胃癌细胞凋亡和增殖细胞核抗原的表达及其意义

我们采用原位ＤＮＡ末端标记技术和免疫组化法 ,检测了慢性胃炎和胃癌患者细胞凋亡及增殖细胞核抗原的表达情况。1　材料和方法胃癌标本来源于石蜡包埋组织 ,男 33例 ,女1 8例 ,年龄 37～ 65岁。已有淋巴结转移 2 9例 ,无淋巴结转移 2 2例。选择正常胃粘膜 2 0例对照组 ,慢性浅表性胃炎 30例 (胃炎组 ) ,慢性萎缩性胃炎伴肠化生 30例 (化生组 ) ,不典型增生 2 2例。免疫组化法所用一抗为鼠抗人ＰＣＮＡ单克隆抗体 ,二抗为ＥｎｖｉｓｉｏｎＴＭｓｙｓｔｅｍ ,均为Ｄａｋｏ公司产品。原位凋亡检测试剂盒为Ｏｎｃｏｇｅｎｅ公司产品。每张切片…     

胃癌中高表达的miR-21对胃癌细胞生物学行为的影响

目的:研究miR-21在胃癌中的表达情况及其对胃癌细胞生物学行为的影响。方法:通过实时荧光定量PCR检测30例胃癌手术切除组织和周围正常组织中以及10株胃癌细胞中miR-21的表达情况。通过CCK8法、Annexin-Ⅴ+PI、流式细胞仪检测、划痕实验,观察过表达miR-21对胃癌细胞增殖、凋亡、细胞周期、迁移等生物学行为的影响。结果:定量real-time PCR结果显示miR-21在胃癌组织中高表达(P0.05),miR-21过表达细胞株增殖能力增强,与阴性对照组和空白对照组对比差别具有统计学意义(P<0.01),miR-21转染细胞划痕愈合速度较对照组快。结论:miR-21在胃癌中呈高表达,过表达miR-21可以促进BGC-823胃癌细胞的增殖能力和迁移能力,但对凋亡和细胞周期影响不明显。     

MicroRNA-193b对K562细胞C-KIT蛋白表达及生物学行为的影响

本研究探讨micro RNA-19b(miR-19b)对K562白血病细胞系C-KIT蛋白表达及生物学行为的影响.采用HiPerFect转染试剂介导FAM荧光标记的miR-193b mimic或阴性对照分别转染过表达C-KIT的K562细胞系,采用流式细胞术检测FAM阳性细胞百分比以监测转染效率,采用Western blot检测C-KIT和磷酸化C-KIT蛋白表达水平,采用CCK-8试剂检测细胞生长曲线,采用Annexin V染色后流式细胞仪检测细胞凋亡,采用流式细胞仪检测粒系分化标志CD11b和CD15阳性细胞百分比.结果显示,miR-193b或阴性对照转染的K562细胞中,FAM阳性细胞可达80％左右;与对照组相比,过表达miR-193b可明显抑制K562细胞中C-KIT、磷酸化C-KIT蛋白表达水平,同时,K562细胞的增殖受到抑制,凋亡细胞、CD11b阳性细胞、CD15阳性细胞的百分比均有增加.结论:miR-193b可抑制K562细胞C-KIT表达,并抑制细胞增殖;该增殖抑制作用可能与miR-193b诱导的细胞凋亡、分化有关,本研究为进一步分析miR-193b在白血病发生中的作用提供了实验依据.     

MiR-126在弥漫性大B细胞淋巴瘤组织中的表达及其生物学功能研究

目的：探讨miR-126在弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）组织中的表达及其生物学功能。方法：选择本院收治的46例DLBCL患者淋巴瘤组织作为研究对象,另选取31例淋巴结反应性增生患者淋巴结增生组织为对照。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)测定患者组织中miR-126的表达水平,并分析其表达与患者病理特征及患者预后的关系。将miR-126 inhibitor及其阴性对照（NC inhibitor）和miR-126 mimics及其阴性对照（NC mimics）分别转染至DLBCL细胞系SU-DHL-4中,RT-qPCR检测细胞中miR-126的表达水平;MTT法检测细胞增殖活性;单克隆形成实验检测细胞集落形成能力;Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡水平;Transwell实验检测细胞迁移及侵袭能力;Western blot法检测细胞凋亡相关蛋白cleaved-Caspase-3、Bcl-2和Bax的表达水平。结果：miR-126在DLBCL患者淋巴瘤组织中高表达,其表达水平与DLBCL患者Hans分型、IPI评分和Ann-Arbor分期存在显著相关性（P<0.05）...     

马钱子碱对人慢性粒细胞白血病KCL-22细胞的增殖及凋亡作用

目的 探索马钱子碱对人慢性粒细胞白血病KCL-22细胞的增殖抑制及诱导凋亡作用,为白血病的治疗提供新的方向。方法 体外培养白血病KCL-22细胞株,采用MTS法检测不同浓度马钱子碱对KCL-22细胞增殖的影响; 通过FITC-Annexin V/PI双染法检测不同浓度马钱子碱处理后细胞的凋亡作用; 运用Western blotting法检测凋亡相关蛋白的表达水平变化。结果 马钱子碱可明显抑制KCL-22细胞增殖,且具有浓度和时间依赖性。马钱子碱可诱导KCL-22细胞发生凋亡,并以早期凋亡为主,在50～400 μg/ml范围内呈剂量效应关系。经马钱子碱处理后,Bcl-2蛋白表达降低、Bax和Cyt-C蛋白表达增高,Caspase-9,Caspase-3均被切割活化。结论 马钱子碱可显著抑制慢性白血病KCL-22细胞增殖,并可能通过调控Bax/Bcl-2平衡、释放Cyt-C及激活Caspase-3,9依赖的内源性线粒体途径诱导细胞凋亡。     

胃癌组织中Fas抗原表达与细胞凋亡的关系

目的　研究胃癌组织中Fas抗原表达与细胞凋亡的关系。方法　采用免疫组织化学及脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记 (TUNEL)技术对 40例胃癌组织中Fas抗原表达与细胞凋亡进行了观察和比较。结果　胃癌组织中Fas抗原表达阳性率为 5 2 .5 % ,Fas表达阳性的胃癌细胞凋亡指数显著高于Fas抗原阴性组 (t =3 .3 5 ,P <0 .0 1)。结论　胃癌细胞调亡与Fas抗原表达密切相关 ,细胞凋亡调控的异常在胃癌发病中可能起重要作用     

Survivin在胃癌组织中的表达及临床意义

目的探讨抗凋亡蛋白Survivin在胃癌组织中的表达及意义。方法应用免疫组织化学方法检测54例胃癌及27例癌旁组织和10例正常胃粘膜组织Survivin蛋白表达,并结合临床指标、预后进行分析。结果癌旁组织与癌组织中Survivin表达阳性率分别为14.8%和38.7%,正常胃粘膜为0,组间阳性表达率差异有显著性(P<0.05)。Survivin表达与患者性别、年龄、淋巴结转移、临床分期均无关(P>0.05),而与肿瘤分化程度及生存预后有关,低分化组较高分化组Survivin表达明显增加(P<0.05),高表达组3年生存率明显低于低表达组(P<0.05)。结论胃癌中Survivin高表达,其表达与肿瘤恶性程度及预后相关,提示Survivin在胃癌发生、发展过程中有重要作用,并可作为判断胃癌预后的一个指标。     

miR-1290在乳腺癌组织中表达及对乳腺癌细胞生物学行为的影响

目的 观察miR-1290在乳腺癌组织中表达情况,探讨其对乳腺癌细胞增殖、凋亡及骨髓基质抗原2(stromal antigen 2,STAG2)表达的影响.方法 取120例乳腺癌患者的癌组织及癌旁组织,采用实时荧光定量PCR法检测miR-1290相对表达量.对数生长期MCF-7细胞,随机分为对照组、模拟物对照组、模拟物...     

细胞周期素E和增殖细胞核抗原在胃癌中表达的预后价值

目的：研究细胞周期素E和增殖细胞核抗原在胃癌中的表达及与胃癌预后的关系。方法：采用免疫组化S-P法检到128例胃腺癌组织中cyclin E蛋白和PCNA的表达，分析其表达状况及生存率与临床、病理参数的相关性。结果：128例胃癌中57例cyclin E蛋白阳性表达(占44．5％)，PCNA LI≥50％者60例(占47％);cyclin E蛋白表达水平和PCNA LI均与肿瘤大小、浸润深度、淋巴结转移、脉管侵犯、运距离转移及TNM分期呈正相关(P＝0．001)，与肿瘤组织学分级无相关性(P＞0．05)。PCNA LI与cyclin E表达呈相关性(P＝0．001)。多因素分析PCNA与cyclin E蛋白表达水平分别是独立的预后指标。结论：PCNA和cyclin E的异常表达与胃癌生物学行为密切相关;cyclin E异常表达合并PCNA LI≥50％的胃癌患者手术后预后最差。     

miR-494-3p在胃癌患者血清外泌体中的表达及价值

摘要:目的探究微小 RNA-494-3p(miR-494-3p)在胃癌患者血清外泌体中的表达水平及临床意义。方法采用 TaqMan探针 法RT-qPCR检测44例胃癌患者和44例健康人对照组血清外泌体中miR-494-3p的表达水平,采用ROC曲线分析并评估其对 胃癌的鉴别诊断价值。同时,在14例胃癌组织和16例胃良性疾病对照患者胃组织中进行进一步验证。结果与健康人对照 组( 1.00+0.36)相比,胃癌组血清外泌体中miR-494-3p的相对表达水平(0.21+0.03)显著降低,差异有统计学意义(Z=3.64,P< 0.01);胃癌组织中miR-494-3p的相对表达水平(0.22+0.07)亦显著低于胃良性疾病对照组( 1.00+0.39),差异有统计学意义 (Z= 2.66, P<0.01)。血清外泌体miR-494-3p筛查胃癌和健康人的ROC曲线下面积( AUCROC )为0.725( 95% CI :0.622 ~0.829 , P<0.01),当ecut-off 值为0.370时,其敏感性为50.0%，特异性为86.4%,阳性预测值为63.3%,阴性预测值为78.6%,准确性为 68.2%。结论miR-494-3p 在胃癌患者血清外泌体中呈低表达，有望成为胃癌筛查和辅助鉴别诊断的潜在生物学标志物。     

微RNA-21在胃癌中的表达研究

目的探讨微RNA（miRNA）-21在胃癌中的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用荧光定量聚合酶链式反应（PCR）检测胃癌组织和配对的正常胃黏膜组织中miRNA-21的表达。并分析miRNA一21表达水平与淋巴结转移及胃癌临床分期（TNM）之间的关系。结果68例胃癌组织标本中56例（82_35％）miRNA-21高表达。高于正常配对组织13例（19．11％）,差异有统计学意义（X2=54．37,P〈O．05）;在淋巴结转移阳性的胃癌组织中,miR—NA-21高表达（高于正常对照2倍）的发生率明显大于淋巴结转移阴性的胃癌组织,差异有统计学意义（X2=7．16,P〈O．05）;且T3～T4期miRNA-21高表达的发生率越高明显大于T1～T2期,差异有统计学意义（X2=4．64,P〈0．05）。结论miRNA-21在胃癌组织表达增高,与淋巴结转移及TNM分期有关,可能是胃癌诊断及治疗的分子靶标。     

miR-1184 regulates the proliferation and apoptosis of colon cancer cells via targeting CSNK2A1

MicroRNA (miRNA) exerts an important part in colon cancer cell proliferation and apoptosis. Meanwhile, the dysregulation of some miRNAs is detected in colon cancer cells. However, it remains unclear about the underlying mechanism of their effects on tumor pathogenesis. The current work aimed to examine the miR-1184 effect on colon cancer cells. The differentially expressed miRNAs (DEMs), including miR-9-3p, miR-1184, miR-492, miR-92a-1-5p and miR-20a-3p, were obtained from the GSE115108 and GSE132619 data sets using the ‘GEO2R’ online tool. Based on the findings, miR-1184 was significantly down-regulated within colon cancer cells and tissues. Moreover, the experimental results of CCK8, flow cytometry, colony formation and Western blotting assays showed that, miR-1184 over-expression suppressed colon cancer cell proliferation through inhibiting Ki67 expression and promoted their apoptosis through up-regulating cleaved caspase-3 and down-regulating Bcl-2 expression. By contrast, miR-1184 inhibition exerted the opposite effects. A total of 110 target genes of miR-1184 were predicted using the TargetScan and miRTarBase databases, which were then used to construct the protein-protein interaction (PPI) network based on the DAVID and STRING websites and to perform GO and KEGG pathway enrichment analyses. The MCODE plug-in of cytoscape was utilized to verify that CSNK2A1 was the target gene and key gene in significant modules. MiR-1184 directly targets CSNK2A1 via using RNA immunoprecipitation assay and luciferase reporter gene assay. According to the results, CSNK2A1 over-expression reversed the functions of miR‐1184 over-expression in suppressing colon cancer cell proliferation and enhancing their apoptosis. In conclusion, over-expression of miR-1184 inhibits colon cancer cell proliferation but promotes their apoptosis through down-regulating CSNK2A1 expression.     

胃癌患者血清circ-PVT1和miR-423-5p的水平变化及其与淋巴结转移的关系

目的 探究胃癌(GC)患者血清环状RNA circ-PVT1和miR-423-5p的水平变化及其与淋巴结转移的关系。方法 选取2020年6月至2022年6月湖州市第一人民医院收治的GC患者100例,根据治疗后淋巴结转移情况分为转移组(64例)和未转移组(36例)。取同期胃炎、胃溃疡、胃息肉等患者100例作为良性病变组,同期体检健康者100例作为健康人对照组。采用qRT-PCR检测各组血清circ-PVT1、miR-423-5p水平,分析血清circ-PVT1、miR-423-5p水平与GC患者治疗后淋巴结转移的关系;Logistic回归分析GC患者治疗后淋巴结转移的影响因素;ROC曲线分析血清circ-PVT1、miR-423-5p水平对GC患者治疗后淋巴结转移的预测价值。结果 与健康人对照组相比,良性病变组和GC组患者血清circ-PVT1水平(1.04±0.30 vs 1.47±0.39 vs 1.83±0.54)显著上调,miR-423-5p水平(1.02±0.28 vs 0.85±0.20 vs 0.51±0.14)显著下降(F分别为87.933、146.594,P<0....     

MiR-101在乳腺癌中的表达及其意义

目的:探讨miR-101在乳腺癌组织中的表达变化。方法:收集乳腺癌组织及对应的癌旁组织,以qRT-PCR方法测定miR-101在乳腺癌组织中的表达变化。在乳腺癌细胞中转染miR-101 mimics、mimics control,以qRT-PCR方法检测上调效果,MTT方法测定细胞增殖变化,流式细胞术测定细胞凋亡变化,Transwell小室测定细胞迁移和侵袭数目变化,蛋白质印迹法测定细胞中cleaved caspase-3和MMP-2蛋白表达变化。结果:miR-101在乳腺癌组织中的表达水平明显低于癌旁组织(P<0.05)。与miR-NC比较,miR-101细胞中miR-101表达水平升高,细胞增殖能力降低,细胞凋亡率升高,细胞侵袭和迁移数目下降,细胞内的cleaved caspase-3蛋白水平表达升高,MMP-2蛋白表达水平减少(P<0.05)。结论:MiR-101在乳腺癌组织中表达下调,上调miR-101抑制乳腺癌细胞增殖、侵袭和迁移并诱导细胞凋亡。     

外周血细胞因子和炎性细胞在肺癌患者中的表达变化及临床意义

目的 探讨肺癌患者外周血12种细胞因子和3种炎性细胞及其比值的变化与临床意义。方法 研究对象为2020年3月至2022年6月期间在青岛大学附属医院诊治的458例肺癌患者及44例健康查体人员,采用多重微球流式免疫荧光发光法检测外周血细胞因子水平,荧光流式细胞技术检测炎性细胞计数。统计学分析采用秩和检验。结果 对照组、小细胞肺癌(SCLC)组和非小细胞肺癌(NSCLC)组3组间外周血白细胞介素(IL)-2、IL-5、IL-6、IL-8和肿瘤坏死因子(TNF)-α 5种细胞因子水平差异存在统计学意义(P均<0.05)。与对照组相比,SCLC组和NSCLC组IL-6、IL-8、TNF-α水平均明显升高,同时NSCLC组IL-5水平明显升高而IL-2水平明显降低(P均<0.05);SCLC组IL-6水平较NSCLC组显著升高(P<0.01);肺鳞癌组IL-2、IL-6水平较肺腺癌组明显升高(P均<0.01)。对照组、SCLC组、NSCLC组3组间外周血中性粒细胞计数(ANC)、淋巴细胞计数(ALC)、单核细胞计数(AMC)、中性粒细胞计数与淋巴细胞计数比值(NLR)和单核...     

miR-371在胃癌细胞中的作用及可能机制分析

目的 研究miR-371在胃癌细胞中的作用及可能机制.方法 利用q-PCR检测人胃腺癌组织和多种胃癌细胞系中miR-371的相对表达量.利用细胞转染的方法分别将miR-371的对照序列(对照组)、miR-371的模拟物(模拟物组)或miR-371的抑制剂(抑制剂组)转染到MNK-45后,继而利用q-PCR检测MNK-4...     

miR-374-5p调控微环境间质干细胞促进胃癌增殖与迁移

目的探讨mi R-374-5p调控人胃组织来源间质干细胞(MSCs)体外促进胃癌细胞增殖和迁移的作用。方法体外分离培养获得人胃癌组织来源间质干细胞(GC-MSC)和配对的癌旁组织来源间质干细胞(GCN-MSC);体外采用GCN-MSC和GC-MSC培养上清液处理胃癌细胞,平板克隆实验检测胃癌细胞增殖能力,划痕实验检测胃癌细胞迁移能力;采用mi R-374-5p模拟物和抑制剂分别过表达和抑制GCN-MSC及GC-MSC中mi R-374-5p的表达水平,收集转染后MSC的培养上清,体外处理胃癌细胞,观察胃癌细胞增殖和迁移能力的改变。结果 GC-MSC培养上清处理组形成的单细胞集落数目[(112±7)个]多于GCN-MSC组[(48±6)个],细胞间距[(6.5±0.5)cm]小于GCN-MSC组[(15±1)cm],可明显促进胃癌增殖(t=12.02,P0.01)和迁移(t=13.17,P0.01)。GCN-MSC过表达mi R-374-5p后,其培养上清可增加单细胞集落形成数目[(115±12.1)个],缩小细胞间距[(7.83±1.08)cm],促进胃癌增殖(t=9.31,P0.01)和迁移(t=4.88,P0.01)。抑制剂组中培养上清处理组单细胞集落数目[(60±10.2)个]减少,细胞间距[(12.17±1.47)cm]增加,mi R-374-5p抑制剂可逆转GC-MSC促进胃癌增殖(t=5.47,P0.01)和迁移(t=4.95,P0.01)能力。结论 mi R-374-5p是调控微环境MSC促进胃癌增殖与迁移的重要分子。     

miR-218-5p在胃癌细胞和胃癌组织中表达的临床意义及生物信息学分析

目的分析miR-218-5p在胃癌细胞和胃癌组织中的表达,采用生物信息学方法,预测其靶基因并对其信号通路进行富集分析,并利用OncomiR数据库对miR-218-5p在胃癌中的表达与预后关系进行生存分析。方法通过实时荧光定量PCR检测miR-218-5p在不同分化程度的胃癌细胞和正常细胞、胃癌组织和癌旁组织中的表达,分析其临床意义。在miRecords网站数据库选择3个以上软件在线预测其靶基因,取其交集,运用DAVID6.7数据库,对其靶基因参与的信号通路进行富集分析。采用OncomiR数据库分析miR-218-5p在胃癌组织相对于癌旁组织中的表达,并利用OncomiR和cBioportal数据库分别进行miR-218-5p在胃癌组织中的表达与预后生存期的分析。结果miR-218-5p在不同分化程度的胃癌细胞中表达下调。相对于癌旁组织,miR-218-5p在胃癌组织中也明显下调,miR-218-5p的下调与胃癌淋巴结转移(P<0.001)及TNM分期(P<0.001)具有相关性。生物信息学分析显示,miR-218-5p的靶基因富集在与肿瘤相关的多个信号通路中,且其在胃癌中的表达与胃癌患者预后具有一定相关性(P=0.01632)。结论miR-218-5p在胃癌中表达下调,起到潜在的抑癌作用,可能成为新的治疗靶点和预后标志物。