NF-κB在烧伤脓毒症大鼠肝损伤中的作用

目的　研究NF κB在烧伤脓毒症大鼠急性肝损害中的作用。方法　采用 30 %Ⅲ度烫伤加内毒素攻击大鼠模型模拟临床烧伤脓毒症 ,6 3只Wistar大鼠随机分为正常对照组、烧伤脓毒症组、烧伤脓毒症 +NF κB抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷 (PDTC)组、单纯PDTC处理组 ,采用凝胶电泳迁移率改变分析法(EMSA)分析肝脏NF κB活性 ,免疫印迹 (Westernblotting)法检测肝脏IκB α表达 ,酶联免疫吸附试验检测肝脏TNF α含量的变化。结果　NF κB于伤后 1h明显活化并达到高峰 (P <0 0 5 ) ;IκB α表达先减少 (P <0 0 5 )后逐渐恢复 ;NF κB抑制剂PDTC可以降低NF κB的活性和减少TNF α的释放 ,同时明显降低血清ALT、AST含量。结论　抑制NF κB活性有助于减轻烧伤脓毒症时肝脏的急性损害。     

核因子-κB在烧伤脓毒症大鼠骨骼肌蛋白分解代谢中的作用研究

目的　观察核因子 κB(NF κB)对烧伤脓毒症大鼠骨骼肌蛋白分解代谢的影响 ,并探讨其可能机制。方法　采用 30 %TBSAⅢ度烫伤加内毒素攻击大鼠为模型模拟临床烧伤脓毒症 ,10 5只Wistar大鼠随机分为正常对照组、烧伤脓毒症组、烧伤脓毒症 NF κB抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷 (PDTC)组 ,采用凝胶电泳迁移率改变分析法 (EMSA)分析骨骼肌NF κB活性的变化 ,高效液相色谱分析法测定酪氨酸和 3 甲基组氨酸。结果　可见烧伤脓毒症大鼠伸趾长肌总蛋白、肌纤维蛋白降解率在伤后 2h即较对照组即显著升高 ,之后逐渐上升 ,以 12h升高最显著 (P <0 0 1) ;而骨骼肌NF κB的活性于伤后 2h显著升高 ,之后呈现下降趋势 ,伤后 12h其活性仍显著高于正常对照组 (P <0 0 5 )。结论　研究表明NF κB于烧伤脓毒症大鼠的骨骼肌中明显活化 ,而应用NF κB抑制剂PDTC能够明显降低脓毒症时骨骼肌代谢率 ,说明NF κB可能参与调控烧伤脓毒症时骨骼肌的异常代谢。     

内毒素诱导肺泡巨噬细胞NF-κB信号通路的变化

目的　观察内毒素(LPS)体外刺激诱发肺泡巨噬细胞(PAM)中NF κB信号通路的变化 ,探讨急性肺损伤 (ALI)的分子病理机制。方法　用原位杂交、EMSA及ELISA方法 ,检测LPS刺激后 0、1/ 4、1/ 2、1、2、4h各时相点PAM中Iκ B激酶 (IKK β)mRNA表达、NF κB核移位以及IκB α降解和TNF α分泌的变化。结果　IKK βmRNA表达在LPS刺激后 1/ 4h开始升高 ,1/ 2h达高峰 ,1h后逐渐下降 ;IκB α水平恰好与IKK βmRNA对应点变化幅度相反 ;NF κB的活性于 1/ 4h开始升高 ,1h达峰值 ,2h后逐渐下降 ;TNF α的含量 1/ 2h开始升高 ,1h达峰值 ,2～ 4h逐渐恢复至刺激前水平。结论　IKK β激活 /IκB α降解 /NF κB活化 /TNF α合成的转导通路在LPS介导ALI的病理机制中发挥了重要作用     

NF-κB活化在烟雾吸入性损伤发生中的作用及地塞米松对其影响

为探讨NF－κB活化在大鼠烟雾吸入性损伤发生中的作用及地塞米松对NF－κB活化的影响，制作大鼠烟雾吸入性损伤模型，将大鼠随机分为正常对照组、烟雾致伤组及地塞米松治疗组，应用免疫组化方法观察伤前及伤后2、6、12、24、48、72h肺组织NF－κBP^65、IκB-α、TNF-α、ICAM-1蛋白表达的动态变化。结果显示，烟雾吸入性损伤后肺组织NF－κBP^65、TNF-α、ICAM－1蛋白表达升高，IκB-α表达降低。而地塞米松治疗组则下调NF－κBP^65、TNF-α、ICAM-1表达，上调IκB-α表达。提示NF－κB活化参与了烟雾吸入损害的发生、发展，而地米松则抑制NF－κB活化，部分阻断细胞因子及粘附分子产生，从而减轻炎症性损害。NF－κB活化可能是烟雾吸入性损伤炎症发展的关键点，从而为从转录水平作为靶点治疗烟雾吸入性损伤提供了理论依据。     

NF-κB抑制剂对烫伤脓毒症大鼠致炎/抗炎细胞因子表达的影响

目的观察NF-κB抑制剂对动物主要器官致炎/抗炎细胞因子基因及蛋白表达的调节效应,并对其作用机制进行初步探讨.方法34只动物随机分为正常对照组(n=6)、烫伤(20%TBSAⅢ度)对照组(n=6)、烫伤后金葡菌感染组(n=12)和NF-κB抑制剂二硫氨基甲酸酞吡咯烷(PDTC)拮抗组(n=10),检测动物肝、肾、肺组织中TNF-α、IL-10基因及蛋白表达的改变.结果烫伤脓毒症组0.5～2h肝、肺、肾组织中TNF-α mRNA表达迅速增强,同时各组织TNF-α蛋白水平亦显著升高.PDTC早期干预对肺脏TNF-α mRNA及蛋白水平影响不明显,但肝、肾组织其表达量在2h均被显著抑制(P＜0.05或0.01).烫伤合并金葡菌感染后2h大鼠肝、肺、肾组织IL-10 mRNA与蛋白水平均显著升高(P＜0.05或0.01),早期给予PDTC对肺、肾组织各时间点IL-10 mRNA与蛋白表达均无明显影响,肝组织仅2h呈现一定程度地下降.结论NF-κB抑制剂在有效拮抗G+菌脓毒症TNF-α等致炎介质的同时,对机体并存的抗炎细胞因子反应机制具有保护作用.     

海水浸泡对大鼠小肠组织NF-κB,IκBα表达的影响

目的 观察海水浸泡并创伤大鼠小肠NF-κB,IκBα达的变化规律.方法 Wistar大鼠91只,随机分为3组:空白对照组7只,创伤组42只,海水浸泡并创伤组42只.创伤组采用腹部开放伤模型,海水浸泡并创伤组在腹部开放伤的基础上海水浸泡1 h.采用Western blotting方法测定3组小肠组织NF-κB,IκBα达量并进行统计分析和组间比较.结果 与创伤组相比,海水浸泡并创伤组伤后3 h小肠组织NF-κB的表达即出现明显增高,并一直持续到72 h(P<0.05),创伤组似较空白组略有降低,但差异无统计学意义(P>0.05);IκBα变化规律与NF-κB相反.结论 IκBα速而且持续地参与了海水浸泡并创伤大鼠的炎症反应过程,海水浸泡并创伤组大鼠伤情严重,损伤因素持续存在.在相当长一段时间内NF-κB负反馈机制并未得到建立.     

乌司他丁对急性肺损伤大鼠肺组织NF-κB表达的影响

目的 研究乌司他丁在脂多糖(LPS)诱导大鼠急性肺损伤(ALD时的肺保护作用机制.方法 36只健康雄性SD大鼠,随机分为3组:正常对照组(NC组),肺损伤组(LPS组)和乌司他丁治疗组(UTI组),每组12只.复制大鼠ALI模型,LPS组经股静脉缓慢注射LPS 5mg/kg;UTI组在注射LPS后,继续由股静脉注入UTI 50 000U/kg;NC组注入2ml 0.9%氯化钠注射液.各组分别于给药完毕后2、4h测定动脉血氧分压(PaO2),然后经颈动脉放血处死6只动物,收集肺标本测定肺组织湿/干(W/D)质量比值,肺组织匀浆中髓过氧化物酶(MPO)活性、丙二醛(MDA)含量,光镜下检查肺组织病理形态学改变,检测肺组织TNF-α蛋白含量和核转录因子-κB(NF-κB)的表达.结果 与NC组比较,LPS组2、4h时的PaO2值均明显下降(P<0.01);UTI组各时间点PaO2均高于LPS组(P<0.05),低于NC组(P<0.05).UTI组和LPS组之间PaCO2未见明显差异(P>0.05).UTI组和LPS组肺组织的W/D比值较NC组均有明显增高(P<0.05),但前两者之间并无明显差异(P>0.05).肺组织病理学检查可见小叶结构紊乱,大量炎性细胞浸润,肺泡腔可见明显出血、渗出,UTI组也存在上述损伤性改变,但程度较LPS组轻.LPS组MPO活性、MDA含量明显高于NC组和UTI组(P<0.05).LPS组TNF-α蛋白含量、NF-κB表达量均明显高于UTI组(P<0.05).结论 在内毒素诱导ALI时,早期使用UTI能够抑制中性粒细胞和NF-κB活化,减少TNF-α的生成,具有较好的肺保护作用.     

核因子-κB活化对肿瘤坏死因子表达的调控

为观察脂多糖（ＬＰＳ）处理单核细胞（Ｍ）后对核因子－κＢ抑制蛋白（ＩκＢα）降解,ＮＦ－κＢ活化及α肿瘤坏死因子（ＴＮＦα）表达的影响,分离、培养Ｍ,分为正常对照组和ＬＰＳ刺激组（ＬＰＳ１０μｇ／ｍ ｌ）;分别在刺激前（０）、刺激后１５、３０ｍ ｉｎ 和１、２、４ｈ,留取Ｍ 和细胞培养上清。检测Ｍ ＩκＢ水平和核提取物中ＮＦ－κＢ的活性和细胞培养上清中ＴＮＦα的含量。结果发现,ＬＰＳ刺激组ＩκＢ水平１５ｍ ｉｎ 开始降低,３０ｍ ｉｎ 降到最低值;ＮＦ－κＢ活性在３０ｍ ｉｎ～４ｈ 显著增高,峰值在刺激后１～２ｈ;ＬＰＳ刺激后１～２ｈ,ＴＮＦα显著升高（Ｐ＜ ０．０１）,峰值在刺激后１ｈ。ＮＦ－κＢ活性与ＴＮＦα含量在刺激后１ｈ 峰值呈显著正相关（ｒ＝ ０．９０１,Ｐ＜ ０．０１）。结果提示, ＬＰＳ可诱导Ｍ 的ＩκＢ降解和ＮＦ－κＢ激活。ＮＦ－κＢ活化后可导致ＴＮＦα的基因转录和表达增加。     

转录因子NF-κB在肝纤维化中的作用

核因子-κB(Nuclear factor-kappa B,NF-κB)是近年来研究极为广泛的转录调控因子,作为一种转录刺激因子,最初是在1986年由Sen和Baltimore首先报道的.NF-κB可因一些细胞因子、氧化剂、蛋白激酶、脂多糖等的刺激而激活,而活化的NF-κB又可诱导细胞因子、趋化因子、免疫因子受体和转录因子等多种物质的表达,在炎症反应、肿瘤及血液性疾病的病理生理过程中发挥重要作用[1].目前对NF-κB在肝纤维化中的作用报道较少,为此,笔者就转录因子NF-κB在肝纤维化形成过程中的相关作用作一综述.     

核因子-κB在大鼠肺型氧中毒发病中的作用

目的 探讨核因子(NF)-κB在大鼠肺型氧中毒发病中的作用.方法 32只SD大鼠随机分为正常对照组及230 kPa高压氧暴露2、6、10 h组.观察肺组织病理变化以及NF-κB和肿瘤坏死因子a(TNF-α)在肺组织中含量的变化.结果 (1)病理检查发现肺组织在高压氧暴露6 h组出现炎症改变,10 h组肺损伤加重.(2)肺组织细胞核中NF-κB P65含量在高压氧暴露2 h组中明显增高,6 h组中达高峰,10 h组中下降但仍高于正常对照组.(3)肺组织TNF-α mRNA表达及肺匀浆中TNF-α浓度在高压氧暴露6 h组中明显增高,10 h组中继续增高.结论 高压氧可以通过活化NF-κB诱导TNF-α高表达从而介导氧中毒的肺损伤.     

烧伤脓毒症早期心肌内泛素mRNA的表达变化及意义

目的　观察烧伤脓毒症大鼠心肌内泛素mRNA表达的变化及意义。方法　采用大鼠 30 %Ⅲ度烫伤复合腹腔注射内毒素(6mg/kg)动物模型 ,分为伤后 2h和 6h组 ,同时设对照组 ,通过核糖核酸印迹法检测大鼠心肌内泛素mRNA表达的变化。结果　伤后 2h和 6h大鼠心肌内泛素mRNA 2 4kb条带和 1 2kb条带的表达均较对照组均显著升高 ,其中 2 4kb条带的升高更明显 (P<0 0 1)。提示烧伤脓毒症早期心肌内重要的蛋白降解途径———泛素系统活性呈持续增强现象 ,预示蛋白降解代谢可能显著增加。结论　该发现对进一步从代谢角度研究烧伤脓毒症时心肌结构的变化及其对心功能的影响有重要意义。     

大鼠高原严重烧伤后早期肝脏损伤的病理变化及复方红景天参芪花粉对其保护作用

目的：探讨高海拔地区(海拔3480m)大鼠严重烧伤后(30％Ⅲ度)肝脏病理变化以及复方红景天参芪花粉对其影响;方法：建立烧伤模型,156只大鼠随机分为烧伤试验组(72只),烧伤对照组(72只),正常组(12只),试验组伤前灌胃给药,其余给盐水,伤后3h、6h、12h、24h、48h和72h6个时相点剖腹取肝脏,10％福尔马林固定,常规石蜡包埋切片,HE染色;结果：烧伤对照组伤后3h肝细胞即出现肿胀,6h～24h损害继续加重,并出现部分肝小叶坏死,可累及整小叶,这种严重的器质性损伤在48h～72h仍然持续;烧伤试验组：烧伤后3h肝细胞轻度肿胀,6h～24h极少出现肝小叶坏死,伤后48h～72h肝小叶仅见中央脂肪变性范围较小,而累及整小叶及小叶中央静脉周围者少见;结论：复方红景天参芪花粉对大鼠高原严重烧伤后的肝损害有显著的保护作用。     

固定化亲和吸附剂血液灌流对脓毒症大鼠作用的研究

观察固定化多粘菌素B血液灌流对脓毒症大鼠血液中内毒素，TNF－α和血液流变学的作用。将24只Wistar大鼠分为固定化多粘菌素B组（LPS＋HP＋PMB组）、空灌流组（LPS＋HP组）和对照组（LPS模型组），给大鼠一次性静注内毒素（LPS）0．5mg/kg，LPS＋HP＋PMB组、LPS＋HP组注入内毒素4h后抽出血液，分离出血浆，将血浆经特异亲和剂灌流柱或未偶联亲和剂的空灌流柱进行血液灌流，灌流后浆与细胞混匀回输动物。测定血浆中LPS、TNF－α水平及全血粘度和红细胞比容变化。结果发现，经特异性亲和灌流柱灌流1h，血浆LPS、TNF－α水平明显下降，提示固定化多粘菌素B血液灌流能显著清除血浆中内毒素，改善血液流变学。     

大鼠高原严重烧伤后早期心肌损伤的病理变化及复方红景天参芪花粉对其保护作用

目的：探讨高海拔地区(海拔3480m)大鼠严重烧伤(30％Ⅲ度)后心肌病理变化及复方红景天参芪花粉对其影响；方法：建立烧伤模型，156只大鼠随机分为烧伤试验组(72只)，烧伤对照组(72只)，正常组(12)只，试验组伤前灌胃给药，其余给盐水；伤后3h、6h、12h、24h、48h、72h6个时相点剖腹取心脏，10％福尔马林固定，常规石蜡包埋切片，脏染色；结果：烧伤对照组伤后3小时心肌间质增宽，充血，伤后6h～24h心肌纤维可见颗粒变性，并可见“波浪纤维”；伤后48h～72h心肌仍持续出现灶性凝固性坏死和溶解坏死，少量肌纤维断裂；烧伤试验组：伤后3h心肌问质轻度水肿，伤后6h～24h心肌纤维仅有部分颗粒变性，未见空泡变性；伤后48h～72h，仍有间质充血水肿，未见肌纤维断裂：结论：复方红景天参芪花粉对大鼠高原严重烧伤后的心肌损害有显著保护作用。     

大鼠高原严重烧伤后早期小肠损伤的病理变化及复方红景天参芪花粉对其保护作用

目的：探讨高海拔地区(3480m)大鼠严重烧伤(30％Ⅲ度)后小肠病理变化以及复方红景天参芪花粉对其影响;方法：建立高原烧伤大鼠模型,156只大鼠随机分为烧伤试验组(72只),烧伤对照组(72只),正常组(12只),试验组伤前灌胃给药,其余给盐水。伤后3h、6h、12h、24h、48h和72h等6个时相点剖腹取出小肠一段,10％福尔马林固定,常规石蜡包埋切片,陋染色;结果：烧伤对照组伤后3h即出现小肠粘膜充血水肿,伤后6h～24h肠粘膜细胞变性。纹状缘消失,继而上皮细胞糜烂,但病变极少累及粘膜下层,伤后48h～72h上述病变更趋明显,固有膜内可见出血灶,粘膜下充血水肿。烧伤试验组：伤后3h小肠粘膜有轻度水肿,伤后6h～24h固有膜内少许粒细胞、淋巴细胞浸润,粘膜上皮未见明显变性糜烂。伤后48h～72h肠粘膜充血水肿减轻;结论：复方红景天参芪花粉制剂对大鼠高原严重烧伤后的小肠损害有显著的保护作用。     

丹参对缺血再灌注诱导的大鼠肝脂质过氧化和血清ALT活性变化的影响

目的:研究丹参对缺血再灌注(IR)肝损伤的防治作用;方法:阻断肝血流,建立IR模型,检测再灌注后不同时相点肝血清谷丙转氨酶活性和脂质过氧化物丙二醛水平;结果:在再灌注后6h各指标达最高峰,丹参组与IR组比较,丹参可降低血清谷丙转氨酶(ALT)(148.2±13.1)U/L与(241.6±29.8)U/L及脂质过氧化物(MDA)(33.8±7.3)mmol/L与(53.2±10.5)mmol/L)水平(P<0.05),而使超氧化歧化酶(SOD)保持在较高水平(91.3±9.1)mU/L与(72.5±5.5)mu/L,(P<0.05);结论:丹参能抑制IR引起的大鼠肝血清ALT和MDA水平的升高,具有防治IR肝损伤的作用。     

大鼠高原严重烧伤后复方红景天参芪花粉制剂对心肌酶谱变化的影响

目的 :观察大鼠高原严重烧伤后心肌酶谱的变化和复方红景天制剂 (RACC)对其的影响 ;方法 :在 3 480m高海拔地区成功复制大鼠 3 0 %Ⅲ度烧伤模型 ,动态观察了烧伤后心肌酶谱 (包括LDH、α -HDH、AKP、同功酶MB型及GOT)的变化 ;结果 :伤后 3小时 ,在实验组和对照组的心肌酶均显著高于正常组 (P <0 .0 1 ) ,然后心肌酶谱逐渐下降 ,并在术后 72小时接近正常。实验组的心肌酶谱水平则显著低于对照组 (P <0 .0 1 ) ;结论 :RACC可对严重烧伤后心肌提供一定的保护作用 ,具有一定的临床意义