RNAi技术及抗乙型肝炎病毒的实验研究进展

目前寻找新的更有效的治疗乙型肝炎病毒(HBV)的方法成为广大学者关注的焦点,RNA干扰技术的出现为治疗慢性HBV感染开辟了新途径。本文就RNA干扰技术及其在抗HBV感染中的研究进展作一综述。     

用于抗HBV RNAi重组质粒的构建

目的构建针对乙型肝炎病毒表面抗原和核心抗原的siRNA表达载体pSuper-HBV,以用于后继的RNAi研究.方法根据RNA作用原理设计,针对HBV S/C区的相应序列,再将其克隆入含聚合酶Ⅲ H1-RNA启动子的表达载体pSuper.结果经酶切鉴定、电泳和测序分析证明,含作用序列的重组质粒pSuper-HBVs/pSuper-HBVc及随机序列对照组pSuper-HBVcontrol构建是成功的.结论用于抗HBV RNAi的重组质粒可于体外成功构建,但仍需进一步实验来确定最佳作用靶点.     

RNA干扰抗丙型肝炎病毒的研究进展

丙型肝炎病毒(HCV)感染严重危害全人类健康,是主要的公共卫生问题之一.据估计全世界HCV阳性率为3%,大约有1.7亿的感染者[1].令人遗憾的是,到目前为止,市场上仍然没有安全、有效的疫苗或抗体来防止HCV感染.目前慢性HCV感染的标准疗法是联合使用聚乙二醇α干扰素和利巴韦林(ribavirin).然而,这种标准疗法的成功却取决于病毒的基因型和治疗之初病毒的载量,仅有约50%的患者会产生持续的病毒学应答,因而不能彻底根除病毒.此外,高昂的价格和严重的不良反应也限制了这种标准疗法的广泛使用.开发新型的、更加安全有效的抗病毒治疗方法具有时空紧迫性和重要现实意义.     

RNA干扰技术抗乙型肝炎病毒的实验研究进展

目前对乙型肝炎病毒(HBV)引起的病毒性肝炎尚无令人满意的治疗效果。RNA干扰技术的出现，为各类慢性HBV感染的治疗开辟了新的途径。作者主要从RNA干扰技术的研究背景、实验中存在的问题和应用前景等方面对其抗HBV的研究进展进行综述。     

RNAi的研究进展

RNAi(RNA interference,即RNA干扰)是指通过反义RNA与正链RNA形成双链RNA特异性地抑制靶基因的现象,它通过人为地引入与内源靶基因具有相同序列的双链RNA(有义RNA和反义RNA),从而诱导内源靶基因的mRNA降解,达到阻止基因表达的目的[1-2].RNAi是最近几年发现和发展起来的新兴基因阻断技术.     

RNAi技术及抗HBV治疗研究进展

RNA干扰L(RNA interference,RNAi)是由21个～23个核苷酸组成的双链RNA(dsRNA)所引发的生物细胞内同源基因转录后沉默的现象,是生物体在进化过程中普遍存在的一种基因调控机制。利用RNAi技术的高效性和特异性抵御病毒感染及其它外源性核酸入侵的研究,已取得了很大进展,针对乙肝病毒感染这一全球性的健康问题,RNAi有着广泛的应用前景。     

RNA干扰抑制土拨鼠肝炎病毒X基因表达

目的:研究土拨鼠肝炎病毒(WHV)序列特异性siRNA对WHV X基因表达的抑制作用。方法:以WHV全长质粒为模板PCR扩增WHV X基因,克隆到pXF3H载体构建WHX-HA融合蛋白真核表达质粒(pXF3H-WHx);合成siRNA的模板序列,克隆到siRNA表达质粒psiRNA构建shRNA表达质粒(psiWx1、psiWx2);质粒pXF3H-WHx与psiWx1、psiWx2共转染Hela细胞,Western blot检测WHV X蛋白的表达。结果:Hela细胞中WHVX蛋白的表达受siRNA的抑制,psiWx1表达的siRNA抑制90%以上的X蛋白表达,并呈剂量依赖性,但是WHV X基因靶位点中2个突变的核苷酸可使这种干扰作用消失。结论:质粒表达的siRNA序列特异性抑制WHV X蛋白的表达。     

治疗疱疹病毒和肝炎病毒感染的植物药

本品由下述植物的干燥粉末或它们的提取物组成：苦艾Artemisia absinthium、乳香Pistacia lentiscus树脂、裸露翠雀花Delphinium denudatum果实，也可以加些蔷薇花瓣、小豆蔻果实和具苞滇紫草Onosma bracteatum花(单甩或混合物均可)，以发挥协同作用。本品具有抗病毒、抑病毒和抗过敏活性，用于治疗疱疹病毒感染，     

载体介导的RNAi抑制乙肝病毒S基因的研究

目的构建针对乙肝病毒S基因的RNAi表达载体,观察其对HBV表达的影响。方法合成针对HBVS基因的RNAi寡核苷酸,克隆入pSUPER载体,与pHBV质粒共转染HepG2细胞。ELISA和Westernblot检测HBsAg表达。结果成功构建针对HBVS基因的RNAi表达载体pSUPER-S1和pSUPER-S2对HBsAg的抑制率分别为79.0%和43.2%,无关序列的RNAi表达载体无此作用。结论载体介导的RNAi能高效、特异地抑制HBVS基因的表达。     

RANi技术用于治疗白血病的最新进展

RNAi最先由Fire和其同事于1998年发现。由于其沉默基因的高效性和特异性,RNAi成为干扰特定基因表达和进行大规模基因功能筛选的有力工具。相比较于其他肿瘤,白血病在分子水平的一个特点就是有较多的染色体方面的改变,比如染色体易位,染色体易位后能激活特定的癌基因或者导致新的融合基因的产生。由于这些基因产生后能直接引起白血病或者能维持白血病的病理状态,因而经常被选作沉默基因的靶点。为了更好地理解RNAi在基础研究中和治疗白血病中的作用,现就最近一些使用RANi来研究白血病的成果进行综述。     

RNA干扰中小干扰RNA的设计原则

RNA干扰(RNAi)是由内源性或外源性双链RNA介导的一种高度保守的序列特异性基因表达调控机制,主要通过小干扰RNA(siRNA)和微小RNA发挥作用。由于其具有高效、高特异性、作用稳定等特点,已被广泛地应用于基础实验和疾病治疗的研究中。在进行siRNA介导的RNAi实验时,如何设计高效、特异性抑制靶mRNA的siRNA是实验成败的关键。     

广东药学院2003年新生乙型肝炎病毒感染情况分析

目的　了解我院 2 0 0 3年新生乙型肝炎病毒感染情况 ,为今后的防治工作提供科学依据。方法　用酶联免疫法对 2 0 0 3年 14 83名新生统一进行乙肝五项标志物和丙氨酸氨基转移酶检测。结果　 2 0 0 3年新生HBsAg阳性率10 .79% ,乙肝病毒感染率 2 3.33%。男生HBsAg阳性率 ,大、小三阳发生率均高于女生 ,差异有显著意义 (P <0 .0 1、P <0 .0 1、P <0 .0 5 )。结论　在学生中要进行乙肝健康教育 ,加强传染源管理的同时 ,对易感者进行乙肝疫苗接种。     

Specific anti-viral effects of RNA interference on replication and expression of hepatitis B virus in mice

HHepeaptaitdisan Bv ivriidruase.is HthBeV p riontofetcyptieon m eism obnere o off t hthee fa mmoilsytcommon and severe viral infections because infectedindividuals are at high risk of developing liver cirrhosis,and eventually,hepatocellular carcinoma.While aneffective vaccine is available,present treatment regimentsfor hepatitis B are costly and often have limit of effects.Only about one-third of patients treated with alphainterferon show a sustained response.Nucleosideanalogues do not elimi…     

琼海市人群乙型肝炎病毒感染情况和认知及行为调查

目的了解琼海市人群对乙型肝炎（以下简称乙肝）认识与行为以及乙肝病毒感染情况。方法以卫生院为区，采用分层整群随机抽样方法，抽取琼海境内常驻人口和流动人口共1350人，采用问卷调查方式进行KAP调查，采血检测乙肝表面抗原。结果乙肝病毒的携带率为12．1％。老年人对乙肝的认知水平显著低于中、青年人；小学文化程度人群对乙肝的认知水平显著低于中学、大学文化程度人群；少数民族人群对乙肝的认知水平显著低于汉族人群，少数民族乙肝病毒携带率远高于汉族（χ^2=7．453，P〈0．01）。结论应在人群中特别是少数民族地区大力加强乙肝防治知识的宣传，加强老年人和低文化程度人群的健康教育工作，提高乙肝疫苗的保护率，控制乙肝病毒的传播。     

RNAi技术在神经干细胞相关基因功能研究中的应用

目的:采用RNA干涉(RNA interference,RNAi)技术研究神经干细胞相关基因-AF116909在神经干细胞中的作用。方法:构建含AF116909目的基因特异序列的发夹结构RNA(small hairpin RNA,shRNA)表达载体,转染到神经干细胞(NSCs)后,观察神经干细胞的形态,并进行RT-PCR检测mRNA表达。结果:经观察,试验组分化明显加强,从3d的(12±1.5)%分化率增加到11d的(80±3.1)%,而对照组几乎无分化现象。RT-PCR检测后,发现试验组中AF116909基因mRNA的表达量同对照组相比明显减少。结论:该方法实现了AF116909基因在NSCs中的有效抑制,并表明,抑制AF116909基因的表达,提高了NSCs的分化率,反应该基因具有抑制NSCs分化的功能。     

延边地区庚型肝炎病毒感染的调查研究

[目的]探讨庚型肝炎病毒在延边地区不同人群中的感染状况。[方法]将278名肝脏疾病患，123名职业献血员以及93名健康人共494人为研究对象，采用酶联免疫吸附测定法检测庚型肝炎病毒。[结果]494例研究对象的庚型肝炎病毒感染率为6.48%(32/494)。存在性别，年龄别及民族别差异，一般人群庚型肝炎病毒感染率为2.15%(2/93)。肝脏疾病患感染率中慢性乙型重症肝炎患的感染率为13.36%(4/30)。为最高，献血员庚型肝炎病毒感染率为7.31%(9/123)。