终35例完成了既定方案化疗,CEF14组临床有效率为50.00%(9/18),CEF21组临床有效率为41.18%(7/17)(P＞0.05).CEF14组、CEF21组化疗前凋亡指数分别为(6.36±1.05)、(7.40±3.93)(P＞0.05);化疗后分别为(24.00±12.00)、(17.52±7.00)(P＞0.05),两组化疗前后比较均有统计学意义(P＜0.05).结论:密集方案新辅助化疗与常规方案新辅助化疗有相似的临床效果,均能诱导肿瘤细胞的凋亡增加.     

米非司酮对乳腺癌细胞凋亡/抗凋亡系统及细胞周期的影响

目的探讨米非司酮(RU486)抗肿瘤作用的机制。方法采用乳腺癌细胞模型，检测10-5 mol·L^-1RU486对类固醇激素受体阳性MCF-7和阴性MDA-MB 435s乳腺癌细胞作用72 h后，凋亡系统Fas/FasL、抗凋亡蛋白Survivin、细胞周期和细胞生长抑制率。结果 ER(-)的MDA-MB 435s细胞Fas/FasL系统及Survivin表达均明显高于ER(＋)的MCF-7细胞。RU486能显著增加ER（＋）MCF 7细胞Fas表达，而对FasL和Survivin的表达无明显影响。RU486能显著减少MDA-MB 435s细胞Survivin的表达，同时以主要降低FasL的表达而提高Fas/FasL的比值。MCF-7细胞的细胞凋亡率明显增加，S期细胞和G2/M期细胞比阴性对照分别减少3.03%和0.39%。而对ER (-) MDA-MB 435s的细胞凋亡率仅稍有增加(1.32%)，S期细胞增加2.79%，G2/M期细胞比阴性对照减少2.53%。72 h后RU486能显著抑制MCF-7细胞的生长，其抑制率为28.88%，而对MDA-MB 435 s细胞生长无明显影响。结论RU486具有抗肿瘤作用，对不同类固醇激素受体状态的乳腺癌细胞其抗肿瘤作用的机制不同。     

Development of Triple-Negative Breast Cancer-Targeted Liposomes with MUC16 Binding Peptide Ligand in Triple-Negative Breast Cancer Cells

Triple-negative breast cancer (TNBC) is a highly malignant tumor that does not express the estrogen receptor (ER), progesterone receptor (PR), or human epidermal growth factor receptor 2 (HER-2). As molecular approaches to these targets have limited clinical utility in TNBC, novel strategies for the treatment of TNBC are urgently needed. MUC16 (Mucin-16) is a glycoprotein involved in cell proliferation and apoptosis and is overexpressed in breast cancer. To develop a clinically available strategy for TNBC treatment, we synthesized a MUC16 targeted peptide (EVQ)-grafted lipid derivative, EVQ-(SG)₅-lipid, and prepared EVQ-(SG)₅/PEGylated liposomes of 100 nm by size and a slightly negative ζ-potential value. Thus, we aimed at investigating the association between EVQ-(SG)₅/PEGylated and TNBC cell lines by interacting with MUC16 using an in vitro model. In addition, we aimed at exploring the intracellular distribution and cellular uptake pathway of EVQ-(SG)₅/PEGylated liposomes as novel drug delivery carriers for TNBC.     

Hydroxyzine Induces Cell Death in Triple-Negative Breast Cancer Cells via Mitochondrial Superoxide and Modulation of Jak2/STAT3 Signaling

Treatment of triple-negative breast cancer (TNBC) has been limited due to the lack of molecular targets. In this study, we evaluated the cytotoxicity of hydroxyzine, a histamine H1 receptor antagonist in human triple-negative breast cancer BT-20 and HCC-70 cells. Hydroxyzine inhibited the growth of cells in dose- and time-dependent manners. The annexin V/propidium iodide double staining assay showed that hydroxyzine induced apoptosis. The hydroxyzine-induced apoptosis was accompanied down-regulation of cyclins and CDKs, as well as the generation of reactive oxygen species (ROS) without cell cycle arrest. The effect of hydroxyzine on the induction of ROS and apoptosis on TNBC cells was prevented by pre-treatment with ROS scavengers, N-acetyl cysteine or Mito-TEMPO, a mitochondria-targeted antioxidant, indicating that an increase in the generation of ROS mediated the apoptosis induced by hydroxyzine. Western blot analysis showed that hydroxyzine-induced apoptosis was through down-regulation of the phosphorylation of JAK2 and STAT3 by hydroxyzine treatment. In addition, hydroxyzine induced the phosphorylation of JNK and p38 MAPK. Our results indicate that hydroxyzine induced apoptosis via mitochondrial superoxide generation and the suppression of JAK2/STAT3 signaling.     

内乳动脉置管新辅助化疗对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:观察乳腺癌患者内乳动脉置管新辅助化疗后癌细胞凋亡及增殖程度的变化,判断区域性新辅助化疗的效果和意义.方法:治疗组为38例接受内乳动脉置管新辅助化疗患者,对照组为34例术前未接受化疗的患者,均进行增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组化染色和原位末端标记法检测细胞凋亡,并进行统计学处理.结果:治疗组PCNA和凋亡指数(AI)的阳性细胞数比率分别为(33.3±6.9)%和(56.9±8.9)%,对照组分别为(51.6±9.8)%和(40.1±7.6)%,两组比较有显著性差异(P＜0.05).结论:内乳动脉置管新辅助化疗能抑制乳腺癌细胞的增殖,诱导凋亡.     

利巴韦林对人肺腺癌细胞A549、人乳腺癌细胞Hela迁移和凋亡的影响研究

目的:研究利巴韦林对人肺腺癌细胞A549、人乳腺癌细胞Hela迁移和凋亡的影响。方法:以A549、Hela细胞为模型细胞,分别分为对照组和利巴韦林低、中、高剂量(20、40、80μmol/ml)组,作用24 h后检测各组细胞的存活率、迁移能力、凋亡情况、酸性膜泡积累情况、自噬标志蛋白LC3(以LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ为指标)的表达情况。结果:与对照组比较,利巴韦林能降低A549、Hela细胞的存活率(中、高剂量组差异均有统计学意义,P<0.05或P<0.01)和迁移能力,增加A549、Hela细胞的凋亡率(低、中、高剂量差异均有统计学意义,P<0.05或P<0.01)、酸性膜泡积累数量与剂量呈反相关,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值(中、高剂量差异均有统计学意义,P<0.01),作用与剂量呈正相关。结论:利巴韦林可能通过诱导细胞自噬降低A549、Hela细胞的迁移并诱导其凋亡。     

黄芩素对人胰腺癌细胞增殖与凋亡的影响

摘 要 目的：探讨黄芩素对人胰腺癌细胞增殖与凋亡的影响。方法: 人胰腺癌细胞株BxPC 3和PANC 1经不同浓度（0,50,75,100 μmol·L-1）的黄芩素处理后,通过CCK 8检测、划痕愈合实验、细胞迁移、侵袭实验、显微镜观察、Real time qPCR 检测增殖和凋亡相关基因的影响等方法,观察黄芩素在胰腺癌细胞增殖、迁移、侵袭以及凋亡、基因表达的影响。结果: 与空白对照组比较,黄芩素能够显著抑制胰腺癌细胞BxPC 3和PANC 1的增殖,并且随着浓度的加大,对BxPC 3和PANC 1增殖的抑制作用在加强（P＜0.01）;且黄芩素对两种胰腺癌细胞系的作用效果与临床常用抗癌药吉西他滨（2 μmol·L-1）的作用效果相似。黄芩素能显著抑制胰腺癌细胞的迁移和侵袭,诱导癌细胞的凋亡,诱导胰腺癌细胞自噬;经过黄芩素处理的癌细胞,细胞周期相关基因和抗凋亡基因（cyclinD1、cyclinE、cyclinA和Bcl 2）表达水平下降,而细胞凋亡相关基因（caspase 3和Bax）的表达水平上调明显。结论: 黄芩素能有效抑制胰腺癌细胞BxPC 3和PANC 1的增殖、迁移和侵袭,并且可以通过凋亡和自噬诱导细胞死亡。     

3361例乳腺肿块与935例乳腺癌临床及病理学研究分析

自1978年1月至1994年12月共行乳腺肿块手术3361例,皆经病理学检查作出最后诊断,其中乳腺癌935例,占乳腺肿块的28％。乳腺癌好发部位是外上象限,占54％。其好发年龄为31～60岁。乳腺良性疾病中,乳腺纤维腺瘤居首位,共1163例,占乳块之34.6％,其次是乳腺增生(11.3％)和乳腺纤维囊性乳腺病(6.3％)。此大宗临床病例与病理学研究统计分析,对乳腺肿块之诊断、鉴别诊断及乳腺疾病的分类学将起到积极的作用。     

雷公藤内酯醇诱导非小细胞肺癌细胞凋亡及其机制初探

目的:研究雷公藤内酯醇(Triptolide,TPL)对非小细胞肺癌细胞A549细胞增殖抑制作用和促凋亡影响的分子机制。方法:以A549细胞为研究对象,采用MTT法测定细胞增殖;吖啶橙/溴乙啶(AO/EB)荧光染色法检测细胞凋亡;Caspase3活性检测试剂盒分析其凋亡机制。结果:在6.25～100 ng·ml~(-1),12～72 h范围内,TPL对A549细胞增殖具有明显抑制作用(P<0.01),48 h内其凋亡率随着时间延长而增加,Caspase3活性早期较对照组有显著提高(P<0.05),并于12 h达到最高值。结论:TPL能有效抑制A549细胞的增殖,这种抑制作用可能与TPL促进肿瘤细胞凋亡,激活Caspase3活性有关。     

乳腺癌的抗血管生成及治疗药物研究进展

肿瘤血管生成是一个多步骤过程,它导致已有的血管系统中生成新的血管,它对转移瘤的生长、转移和发展起关键作用。实验和临床数据证明,乳腺癌是一种血管生成依赖型疾病,而血管内皮生长因子(VEGF)家族的高表达和选择性内皮生长因子起关键作用,临床前研究表明血管生成启动发生在乳腺癌发展多步过程的早期。从肿瘤发展的生物学分子通道的靶向治疗已成为一种新的治疗策略,其目的是控制肿瘤的生长。     

乳腺B超鉴别乳腺癌方面的诊断能力

目的研究分析乳腺B超鉴别乳腺癌方面的诊断能力。方法将自2008年7月至2011年7月我院收治的50例乳腺肿瘤患者作为研究对象,全部经过手术与病理证实,对病例的超生图像与彩色多普勒血流显像资料作回顾分析,以判定B超在诊断乳腺癌肿瘤良恶性方面的作用。结果经过B超鉴别诊断,本组病例中确诊为乳腺癌的有13例,经病理证实为12例,误诊为1例,误诊率为7.69%,B超诊断结果为良性肿块的有37例,术后病理证实为:乳腺纤维腺瘤26例,腺腺病4例,乳腺癌2例,乳腺囊性增生5例,良恶性的诊断确诊率为94.6%,乳腺癌的漏诊率为5.4%。结论在乳腺肿瘤良恶性的鉴别诊断中,应用B超确诊率比较理想,值得在临床诊断乳腺肿瘤的应用中大力推广。