肾组织WT1蛋白表达与大鼠阿霉素肾病模型蛋白尿关系的实验研究

目的观察WT1（Wilms’tumor 1）在大鼠阿霉素肾病模型中的表达，探讨其在蛋白尿发生发展过程中的作用。方法30只SD大鼠随机分为模型组和对照组，建立阿霉素肾病模型，在第2，4、6、8周，应用光镜、电镜观察肾组织的病理改变，BCA法检测24h尿蛋白排泄量，半定量Western Blot的方法检测大鼠肾皮质中WT1的表达。结果①随着模型组大鼠肾组织病理改变逐步加重及尿蛋白量逐渐增加，肾皮质WT1的表达量亦逐渐增加，第2、4、6、8周分别为对照组的1，5、2．7、3．1、4．3倍；②WT1的表达水平与尿蛋白量之间呈正相关性（P〈0．001）。结论阿霉素肾病模型大鼠肾皮质WT1的表达与大鼠蛋白尿的发生发展密切相关。     

E-钙粘素在大鼠阿霉素肾病模型中的表达及其意义

目的动态观察E-钙粘素(E-cadherin)在大鼠阿霉素肾病模型中肾小球内的表达,探讨其变化在肾小球疾病中的作用。方法采用大鼠尾静脉单剂量注射阿霉素(浓度2 mg/ml,剂量7.5 mg/kg)建立阿霉素肾病模型,生化检测白蛋白变化,尿液检测24 h尿蛋白定量,光镜下观察肾小球形态学改变,免疫组化检测肾组织E-cadherin和纤维连接蛋白(FN)的表达。结果阿霉素肾病组大鼠肾脏肾小球形态于第4周时出现微小病变,第8周时为局灶阶段性硬化;并且肾病组大鼠均出现大量蛋白尿、低蛋白血症,肾病组与对照组相比,差异具有显著性(P<0.01);E-cadherin在肾小球足细胞的表达随着肾小球病变的加重而逐渐减少;FN在肾小球内的表达随着肾小球病变的加重而逐渐增加;E-cadherin和FN在肾组织内的表达呈负相关(r=0.926,P<0.001)。结论阿霉素肾病组大鼠肾小球E-cadherin表达减少和FN表达增加在不同阶段表达的变化可能参与了肾小球硬化的发生发展过程。     

苯那普利对大鼠阿霉素肾病结缔组织生长因子表达的影响

目的 :探讨苯那普利对阿霉素肾病大鼠结缔组织生长因子 (CTGF)和转化生长因子 β1(TGF β1)表达的影响。方法 :3 6只大鼠随机分为正常组、肾病组和苯那普利治疗组 ,建立单次阿霉素尾静脉注射的模型 ,分别于4、7周后留取标本 ,检测 2 4h蛋白尿、血肌酐 ,肾组织分别行透射电镜、HE、PAS染色 ,应用免疫组织化学方法检测肾组织中的CTGF、TGF β1表达。结果 :肾病组大鼠尿蛋白排泄明显高于对照组 (P <0 0 5 ) ,肾小球与肾小管有明显病理改变 ,CTGF和TGF β1第 7周表达明显上调 (P <0 0 5 ) ,苯那普利治疗组CTGF和TGF β1表达下降 (P <0 0 5 )。结论 :在阿霉素肾病中 ,苯那普利可以减少尿蛋白 ,下调肾组织CTGF和TGF β1的表达 ,对肾脏呈保护作用。     

黄芩素对阿霉素肾病大鼠肾小管上皮细胞凋亡的调节作用

目的:探讨黄芩素对阿霉素肾病大鼠肾小管上皮细胞凋亡的调节作用。方法:18只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(正常组,n=6)、阿霉素肾病组(模型组,n=6)和黄芩素治疗组(治疗组,n=6),模型组和治疗组一次性尾静脉注射阿霉素2.0mg/kg诱导阿霉素肾病动物模型,正常组注射等量生理盐水。造模后第1天开始,治疗组予黄芩素300 mg/(kg·d)灌胃,正常组和模型组予等量蒸馏水灌胃,共治疗8周。8周时留取各组大鼠24 h尿液标本及肾脏组织标本,使用TUNEL检测肾小管上皮细胞凋亡,免疫组化检测肾组织中caspase-3表达,western Blot方法检测肾皮质中Bcl-2及caspase-3蛋白水平。结果:与正常组比较,模型组24 h尿蛋白定量明显升高(P0.05),肾小管上皮细胞凋亡数量明显增加(P0.05),肾皮质中caspase-3蛋白水平明显增加(P0.05),Bcl-2蛋白水平明显下降(P0.05)。与模型组比较,治疗组24 h尿蛋白定量明显下降(P0.05),TUNEL阳性肾小管上皮细胞数量明显减少(P0.05),肾皮质中caspase-3蛋白水平明显下降(P0.05),Bcl-2蛋白水平明显增加(P0.05)。结论:黄芩素对阿霉素肾病具有一定的保护作用,其作用机制可能与调节肾小管上皮细胞凋亡有关。     

黄葵胶囊对阿霉素肾病大鼠肾组织MCP-1表达及对肾组织病理损伤的影响

目的探讨黄葵胶囊对阿霉素肾病(AN)大鼠肾组织单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)表达及对肾组织病理损伤的影响。方法选择30只清洁级雄性SD大鼠作为实验动物,分为正常组大鼠10只,剩余的20只为建模大鼠。根据随机数字表法,将这20只大鼠分为模型对照组(n=10)及治疗组(n=10)。分析各组大鼠一般状况、比较各组24h尿蛋白定量变化情况、不同时点血生化指标水平、不同时点肾组织光镜检查结果、不同时点肾组织MCP-1阳性表达情况。结果(1)第2周、第8周模型对照组与治疗组24h尿蛋白定量水平均高于相应时点的正常对照组大鼠24h尿蛋白定量水平(P均<0.05),且治疗组24h尿蛋白定量水平均分别显著小于模型对照组对应时点的24h尿蛋白定量水平(P均<0.05);(2)第2周、第8周模型对照组与治疗组血Scr水平均高于相应时点的正常对照组大鼠血Scr水平(P均<0.05),且治疗组血Scr水平均分别显著小于模型对照组对应时点的血Scr水平(P均<0.05);第2周、第8周模型对照组与治疗组血Alb水平均低于相应时点的正常大鼠血Alb水平(P均<0.05),且治疗组血Alb水平均分别显著高于模型对照组对应时点的血Alb水平(P均<0.05);(3)光镜HE染色结果:经光镜检查,正常对照组大鼠肾小球、肾间质、肾小管等均正常。第2周末时,模型对照组少数大鼠肾小球存在基质与系膜细胞轻度增生,有少量肾小球包氏囊厚度增大,球囊发生粘连现象,少量肾小管出现扩张,剩余大鼠的肾组织无显著异常现象;第8周末时,模型组大鼠肾小球存在局灶节段硬化的现象,出现包氏囊厚度增加以及球囊出现粘连,某些肾小管出现萎缩,部分肾间质出现纤维化现象,且在光镜下可探查局灶性炎症细胞发生浸润反应。在同一时间节点,治疗组大鼠肾脏病变较模型组大鼠要更加轻微;(4)第2周、第8周模型对照组与治疗组MCP-1在肾组织阳性表达指数均高于相应时点的正常大鼠MCP-1在肾组织阳性表达指数(P均<0.05),且治疗组第2中、第8周时MCP-1在肾组织阳性表达指数均分别显著小于模型对照组对应时点的MCP-1在肾组织阳性表达指数(P均<0.05)。结论黄葵胶囊能够降低ADR肾病大鼠24h尿蛋白量、血Scr、MCP-1阳性表达指数及提高血Alb水平,改善大鼠肾组织功能。     

阿霉素肾病大鼠肾组织NF-κB表达及甘草甜素的防护作用

目的 观察甘草甜素对阿霉素肾病大鼠肾组织中核因子-κB(NF-κB)表达的影响,探讨甘草甜素对阿霉素肾病大鼠的防护作用.方法 18只SD雄性大鼠随机分为3组:A组(正常对照组)、B组(模型组)、C组(甘草甜素治疗组)每组6只.模型组和甘草甜素治疗组大鼠采用尾静脉注射阿霉素的方法建立阿霉素肾病模型.甘草甜素治疗组予以甘草甜素灌胃6周,正常对照组和模型组大鼠予以等量生理盐水灌胃.检测各组大鼠24h尿蛋白定量及血清生化指标.观察各组大鼠肾组织病理学改变,检测肾组织中核因子-κB(NF-κB)活性及其下游炎症因子结缔组织生长因子(connective tissue growthfactor,CTGF)的表达水平.结果 甘草甜素治疗组于用药第6周24 h尿蛋白定量与同期模型组相比,均有明显改善,差异有统计学意义.甘草甜素治疗组大鼠肾组织病理学改变明显优于模型组,且肾组织中NF-κB活性、CTGF水平也明显下降,差异有统计学意义.结论 甘草甜素可能直接或间接抑制肾组织中NF-κB活化,减轻肾小球细胞外基质的积聚,从而延缓肾小球硬化的进程.     

阿霉素肾病大鼠肾组织NF-κB表达及甘草甜素的防护作用

目的观察甘草甜素对阿霉素肾病大鼠肾组织中核因子-κB(NF-κB)表达的影响,探讨甘草甜素对阿霉素肾病大鼠的防护作用。方法18只SD雄性大鼠随机分为3组:A组(正常对照组)、B组(模型组)、C组(甘草甜素治疗组)每组6只。模型组和甘草甜素治疗组大鼠采用尾静脉注射阿霉素的方法建立阿霉素肾病模型。甘草甜素治疗组予以甘草甜素灌胃6周,正常对照组和模型组大鼠予以等量生理盐水灌胃。检测各组大鼠24h尿蛋白定量及血清生化指标。观察各组大鼠肾组织病理学改变,检测肾组织中核因子-κB(NF-κB)活性及其下游炎症因子结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)的表达水平。结果甘草甜素治疗组于用药第6周24h尿蛋白定量与同期模型组相比,均有明显改善,差异有统计学意义。甘草甜素治疗组大鼠肾组织病理学改变明显优于模型组,且肾组织中NF-κB活性、CTGF水平也明显下降,差异有统计学意义。结论甘草甜素可能直接或间接抑制肾组织中NF-κB活化,减轻肾小球细胞外基质的积聚,从而延缓肾小球硬化的进程。     

苯那普利对阿霉素肾病大鼠肾皮质Smad3、Smad7表达的影响

目的 :评估苯那普利对阿霉素肾病大鼠肾皮质中Smad3、Smad7表达的影响。方法 :建立阿霉素肾病大鼠模型 ,药物组予苯那普利 10mg·kg-1·d-1灌胃。分别于第 4、7周取肾皮质 ,通过RT PCR半定量分析Smad7mRNA表达 ,通过光镜、电镜观察肾脏病理改变 ,用免疫组化法测定转化生长因子 β1(TGF β1)、Smad3、Smad7蛋白表达。结果 :Smad3、Smad7主要表达于肾小管上皮细胞 ,肾病组Smad7mRNA、蛋白的表达随病变加重而上调 ,Smad3蛋白表达下调 ,而苯那普利可抑制Smad7的上调和Smad3的下调。结论 :在阿霉素肾病大鼠肾皮质的小管病变进展中 ,Smads起着重要作用。苯那普利可通过调节Smads的表达而保护肾脏     

普罗布考对实验型大鼠胱抑素C、肾功能和肾脏病理学的影响

目的观察普罗布考对实验型大鼠血清胱抑素C(CysC)、肾功能及肾脏病理学的影响,并探讨CysC对肾小球肾病的诊断价值。方法雄性SD大鼠40只,随机分为正常组、模型组、治疗组。尾静脉一次性注射阿霉素6mg/kg制备阿霉素肾病模型。1周后开始药物干预,持续4周。检测大鼠24h尿蛋白、血清CysC、尿素氮(BUN)、血清肌酐(Scr)、血清和肾组织中血清超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA),同时取肾组织标本观察病理学改变。结果治疗组24h尿蛋白排泄量明显低于模型组(P<0.05),治疗组CysC明显降低(P<0.05),肾功能明显好转,肾指数明显改善(P<0.05),血清和肾组织中SOD明显上升、MDA明显下降(P<0.05),肾组织病理损伤减轻。结论普罗布考能减少实验型大鼠蛋白尿,降低CysC,减轻肾组织的病理损伤,具有肾保护作用。CysC对肾小球肾病的早期诊断有一定的价值,能较Scr更早反映肾功能的变化。     

益气养阴通络方对IgA肾病模型大鼠肾脏组织肿瘤坏死因子-α的影响

目的探讨益气养阴通络方对IgA肾病模型大鼠血尿、蛋白尿及对其肾脏组织病理的影响。方法 60只雄性清洁级SD大鼠,随机分为空白组、模型组、黄葵组与中药(益气养阴通络方)高、中、低剂量组,于造模前及造模后第4、8、12、16周末对各组大鼠24 h尿蛋白定量、尿红细胞计数进行检测,同时给药后8周分别通过HE染色法、免疫组化法检测各组大鼠肾组织病理变化及TNF-α表达情况。结果与空白组比较,模型组、黄葵组、中药高、中、低剂量组大鼠给药8周后尿红细胞计数、24 h尿蛋白、TNF-α表达均不同程度增高(P0.05);与模型组比较,黄葵组、中药高、中、低剂量组给药8周后尿红细胞计数、24 h尿蛋白、TNF-α表达显著降低(P0.05),且中药组给药8周上述指标均显著低于黄葵组(P0.05)。光镜显示空白组大鼠肾组织结构正常,模型组大鼠多数肾小球系膜细胞和基质出现中、重度增生,肾间质出现炎性细胞浸润伴灶状纤维化;各治疗组肾小球系膜细胞和系膜基质增生程度均有一定程度缓解。结论益气养阴通络方可减少IgA肾病模型大鼠血尿、蛋白尿,减轻肾脏组织病变,其作用机制可能与其降低尿红细胞数、24 h尿蛋白,抑制肾脏TNF-α表达有关。     

雷米普利对阿霉素肾病大鼠肾脏Toll样受体4，核因子-κB，白细胞介素-8表达的影响

目的：探讨雷米普利对阿霉素肾病大鼠肾脏Toll样受体4,核因子κB,白细胞介素-8表达及尿蛋白量的影响。方法：雄性wistar大鼠40只,随机分为对照组（A组）,模型组（B组）,常规剂量治疗组[C组,5mg／（kg·d）],大剂量治疗组[D组,10mg／（kg·d）]。采用尾静脉注射阿霉素6mg／kg的方法建立阿霉素肾病大鼠模型。分别于4周,8周未观察各组大鼠24h尿蛋白定量及肾脏病理变化。免疫组织化学方法测定肾脏Toll样受体4,核因子-κB,白细胞介素-8的表达水平。结果：与B组比较,C,D组24h尿蛋白定量明显降低（P〈0．05）,肾组织Toll样受体4,核因子-κB,白细胞介素-8表达明显降低（P〈0．05）。与C组比较,D组上述指标明显降低（P〈0．05）。结论：雷米普利可能通过下调Toll样受体4,核因子-κB,白细胞介素-8的表达减少尿蛋白。     

盐酸贝那普利对糖尿病大鼠肾脏足细胞及其蛋白nephrin表达的影响

目的观察盐酸贝那普利对糖尿病大鼠足细胞及其nephrin蛋白表达的影响,初步探讨其对糖尿病大鼠肾脏保护作用及其可能的机制。方法将健康雄性SD大鼠随机分为正常对照(NC组)和实验组。实验组通过一次性腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,造模成功后,随机分为糖尿病对照组(DM组)和贝那普利干预组(DT组),DT组予以盐酸贝那普利10 mg.kg-1.d-1,混悬液灌胃。NC、DM组予以等量0.9%氯化钠注射溶液相应时间灌胃。每周监测各组大鼠尾外周血血糖。4周后,检测糖化血红蛋白(HbA1c)及尿液中nephrin蛋白、白蛋白(ALB)及视黄醇结合蛋白(RBP)。处死大鼠留取肾脏标本,在电镜下观察肾脏组织形态学及足细胞超微结构的变化,采用免疫组织化学方法检测肾组织nephrin蛋白的表达水平。结果造膜4周后,DM和DT组的HbA1c、肾脏肥大指数、尿nephrin/肌酐(Cr)、尿ALB/Cr、尿RBP/Cr与NC组相比,差异有统计学意义(P<0.05),DM和DT组与NC组nephrin表达水平差异有统计学意义(P<0.05),电镜下糖尿病大鼠组与NC组相比肾组织病变明显。与DM组比较,DT组除血糖和HbA1c水平外,其余各项指标二组之间均差异有统计学意义(P<0.05),肾组织病理改变亦明显减轻。结论贝那普利通过上调nephrin表达水平改善修复受损足细胞,减少足细胞脱落,从而减少糖尿病大鼠蛋白尿,对糖尿病肾病发挥保护作用。     

1,25-(OH)_2D_3减轻糖尿病大鼠炎症因子的排泄及podocin表达缺失

目的:观察1,25-(OH)2D3对糖尿病大鼠尿液炎症因子单核细胞趋化蛋白- 1(MCP-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-λ(IFN-λ)及podocin表达水平的影响。方法:雄性Wistar大鼠随机分为对照组和糖尿病模型组;后者经链脲菌素诱导糖尿病模型成功后再随机分为糖尿病组和1,25-(OH)2D3组。给予1,25-(OH)2D3第6周测定大鼠尿红细胞、24小时尿蛋白、MCP-1、TNF-α、IFN-λ排泄及血糖水平。肾组织光镜电镜、肾小球podocin免疫组化及荧光染色定量分析检测podocin的表达。结果:与对照组相比,1,25-(OH)2D3组及糖尿病组尿红细胞、尿蛋白、MCP-1、TNF-α、IFN-λ、血糖明显升高(P<0.01),podocin蛋白表达明显下降(P<0.01)。与糖尿病组相比,1,25-(OH)2D3组尿红细胞、尿蛋白、MCP-1、TNF-α、IFN-λ、血糖明显降低(P<0.05或P<0.01),podocin蛋白表达明显增加(P<0.01)。结论:1,25-(OH)2D3可减轻糖尿病大鼠血尿、蛋白尿,减轻尿液炎症因子的排泄,恢复podocin的表达而有肾保护作...     

奥美沙坦酯对阿霉素肾病大鼠klotho蛋白表达及氧化应激的影响

目的探讨奥美沙坦酯对阿霉素肾病大鼠klotho蛋白(KL)表达和氧化应激的影响。方法阿霉素肾病大鼠随机分为阿霉素肾病组(ADR组)、奥美沙坦酯干预组(OLM组),每组11只,另设10只正常大鼠作为对照组(NC组)。OLM组大鼠给予奥美沙坦酯10mg/(Kg·d)灌胃,ADR组及NC组大鼠给予等量生理盐水灌胃。于第8周时检测大鼠24h尿蛋白、血清白蛋白、总胆固醇、甘油三酯、尿素氮、肌酐、氧化应激指标(SOD、MDA)、KL mRNA及klotho蛋白表达水平。结果与NC组比较,第8周时ADR组与OLM组24h尿蛋白、总胆固醇、甘油三酯、MDA水平明显增加,KL mRNA、klotho蛋白表达、SOD活性降低,差异具有统计学意义(P<0.05);ADR组与OLM组相比,上述改变更加明显,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论阿霉素肾病大鼠klotho蛋白的表达降低,奥美沙坦酯可提高阿霉素肾病大鼠肾脏klotho蛋白的表达,抑制氧化应激,延缓肾病进展。     

泼尼松、苯那普利对阿霉素肾病大鼠podocin mRNA和蛋白表达的影响

目的:观察阿霉素肾病大鼠肾小球上皮细胞足突蛋白podocinmRNA和蛋白的表达及泼尼松、苯那普利对此表达的影响,探讨podocin分子在蛋白尿发生中的可能作用。方法:SD雄性大鼠,随机分4组进行观察:正常对照组、肾病对照组、肾病泼尼松治疗组、肾病苯那普利治疗组。肾病泼尼松治疗组与肾病苯那普利治疗组每日分别予泼尼松10mg/kg、苯那普利3mg/kg灌胃,共4周;实验4周时留24h尿蛋白定量及血生化,取肾脏皮质抽提总RNA和总蛋白,分别应用半定量RT-PCR和Westernblot测定podocinmRNA和蛋白质的表达。结果:正常对照组大鼠podocin蛋白表达的相对量是5.26±1.19,而肾病对照组大鼠podocin蛋白基本不表达,泼尼松、苯那普利可增加podocin蛋白的表达;正常对照组、肾病对照组、肾病泼尼松治疗组、肾病苯那普利治疗组podocin分子mRNA的相对值分别为0.99±0.21、1.96±0.98、1.31±0.24、2.46±1.49,肾病对照组大鼠podocinmRNA的表达与正常对照组相比显著上调(P<0.05)。结论:podocin蛋白表达的减少可能是阿霉素肾病大鼠蛋白尿产生的...     

Effect of hyperfiltration, proteinuria and diabetes mellitus on the uptake kinetics of gentamicin in the kidney cortex of rats

The influence of hyperfiltration-hypertrophy, proteinuria and glucosuria on the renal cortical uptake of gentamicin was studied in several experimental models. Two groups of remnant kidney rats, one fed a standard protein diet and one a low protein diet, heavy proteinuric rats (adriamycin) and diabetic rats, each with their own control group, were treated with increasing doses of gentamicin, given as a continuous infusion over 6 hr. The relationship between increasing steady-state serum levels (ranged from 1 to 100 micrograms/ml) and the cortical gentamicin concentrations at the end of the infusions was examined by means of Michaelis-Menten kinetics. The uptake curves were compared to their respective control curves. It was demonstrated that gentamicin uptake was reduced in remnant kidney rats fed standard diet (showing hyperfiltration and heavy proteinuria), in adriamycin rats (showing heavy proteinuria in the absence of hyperfiltration) and in diabetic rats. Uptake of gentamicin in remnant kidney rats fed low protein diet (showing hyperfiltration and slight proteinuria) was comparable to controls. It appeared that among the pathophysiological factors examined, proteinuria is the most important in decreasing the cortical uptake of gentamicin. It is suggested that high levels of proteins in the proximal tubular fluid interfere with the adsorptive endocytic process, involved in the uptake of both proteins and gentamicin.     

蛋白激酶Cβ抑制剂LY333531对阿霉素肾病小鼠肾脏的保护作用

目的:探讨蛋白激酶Cβ抑制剂LY333531对阿霉素肾病小鼠肾脏的保护作用。方法:24只雄性、8周龄BALB/c小鼠随机分为肾病组、治疗组和对照组(n=8),肾病组和治疗组一次性尾静脉注射阿霉素(10mg/kg),对照组注射等量生理盐水;阿霉素注射后第5天,治疗组予LY33353110mg/(kg·d)灌胃,肾病组和对照组予等量溶媒灌胃。阿霉素注射后2周处死小鼠。处死前留取尿标本检测尿蛋白和肌酐。观察肾脏病理、巨噬细胞浸润、巨噬细胞移动抑制因子(MIF)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的表达。结果:与对照组相比,肾病组尿蛋白肌酐比值升高,肾脏巨噬细胞浸润、MCP-1和MIF表达增加(P<0.01);与肾病组相比,治疗组尿蛋白/肌酐比值下降,肾脏巨噬细胞浸润、MCP-1和MIF表达减少(P<0.01)。结论:LY333531对阿霉素肾病小鼠肾脏具有保护作用,其机制可能与下调阿霉素肾病小鼠肾脏MCP-1和MIF表达,抑制巨噬细胞浸润有关。     

Renal purine efflux and xanthine oxidase activity during experimental nephrosis in rats: difference between puromycin aminonucleoside and adriamycin nephrosis

1. The hypothesis was tested that the renal xanthine oxidase system provides a source of oxygen free radicals in puromycin aminonucleoside and adriamycin experimental nephrosis by generating uric acid from hypoxanthine and xanthine. 2. The concentrations in renal tissue of the putative intermediary products of puromycin aminonucleoside metabolism, hypoxanthine and xanthine, and of their precursors, adenosine and inosine, were lower in rats treated with puromycin aminonucleoside than in normal controls, whereas concentrations of the metabolites were normal after adriamycin intoxication. Their daily urinary excretion was lower in the 24 h after puromycin aminonucleoside administration compared with the baseline values and returned to near normal levels within 5 days. After adriamycin the 24 h urinary excretion of xanthine and uric acid was double the baseline levels (P less than 0.001). 3. When equimolar amounts of hypoxanthine were injected instead of puromycin aminonucleoside, the concentration of all bases increased slightly in renal tissue and their urinary efflux was double the baseline level: allantoin, uric acid, the unmodified nucleotide and xanthine were the most represented compounds in urine. 4. The enzymatic activities relative to xanthine oxidase (EC 1.1.3.22) and xanthine dehydrogenase (EC 1.1.1.204) in renal tissues were unchanged 1 day after puromycin aminonucleoside or hypoxanthine intoxication and only moderately increased in both groups at 13 days (the time of appearance of heavy proteinuria in the puromycin aminonucleoside-treated group). In contrast, xanthine oxidase and xanthine dehydrogenase activities were higher in adriamycin-treated rats at 1 and 15 days after the treatment (P less than 0.001). 5. Feeding rats with normoprotein diets containing tungsten induced a marked and constant decrease of renal xanthine oxidase and xanthine dehydrogenase activities to 20% of the baseline values in both puromycin aminonucleoside- and adriamycin-treated rats. Inhibition of renal xanthine oxidase and xanthine dehydrogenase activities by tungsten was associated with a marked reduction (P less than 0.001) of proteinuria in adriamycin-treated rats and the same occurred with allopurinol, a specific inhibitor of xanthine oxidase activity. In contrast, tungsten treatment did not reduce the proteinuria associated with puromycin aminonucleoside, which reached a maximum 13 days after puromycin aminonucleoside intoxication. Hypoxanthine-treated rats were normoproteinuric after 2 months of observation. 6. These data demonstrate an activation of renal xanthine oxidase and xanthine dehydrogenase after adriamycin intoxication which is relevant to the induction of proteinuria. They also argue against the involvement of the renal xanthine oxidase system as a source of free radicals in puromycin aminonucleoside nephrosis and suggest that the nucleotide cycle is not a normal route for puromycin aminonucleoside degradation.(ABSTRACT TRUNCATED AT 400 WORDS)     

糖尿病肾病大鼠血管钙化与骨钙素表达的实验研究

目的探讨糖尿病肾病大鼠肾脏钙化、血管钙化与骨钙素表达的关系。方法用链脲佐菌素诱导糖尿病肾病大鼠模型,并以正常大鼠作为对照组,于第3、6个月末分别采用VonKossa染色观察肾脏钙盐沉积、免疫组化观察肾脏骨钙素的表达水平。结果糖尿病肾病大鼠肾脏及血管有骨钙素的表达,且与钙盐沉积正相关(r=0.81,P<0.05)。正常大鼠肾脏没有发现骨钙素的表达。结论糖尿病肾病晚期肾脏、血管出现钙盐沉积,骨钙素的表达水平与钙盐沉积程度呈正相关。     

GSK3β抑制剂对糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β1和血清PAI-1表达的影响

目的观察糖原合成酶激酶-3β（GSK3β）抑制剂Licl对糖尿病肾病（DN）大鼠的影响,从而明确GSK-3β抑制剂对DN的作用机制。方法将60只雄性Wistar大鼠随机分为四组：正常对照组（NC组,n=10）,Licl组（n=10）,DN组（n=20）,DN＋Licl组（n=20）。通过一次性腹腔注射链脲佐菌素（STZ）联合长期高脂饮食,建立DN大鼠模型;通过腹腔注射GSK-3β抑制剂Licl进行药物干预。观察各组大鼠一般状态、体重、肾重/体重的变化;检测血糖、尿量、尿蛋白、血肌酐等指标;肾脏PAS染色观察各组大鼠肾脏病理改变;ELISA方法检测各组大鼠血清纤溶酶原激活物抑制物-1（PAI-1）的水平,IHC方法检测肾组织转化生长因子-β1（TGF-β1）的表达,进行组间比较。结果与NC相比,DN组大鼠一般状态、体重、肾重/体重、血糖、血肌酐、尿量、尿蛋白、肾脏病理均出现了DN特有的变化特征,血清PAI-1明显增高,肾组织TGF-β1的表达明显上调。DN＋Licl组较DN组大鼠存活率高,尿蛋白、血清PAI-1表达显著减少,肾脏病理较DN组明显减轻,而肾组织TGF-β1表达明显增加。结论 GSK-3β抑制剂Licl能够降低DN大鼠血清PAI-1水平、蛋白尿及死亡率。DN大鼠较正常大鼠肾组织TGF-β1表达明显上调,GSK-3β抑制剂Licl能进一步增加DN大鼠肾组织TGF-β1蛋白的表达。抑制GSK-3β,对治疗DN有积极的意义。但是GSK-3β抑制剂Licl作为药物治疗DN,应考虑其效应的两面性。