两种靶细胞在抗体依赖细胞介导的细胞毒活性检测中的比较

目的　通过两种靶细胞在抗体依赖细胞介导的细胞毒 (ADCC)活性检测的比较 ,选择一种较为合适的靶细胞。方法　应用绵羊红细胞 (SRBC)、鸡红细胞 (CRBC)作为靶细胞 ,在效靶比为 1∶ 10、抗 SRBC抗体 1∶ 2 0 0 0、抗 CRBC抗体 1∶ 2 0 0稀释 ,37℃孵育 4h后 ,检测外周血单个核细胞 PBMC)对两种靶细胞的细胞毒指数。结果　检测得 PBMC对SRBC的细胞毒指数 (% )为 9.0 3± 6 .74,对 CRBC的细胞毒指数 (% )为 31.77± 16 .2 7。其中对 10例同人相同浓度 PBMC对 SRBC、CRBC的细胞毒指数配对比较中 ,经相关性检验 ,对两靶细胞的检测结果具有显著相关性 (r=0 .715 2 ,P <0 .0 5 ) ;经 t检验 ,对两靶细胞的细胞毒指数具有极显著性差异 (t=4.33,P <0 .0 1)。结论　在相同条件下 ,对 CRBC的细胞毒指数比 SRBC高 ,用 CRBC作为靶细胞检测人 PBMC的活性较好     

两种靶细胞在抗体依赖细胞介导的细胞毒活性检测中的比较

目的通过两种靶细胞在抗体依赖细胞介导的细胞毒(ADCC)活性检测的比较,选择一种较为合适的靶细胞.方法应用绵羊红细胞(SRBC)、鸡红细胞(CRBC)作为靶细胞,在效靶比为1:10、抗SRBC抗体1:2000 、抗CRBC抗体1:200稀释,37℃孵育4h后,检测外周血单个核细胞PBMC)对两种靶细胞的细胞毒指数.结果检测得PBMC对SRBC的细胞毒指数(%)为9.03±6 .74,对CRBC的细胞毒指数(%)为31.77±16.27.其中对10例同人相同浓度PBMC对SRBC、C RBC的细胞毒指数配对比较中,经相关性检验,对两靶细胞的检测结果具有显著相关性(r= 0.7152,P<0.05);经t检验,对两靶细胞的细胞毒指数具有极显著性差异(t=4.33, P<0.01).结论在相同条件下,对CRBC的细胞毒指数比SRBC高 ,用CRBC作为靶细胞检测人PBMC的活性较好.     

CTLL2细胞增殖检测单核／巨噬细胞ADCC效应方法的应用研究

探讨ＣＴＬＬ２细胞增殖检测单核／巨噬细胞ＡＤＣＣ效应方法的应用价值，利用此方法检测比较了健康志愿者外周血单核细胞ＡＤＣＣ效应和非特异杀伤效应，ＬＰＳ刺激单核细胞前后其ＡＤＣＣ效应变化。     

CTLL_2细胞增殖检测单核/巨噬细胞ADCC效应方法的应用研究

探讨ＣＴＬＬ２细胞增殖检测单核／巨噬细胞ＡＤＣＣ效应方法的应用价值，利用此方法检测比较了健康志愿者外周血单核细胞ＡＤＣＣ效应和非特异杀伤效应，ＬＰＳ刺激单核细胞前后其ＡＤＣＣ效应变化。结果表明检测单核细胞ＡＤＣＣ效应和非特异杀伤效应不存在相关性（Ｐ＞０．０５），活化后单核细胞ＡＤＣＣ效应较活化前明显增强（Ｐ＜０．０１），提示ＣＴＬＬ２细胞增殖检测单核／巨噬细胞ＡＤＣＣ效应方法是特异、灵敏的实验方法，为临床广泛研究单核／巨噬细胞ＡＤＣＣ效应提供一种可靠的检测手段。     

干扰素对放疗后鼻咽癌(NPC)患者ADCC作用的影响

抗体依赖性细胞毒性ADCC是机体重要的抗肿瘤免疫机制之一。作者用干扰素对20例放疗后的NPC(鼻咽癌)患者的ADCC作用进行了探讨。实验中,靶细胞为低分化NPC细胞株(CNE-2),效应细胞为患者外周血淋巴细胞,靶细胞抗体为兔抗CNE-2细胞抗体,用~(51)Cr释放法测定。结果表明经干扰素预孵的效应细胞比未经干扰素预孵的效应细胞的细胞毒平均增加33.5％(P<0.001),表明干扰素有促进ADCC的作用。     

一种新的检测人外周血K细胞ADCC实验系统的建立

介绍一种人NK 细胞抵抗的黑色素瘤细胞和相应抗体作为指示系统,采用~(51)Cr6h 释放试验来检测人外周血K 细胞的ADCC 活性。     

雪卡毒素两种检测方法的比较研究

目的建立雪卡毒素的细胞毒性试验检测和小鼠生物法检测方法,对比评价两种方法的优缺点。方法利用不同浓度的雪卡毒素标准品（P—CTX-1）结合乌苯苷和黎芦定处理小鼠神经母细胞瘤细胞（N-2a）,研究和建立毒素剂量与细胞活性的毒性曲线关系式。同时,通过测定昆明系小白鼠的雪卡毒素半数致死剂量LD50和毒素剂量与小鼠死亡时间的关系方程式,建立小鼠生物法检测标准,再分别以两种方法对32份不同月份采集的鱼样品的毒素提取物进行检测,对两种方法检测结果做分析比较。结果细胞毒性试验法检测结果与小鼠生物法检测结果具有一定的相关性,但细胞毒性试验法检测雪卡毒素的检测灵敏度远高于小鼠生物法。结论细胞毒性试验检测法适用于大量样品的初步筛选方法,而小鼠生物法可作为雪卡毒素检测的重要参考方法。     

两种血沉检测方法的比较分析

目的 采用传统的魏氏法和倾斜管法两种方法来测定红细胞的沉降率,并对两种血沉检测方法进行比较分析.方法 随机采集100例血液标本,对这100例血液标本同时采用倾斜管法和魏氏法两种方法进行红细胞沉降率的测定,并对两种血沉检测方法进行统计比较和分析.结果 对两种血沉检测方法进行比较分析,两种方法测定的红细胞沉降率差异并不显著(P>0.05),没有统计学意义,相关性很好.结论 采用倾斜管法对红细胞的沉降率进行测定是一种简单、便捷的方法,可以在特点的条件下使用,具有推广价值.     

两种方法检测红细胞沉降率的比较分析

目的比较两种不同方法测定红细胞沉降率(ESR)的结果,评价LBY-XC-20全自动动态ESR试仪。方法分别用全自动血沉测试仪与魏氏法同时测定ESR,对数据进行分析与比较。结果经统计学处理,2种方法测定结果相关系数(r=0.997 5,P>0.05),2种方法比较差异无统计学意义,相关性好。结论全自动ESR测试仪与魏氏法对标本测定结果接近。     

两种细胞凋亡检测方法的比较

0引言近年来随着细胞凋亡分子机制研究的深人，人们认识到凋亡的意义不只局限于能使肿瘤细胞减少．‘它对于研究肿瘤的发生机制也有着重要的意义[1]．我们将比较两种最常用于群体细胞凋亡的检测方法．l材料和方法1．l材料HL－60细胞山本校病理教研室白庆咸博士提供，etoposide100mg（5ml）购自西安光华制药厂；RP－MI1640培养基为Gibco产品．1．2方法l．2．l凋亡模型的建立培养细胞至16X1O6，分为4组，即加人etoposide90g／mL。作用0，l.0，2．5，3．5h4组，其中0．5h．～3.5h组先加人etoposi作用0．5h，再1000r／minX3min离心去除etop…     

脐血单个核细胞体外扩增的实验研究

目的 :采用集落刺激因子体外扩增脐血单个核细胞 (CBMC) ,研究集落刺激因子对CBMC增殖活性的影响。方法 :用RPMI1 640培养液加入集落刺激因子IL - 3、SCF、GM -CSF及其组合 ,体外扩增CBMC ,健康成人外周血单个核细胞 (PBMC)作为对照组。结果 :加入不同集落刺激因子体外培养CBMC与PBMC后 ,增殖活性均有不同程度的升高 ,以加入IL - 3、SCF、GM -CSF组最为显著 ;CBMC的增殖活性与PBMC比较有显著性差异 (P<0 .0 5)。结论 :集落刺激因子可在体外扩增CBMC ,IL - 3、SCF、GM -CSF之间有明显的协同作用 ;与PBMC相比 ,CBMC有更高的增殖潜能     

实验性哮喘小鼠免疫细胞的ADCC作用

目的 :探讨支气管哮喘的发病机制。方法 :在小鼠 OVA支气管哮喘模型的基础上 ,分离哮喘鼠和正常鼠脾脏各种免疫细胞 ,包括单核 /巨噬细胞、树突状细胞、B细胞、CD3+ T细胞、CD4+ T细胞和 CD8+ T细胞 ,并以细胞增殖法和改良的 MTT比色法检测上述各种细胞的抗体依赖的细胞介导细胞毒效应 ( antibody dependentcell- mediated cytotoxicity,ADCC)。结果 :支气管哮喘小鼠上述各种细胞自然状态下的 ADCC作用均较健康对照组减弱 ( P<0 .0 5 )。结论 :免疫细胞自然状态下 ADCC作用减弱可能作为支气管哮喘免疫功能紊乱的一部分参与了哮喘的发病     

NK细胞联合西妥昔单抗对大肠癌细胞ADCC作用的研究

目的比较3株肠癌细胞株(LOVO、SW480、SW620)与自然杀伤(natural killer,NK)细胞、西妥昔单抗(Cetuximab)混合作用之后,NK细胞抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用(antibody dependent cell cytotoxicity,ADCC),探讨Cetuximab抗肿瘤过程中ADCC的作用。方法免疫组织化学方法检测3种不同肠癌细胞系(LOVO、SW480、SW620)的EGFR表达水平;MTT法检测6种不同浓度Cetuximab作用48h后肿瘤细胞的生长抑制情况;NK细胞与Cetuximab包被的肿瘤细胞共孵育,LDH法检测NK细胞的ADCC功能变化。结果免疫组织化学结果显示,3株细胞EGFR表达:LOVO(),SW480(+),SW620(-);Cetuximab对LOVO细胞和SW480细胞的生长抑制呈剂量依赖,对SW620细胞无抑制作用;LOVO细胞和SW480细胞经Cetuximab处理后,NK细胞的ADCC作用均增强且有统计学意义(P<0.05)。结论单独的Cetuximab可抑制EGFR阳性的LOVO细胞和SW480细胞,而对EGFR阴性的SW620细胞生长抑制作用不明显,所选的2株EGFR阳性肿瘤细胞都可被Cetuximab所介导ADCC作用所抑制,高EGFR表达的肿瘤细胞更加敏感。     

护肝合剂对慢性乙型肝炎患者PBMC功能的影响

目的观察护肝合剂对慢性乙型肝炎患者肝功能、外周血单个核细胞(PBMC)功能的影响。方法治疗组50例,在一般治疗的基础上加用护肝合剂,对照组15例用甘草酸二胺氯化钠溶液、门冬氨酸鸟氨酸、灯盏花素等进行一般治疗。分离培养治疗前后外周血单核细胞,加入植物血凝素(PHA),培养48h后,1500r/min离心10min,收集上清液-20℃保存,统一检测IFN-γ,IL-10含量。采用流式细胞仪检测治疗前后外周血CD8 CD28 T细胞亚群。结果治疗组谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST),黄疸指数(TBIL)复常率均明显优于对照组(P<0.05,P<0.01,P<0.01)。治疗组治疗后IFN-γ显著升高(P<0.05),IL-10显著下降(P<0.05),对照组升高不显著(P>0.05)。CD8 CD28 T细胞亚群治疗组较对照组显著升高(P<0.05),且治疗组治疗前后亦显著升高(P<0.05)。结论护肝合剂能够改善肝功能,提高慢性乙型肝炎患者Th1细胞免疫。     

甲型肝炎患者PBMC中HAV-Ag的APAAP检测法及HAV-Ag检出的意义

目的 建立检测甲肝患外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中甲肝病毒抗原（ＨＡＶ－ＡＧ）的ＡＰＡＡＰ方法,并对５２例甲肝患ＰＢＭＣ中ＨＡＶ－Ａｇ进行动态。方法 应用抗ＨＡＶ－ＭｃＡｂ,着抗鼠ＩｇＧ及ＡＰＡＡＰ建立了三层重叠的ＡＰＡＡＰ法,对５２例甲肝患急性期及恢复期ＰＢＭＣ进行动态检测,对ＨＡＶ－Ａｇ阳性率及平均阳性细胞百分率及其与甲肝病程的相关关系进行了分析。结果 替代试验及阴断试验证明本方法特异性     

The clinic study on synchronous detection of HCV RNA in the plasma and PBMC of hepatitis C patients

Recentyears,it had been reported the HCV in-fection in peripheral mononuclear blood cells(PBMC) was found in the literatures[1— 3 ] .In orderto increase the HCV RNA positive detection rate inthe chronic hepatitis C(CHC) patients,we usedRT- PCR techniques to synchronously detected HCVRNA in the plasma and PBMC of 5 83 CHC patientswith a continuously elevated level of ALT for morethan one year.1　MATERIALSAND METHODS1 .1　 SubjectsThe5 83 in- patientsand out- patients wer…     

乙型肝炎患者外周血单个核细胞产生TNF活性的研究

本文对70例不同类型乙型肝炎患者,包括重症肝炎26例、急性肝炎19例、慢性活动性肝炎13例、以及慢性迁延性肝炎12例的外周血单个核细胞的TNF活性及其在肝细胞坏死中的可能作用进行了研究。研究中采用微量全血体外刺激,即以LPS刺激单个核细胞产生TNF_α、以PHA刺激淋巴细胞产生TNF_β,然后用国际通用的L_(929)细胞标准法检测TNF的活性。研究发现重症肝炎患者的TNF活性(TNF_α为15.76 U/ml;TNF_β20.13 U/ml)明显高于正常人(TNF_α为3.10U/ml;TNF_β为0.21 U/ml)与急性肝炎患者(TNF_α为3.44U/ml;TNF_β为0.24 U/ml)。又慢活肝患者的TNF活性(TNF_α为11.42U/ml;TNF_β为7.54 U/ml)明显高于慢辽肝(TNF_α活性为5.92U/ml;TNF_β为0.41 U/ml)。结果表明TNF活性的增高与肝损害的程度与肝炎的活动性呈正相关。     

CTLA4Ig抑制银屑病外周血单个核细胞增殖的体外研究

目的　研究CTLA4Ig在银屑病外周血单个核细胞 (peripheralbloodmononuclearcells ,PBMCs)增殖中的作用。方法　PBMC标本取自 3 3例寻常型银屑病患者和 2 0名健康献血者 ,利用植物血凝素 (phytohemagglutinin ,PHA)、脂多糖(lipopolyaccharide ,LPS)、金葡菌肠毒素B(staphylococcalenterotoxinB ,SEB)刺激增殖 ,在加入或未加入CTLA4Ig情况下 ,观察细胞形态并检测 3 H TdR掺入量。结果　显示CTLA4Ig对PHA、LPS有抑制作用 ,并呈剂量依赖关系 ;而CTLA4Ig浓度只有高于 5 μg/ml时 ,对SEB才有抑制作用 ,且可完全抑制。 结论　CTLA4Ig对PHA、LPS、SEB刺激下的银屑病PBMC增殖反应有明显的抑制作用 ,但反应模式不一致     

2型糖尿病患者PBMC组蛋白甲基化研究

目的 该研究探讨了2型糖尿病(T2DM)患者外周血单个核细胞(PBMC)组蛋白修饰情况.方法 收集12例T2DM患者及12例健康对照者的PBMC,采用H3K4/H3K9甲基化检测试剂盒提取组蛋白和检测H3K4/H3K9甲基化水平.实时荧光定量PCK法检测T2DM患者的PBMC组蛋白甲基转移酶和组蛋白去甲基化酶基因的mRNA表达水平.结果 与健康对照组比较,T2DM患者的PBMC组蛋白H3K4甲基化水平升高.实时定量PCR结果 显示T2DM患者组PBMC的SET1、SUV39H1、SUV39H2、KDM3A、KDM5B和LSD1基因表达分别是健康对照组的3.06、0.46、0.48、0.43、3.07和0.35倍.结论 2型糖尿痛患者外周血PBMC组蛋白甲基化呈现异常.     

黄芪总提取物促进PBMC对肝癌细胞的体外杀伤作用

目的 观察黄芪总提取物(TAE)与人外周血单个核细胞(PBMC)联用对肝癌细胞株BEl-7402的体外杀伤作用.方法 MTT法及流式细胞术分别检测TAE与PBMC在单独、联合应用情况下对BEL-7402细胞的杀伤活性,Burgi修正公式评价药物联合应用对细胞杀伤效果是否具有协同作用,ELISA法检测TAE对PBMC分泌IFN-γ、TNF-α 细胞因子的影响.结果 TAE与PBMC联用对肝癌细胞BEl-7402具有协同杀伤作用.TAE预先与PBMC孵育后两者协同杀伤作用明显增强.TAE可以刺激PBMC分泌IFN-γ、TNF-α细胞因子.结论 TAE可以促进PBMC对肝癌细胞的体外杀伤能力,二者联用具有协同杀伤作用,其作用机制可能是TAE刺激PBMC分泌IFN-γ和TNF-α以增强免疫杀伤能力.