干扰素α-2b对人肝癌细胞及血管内皮生长因子分泌的抑制作用

目的探讨干扰素(IFN)α-2b对人肝癌细胞及其血管内皮生长因子(VEGF)分泌的抑制作用。方法培养人肝癌HepG2细胞制成细胞悬液,同时设立空白组(培养液)、阴性对照组(培养液+HepG2细胞)、不同浓度IFNα-2b处理组。用MTT比色法、酶联免疫法检测HepG2的抑制率、VEGF蛋白表达水平。结果不同浓度IFNα-2b对体外培养肝癌细胞的生长抑制率具有时间、剂量双重效应(P均<0.05);IFNα-2b对VEGF蛋白表达抑制呈剂量效应(P均<0.01)。结论 IFNα-2b对肝细胞癌增殖和VEGF的分泌均有抑制作用。     

TIMP-2、MMP-2和MT1-MMP在活化肝星状细胞中的表达及对细胞外基质合成分泌的影响

目的 研究金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)在活化肝星状细胞(HSCs)中的表达,观察其对细胞外基质(ECM)合成分泌的影响.方法 原代分离培养大鼠HSCs活化后,分别给予40～160 pmol化学合成经修饰抗TIMP-2 siRNA进行干预,检测培养细胞上清液透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)和羟脯氨酸(Hyp)的含量,采用荧光实时定量PCR法检测TIMP-2、MMP-2、MT1-MMP、MMP-13、COL Ⅰ和COL Ⅲ mRNA的表达,western印迹检测TIMP-2、MT1-MMP和MMP-13蛋白表达及明胶酶谱法检测MMP-2蛋白表达.结果 应用化学合成经修饰抗TIMP-2 siRNA后,TIMP-2、MMP-2、MT1-MMP、COL Ⅰ和COL Ⅲ的表达明显降低,而MMP-13的表达则明显增加,培养细胞上清液中HA、PCⅢ和Hyp的含量也明显减少.结论 TIMP-2通过MT1-MMP介导MMP-2的活化,抑制TIMP-2的表达,MT1-MMP和MMP-2的表达随之降低,而HSCs合成分泌ECM也相应减少.     

糖尿病足感染伤口渗液中基质金属蛋白酶2和金属蛋白酶2组织抑制因子的定量研究

应用ELISA法测定20例糖尿病足溃疡并感染患者(DF组)、10例糖尿病非感染手术患者(DM组)、及10例非糖尿病非感染手术患者(NC组)创面渗液样本中MMP-2、TIMP-2的浓度,并进行相关分析。结果 DF组渗液中MMP-2浓度显著高于DM组及NC组(P<0.05);DF组渗液中TIMP-2浓度低于DM组及NC组(P<0.05);DF组MMP-2/TIMP-2比值明显高于DM组及NC组(P<0.01),而DM组与NC组之间的差异不具有统计学意义(P>0.05);DF分组中混合感染组MMP-2的浓度较单一感染组升高(P<0.05),两组间TIMP-2的浓度及MMP-2/TIMP-2比值差异没有统计学意义(P>0.05);Ⅲ级溃疡组MMP-2的浓度及MMP-2/TIMP-2比值较Ⅱ级溃疡组升高(P<0.05),两组间TIMP-2的浓度差异没有统计学意义(P>0.05)。结论糖尿病足溃疡合并感染创面中MMP-2的浓度明显升高,TIMP-2的浓度明显下降,MMP-2/TIMP-2比值明显升高。     

MMP-2、TIMP-2在食管鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

目的探讨基质金属蛋白酶2（MMP-2）、基质金属蛋白酶组织抑制剂2（TIMP-2）与食管鳞状细胞癌（ES-CC）生物学行为之间的关系。方法采用免疫组化法检测MMP-2、TIMP-2在ESCC中的表达。结果有无淋巴结转移、不同浸润深度、不同临床分期的ESCC患者MMP-2的阳性表达率有统计学差异（P均〈0.05）,有无淋巴结转移、不同临床分期患者的TIMP-2阳性表达率也有统计学差异（P均〈0.05）。结论MMP-2、TIMP-2平衡破坏是ESCC发生、侵袭、转移、甚至影响预后的重要因素,二者均可作为判断ESCC恶性生物学行为的标记物。     

MMP-2、TIMP-4在食管鳞状细胞癌中的表达及意义

目的 探讨食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中基质金属蛋白酶2(MMP-2)及其特异性抑制剂基质金属蛋白酶抑制剂4(TIMP-4)的表达及其与临床病理参数的相关性.方法 选取经病理证实的ESCC组织68例及正常食管组织12例,免疫组化方法检测MMP-2与TIMP-4的表达.结果 MMP-2及TIMP-4在ESCC中阳性表达率明显高于正常食管组织(P<0.05);MMP-2表达与ESCC的区域淋巴结转移、浸润深度、临床分期等呈正相关,TIMP-4的表达与上述临床病理参数呈负相关;MMP-2与TIMP-4在ESCC中的表达呈负相关关系.结论 MMP-2和TIMP-4平衡的破坏是ESCC发生侵袭、转移甚至影响预后的重要因素.     

Smad7反义寡核苷酸对人胰腺癌SW1990细胞MMP-2和TIMP-2表达及细胞增殖的影响

目的 研究Smad7反义寡核苷酸(ASODN)转染后人胰腺癌SW1990细胞基质金属蛋白酶-2(M MP-2)和基质金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)表达及细胞增殖的变化,探讨Smad7在胰腺癌发生、发展中的作用机制.方法 经脂质体介导将Smad7 ASODN转染人胰腺癌细胞株SW1990.以无义寡核苷酸( NSODN)转染、单加ASODN、单加脂质体作为对照.荧光显微镜及流式细胞仪检测转染效率;RT-PCR、蛋白质印迹法检测转染细胞Smad7、MMP-2和TIMP-2表达;噻唑蓝(MTT)比色法检测转染细胞的增殖.结果 Smad7 ASODN转染SW1990细胞的转染效率为81.2％,转染24h后,转染组、ASODN组和脂质体组细胞Smad7 mRNA表达量分别为0.34±0.06、0.95 ±0.07、1.03 ±0.11;MMP-2mRNA表达量为0.54 ±0.08、1.15 ±0.13、1.27 ±0.16;TIMP-2 mRNA表达量为0.26±0.07、0.72±0.13、0.78±0.17;Smad7蛋白表达量为0.14±0.03、0.29 ±0.05、0.28±0.07;MMP-2蛋白表达量为0.17±0.02、0.29±0.05、0.31±0.04;TIMP-2蛋白表达量为0.20±0.03、0.41±0.11、0.43±0.09.转染组均较其他各组的表达显著减少(P值均＜0.01).转染组、ASODN组、脂质体组细胞的增殖活性分别为0.83 ±0.03、1.02±0.02、0.99±0.02,转染组细胞的增殖活性较其他各组显著被抑制(P值均＜0.01).结论 Smad7 ASODN转染可有效抑制SW1990细胞Smad7基因的表达,并抑制MMP-2、TIMP-2表达及细胞增殖活性.     

鼻腔鳞状细胞癌组织中MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的表达变化及意义

目的 观察鼻腔鳞状细胞癌组织中基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9及组织金属蛋白酶抑制剂(TIMP)-1、TIMP-2的表达变化,并探讨其意义.方法 鼻腔鳞状细胞癌患者45例(观察组),鼻窦炎或过敏性鼻息肉患者30例(对照组),采用免疫组化法检测各组MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2,分析各指标间及与鼻腔鳞状细胞癌临床病理特征的相关性.结果 观察组MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2阳性率分别为57.8％、62.2％、66.7％、73.3％,对照组分别为23.3％、13.3％、56.7％、26.7％,两组MMP-2、MMP-9、TMP-2比较P均＜0.05.MMP-2表达与鼻腔鳞状细胞癌TNM分期、淋巴结转移、分化程度有关(P均＜0.05),MMP-9、TIMP-2与鼻腔鳞状细胞癌TNM分期、分化程度有关(P均＜0.05).鼻腔鳞状细胞癌中MMP-2与TMP-2表达呈正相关(r=0.64,P＜0.05).结论 MMP-2、MMP-9及TIMP-2表达与鼻腔鳞状细胞癌的浸润、转移及预后密切相关.     

TNF-α对胃癌细胞MMP-2和MMP-9表达的诱导作用

目的:探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)对胃癌细胞基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的诱导作用.方法:以外源性TNF-α作用于胃癌细胞.未经TNF-α作用的胃癌细胞作为对照.采用ELISA法检测胃癌细胞培养上清液中MMP-2和MMP-9蛋白的含量.采用RT-PCR检测胃癌细胞MMP-2 mRNA和MMP-9 mRNA的表达状况.采用Western blot检测胃癌细胞内MMP-2蛋白和MMP-9蛋白含量.结果:不同浓度(1,10和100μg/L)的TNF-α作用胃癌细胞后,胃癌细胞上清液中MMP-2的含量分别为8.24±1.36,23.65±3.45和14.83±2.54 ng/L,均显著高于对照组(1.56±0.23 ng/L,P<0.01);MMP-9的含量分别为12.47±2.66,34.12±6.78和23.31±4.45 ng/L,亦均明显高于对照组(5.25±0.89 ng/L,P<0.01),其中以10μg/L TNF-α作用时升高最为显著.TNF-α作用胃癌细胞16h后,上清液中MMP-2和MMP-9含量达到峰值,分别为23.65±3.45和34.12±6.78 ng/L.胃癌细胞MMP-2 mRNA和MMP-9 mRNA表达明显增强,胃癌细胞内MMP-2和MMP-9蛋白表达亦明显增多.结论:TNF-α可上调胃癌细胞MMP-2和MMP-9表达.     

TNF-α对胃癌细胞MMP-2和MMP-9表达的诱导作用

目的探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)对胃癌细胞基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的诱导作用.方法以外源性TNF-α作用于胃癌细胞.未经TNF-α作用的胃癌细胞作为对照.采用ELISA法检测胃癌细胞培养上清液中MMP-2和MMP-9蛋白的含量.采用RT-PCR检测胃癌细胞MMP-2 mRNA和MMP-9 mRNA的表达状况.采用Western blot检测胃癌细胞内MMP-2蛋白和MMP-9蛋白含量.结果不同浓度(1,10和100 μg/L)的TNF-α作用胃癌细胞后,胃癌细胞上清液中MMP-2的含量分别为8.24±1.36,23.65±3.45和14.83±2.54 ng/L,均显著高于对照组(1.56±0.23 ng/L,P＜0.01);MMP-9的含量分别为12.47±2.66,34.12±6.78和23.31±4.45 ng/L,亦均明显高于对照组(5.25±0.89 ng/L,P＜0.01),其中以10μg/L TNF-α作用时升高最为显著.TNF-α作用胃癌细胞16 h后,上清液中MMP-2和MMP-9含量达到峰值,分别为23.65±3.45和34.12±6.78 ng/L.胃癌细胞MMP-2 mRNA和MMP-9mRNA表达明显增强,胃癌细胞内MMP-2和MMP-9蛋白表达亦明显增多.结论TNF-α可上调胃癌细胞MMP-2和MMP-9表达.     

中药解毒通络保肾散对实验性糖尿病大鼠肾脏基质金属蛋白酶2mRNA表达的影响

目的 探讨中药解毒通络保肾散(JDTLBSS)对实验性糖尿病(DM)大鼠肾脏组织基质金属蛋白酶2(MMP-2 )mRNA表达的影响.方法 采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,检测分别灌服JDTLBSS、氨基胍(AG)药物8 w的链脲佐菌素(STZ)致DM大鼠肾脏内MMP-2 mRNA及TIMP-2 mRNA表达.结果 在DM状态下,大鼠肾脏MMP-2 mRNA呈低表达状态,TIMP-2 mRNA呈高表达状态,MMP-2 mRNA/TIMP-2 mRNA降低;与DM组比,JDTLBSS组和AG组均有提高DM大鼠MMP-2 mRNA表达,抑制TIMP-2 mRNA表达,升高MMP-2 mRNA/TIMP-2 mRNA作用,二者作用相当.结论 JDTLBSS对DM大鼠肾脏功能和结构的保护作用机制之一可能与其上调MMP-2 mRNA表达,下调TIMP-2 mRNA表达作用,提高MMP-2 mRNA/TIMP-2 mRNA比值,从而促进肾小球细胞外基质(ECM)的降解有关.     

和解利湿方对大鼠酒精性慢性胰腺炎纤维化及胰腺组织MMP-2、TIMP-1和TIMP-2表达的影响

[目的]研究和解利湿方对大鼠酒精性慢性胰腺炎(ACP)及胰腺基质金属蛋白酶-2(matrix metal protease-2,MMP-2)及其组织抑制因子(tissue inhibitors of metal protease-1,TIMP)-1、TIMP-2蛋白表达的影响及相关机制.[方法]Lieber-DeCarli酒精流质饮食联合尾静脉注射脂多糖制备大鼠ACP模型.在不同浓度(2.170 g/ml、1.085 g/ml、0.543 g/ml)的和解利湿方治疗4周后,采用苏木精-伊红和天狼猩红染色观察胰组织病理变化,Western blot法检测MMP-2、TIMP-1和TIMP-2蛋白的表达.[结果]与模型对照大鼠比较,高剂量的和解利湿方减少了大鼠酒精性慢性胰腺炎炎症及纤维化病变,并增加MMP-2蛋白的表达(P＜0.05),减少TIMP-1 (P＜0.05)和TIMP-2 (P＜0.01)蛋白的表达,增加MMP-2和TIMP-1的比值(P＜0.01).[结论]高剂量的和解利湿方对ACP胰腺纤维化可能有一定的治疗作用,其机制可能与抗炎、调节胰腺组织MMP-2、TIMP-1和TIMP-2蛋白的表达有关.     

胃肠安方对胃癌基质金属蛋白酶9及基质金属蛋白酶抑制因子1/2蛋白表达的影响

[目的]观察胃肠安方对人胃癌裸鼠原位移植瘤转移的抑制作用及其对基质金属蛋白酶9 (matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制因子(matrix metalloproteinases tissue inhibitor,TIMP)-1、TIMP-2蛋白表达的影响.[方法]建立裸小鼠胃原位癌模型,分为胃肠安方组及模型组,观察裸小鼠胃癌种植后肿瘤转移灶情况以及与肿瘤生长与转移密切相关的MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的影响.[结果]胃肠安方能够抑制胃癌生长与转移,与模型组比较,差异具有统计学意义(P＜0.05).胃肠安方组MMP-9蛋白阳性表达明显弱于模型组,TIMP-1及TIMP-2蛋白阳性表达明显强于模型组.[结论]胃肠安方具有抑制人胃癌裸鼠原位移植瘤转移作用,其抑制胃癌转移的部分作用机制与抑制MMP-9蛋白表达及上调TIMP-1、TIMP-2蛋白表达有关.     

罗格列酮对兔动脉粥样硬化MMP-2、TIMP-2表达的影响

目的:通过比较罗格列酮和辛伐他汀对兔动脉粥样硬化基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶抑制因子-2(TIMP-2)表达的影响,探讨罗格列酮抗动脉粥样硬化的作用机制。方法:将36只雄性新西兰兔随机分为对照组、模型组、辛伐他汀组和罗格列酮组;采用皮下注射同型半胱氨酸硫内酯及高脂饲养的方法建立兔动脉粥样硬化模型。检测血清氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)、sCD40L水平和主动脉粥样硬化组织中MMP-2和TIMP-2的表达。结果:与对照组相比,其他3组MMP-2蛋白表达显著升高,而TIMP-2蛋白表达显著降低;与模型组比较,辛伐他汀和罗格列酮组MMP-2表达显著降低,TIMP-2表达显著增加,血清ox-LDL、sCD40L水平显著降低。辛伐他汀组和罗格列酮组比较,差异无统计学意义。结论:罗格列酮可通过下调兔主动脉粥样硬化组织中MMP-2、上调TIMP-2的表达,降低血清ox-LDL和sCD40L水平,减轻大动脉内膜的炎性反应,发挥抗动脉粥样硬化的作用。     

CD147分子和基质金属蛋白酶在类风湿关节炎滑膜中的表达

目的 探讨类风湿关节炎(RA)滑膜组织CD147的表达及其与基质金属蛋白酶(MMP)-01和MMP-2表达的相关性。方法 采用免疫组织化学SP(streptavidin／peroxidase)染色方法检测11例RA患者受损关节软骨-血管翳接合部（CPJ)滑膜组织中CD147和MMP-1及MMP-2的表达，并与3例骨关节炎（OA)患者滑膜组织CD147和MMP-1及MMP-2的检测相对照。结果 3例OA滑膜组织CD147和MMP-1及MMP-2的表达均为阴性，而11例RA滑膜组织中均有CD147和MMP-1及MMP-2的表达。其中，表达CD147的细胞为单核-巨噬细胞、淋巴细胞和滑膜成纤维样细胞，表达MMP-1及MMP-2的细胞为滑膜成纤维样细胞。统计学分析表明RA滑膜细胞CD147的表达和MMP-1及MMP-2的表达间存在显著相关性。结论 CD147在RA滑膜组织中表达增高，可能是导敏RA受损关节软骨、骨基质降解的重要因素之一。     

MMP-2／TIMP-2比值与2型糖尿病大鼠心肌胶原代谢的关系及瑞舒伐他汀对其的干预

目的探讨基质金属蛋白酶-2（matrixmetalloproteinases-2,MMP-2）／基质金属蛋白酶组织抑制剂-2（tissueinhibitorofmatrixmetalloproteinases-2,TIMP-2）与2型糖尿病大鼠心肌间质中胶原代谢的关系,及瑞舒伐他汀防治心肌间质纤维化的可能机制。方法30只雄性SD大鼠按随机数字表法抽取8只作为正常对照组,其余22只喂高脂,高糖饲料,并予低剂量链脲佐菌素单次腹腔注射。16只成模的糖尿病组大鼠按随机数字表法分成糖尿病组（n=8）与瑞舒伐他汀治疗组（n=8）。待血糖稳定后,治疗组开始给予瑞舒伐他汀干预处理,干预两个月后,处死大鼠,测定动物体质量,心脏质量,以计算心脏质量指数：心脏质量（g）／动物体质量（g）。酶联免疫吸附试验（ELISA）法分别测定3组大鼠血浆MMP-2、TIMP-2浓度,采用免疫组化方法检测心肌MMP-2、TIMP-2蛋白表达的水平和组织定位,采用Masson染色方法观察心肌间质胶原蛋白含量变化及分布。结果糖尿病组及治疗组血糖高于正常组,差异有统计学意义（P〈0．05）。糖尿病组心脏质量指数高于治疗组和正常组,差异有统计学意义（P〈0．05）。糖尿病组血浆MMP-2及TIMP-2浓度均比正常组高,差异有统计学意义（P〈0．05）。治疗组血浆MMP-2及TIMP-2浓度比糖尿病组降低,差异有统计学意义（P〈0．05）。然而,免疫组化检测到MMP．2在糖尿病组心肌间质中表达比正常组明显减少,在治疗组的表达比在糖尿病组增多,差异有统计学意义（P〈0．05）：TIMP-2在糖尿病组心肌间质中表达比正常组明显增多,在治疗组的表达比在糖尿病组减少,差异有统计学意义（P〈O．05）。糖尿病组与正常组比较,MMP-2／TIMP-2比值下降;治疗组与糖尿病组比较,MMP-2／TIMP-2比值上升。心肌Masson染色：亮绿色纤维在糖尿病组心肌间质中明显比正常组增多。而治疗组比糖尿病组有所减少。结论糖尿病大鼠中MMP-2／TIMP-2比值下降可能是导致心肌间质纤维化的原因之一。瑞舒伐他汀可减轻糖尿病大鼠心肌间质的胶原沉积,其可能是通过升高MMP-2／TIMP-2比值,使糖尿病心肌问质纤维化有所减轻。     

4-羟基壬烯醛上调气道上皮细胞MMP-2、MMP-9和COX-2的表达

目的 观察4-羟基壬烯醛(4-HNE)对气道上皮细胞基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和环氧合酶2(COX-2)表达的影响.方法 Western-blot和RT-PCR检测不同浓度4-HNE(0μmol/L,10 μmol/L,30 μmol/L和50 μmol/L)作用气道上皮细胞4h后MMP-2、MMP-9和COX-2蛋白和mRNA表达的变化.结果 4-HNE以剂量依赖的方式促进MMP-2、MMP-9、COX-2mRNA表达和蛋白合成,与对照组相比,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 4-HNE可通过上调气道上皮细胞COX-2的表达而导致慢性阻塞性肺疾病患者慢性气道炎症的发生、发展,上调MMP-2、MMP-9的表达引起慢性阻塞性肺疾病患者的气道重塑.     

原发性干燥综合征患者唇腺组织中MMP-9与CD147的表达及意义

目的 探讨基质金属蛋白酶(MMP)-9、细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(CD147)在原发性干燥综合征(pSS)发病过程中的作用及意义.方法 采用免疫组织化学方法对52例pSS患者、30名正常对照组唇腺中MMP-9、CD147表达进行描述,并对二者表达的相关性进行分析.结果 pSS组MMP-9均阳性高表达,对照组MMP-9亦阳性表达,表达的强度较pSS组低(P<0.05),随淋巴细胞浸润灶数的增加而表达增强.CD147在对照组的23例阳性低表达,PSS组52例CD147阳性高表达,强度较对照组高(P<0.05),随淋巴细胞浸润灶数的增加而表达增强.MMP-9与CD147的表达呈正相关(P<0.01 .结论 MMP-9、CD147在pSS患者唇腺组织中异常表达,均参与pSS的发病过程.     

α干扰素对人高转移肝癌细胞系HCCLM3血管形成因子表达的影响

目的:研究IFN-a对高转移潜能的人肝癌细胞系HCCLM3细胞血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和白介素-8(IL-8)表达的影响,探索IFN-a抗中瘤血管形成的机制.方法:将HCCLM3细胞在高糖DMEM培养液(Dulbecco'smodified Eagle medium)和加入了不同剂量(30,300或3 000 kU/L)IFN-α的DMEM培养液中孵育72 h.ELISA法检测IFN-α干预组与对照组(未加入IFN-α)中VEGF,bFGF,MMP-2,MMP-9和IL-8的表达情况.结果:HCCLM3细胞空白对照组中VEGF,MMP-2,bFGF和IL-8的表达农度分别为2666±122.6,4400±1 000,28.0±5.1和1 160±69.4 ng/L.同时IFN-α为300 kU/L时,VEGF,MMP-2,bFGF和IL-8的浓度分别为2476.5±125.7(P＜0.05),2 400±600(P＜0.01),25.8±1.6和1 079±5 ng/L;IFN-α为3 000 kU/L时,VEGF,MMP-2,bFGF和IL-8的浓度分别为2 289.5±119.5(P＜0.01),2 000±500(P＜0.01),25.1±2.9和1 087.9±83.9 ng/L.各组中均未检测到MMP-9的表达.结论:IFN-α对HCCLM3细胞VEGF和MMP-2蛋白的表达均具有明显的抑制作用,并呈剂量依赖性.bFGF,IL-8和MMP-9的表达浓度在IFN-α各剂量组与对照组间无显著性差别.IFN-α对肝癌细胞中VEGF和MMP-2表达水平的下调在其抗肝癌血管形成机制中发挥重要作用.     

慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞基质金属蛋白酶-1及其抑制因子基因的表达

目的 比较外周血单个核细胞(PBMC)及自身血清中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)表达水平,探讨MMP-1及TIMP-1基因表达对肝纤维化的诊断价值.方法 实时荧光定量反转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)方法分别检测37例慢性乙型肝炎患者及20例健康对照者PBMC中MMP-1及TIMP-1 mRNA的表达水平,双抗体央心酶联免疫吸附方法检测血清MMP-1及TIMI-1水平;慢性乙型肝炎患者均行肝组织穿刺活检,行纤维化程度分期(S).组间比较采用多个独立样本非参数检验,并作Spearman相关性分析.结果 健康对照组PBMC中MMP-1 mRNA及TIMP-1 mRNA呈低水平表达,慢性乙型肝炎患者PBMC中MMP-1mRNA表达水平与健康对照组比较差异无统计学意义,而TIMP-1 mRNA表达水平显著高于健康对照组的(0.48±0.80)lg拷贝/μL,血清TIMP-1也高于健康对照组的(158.29±58.58)μg/L.随着慢性乙型肝炎肝纤维化程度加重,各期之间MMP-1 mRNA的表达水平及血清MMP-1水平比较差异无统计学意义(χ~2=8.960,P=0.111;χ~2=7.898,P=0.211);从S1～S4,TIMP-1 mRNA表达水平依次为(1.67±0.84)、(3.48±2.08)、(5.86±3.47)及(8.14±6.48)lg拷贝/μL,血清TIMP-1水平依次为(233.73±64.84)、(262.10μ71.12)、(301.15μ62.74)及(381.15±152.75)μg/L,各期之间TIMP-1mRNA表达水平及血清TIMP-1水平比较差异均有统计学意义(χ~2=14.290,P=0.002;χ~2=12.209,P=0.007).PBMC中TIMI-1 mRNA、血清TIMP-1与肝纤维化呈正相关(r=0.752.P<0.01;r=0.530,P=0.008).结论 PBMC中TIMP-1 mRNA表达水平及血清TIMP-1水平与肝脏纤维化程度密切相关.PBMC中TIMP-1 mRNA及血清TIMP-1可以作为诊断肝纤维化的新指标,尤其PBMC中TIMP-1 mRNA诊断价值最大.     

广谱基质金属蛋白酶抑制剂对高血压肾纤维化的影响

目的 研究多西环素(DOX)对卒中易感型自发性高血压大鼠(SHR-SP)肾脏基质金属蛋白酶(MMPs)及金属蛋白酶组织型抑制剂(TIMPs)活性的影响,探讨DOX对高血压肾纤维化病理转归的作用机制.方法 选用7周龄雄性SHR-SP随机分为药物干预组和对照组,定期观察大鼠体重、测量无创鼠尾压、尿量、尿肌酐、尿蛋白变化.观察终止时进行血流动力学分析;测定血清肌酐、尿素氮浓度;采用组织病理、明胶酶谱和逆明胶酶谱等方法观察各组大鼠肾脏组织学改变和MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2等活性变化.结果 收缩压、脉压、血清肌酐浓度在DOX组与对照组之间无统计学差异,但DOX组有升高趋势;从19周龄起,DOX组大鼠尿蛋白浓度与尿肌酐浓度比值即高于对照组[(8.3±6.4 vs 3.3±2.0)mg/μmol,P＜0.05];病理染色显示肾小管损伤平均指数和胶原容积分数均高于对照组(损伤平均指数:3.14±0.47 vs 2.69±0.38,P＜0.05;胶原容积分数:10.5%±2.7% vs 6.6%±1.9%,P＜0.01);与血压正常大鼠相比,高血压大鼠肾脏MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2的活性升高;药物干预后MMP-2、MMP-9活性降低(MMP-2:2.62±0.75 vs 3.39±0.92;MMP-9:2.89±1.13 vs 4.01±0.91,P＜0.05),而TIMP-1、TIMP-2活性则显著升高(TIMP-1:2.89±1.76 vs 1.54±0.86,P＜0.05;TIMP-2:1.69±0.47 vs 1.06±0.47,P＜0.01).结论 广谱基质金属蛋白酶抑制剂DOX可以抑制SHR-SP肾脏中MMP-2、MMP-9活性,加重高血压造成的肾脏损害.在肾脏损害发生后,抑制MMPs活性可能会加重高血压肾脏纤维化的进展.