肿瘤坏死因子相关配体与阿司匹林合用对肝癌SMMC-7721细胞凋亡的影响

目的 观察肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)与阿司匹林合用对肝癌SMMC-772l细胞的作用。方法 氨甲喋呤法检测SMMC-772l细胞存活分数；流式细胞仪检测SMMC-772l细胞的凋亡率和细胞周期；WesternBlot法检测凋亡相关基因的表达。结果 单用300ng／ml TRAIL、3、10mmol／L阿司匹林SMMC-772l细胞存活分数分别为82．76％、81．34％和71．29％，合用的存活分数分别为43．5％、37．8％。3、l0mmol／L阿司匹林与300ng／ml TRAIL合用诱导的细胞凋亡率明显大于单用两药诱导的细胞凋亡率之和(单用300ng／ml TRAIL、3mmol／L和10mmol／L阿司匹林凋亡率分别为21．25％、1．89％和6．08％，合用的凋亡率分别34．76％，38．56％)并使G0/Gl期细胞增加l3、10mmol／L的阿司匹林使SMMC-772l细胞Bcl-2的表达明显减弱，但对Bax的表达无影响。结论 TRAlL与阿司匹林合用对肝癌SMMC-772l细胞有明显的协同杀伤作用，其机制可能与阿司匹林抑制Bcl-2的表达有关。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体对肝癌耐药细胞株阿霉素化疗敏感性的影响

目的 研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)联合阿霉素(ADM)处理肝癌耐药细胞株HePG2／ADM对化疗敏感性的影响。方法 通过培养液中ADM的浓度梯度增加法长期筛选培养，建立肝癌HepG2／ADM耐药细胞株，荧光定量PCR检测多药耐药(MDR)1的表达，TRAIL联合化疗药物ADM处理HePG2／ADM，MTT比色法检测细胞增殖，细胞凋亡采用流式细胞仪和TUNEL法检测观察HePG2／ADM对化疗药物的敏感性变化。结果 HepG2／ADM细胞是一个明确的多药耐药细胞模型，联合TRAIL(100ng／L) ADM(0．1mg／L)后，MTT显示HepG2／ADM细胞的增殖明显抑制，流式细胞术、TUNEL法检测TRAIL联合ADM处理HePG2／ADM细胞诱导的凋亡，与对照组相比，凋亡指数显著增加。结论 MDR1不参与TRAIL耐受。TRAIL可部分逆转HepG2／ADM对ADM的耐药，增加其对化疗药物的敏感性。联合TRAIL和亚毒剂量化疗药物可望克服肿瘤细胞中存在的化疗耐药和TRAIL耐受。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体与肝细胞凋亡的相关性

肿瘤坏死因子相关的调亡诱导配体是TNF家族成员之一,通过其死亡受体诱导凋亡.研究显示TRAIL/死亡受体途径参与多种肝脏病理过程,本文就TRAIL/死亡受体途径的特性、致凋亡的机制及与肝细胞凋亡关系的最新进展作一综述.     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体诱导人胃癌耐药细胞凋亡的研究

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (TRAIL)是最近发现的肿瘤坏死因子 (TNF)家族新成员 ,因其独特结构和作用特点 ,有可能成为临床上重要的抗肿瘤因子[1] 。许多研究证实 ,TRAIL可诱导许多恶性肿瘤细胞凋亡 ,包括血液系统恶性肿瘤细胞、乳腺癌等[2 ,3 ] 。我们在另一实验中已证实TRAIL能诱导胃癌细胞凋亡 ,现进一步研究TRAIL体外诱导胃癌耐药细胞的凋亡作用 ,为临床上解决胃癌多药耐药这一难题提供新的思路和方法。一、材料和方法1.材料 :SGC790 1 VCR胃癌耐药细胞引自第四军医大学西京医院消化病研究所 ,为SGC 790 1胃癌细胞经长…     

肝癌TACE中化疗和栓塞与肿瘤抑制和肝损伤关系的临床研究

目的 研究肝癌TACE中化疗与栓塞的并用与否对肿瘤抑制和肝损伤的影响.方法 回顾性分析152例HCC患者接受化疗灌注(A组30例)、栓塞(B组29例)或化疗栓塞(C组93例)后1天和4天,AFP下降及肝功能各指标变化.结果 (1)AFP下降人数,B组(56.5%,78.3%)和C组(67%,80.7%)显著大于A组(25%,25%)(P＜0.001).(2)肝功能异常人数增幅表现为:TBil,A、C组明显高于B组(P＜0.001).ALT及ALB,B、C组明显大于A组(P＜0.005).PA,C组明显高于A、B组(P＜0.005).结论 TACE对肿瘤的抑制主要归功于肿瘤供血血管的栓塞作用;加用肝动脉化疗灌注后,肝损伤的增加明显大于对肿瘤的抑制.     

肿瘤坏死因子诱导细胞凋亡的信号传导机制

1肿瘤坏死因子的分子生物学特性 TNF的研究可追溯到一百多年前.早在19世纪末,人们发现有些恶性肿瘤患者在伴细菌感染时,可导致肿瘤的自发消退,提示细菌感染和肿瘤消退之间存在一定关系.1893年美国学者Coley et al尝试在肿瘤患者体内诱发细菌感染以及注射死亡细菌的混合物来治疗肿瘤.这就是有关TNF的最早记录[1].本世纪80年代以来,随着分子生物学的飞速发展,对TNF研究不断深入,人们发现其具有多种生物学活性,除对免疫细胞有活化、促增殖和分化等作用外,对某些非肿瘤细胞和大多数肿瘤细胞具有诱导凋亡(Apoptosis)的作用[2].当机体处于炎症如病毒、细菌、寄生虫感染,或创伤等病理状态时,这些作用对清除受损细胞、维持机体内环境平衡,起着重要的作用.     

X-染色体相关凋亡抑制蛋白相关因子1抑制肝癌细胞增殖和诱导凋亡的实验研究

目的 研究X-染色体相关凋亡抑制蛋白（XIAP）相关因子1（XAF1）对肝癌细胞增殖和凋亡的影凋亡响。方法 构建正义pcDNA3-XAF1和反义pcDNA3-XAF1-AS质粒，通过脂质体转染技术将质粒DNA转入SMMC7721肝癌细胞株并建立稳定高表达XAF1的肝癌细胞克隆。应用MTT、流式细胞仪、TUNEL法检测肝癌细胞的增殖和凋亡；应用RT-PCR和Western印迹法检测基因在mRNA和蛋白水平的表达。结果 XAF1在SMMC7721肝癌细胞株中有表达，但低于正常肝脏细胞水平。稳定高表达XAF1基因可抑制肝癌细胞的增殖和诱导，并能增加其对化疗药物5-氟尿嘧啶和羟基喜树碱的敏感性。结论 XAF1能抑制肝癌细胞增殖和诱导其凋亡。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体及其在脑缺血中的作用

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)在缺血等病理状态下被诱导,并介导脑缺血后的神经元凋亡.了解TRAIL在缺血脑组织中的上调机制,有望开发出新的卒中治疗方法.     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的受体在胃癌中的表达

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (ＴＮＦｒｅｌａｔｅｄａｐｏｐｔｏｓｉｓｉｎｄｕｃｉｎｇｌｉｇａｎｄ ,ＴＲＡＩＬ)是最近发现的ＴＮＦ家族新成员 ,因其独特结构和作用特点 ,有可能成为临床上重要抗肿瘤因子[1 ] 。我们观察到ＴＲＡＩＬ在体外可诱导胃癌细胞的凋亡[2 ] 。体外实验的目的是为了最终使ＴＲＡＩＬ在体内能够治疗胃癌。现已知ＴＲＡＩＬ是通过其受体而起作用的。因此根据肿瘤表达其受体状况 ,决定了肿瘤对ＴＲＡＩＬ敏感性。为此 ,我们检测了ＴＲＡＩＬ受体 (Ｒ1 、Ｒ2 、Ｒ3、Ｒ4 )在胃癌组织中的表达 ,为ＴＲＡＩＬ应用于…     

肿瘤坏死因子相关性凋亡诱导配体与缺血性卒中

肿瘤坏死因子相关性凋亡诱导配体(TRAIL)是肿瘤坏死因子超家族成员,可选择性诱导肿瘤细胞凋亡。近年来的研究表明,缺血后脑组织中可见TRAIL表达,并在神经元凋亡中起重要作用。     

人端粒酶逆转录酶干扰对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体诱导肝癌细胞凋亡的影响

目的研究人端粒酶逆转录酶(hTERT)干扰对肝癌．HepG2、SMMC-7221细胞生物学形为的影响和对肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)诱导凋亡的影响。方法将HepG2细胞和SMMC-7721细胞分为转染组 (转染重组质粒真核表达载体)、对照组(转染空载体质粒)和未转染组。采用聚合酶链反应方法检测hTERT干扰序列, 逆转录聚合酶链反应方法检测hTERT表达,HE染色、生长曲线和流式细胞术方法分别检测细胞形态、增殖情况和细胞周期,β-半乳糖苷酶染色方法检测细胞状态,Armexin V／PI染色流式细胞术检测细胞凋亡。结果转染组细胞内均存在hTERT干扰序列,HepG2和SMMC 7221细胞hTERT干扰率分别为100％和43．3％;与未转染组细胞相比, 转染细胞核质比明显缩小,增殖率下降差异有统计学意义(P<0．05),老化细胞和G2-M期细胞明显增加(P<0．05)。细胞老化率分别由未转染组的0增加到转染组的20．4％,由3．60%,增加到10．O％;G2-M期分别由未转染组的7．1％、6．9％增加到转染组的10．6％、7．9％。hTERT干扰显著增加肝癌细胞凋亡和TRAIL诱导凋亡敏感性(P<0．05)。两株肝癌细胞凋亡率分别由未转染组的3．5％、4．8％增至转染组的5．2%、7．9％;100 ng／ml TRAIL作用24 h后两株肝癌细胞凋亡率分别由未转染组的5．3％、13．9％增加到转染组的10．4％、77．2％,而对照组细胞各指标均无显著变化。结论 hTERT干扰明显影响肝癌细胞的生物学行为,显著增加细胞凋亡和TRAIL诱导凋亡的敏感性。     

抗肿瘤坏死因子-α 单克隆抗体对肝细胞凋亡和坏死的影响

目的：为了研究抗肿瘤坏死因子α单克隆抗体在肝细胞凋亡和坏死中的作用，方法：我们采用酶联免疫吸附法测定了抗鼠肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）、赖氏法测定谷丙转氨酶（ＡＬＴ）及肝组织病理。结果：模型组血浆ＴＮＦα及ＡＬＴ明显高于正常对照组（Ｐ＜０．０１），而抗ＴＮＦα单抗组血浆ＡＬＴ活性及ＴＮＦα含量较模型组明显降低（Ｐ＜０．０１），肝组织病理检查未发现有肝细胞凋亡和坏死发生。结论：上述结果提示ＴＮＦα单克隆抗体可以阻断实验性肝细胞凋亡和坏死的发生。     

反义甲基转移酶基因片段增强肿瘤坏死因子相关凋亡诱导对肝癌细胞的作用

目的　观察转入反义甲基转移酶 (DNMT) 1基因片段后的肝癌SMMC 772 1细胞对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (TRAIL)的敏感性改变。方法　使用脂质体法将真核表达载体 pCl neo转入肝癌SMMC 772 1细胞内 ,PCR法鉴定载体的转入 ,锥虫蓝排斥试验检测活细胞率 ,末端脱氧核苷酰转移酶介导的dUTP缺口末端标记法 (TUNEL法 )检测细胞凋亡率。结果　PCR法证明载体成功转入肝癌SMMC 772 1细胞内 ,转入反义DNMT1基因片段的肝癌SMMC 772 1细胞与转入正义DNMT1基因片段和空载体的细胞相比 ,活细胞率显著降低 (P <0 .0 5 ) ,凋亡率显著增高 (P <0 .0 5 )。结论　转入反义DNMT1基因片段的肝癌SMMC 772 1细胞对TRAIL的敏感性明显增强。     

大鼠肝癌发生过程中α-SMA及AFP动态变化

目的 研究大鼠肝癌进展过程中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和甲胎蛋白(AFP)的变化.方法 选取大鼠65只,对照组21只饮用灭菌食用水,实验组35只,饮用灭菌食用水配置的二乙基亚硝胺建立肝癌模型,同时另9只作为实验备用组处理同实验组.在第6、8、10、12、14、16、18周取肝组织,称取肝重并染色观察大鼠肝癌模型的进展,同时测定肝癌组织中α-SMA的量及血清中AFP的含量.结果 成功建立了大鼠肝癌模型,实验中出现实验大鼠死亡2例,死亡率5.71％,死亡大鼠用实验备用组大鼠补充继续试验.对照组大鼠肝脏重量少量增加,实验组大鼠肝重量明显增加,从第10周开始明显比对照组重(P＜0.05).免疫组化显示随着实验时间的增加,大鼠肝癌模型逐渐进展到肝癌晚期,大鼠肝脏组织中α-SMA的表达量逐渐增加,血清中AFP的含量也逐渐增加.结论 大鼠肝癌发生过程中大鼠肝癌组织中α-SMA及血清AFP含量逐渐增加,因此α-SMA及AFP可作为临床诊断原发性肝癌的主要指标.     

卡维地洛与阿替洛尔对肿瘤坏死因子α诱导内皮细胞凋亡的影响

本研究通过体外培养人肺静脉血管内皮细胞,观察卡维地洛与阿替洛尔对肿瘤坏死因子(TNF α)诱导内皮细胞凋亡的影响。一、资料与方法1.传4～6代生长良好的人肺静脉血管内皮细胞,消化,离心,用10 %的16 4 0培养液配成1×10 6/ml浓度的细胞悬液;6孔培养板每孔加入1×10 6/ml的细胞悬液1ml,再分别加入1mmol/L浓度卡维地洛(山东齐鲁制药厂) 0、2 5、5、10、15 μl(此时培养液中的卡维地洛浓度分别为0、2 5、5、10、15 μmol/L) ,然后加入10mg/LTNF α10 μl,每种处理5个复孔,置于37℃含5 %CO2 的饱和水汽培养箱中培养。阿替洛尔(Sigma公司)…     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体诱导胃癌细胞凋亡机制的研究

背景：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）可诱导不同胃癌细胞株的凋亡，但凋亡的途径尚不清楚。目的：通过研究TRAIL诱导胃癌细胞凋亡的作用机制，为TRAIL的临床应用提供理论依据。方法：应用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法检测SGC-7901胃癌细胞TRAIL受体（TRAILR），包括死亡受体TRAILR1、TRAILR2和诱惑受体TRAILR3、TRAILR4的表达；应用免疫组化法检测SGC-7901胃癌细胞Bcl-2和caspase-3的表达．并观察两者在不同浓度（50ng／ml和500ng／ml）的TRAIL处理后的变化。结果：SGC-7901胃癌细胞仅表达TRAILR1和TRAILR2，不表达TRAILR3、TRAILR4。TRAIL可引起SGC-7901胃癌细胞Bcl-2阳性表达，不同浓度的TRAIL作用12h、24h、48h其表达无影响；与对照组比较，不同浓度的TRAIL作用24h后SGC-7901胃癌细胞caspase-3表达均有显著增加（P〈0．01）。结论：TRAIL诱导胃癌细胞凋亡是因胃癌细胞仅表达TRAILR1、TRAILR2，不表达TRAILR3、TRAILR4。TRAIL是通过TRAILR1、TRAILR2增加细胞内caspase-3的表达而导致胃癌细胞凋亡，其诱导胃癌细胞凋亡的作用不受Bcl-2的影响。     

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体及其受体与动脉粥样硬化

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体是肿瘤坏死因子家族新成员,它能和五种受体包括两种死亡受体和三种诱骗受体结合,分别能促进和抑制细胞凋亡。肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体及其受体可表达于参与动脉粥样硬化的各种细胞如内皮细胞、平滑肌细胞及各种炎症细胞,发挥着促凋亡和抗凋亡的双重调节作用,直接或间接地参与了动脉粥样硬化的发生和发展。     

青蒿琥酯和肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体对前列腺癌细胞凋亡的诱导作用

目的探讨青蒿琥酯和肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)诱导前列腺癌细胞(PC-3、LNCaP)凋亡的机制。方法培养前列腺癌PC-3、LNCaP细胞,分别加入青蒿琥酯和TRAIL,随机分为4组,对照组、TRAIL组、青蒿琥酯组、TRAIL+青蒿琥酯组,分别采用RT-PCR法和Western blot法检测各组细胞内相关信号分子(caspase-3/caspase-8、Bcl-2、Bax、Bak)在mRNA及蛋白水平的表达。结果促凋亡基因(caspase-3/caspase-8、Bax、Bak)mRNA及蛋白的表达与TRAIL及青蒿琥酯的浓度呈正相关,凋亡抑制基因(Bcl-2)蛋白及mRNA的表达与TRAIL及青蒿琥酯的浓度呈负相关。结论青蒿琥酯和TRAIL诱导前列腺癌细胞(PC-3、LNCaP)凋亡的机制可能是通过上调caspase-3/caspase-8、Bax、Bak等促凋亡基因和下调Bcl-2等凋亡抑制基因来实现的。