EGFR基因突变在非小细胞肺癌胸水细胞块中的检测分析

目的 分析表皮生长因子受体(epidermal growth factor,EGFR)基因突变在非小细胞肺癌阳性胸水中的表达情况.方法 将胸水内查见非小细胞肺癌的病例其阳性胸水离心沉渣制作细胞块.分离细胞块样品DNA,使用实时荧光检测PCR(ARMS-PCR)检测215例非小细胞肺癌细胞块和404例非小细胞肺癌组织块中EGFR的29种突变类型,并检测细胞块同时送检组织块的患者74例的一致性.结果 细胞决EGFR基因突变型102例,突变率47.44％(102/215);组织块EGFR突变型172例,突变率42.57％(172/404);74例有组织块对照的细胞块EGFR结果一致性有53例,一致率达71.62％(53/74),其中细胞块EGFR的突变率44.59％(33/74),组织块突变率70.27％(52/74).结论 可以应用非小细胞肺癌阳性胸水细胞块代替肿瘤组织检测EGFR基因突变,对指导晚期肺腺癌患者靶向药物治疗具有重要指导意义.     

突变体富集PCR法检测非小细胞肺癌病理组织EGFR基因突变

目的：建立突变体富集PCR法检测非小细胞肺癌病理组织中的EGFR基因突变。方法：选取55例细支气管肺泡癌和59例非小细胞肺癌病理组织蜡块，提取基因组DNA，采用不同的突变体富集PCR法（PCR-PAGE和PCR-RLFP）检测EGFR基因常见的19和21外显予突变，并经过直接测序验证。结果：在59例非小细胞肺癌中共检测出EGFR基因突变22例,突变率为37．3％（22／59）。55例细支气管肺泡癌中共检测出24例基因突变，突变率为43．6％（24／55）。经直接测序验证，EGFR19外显予有3种类型缺失突变。EGFR21外显予的错义突变为L858R。结论：突变体富集PCR法准确、快速、经济，便于临床筛查非小细胞肺癌病理组织中的EGFR基因突变。     

非小细胞肺癌组织中p16的表达及其与肿瘤细胞增殖的关系

目的 研究p16在人类非小细胞肺癌中的表达意义及与肿瘤细胞增殖的关系。方法应用免疫组织化学（S-P法）检测了80例非小细胞肺癌组织标本和40例肺良性病变组织中p16和细胞增殖核抗原（PCNA）的表达水平。结果（1）非小细胞肺癌组织中p16表达水平（57．5％）显著低于肺良性病变组织（90．0％）（P〈0．01）；（2）非小细胞肺癌组织中p16基因表达水平降低与肺癌组织学类型，细胞分化程度，患者P-TNM分期，是否有淋巴结转移存在相关性（P〈0．05）；（3）非小细胞肺癌组织中p16与PCNA表达呈负相关。结论p16基因表达下调与非小细胞肺癌细胞增殖有关，与肿瘤的发生、发展关系密切。     

实时荧光PCR检测非小细胞肺癌外周血EGFR基因突变的临床应用

目的 分析非小细胞肺癌表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因突变的特征,为EGFR基因检测及靶向治疗提供指导.方法 选取本院2018年7月至2019年6月收治并行外周血EGFR突变检测的46例晚期非小细胞肺癌患者,采用突变阻滞扩增系统(amplification refractory mutation system,ARMS)法检测其血浆EGFR基因突变的特征,并应用SPSS 19.0软件进行统计学分析.分析其外周血EGFR突变与临床病理特征的关系.结果 46例非小细胞肺癌患者中EGFR突变11例,总体突变率为23.9％.突变类型以19号外显子缺失(19Del)(3例,27.2％)和21号外显子突变(L858R)(4例,36.3％)为主.腺癌突变率为33.3％,女性突变率为47.10％,不吸烟患者突变率为32.2％,分别与非腺癌突变率(6.2％)、男性突变率(10.3％)、吸烟患者突变率(6.6％)比较,差异均有统计学意义(P<0.05);EGFR基因突变与年龄无明显相关性(P>0.05).结论 非小细胞肺癌中,腺癌、女性和不吸烟患者EGFR基因突变率较高,临床特征可作为EGFR基因突变的预测指标.     

湖南地区238 例非小细胞肺癌EGFR 基因突变状态分析

目的：评价湖南地区非小细胞肺癌患者EGFR基因突变状态及其与临床特征之间的关系。方法收集2012年1月至2013年6月中南大学湘雅医学院附属肿瘤医院手术切除的非小细胞肺癌石蜡包埋组织238例,采用PCR扩增结合直接基因测序的方法,对组织DNA中EGFR基因第18-21外显子突变进行检测。结果在238例非小细胞肺癌中,EGFR突变的检出率为35.3％（84/238）。其中,第18、19、20、21号外显子突变占总突变的比例分别为2.4％（2/84）、67.9％（57/84）、3.6％（3/84）、26.2％（22/84）。19号外显子的突变均为第746-753密码子的碱基缺失,以Del E746-A750为主;21号外显子突变类型以L858R为主。女性EGFR基因的突变率显著高于男性,不吸烟者显著高于吸烟者（P〈0.05）。而EGFR基因的突变率与非小细胞肺癌患者的年龄、临床分期和淋巴结转移均无相关性（P〉0.05）。结论湖南地区的非小细胞肺癌EGFR基因突变以19、21外显子为主,且19外显子的突变率高于21外显子,多见于女性、腺癌、不吸烟患者。     

非小细胞肺癌患者血浆和肿瘤组织中p16基因结构异常的研究

目的研究非小细胞肺癌（NSCLC）患者血浆及肿瘤组织中p16基因突变对该病发生、发展和预后的意义。方法应用聚合酶链反应特异性扩增p16基因第2外显子,并用单链构象多态性分析产物突变情况,再与性别、年龄、肿瘤分期等各生物学参数进行相关分析研究。结果32例NSCLC患者血浆中检测到14例p16基因突变（43．75％）,而组织中检测到17例（53．12％）。Ⅲ期及Ⅳ期NSCLC患者血浆和组织中p16基因突变率[分别为52．6％（10／19）和63．2％（12／19）]明显高于Ⅰ＋Ⅱ期[分别为30．8％（4／13）和38．5％（5／13）],差异有统计学意义（P〈0．05）。有淋巴结转移的NSCLC患者血浆和组织中p16基因突变率[分别为52．2％（12／23）和65．2％（15／23）]明显高于无淋巴结转移的患者[均为22．2％（2／9）],差异有统计学意义（均P〈0．05）。结论血浆中DNAp16基因第二外显子突变在NSCLC中有较高的检出率。血浆p16基因第二外显子突变检出率与肿瘤组织中的突变检出率近似。NSCLC患者血浆中p16基因第二外显子突变与肿瘤临床分期、淋巴结转移有关。检测患者血浆p16基因突变对NSCLC的诊断以及预后评估具有重要价值,方法较为简便。     

p53基因突变与非霍奇金淋巴瘤病因学关系研究

目的：研究p53基因突变在非霍奇金淋巴瘤（NHL）发生发展中的作用。方法：在37例非霍奇金淋巴瘤组织中采用PCR-单链构象多态性分析法（PCR-SSCP）进行p53基因外显子58的突变检测。结果：p53基因总突变率为54.1%，惰性组、侵袭性组、高侵袭性组突变率分别为0.0%、58.1%、100.0% T和NK细胞组和B细胞组突变率分别为37.5%、58.6%。结论：非霍奇金淋巴瘤中存在p53基因的突变，p53基因的突变在NHL的发展演变中可能起重要作用。     

组织学类型和临床分期对中心型非小细胞肺癌浸润近端支气管壁的影响

目的 :探讨中心型非小细胞肺癌不同的病理组织学类型与 pTNM分期对癌细胞浸润近端支气管壁长度的影响 ,为术式的选择提供临床病理依据。方法 :86例原发性中心型非小细胞肺癌的手术标本 ,用细探针探测支气管腔 ,沿探针剖开支气管壁全层至肿瘤处 ,测量肿瘤边缘至支气管切缘的最近距离 ,对肿瘤至支气管切缘的管壁进行连续取材 ,常规病理制片、显微镜下观察组织学类型 ,测量癌细胞浸润近端支气管的长度。结果 :Ⅲa期腺癌最长 ,为 (1.91±0.36)cm ,Ⅰb期鳞癌最短为 (0.39±0.15)cm ,且差别有统计学意义。结论 :在原发性中心型非小细胞肺癌中 ,病理组织学类型、pTNM分期与癌细胞浸润近端支气管壁的长度有关 ,可作为选择术式的依据之一。     

非小细胞肺癌表皮生长因子受体基因19、21外显子突变情况及其与患者临床病理特征、吉非替尼治疗后疗效相关性探讨

目的:探讨非小细胞肺癌表皮生长因子受体基因19、21外显子突变情况及其与患者临床病理特征、吉非替尼治疗后疗效相关性。方法:选取2015年1月~2015年3月到某院接受治疗的60例患者作为研究对象,所有患者入院后经过各项详细检测以及组织病理学部门诊断确实为非小细胞肺癌。采用直接测序法检测60例患者的表皮生长因子受体基因19、21外显子突变情况。结果:男性和女性患者有统计学意义(P0.05);腺癌与鳞癌两种突变率有统计学意义(P0.05);吸烟患者和不吸烟患者两者突变率有统计学意义(P0.05)。结论:EGFR基因突变状态与患者的性别、病理类型以及是否吸烟有关,EGFR基因突变状态到目前还不能作为化疗疗效以及远期生存的预测因子。     

重组人p53腺病毒治疗肿瘤临床研究进展

p53基因是重要的肿瘤抑制基因，定位于人类染色体17p13．1位点，长约20Kb，由11个外显子和10个内含子组成。p53基因分子量为53kDa，编码395个氨基酸残基组成的蛋白在细胞周期调控，DNA修复和诱导细胞凋亡等方面均具有关键性作用。人类50％以上的肿瘤组织中存在p53基因突变，是所检测到的最常见的基因突变。     

论著p53基因突变与非霍奇金淋巴瘤病因学关系研究

目的:研究p53基因突变在非霍奇金淋巴瘤(NHL)发生发展中的作用。方法:在37例非霍奇金淋巴瘤组织中采用PCR-单链构象多态性分析法(PCR-SSCP)进行p53基因外显子5～8的突变检测。结果:p53基因总突变率为54.1%,惰性组、侵袭性组、高侵袭性组突变率分别为0.0%、58.1%、100.0%;T和NK细胞组和B细胞组突变率分别为37.5%、58.6%。结论:非霍奇金淋巴瘤中存在p53基因的突变,p53基因的突变在NHL的发展演变中可能起重要作用。     

肿瘤分化程度及淋巴结转移与P53基因突变的关系

目的研究P53基因的突变与肿瘤分化程度及淋巴结转移的关系。方法应用聚合酶链反应—单链构象多态性分析(PCR-SSCP)法检测食管鳞状细胞癌患者36例,对结果进行分析。结果 36例食管鳞状细胞癌患者中出现P53基因突变14例,突变率为38.89%。且低分化癌突变率显著高于中、高分化癌突变率(P<0.05),有淋巴结转移者突变率明显高于无淋巴结转移者突变率(P<0.05)。结论食管鳞状细胞癌的发生和发展、肿瘤分化程度及淋巴结转移情况与P53基因突变有相关性。     

尿路上皮肿瘤ras和p53基因突变的研究

目的：研究K-ras和p53基因突变与尿路上皮肿瘤的预后关系。方法：应用聚合酶链式反应加单链多态性分析（PCR－SSCP）检测52例尿路上皮肿瘤K-ras和p53基因突变。结果：K-ras基因突变率为9．6％（5／52），p53基因突变率为42．3％（22／52）。结论：尿路上皮肿瘤发生和发展牵涉多基因多步骤途径，p53基因突变对尿路上皮肿瘤预后有预测意义。     

非小细胞肺癌58例表皮生长因子受体突变状态

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)表皮生长因子受体(EGFR)突变状态及其对预测酪氨酸激酶抑制剂(TKIs)疗效的价值.方法 提取58例NSCLC患者肿瘤组织和正常肺组织的DNA,用巢式PCR扩增,直接测序法检测EGFR外显子19和21基因突变.结果 正常肺组织中EGFR基因均为野生型.肿瘤组织EGFR基因突变率为32.8％(19/58),外显子19和21突变率分别为73.7％(14/19)和26.3％00(5/19).腺癌、女性、不吸烟患者突变率要高于鳞癌、男性、吸烟患者(P＜0.05).随访3.0-29.3个月;58例患者的中位生存时间为23.5个月.19例EGFR基因突变者中,3例应用TKIs治疗,均健在.结论 NSCLC患者中,19外显子是EGFR基因突变的主要类型,女性、腺癌、不吸烟患者突变率较高.检测EGFR基因突变状态可用于预测NSCLC患者对TKIs治疗的敏感性.     

p73基因与鼻咽癌关系的研究现状

p53基因家族目前包括p53、p63、p73,共3个基因。p53基因是一个研究较为深入的肿瘤抑制基因,与人类肿瘤相关性极高,其在人类肿瘤中突变率较高,且突变型具有致癌作用。p73基因作为p53家族的另一成员,与p53基因在基因及蛋白水平上具有高度的同源性。但是在许多方面与p53基因也存在着显著差异。本文就p73基因的表达类型、结构和功能及其与鼻咽癌的相关性作一综述。     

非小细胞肺癌基因变异与靶向治疗药物的选择

肺癌的发病率和死亡率在全球位居榜首,靶向药物的出现显著延长了肺癌患者的生存期并提高生存质量。靶向药物的选择主要是基于肿瘤基因突变情况,由于患者肿瘤个体差异大,携带的驱动基因突变类型多种多样,不同突变类型的肿瘤对特定靶向药的敏感性不同。随着医药行业的发展,越来越多的肺癌靶向药物进入临床,如何根据肿瘤的基因突变情况选择最适宜的靶向治疗药物至关重要。本文总结了非小细胞肺癌常见驱动基因的突变情况及可选择的靶向药物,为非小细胞肺癌靶向治疗药物的选择提供了依据。     

十二指肠食管反流对p53基因及其表达的影响

目的：研究十二指肠液食管反流对食管粘膜中p53基因的突变及表达水平的影响。方法：制作十二指肠食管反流导致反流性食管炎、食管癌的动物模型，用原位杂交和免疫组化法分别检测反流不同时间食管上皮p53基因的mRNA和蛋白表达；进行基因组DNA抽提，用PCR－SSCP法检测食管组织的p53基因突变情况。结果：反流组食管组织中p53基因的蛋白表达和mRNA表达均显著高于对照组，并随病程延长而明显增强。两组均未见p53基因缺失，反流组p53突变率随时间延长而增加，40周时突变率（31．6％）显著高于对照组（15．4％）。结论：十二指肠食管反流可在mRNA及蛋白水平改变食管上皮p53基因的表达，并增加p53基因的突变率，这可能与其引起反流性食管炎及食管癌等并发症有关。     

非小细胞肺癌胸腔积液与小活检标本中EGFR基因突变检测的比较

目的：探讨非小细胞肺癌胸腔积液与小活检标本中EGFR基因突变检测结果的一致性,评价胸腔积液标本检测EGFR基因突变的应用价值。方法：收集中南大学湘雅医学院附属肿瘤医院非小细胞肺癌患者胸腔镜下活检标本46例,配对收集相同患者胸腔积液43例,抽提肿瘤细胞DNA,采用焦磷酸测序的方法,对DNA中EGFR基因第18～21外显子突变进行检测。结果：活检标本和胸腔积液标本中EGFR基因突变检出率分别27．9％（12／43）和25．6％（11／43）,两者差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：恶性胸腔积液可以作为无法获得肿瘤组织的晚期非小细胞肺癌EGFR基因检测的替代标本。     

非小细胞肺癌中EGFR基因突变及靶向药物治疗研究进展

报道在非小细胞肺癌(NSCLC)中表皮生长因子受体(EGFR)基因突变与非小细胞肺癌发生的相关性,尤其在东方人群、女性、非吸烟者、腺癌的患者中突变率更高的现状。分别对EGFR基因突变与临床病理特征的关系、相关靶向药物治疗、检测方法等方面进展进行了综述,EGFR基因突变检测将会成为今后研究EGFR靶向药物治疗的热点。     

p53基因与Rb基因在卵巢癌组织中突变状况初步分析

为了解卵巢癌组织中抗癌基因p53与Rb基因的突变情况，把聚合酶链反应单链构象多态(PCR-SSCP)银染技术及PCR-DNA直接测序方法应用于57例卵巢癌组织细胞的检测，结果发现，p53基因可能的突变率为32%，Pb基因可能的突变率为21%，不同分化程度肿瘤的p53及Rh基因突变率未见明显区别。结论；PCR-SSCP银染技术是筛查基因突变，简便、敏感、无核素污染的最佳方法，而PCR-DNA直接测序又能精确到检测单个核苷酸的突变及突变内容。