缺铁大鼠肠道黏膜细胞IRP2 mRNA、TfR mRNA和Fn mRNA表达水平的研究

正常机体铁代谢是处于动态平衡状态的，这一平衡状态主要通过铁调节蛋白(IRP)、转铁蛋白受体(TfR)、铁蛋白(Fn)等的共同协调作用来维持。近年来对IRP2的研究较少。我们在建立大鼠营养性缺铁性贫血动物模型的基础上，对不同程度的缺铁大鼠十二指肠中IRP2 mRNA、Fn mRNA、TfR mRNA的表达进行了检测，以揭示IRP2、TfR、Fn等在肠铁吸收及调节的作用。     

HL-60细胞IRP2 mRNA、TfR mRNA、Fn mRNA的表达关系研究

为了探讨白血病细胞铁代谢及其调节机制，以及铁调节蛋白2（IRP2）在HL-60细胞铁代谢中的作用，将FeCl3或去铁胺（desferrioxamine，DFO）加入含有10％胎牛血清的RPMl1640培养液中，使HL-60细胞处于缺铁或富铁的不同状态下进行培养。分别于细胞培养后第12、24和48小时收集细胞，提取总RNA，采用RT-PCR半定量法测定IRP，mRNA、铁蛋白（Fn）mRNA和转铁蛋白受体（TfR）mRNA等指标的相对表达量。结果表明：①各实验组之间IRP2 mRNA的表达量变化不大，组间差异无统计学意义（F组间=1．199，P〉0．05）；而细胞培养时间对IRP2 mRNA的表达有影响，组内差异有统计学意义（F组内=43．418，P〈0．01），表现为随时间的延长，IRP2 mRNA的表达降低。②各实验组之间TfR mRNA的表达差异有统计学意义（F组内=7．184，F组间=113．926，P〈0.01）。在加入DFO的两个实验组中，TfR mRNA的表达升高。在加铁的两个实验组中，与对照组相比较，于12小时时TfR mRNA的表达量上升，24小时时达到高峰，之后迅速下降。③在加铁的两个实验组中，Fn mRNA的表达量较高，大约是对照组的2倍，它们与对照组比较，差异具有统计学意义（P〈0．05）；而在加入DFO的两个实验组中Fn mRNA的表达与对照组相比较，无明显的差异（P〉0．05）。④IRP，mRNA与TfR mRNA及Fn mRNA的表达均不相关（r=-0．005，r=0．074，P〉0．05）。结论：①IRP2在转录水平上可能是通过自身不同片段的量的变化，而在转录后水平上是以氧化修饰的方式通过自身降解，对HL-60细胞的铁代谢进行调节。②Fn mRNA和TfR mRNA不同程度地参与了对HL-60细胞内铁的调控过程。     

铁调节蛋白2的特征及其调节

铁调节蛋白（ＩＲＰ）是一类调节细胞铁代谢的ＲＮＡ结合蛋白。最近发现的ＩＲＰ２在分子结构、细胞表达上与ＩＲＰ１相似,但仍有其独特的功能,其结合活性及表达受细胞铁变化、一氧化氮和低氧等因素的不同调节。深入研究ＩＲＰｓ在调节细胞铁代谢中的作用,将有助于揭示人体病理条件下（如炎症、肿瘤）铁利用障碍的机制。     

四君子汤对脾虚大鼠肠黏膜 TFF3蛋白表达及 TFF3mRNA 表达的影响

目的：探讨四君子汤对脾虚大鼠肠道黏膜 TFF3蛋白表达及 TFF3mRNA 表达的影响。方法大鼠随机分为正常对照组、脾虚模型组、自然复健组和四君子汤组,蛋白印迹（Western-Blot）法测定回肠黏膜 TFF3蛋白表达的变化,采用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）法检测 TFF3mRNA。结果与正常对照组相比,脾虚各组大鼠肠黏膜 TFF3蛋白表达,TFF3mRNA 降低。经四君子汤治疗后,大鼠肠黏膜 TFF3蛋白表达,TFF3mRNA 明显上调,优于自然复健组（P ＜0．01）。结论研究表明,四君子汤可增强 TFF3mRNA 与蛋白的表达,促进受损肠黏膜的重建与修复,增强肠黏膜防御能力。     

铁代谢中铁蛋白,转铁蛋白及相关基因调节的研究进展

铁代谢中铁蛋白、转铁蛋白及相关基因调节的研究进展李昕权综述廖清奎审校有关铁代谢的研究，近年来有很多学者从分子水平对铁蛋白（Ｆｎ）和转铁蛋白（Ｔｆ）的结构及其摄铁、贮铁、释放铁的机制；对调节铁代谢的相关基因的结构和表达产物的功能进行了深入研究，取得了许...     

铁调节蛋白2的特征及其调节

铁调节蛋白(IRP)是一类调节细胞铁代谢的RNA结合蛋白。最近发现的IRP2在分子结构、细胞表达上与IRP1相似,但仍有其独特的功能,其结合活性及表达受细胞铁变化、一氧化氮和低氧等因素的不同调节。深入研究IRPs在调节细胞铁代谢中的作用,将有助于揭示人体病理条件下(如炎症、肿瘤)铁利用障碍的机制。     

谷氨酰胺对饥饿大鼠肠道黏膜损伤的保护作用

目的观察谷氨酰胺对饥饿大鼠肠黏膜的保护作用。方法以饥饿SD大鼠为模型,将82只雄性SD大鼠随机分成全饥饿组40只、谷氨酰胺组40只,正常对照2只,根据观察时点的设置处死动物,取门静脉血检测内毒素;对回肠黏膜进行光镜检查,并用显微图象分析仪对大鼠回肠黏膜的厚度、绒毛高度和陷窝深度进行计算机图象分析。结果门静脉血内毒素水平饥饿后3、5、7天呈逐渐升高趋势,9天后下降。全饥饿组内毒素水平饥饿后3天（0.22±0.03）μg/L,7天（0.25±0.03）μg/L,9天（0.23±0.06）μg/L;谷氨酰胺组内毒素水平饥饿后3天（0.13±0.02）μg/L,7天（0.18±0.03）μg/L,9天（0.16±0.02）μg/L。肠黏膜厚度、绒毛高度及陷窝深度饥饿后3、5、7、9天呈逐渐变薄、变浅,全饥饿组黏膜平均厚度、绒毛高度、陷窝深度饥饿后3天分别为（360.06±17.54）μm,（214.41±18.04）μm,（51.74±10.29）μm;9天分别为（253.02±16.84）μm,（150.21±5.73）μm,（35.78±2.84）μm;谷氨酰胺组黏膜平均厚度、绒毛高度、陷窝深度饥饿后3天分别为（393.36±19.75）μm,（230.39±18.05）μm;（56.47±9.83）μm;9天分别为（312.18±20.27）μm;（181.24±14.71）μm,（44.45±8.02）μm。两组上述指标在组间、不同时点以及组间和不同时点的交互作用差异均有统计学意义（P〈0.05或〈0.01）。结论全饥饿大鼠肠道内毒素升高,肠黏膜结构屏障受到破坏,肠道补充谷氨酰胺能有效地维护饥饿后肠道黏膜的结构,减少内毒素进入门静脉。     

银杏叶提取物对大鼠肠缺血/再灌注后肠黏膜的保护作用及机制

目的研究银杏叶提取物（EGb761）预先给药对大鼠肠缺血／再灌注（I／R）后肠黏膜的保护效应，并观察氧自由基、bcl-2蛋白表达，探讨其作用机制。方法32只SD大鼠随机分为4组（n=8）：对照组、损伤组、EGbl组、EGb2组。监测平均动脉压（MAP），实验结束后取回肠末端组织行光镜检查，并进行肠黏膜组织Chiu’s评分，称量肠干重、湿重并计算肠含水率：检测肠黏膜组织SOD活性、MDA含量的变化，免疫组化检测bcl-2蛋白表达。结果EGb预先给药能显著升高肠I／R后的MAP，明显减轻肠黏膜组织病理损害。损伤组Chiu’s评分、肠含水率及MDA含量均显著高于对照组（P〈0．01），SOD活性显著低于对照组（P〈0.01），EGb能剂量依赖性地显著改善上述指标（P〈0．05）。损伤组bcl-2蛋白表达显著低于对照组（P〈0．01），EGb761可使bcl-2蛋白表达显著高于损伤组及对照组（P〈0.01）。结论EGb761预先给药对肠I／R后肠黏膜具有保护作用，可能与其清除氧自由基、诱导bcl-2的高表达有关。     

重组人红细胞生成素对人多发性骨髓瘤患者铁调节蛋白Hepcidin mRNA表达的影响

本研究探讨人多发性骨髓瘤血清对肝腺瘤细胞系Hep-3b细胞铁调节蛋白hepcidin表达的影响,及白介素-6(IL-6)单克隆抗体或重组人红细胞生成素(rhEPO)对其的抑制作用。在Hep-3b细胞培养液中按10%终浓度加入人多发性骨髓瘤患者血清,共培养后用逆转录聚合酶链式反应半定量方法检测Hep-3b细胞hepcidin mRNA的表达水平。在上述培养体系中,加入人IL-6单克隆抗体或rhEPO观察hepcidin mRNA表达的变化。结果表明,未治疗的多发性骨髓瘤组hepcidin mRNA表达量高于正常对照组及缺铁性贫血组,这种升高作用能被IL-6单克隆抗体或rhEPO完全抑制。对多发性骨髓瘤患者短期随访中,规律治疗能稳定血红蛋白,降低患者血清对Hep-3b细胞hepcidin mRNA的影响。结论:未治疗的多发性骨髓瘤患者血清能促进肝腺瘤细胞系Hep-3b细胞hepcidin表达,这种促进作用可被人IL-6单克隆抗体拮抗,提示IL-6可能导致Hep-3b细胞hepcidin表达量升高,从而造成慢性病性贫血(anemia of chronic disease,ACD)。这种促进作用也能被rhEPO抑制,提示rhEPO可能对ACD有治疗作用。在多发性骨髓瘤患者短期随访中,血红蛋白水平稳定,患者血清对Hep-3b细胞hepcidin mRNA的影响减小,这表明治疗使病情稳定,改善了ACD。     

肠道感染模型幼鼠肠道上皮细胞 TLR2、TLR4和NOD2表达与肠黏膜功能的关系

目的探究肠道感染幼鼠肠道上皮细胞上Toll样受体2(TLR2)、TLR4及NOD样受体2(NOD2)的表达与肠道黏膜功能之间的关系。方法雄性SD幼鼠共60只随机均分为对照组(A组,仅进行麻醉)、肠道感染模型组(B组,回肠末端-盲肠侧侧吻合手术制作肠道感染模型)及缝线组(C组,于幼鼠回肠末端缝线),分别于造模第2周和第8周采集距吻合口1～3 cm的末端回肠组织,苏木素-伊红染色法法肉眼和镜下观察其炎症变化情况并进行炎症评分;免疫组化检测TLR2、TLR4及NOD2在幼鼠肠道上皮细胞的表达。采用相关性分析TLR2、TLR4及NOD2的表达与肠黏膜功能的关系。结果第2周时,A组幼鼠的肠组织无炎症反应,而B组与C组炎症明显,炎症评分值也较A组显著增加(P 0. 05); B组和C组肠上皮细胞TLR2、TLR4及NOD2在的表达均显著高于A组;第8周时,B组的炎症评分值显著高于A、C组(P 0. 05);与前期相比,第2～8周内,肠道上皮细胞TLR2、TLR4及NOD2的表达在B组中持续升高,C组具有降低趋势,A组无显著变化,且3组之间差异显著(P 0. 05)。结论肠道上皮细胞TLR2、TLR4及NOD2的表达情况与幼鼠肠黏膜炎症的严重程度呈现正相关关系,表达量越多,肠黏膜炎症越严重。     

乌司他丁在梗阻性黄疸时保护肠粘膜屏障功能的实验研究

目的：研究乌司他丁（UTI）在梗阻性黄疸大鼠模型中保护肠粘膜屏障功能的作用。方法：将56只sD大鼠随机分为假手术组（sham）、阻黄组（OJ）、治疗组（UTI），制模成功后治疗组从尾静脉注射UTI1mL（1万U·只^-1），1次·d^-1。UTI3、UTI6和UTI9组分别连续用3d、6d和9d后处死，sham组、OJ组同期尾静脉注射等量生理盐水后处死；观察一般情况、下腔静脉采血测定血浆内毒素（ET）、TNF—α、WBC计数、细菌易位率、肝功能（ALT、SB），及取肝、小肠标本作病理分析。结果：UTI在治疗梗阻性黄疽大鼠时，与OJ比较，UTI组白细胞（WBC）、谷丙转氨酸（ALT）、总胆红素（SB）、内毒素（ET）、肿瘤坏死因子-α（TNF—α）、细菌易位率、腹水、伤口感染、出血、肝淤胆、肝细胞坏死程度、小肠粘膜水肿、糜烂、萎缩、炎性细胞浸润程度等明显降低。结论：UTI在治疗梗阻性黄疸大鼠时对保护肝功能、抑制全身炎症反应、降低肠道细菌易位率、保护肠粘膜屏障有一定的作用。     

小分子蛋白铁对缺铁性贫血的作用

为了观察小分子蛋白铁（双鹭牌红欣生血胶囊）改善营养性贫血的作用,对试服组儿童和对照组儿童进行了血红蛋白的含量、红细胞压积和红细胞游离原卟啉含量的测定与评价。研究结果表明,服用小分子蛋白铁30天能使贫血儿童的血红蛋白、红细胞压积水平显升高,红细胞游离原卟啉含量显降低,并且试服组试验前后的差值与对照组相比有显的统计学差异。结论提示,根据《保健食品功能学评价程序和检验方法》讨论稿,认为红欣生血胶囊能有效的改善儿童的缺铁性贫血。     

测定大肠癌患者的血清铁和血清铁蛋白的临床意义

目的 :探讨大肠肿瘤患者的血清铁和血清铁蛋白的表现。方法 :对 92例大肠癌的失血程度与癌的大小 ,部位 ,病程 ,病理和癌胚抗原之间的相关性进行对比。结果 :肿瘤直径大小 3cm组比小于等于 3cm组的血清铁 ,血清铁蛋白明显减少 (P <0 .0 1;P <0 .0 5 )。右半结肠组的失血量比左半结肠组的多 (P <0 .0 1)。结论 :大肠癌引起的失血与肿瘤的大小及发生部位有一定的关系     

白术对大鼠脑出血后小肠粘膜形态学变化的影响

目的：评价白术对脑出血大鼠小肠粘膜形态学的影响。方法：56只SD大鼠随机分为模型组24只、治疗组24只及对照组8只,对照组不予任何处理,模型组和治疗组制备脑出血大鼠模型后分别采用灌胃法每天灌注生理盐水和白术液（0.2 g/mL）。检测并分析对照组及脑出血后第1、7、14天模型组、治疗组（每时间点各取8只）小肠粘膜的形态学参数。结果：与对照组比较,模型组脑出血后绒毛面积降低最快最明显,绒毛高度及粘膜厚度逐渐降低,肠腺密度和深度先降低后增高。与模型组比较,治疗组于脑出血后第1天小肠绒毛高度、粘膜厚度明显降低（P0.01）,绒毛面积略降,肠腺密度及深度略增;第7天小肠绒毛高度、绒毛面积及粘膜厚度略降,肠腺密度及深度明显增大（P0.01）;第14天小肠绒毛高度、绒毛面积及粘膜厚度明显增加（P0.01）,肠腺密度及深度略降。结论：脑出血可以引起小肠粘膜萎缩;白术可改变脑出血大鼠的小肠粘膜形态,从而促进大鼠肠道功能的恢复。     

严重烧伤早期肠黏膜组织热休克蛋白70的表达规律

目的探讨大鼠烧伤后早期肠黏膜组织热休克蛋白70(HSP70)的表达变化规律及其意义。方法采用大鼠烫伤模型,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质免疫印迹(Westernblot)及免疫组化等方法,检测伤后3、6、12、24和48h不同时间点肠黏膜组织内HSP70及热休克因子1(HSF1)的表达分布情况。结果烫伤后3h肠黏膜组织内HSP70mRNA及蛋白表达均显著增加,分别在伤后6h和12h达高峰,伤后48h仍高于正常对照组(P均<0.01);伤后3h大鼠肠黏膜组织HSF1出现一过性降低,伤后6h其表达显著高于正常对照组,并呈逐渐增加的趋势直至持续到伤后48h(P均<0.01)。结论严重烧伤早期肠黏膜组织HSP70及HSF1表达均显著增加,提示严重烧伤早期即可引起肠黏膜组织细胞的应激反应,可能与细胞的自我保护机制启动有关。     

肢体缺血预处理对大鼠全肝缺血再灌注肠黏膜屏障功能的影响

【目的】观察肢体缺血预处理对SD大鼠全肝缺血再灌注肠黏膜屏障功能的影响。【方法】24只SD大鼠随机分成假预处理组（S组,n=8）、全肝缺血再灌注组（IR组,n=8）、肢体缺血预处理组（LIP组,n=8）。S组行假预处理及24h后行假手术;IR组行假预处理及24h后行全肝缺血再灌注;LIP组分离双下肢股动静脉后阻断5min再开放10min,重复3次,24h后行全肝缺血再灌注。3组动物于再灌注3h或者相应时间点取回肠末端组织和肠系膜上静脉血,检测回肠末端二胺氧化酶（DAO）活性和血浆D-乳酸、内毒素含量。【结果】与S组相比,IR组和LIP组回肠末端DAO活性显著降低（P〈0．05）,血浆D-乳酸、内毒素含量显著升高（P〈0．05）;LIP组回肠末端DA0活性显著高于IR组,血浆D-乳酸、内毒素含量低于IR组（P〈0．05）。【结论】肢体缺血预处理能够保护SD大鼠全肝缺血再灌注时损伤的肠黏膜屏障功能。     

生长抑素区域动脉灌注对重症急性胰腺炎大鼠肠黏膜屏障的保护作用

【目的】探讨生长抑素区域动脉灌注对重症急性胰腺炎（SAP）大鼠肠黏膜屏障的保护作用及机制。【方法lSD大鼠60只,随机分为假手术组（A组）,SAP组（B组）,生长抑素外周静脉注射组（C组）,生长抑素区域动脉灌注组（D组）。测定各组大鼠的血清淀粉酶（Amy）,各组动物血中白细胞介素-1（IL-1）、白细胞介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-a（TNF-a）的含量,观察小肠病理损害及肠黏膜上皮细胞凋亡的情况。【结果】①制成SAP模型后,各组Amy、IL-1、IL-6、TNF-a的含量水平显著上升,生长抑素治疗后可使Amy、IL-1、IL-6、TNF-a的含量下降,其中生长抑素区域动脉灌注组下降更为明显。②生长抑素治疗后小肠病理损害评分及细胞凋亡指数均下降（P〈0．05）,生长抑素区域动脉灌注组作用更强。【结论】①sAP时,应用生长抑素可以减轻sAP时肠黏膜的损伤,对肠黏膜屏障具有一定的保护作用,其机制可能与降低血中IL-1、IL-6、TNF-a的含量,抑制肠黏膜上皮细胞的过度凋亡有关。②区域动脉灌注是治疗SAP的增效途径。     

Intravenous Iron Replacement with Sodium Ferric Gluconate Complex in Sucrose for Iron Deficiency Anemia in Adults

Background: When oral iron replacement therapy is ineffective, IV or IM iron dextran products have been used successfully in many patients. However, adverse events, including urticaria, anaphylaxis, and death, sometimes are associated with the use of these products.Objective: The aim of this study was to assess the efficacy and tolerability of sodium ferric gluconate complex (SFGC) in sucrose in the treatment of adults with iron deficiency anemia.Methods: This was a single-center, open-label, uncontrolled study. Consecutive adults in need of IV iron replacement who experienced severe reactions to generic IV iron dextran and who had previously failed to respond to oral iron products were treated with a single dose of IV SFGC (312, 375, or 500 mg) infused over 2 hours. A second dose of SFGC could be administered 6 to 8 weeks later, if needed.Results: Six patients (3 men, 3 women; mean [SD] age, 77.0 [10.4] years) were enrolled. All patients received a single-dose infusion of SFGC, and 2 patients received a second dose. No adverse events were observed at the lower doses (312 and 375 mg); however, both patients given the 500-mg dose reported transient nausea, and 1 had pruritus and the other had transient hypertension.Conclusion: The results of this study show that SFGC is a satisfactory alternative when IV iron replacement is needed by adults with iron deficiency anemia.     

大肠黏膜癌变过程中COX-2,Bcl-2及Bax表达的相关性

[目的]探讨COX-2,Bcl-2及Bax在大肠黏膜癌变过程中表达相关性。[方法]采用免疫组织化学法检测了正常结肠黏膜15例、慢性结肠炎20例、大肠癌旁组织50例、腺瘤30例及大肠癌组织50例中COX-2,Bcl-2及Bax蛋白的表达。分析COX-2、Bcl-2及Bax的表达与各种临床病理特征的关系及三者的相关性。[结果]COX-2在正常结肠黏膜,慢性结肠炎,大肠癌旁组织,腺瘤及大肠癌组织中的表达阳性率分别是6.7%,10.0%,40.0%,56.7%,90.0%,呈递增趋势。Bcl-2在5组中的表达阳性率分别为6.7%,10.0%,38.0%,46.7%,76.0%,呈递增趋势。Bax在5组中的表达阳性率分别为86.67%,75.0%,78.0%,76.7%,82.0%,五组之间阳性率比较均无显著性差异（P〉0.05）,但其阳性表达程度在正常组织,腺瘤样息肉,大肠癌三组之间呈递减趋势（P〈0.05）。3者在大肠癌中的表达与患者性别、年龄、肿块大小无明显差异（P〉0.05）。COX-2和Bcl-2在大肠癌组织中阳性反应呈显著正相关（P〈0.05,r=0.653）。COX-2、Bcl-2及Bax在大肠癌高、中分化组中的表达率分别为100%,88.9%,85.2%,明显高于低分化组中的79.3%、60.9%、78.3%;在大肠癌Duke＇s A,B期中Bcl-2表达却显著高于C,D期。[结论]COX-2及Bcl-2在正常结肠黏膜、慢性结肠炎、大肠腺瘤、大肠癌组织中的表达均呈递增趋势,而Bax在正常结肠黏膜、大肠腺瘤、大肠癌组织中的阳性表达程度呈递减趋势,提示COX-2及Bcl-2表达上调和Bax表达下调与大肠黏膜癌变过程有关。COX-2在大肠癌中的表达与肿瘤分化程度有关,Bcl-2在大肠癌中的表达与肿瘤分化程度、Duke＇s分期有关。COX-2与Bcl-2的表达呈正相关。