大黄灵仙胶囊对胆结石小鼠模型法尼醇X受体的影响

目的?探究大黄灵仙胶囊对胆结石小鼠模型法尼醇X受体(FXR)基因转录及其蛋白表达的影响。方法?将60只成年SPF级雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为5组：空白对照组（P组)、致石组（Z组）、注水组（W组）、熊去氧胆酸胶囊组（U组）、大黄灵仙胶囊组（D组），每组12只。采用高脂、高热量、高胆固醇饲料喂养诱导方法造模创建胆结石模型，造模过程当中U、D组分别予130 g/kg熊去氧胆酸胶囊干粉溶液、13 g/kg大黄灵仙胶囊干粉溶液每日灌胃，持续8周，W组予同体积生理盐水持续8周每日灌胃。运用蛋白免疫印迹法（Western Blot）、实时聚合酶链式反应（RT-PCR）法检测各组肝胆管侧膜细胞胆固醇7α-羟化酶（CYP7A1）、固醇12α-羟化酶（CYP8B1）、小分子异源二聚体伴侣（SHP）、肝脏受体同系物-1（LRH-1）、胆汁酸盐输出泵基因（BSEP）、钠离子-牛磺胆酸共转运蛋白（NTCPmRNA）转录水平及其蛋白表达变化情况。结果?（1）造模情况：Z、W组小鼠及其他组胆囊内可见颗粒样结石形成或泥沙样结石，可见胆总管扩张及胆管内泥沙样沉淀物，而D、U组胆囊内胆汁呈淡黄色，清澈透亮，胆总管解剖清晰，无扩张及结石形成。（2）基因表达情况：与W组比较，D、U组CYP7A1、CYP8B1、BSEP、NTCPmRNA及蛋白表达水平显著升高（P<0.05），SHP、LRH-1mRNA及蛋白表达水平降低（P<0.05）；与U组作比较，D组各因子蛋白及mRNA表达水平差异无统计学意义（P>0.05）。结论?大黄灵仙胶囊可以调控上游转录因子核受体FXR信号通路，激活FXR-CYP7A1/CYP8B1、FXR-BSEP/NTCP受体系统，减少肝细胞的“病理性胆汁”分泌，从而预防胆结石的形成。     

大黄灵仙胶囊对慢性肝损伤后胆结石形成的干预作用研究

目的 探讨大黄灵仙胶囊对慢性肝损伤家兔胆结石形成的干预作用及其作用机制.方法 将46只家兔随机分为正常组、慢性肝损伤组、肝硬化组、大黄灵仙胶囊大剂量组、大黄灵仙胶囊小剂量组.采用皮下注射CCl4方法 进行慢性肝损伤造模,各组同时进行不同处理.最后观察各组胆囊成石率,肝脏功能生化指标,肝组织病理改变、超微结构改变,胆汁成分改变.结果 ①慢性肝损伤组、肝硬化组胆石形成阳性检出率较正常对照组显著增加(P＜0.05或P＜0.01).大黄灵仙胶囊大剂量组、大黄灵仙胶囊小剂量组胆石阳性检出率较肝硬化组有显著降低(P＜0.01或P＜0.05).②各模型组中肝脏超微结构均发生不同程度异常改变,大黄灵仙胶囊大、小剂量治疗组肝脏病理改变、肝细胞超微结构改变较模型组比较均有改善,大剂量组尤为明显.③大黄灵仙胶囊大、小剂量组血清AST,ALT,γ-GT,非结合胆红素均明显低于肝硬化组(P＜0.05或P<0.01);总胆红素、间接胆红素、钙离子大黄灵仙胶囊大、小剂量组较肝硬化组明显降低(P<0.01),大剂量组较小剂量组明显降低(P<0.01).结论 大黄灵仙胶囊对慢性肝损伤后胆结石形成具有明显的预防效果,其作用机制主要与抑制CCl4所致肝脏损伤的作用有关,同时与大黄灵仙胶囊在多层次、多途径调节参与结石形成各因素关系密切.     

双蓣调脂汤对高胆固醇血症大鼠肝组织SRB1/CYP7A1/FXR信号通路的影响

目的:探讨双蓣调脂汤对高胆固醇血症大鼠肝组织B类清道夫受体(SRB1)/胆固醇7α羟化酶(CYP7A1)/法尼醇X受体(FXR)信号通路的作用,明确其调控血脂机制.方法:40只SD大鼠,随机抽取8只为正常组,其余32只成功建立高胆固醇血症模型后随机分为模型组,双蓣调脂汤低、高剂量组(7.8,15.6 g?kg-1),辛...     

黄芪多糖对MC-3T3-E1成骨细胞CYP27B，CYP24A mRNA及蛋白表达的影响

目的:通过研究黄芪多糖对成骨细胞增殖及1α羟化酶(CYP27B),24-羟基化酶(CYP24A)基因与蛋白表达情况的影响对其治疗骨质疏松症(OP)作用机制进行初步探讨。方法:以MC-3T3-E1成骨细胞为研究对象,实验分为5组,分别为正常组,维生素D组(1×10-5mmol·L-1),黄芪多糖高、中、低剂量组(10,1,0.1 mg·L~(-1))。用噻唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度的黄芪多糖在不同时间(24,36,48 h)对MC-3T3-E1成骨细胞增殖率的影响。实时荧光定量聚合酶链式反应法(Real-time PCR)检测黄芪多糖对MC-3T3-E1成骨细胞CYP24A,CYP27B mRNA的表达情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测黄芪多糖对MC-3T3-E1成骨细胞CYP24A,CYP27B蛋白的表达情况。结果:MTT比色法显示黄芪多糖的质量浓度在0.1,1,10 mg·L~(-1)时可以提高MC-3T3-E1成骨细胞的增殖率,且在48 h促增殖作用最佳。Real-time PCR,Western blot检测结果显示,与正常组比较,维生素D组MC-3T3-E1成骨细胞CYP27B mRNA表达量、蛋白表达量有显著促进作用(P0.05);与维生素D组比较,黄芪多糖在质量浓度为10,1,0.1 mg·L~(-1)时对MC-3T3-E1成骨细胞CYP24A mRNA表达量、蛋白表达量有显著抑制作用(P0.05)。结论:黄芪多糖能够治疗骨质疏松症其机制与提高成骨细胞活性及调节MC-3T3-E1成骨细胞CYP24A,CYP27B mRNA及蛋白表达水平有关。     

合成冰片对大鼠肝CYP450酶含量及CYP3A1 mRNA表达的影响

[目的]研究冰片对大鼠肝脏细胞色素氧化酶（cytochromeP450,CYP450）含量及其亚型CYP3AImRNA表达的影响。[方法] Wistar大鼠合成冰片（设0．3g／kg和0.03g／kg剂量组,1次／d,连续7d）灌胃,以溶媒羧甲基纤维素纳（CMC-Na）和苯巴比妥钠为对照组,钙沉积法提取肝微粒体,紫外分光光度法测定CYP450含量,实时定量RT-PCR法检测肝脏CYP3AImRNA的表达。[结果]0．3g／kg合成冰片口服可诱导大鼠肝脏CYP450酶含量增高（P〈0．05）,CYP3A1 mRNA表达上调（P〈0．05）。[结论]高剂量合成冰片口服可能影响肝脏药物代谢。     

养肝利胆颗粒对胆固醇结石小鼠肝脏中PPAR-γ及CYP7A1表达的影响

目的:观察养肝利胆颗粒对胆固醇结石小鼠肝脏PPAR-γ及CYP7A1表达的影响。方法:38只C57BL/6雌性小鼠随机分为正常对照组(n=10)、模型组(n=15)和养肝利胆颗粒组(n=13)。其中后两组小鼠采用高脂饮食诱发法建立胆固醇结石模型。造模过程中,养肝利胆颗粒组小鼠予养肝利胆颗粒2.1g/(kg.d)灌胃治疗。8周后观察各组小鼠的成石率,并用Western Blotting法检测肝脏中PPAR-γ及CYP7A1的表达。结果:养肝利胆颗粒组成石率显著降低(P<0.01),小鼠肝脏PPARγ及CYP7A1表达增强。结论:养肝利胆颗粒可通过增强肝脏PPARγ及CYP7A1的表达,从而发挥防治胆石病的作用。     

贞芪扶正胶囊对大鼠肝细胞色素P450酶CYP1A2、CYP3A4、CYP2E1的影响

目的:研究贞芪扶正胶囊对大鼠肝细胞色素P450酶CYP1A2、CYP3A4、CYP2E1的影响。方法:用Cocktail探针药物法,将Wistar大鼠按体重随机分组,灌胃给予贞芪扶正胶囊溶液,以生理盐水为空白对照,诱导10天,股动脉插管,注射给予Cocktail探针药物咖啡因、氨苯砜、氯唑沙宗,通过HPLC检测各探针药物的代谢率来评价各组的CYP1A2、CYP3A4、CYP2E1亚型酶的活性;药动学计算采用DAS2.0软件完成。结果:给予贞芪扶正胶囊组大鼠CYP2E1的酶活性明显低于对照组,探针药物氯唑沙宗的t1/2显著延长;CYP1A2、CYP3A4的的水平没有显著变化。结论:贞芪扶正胶囊对大鼠CYP2E1有抑制作用,对大鼠CYP1A2、CYP3A4的影响不显著。     

粗叶悬钩子总生物碱对急性肝损伤大鼠肝组织CYP2E1与CYP3A1酶mRNA表达的影响

目的 研究粗叶悬钩子总生物碱对肝药物代谢酶CYP2E1和CYP3A1 mRNA表达的影响。     

制何首乌对大鼠肝CYP1A2酶活性及mRNA表达的抑制作用

目的:考察制何首乌水提物对大鼠肝细胞色素P450酶亚型CYP1A2的酶活性及mRNA表达的影响。方法:水回流提取得制何首乌水提物,HPLC确定主要成分并测定其含量。大鼠随机分为空白对照组、制何首乌水提物组(2 g/kg和20g/kg),给药组每天按10 m L/kg量灌胃给予制何首乌水提物,连续7 d。取肝分离肝微粒体,HPLC测定肝微粒体对CYP1A2酶的底物非那西丁的代谢消除率,考察肝微粒体CYP1A2酶活性;实时荧光定量PCR技术检测肝组织中CYP1A2基因mRNA的表达。结果:与空白对照组相比,制何首乌水提物20 g/kg组大鼠肝CYP1A2酶活性和mRNA的表达均明显降低(CYP1A2酶活性,P0.01;CYP1A2的mRNA表达,P0.05)。结论:制何首乌水提物20 g/kg对大鼠肝CYP1A2酶活性和mRNA的表达有明显抑制作用。     

丹参和山楂提取物含药血清对胆固醇代谢的影响

目的研究丹参和山楂提取物的调脂作用机制及其相互作用。方法以正交设计L16(215)制备丹参和山楂提取物的含药血清,采用两性霉素B细胞模型和RT-PCR方法,观察含药血清对中国仓鼠卵巢(CHO)细胞内源性胆固醇合成和BRL肝细胞胆固醇7α-羟化酶(CYP7A)mRNA表达的影响。结果丹参75%乙醇提取物和丹参氨水提取物在两性霉素B细胞模型实验中均能明显增加吸光度(A)值,同时亦能明显增加BRL肝细胞CYP7AmRNA表达,而单独应用山楂各提取物对胆固醇代谢未见直接的作用,但对丹参各提取物有协同作用。结论丹参提取物能够通过抑制内源性胆固醇合成和增加CYP7AmRNA表达发挥调血脂作用,而山楂提取物和丹参提取物合用可产生有益的协同作用。     

大黄灵仙胶囊降低胆石症术后残石率及复发率疗效观察

目的:观察大黄灵仙胶囊降低胆石症术后残石率及复发率的临床疗效。方法:对136例胆石症手术患者临床治疗和追踪观察1年,患者现代医学处理原则一致,治疗组68例在围手术期及手术后3月口服大黄灵仙胶囊,对照组68例不服中药。结果:治疗组痊愈48例,显效12例,好转7例,无效1例,总有效率98.5％;对照组痊愈36例,显效20例,好转5例,无效7例,总有效率89.7％。2组疗效比较,差异有显著性意义（P<0.05）,治疗组优于对照组。1年内残留结石或结石复发率分别为治疗组29.4％（20/68）和对照组47.1％（32/68）,2组差异有显著性意义（P<0.05）,治疗组术后残留结石或结石复发率明显低于对照组。结论:大黄灵仙胶囊可降低胆石症术后残石率及复发率,提高胆石症手术疗效。     

地龙胶囊对哮喘豚鼠肺组织C-JUNmRNA表达的影响

目的:探讨地龙胶囊治疗哮喘的疗效机理.方法:用原位杂交方法检测不同实验组豚鼠肺组织的C-JUN mRNA的表达.结果:哮喘组豚鼠肺组织的C-JUNmRNA呈高表达,尤其是在哮喘激发后24h表达最明显.而其他三组表达不明显.结论:地龙胶囊可以通过改善C-JUNmRNA的表达治疗哮喘.     

平喘宁对哮喘豚鼠肺组织中GM-CSF mRNA表达的影响

目的:探讨平喘宁治疗哮喘的分子作用机理.方法:采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法半定量分析哮喘豚鼠肺组织中GM-CSF mRNA表达水平的变化.结果:哮喘模型组GM-CSF mRNA表达水平比空白对照组显著増高,P＜0.01;经平喘宁大、中、小剂量治疗后,GM-CSF mRNA表达水平减低(P＜0.01,P＜0.05).结论:平喘宁能降低哮喘豚鼠肺组织GM-CSF mRNA表达水平,发挥治疗哮喘的作用.     

消脂护肝胶囊对非酒精性脂肪肝大鼠病理及CYP2E1基因的影响

目的：研究消脂护肝胶囊对非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）大鼠模型肝脏病理和肝细胞色素P4502E1（CYP2E1）基因表达的影响。方法：32只SD大鼠随机分为空白组、模型组、观察组和对照组4组,后3组以高脂饲料联合四环素腹腔注射建立NAFLD模型,造模1周后分别给予消脂护肝胶囊和东宝肝泰片治疗。实验结束时观察各组肝匀浆游离脂肪酸（FFA）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）含量、肝脏病理及肝组织CYP2E1 mRNA表达情况（RT-PCR法）的变化。结果：观察组肝匀浆FFA、MDA含量降低,SOD增加,肝脂肪变性程度减轻,CYP2E1 mRNA表达减少,效果优于东宝肝泰对照组。结论：消脂护肝胶囊能够显著抑制CYP2E1 mRNA表达,阻止脂质过氧化反应,从而发挥防治NAFLD的作用。     

扶正平喘汤对过敏性哮喘豚鼠NO、ET-1的影响

目的探讨扶正平喘汤防治过敏性哮喘的机制。方法将40只豚鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、地塞米松组、扶正平喘汤组,用鸡卵清蛋白雾化激发制成哮喘模型。地塞米松组与扶正平喘汤组分别于激发前3d给药,至激发后3d停药。用计数板计数外周血嗜酸性细胞(EOS)数量,观察小支气管形态学改变和肺组织中EOS浸润情况;生化法和放免法测定血清和肺泡灌洗液(BALF)中一氧化氮(NO)和内皮素-1(ET-1)的含量。结果扶正平喘汤可明显改善模型豚鼠小支气管损伤情况,减轻外周血和肺组织的EOS浸润程度,降低血清和BALF中NO的含量,降低BALF中ET-1的含量。结论扶正平喘汤可能通过减轻EOS浸润、调节机体NO和ET-1产生,对过敏性哮喘发挥预防和治疗作用。     

大黄(庶虫)虫丸对肝纤维化大鼠肝组织AT1R及其mRNA表达的影响

肝纤维化是各种慢性肝病共同的病理学基础,是诸多慢性肝病向肝硬化甚至肝癌发展的必经阶段,其核心环节是肝星状细胞(HSC)的活化并向肌成纤维样细胞和成纤维细胞的转化,阻断或逆转肝纤维化是治疗各种慢性肝病的关键.     

扶正平喘汤对过敏性哮喘豚鼠NO、ET-1的影响术

目的探讨扶正平喘汤防治过敏性哮喘的机制。方法将40只豚鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、地塞米松组、扶正平喘汤组，用鸡卵清蛋白雾化激发制成哮喘模型。地塞米松组与扶正平喘汤组分别于激发前3d给药，至激发后3d停药。用计数板计数外周血嗜酸性细胞（EOS）数量，观察小支气管形态学改变和肺组织中EOS浸润情况；生化法和放免法测定血清和肺泡灌洗液（BALF）中一氧化氮（NO）和内皮素-1（ET-1）的含量。结果扶正平喘汤可明显改善模型豚鼠小支气管损伤情况，减轻外周血和肺组织的EOS浸润程度，降低血清和BALF中NO的含量，降低BALF中ET-1的含量。结论扶正平喘汤可能通过减轻EOS浸润、调节机体NO和ET-1产生，对过敏性哮喘发挥预防和治疗作用。     

救心胶囊对缺氧及LDL损伤人脐静脉内皮细胞PAI-1mRNA表达的影响

[目的]观察救心胶囊通过抑制损伤人脐静脉内皮细胞纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)mRNA的表达,保护内皮细胞功能。[方法]通过建立缺氧及低密度脂蛋白(LDL)损伤内皮细胞模型,并以载药血清为给药方式,运用细胞原位杂交技术检测PAI-1mRNA的表达。[结果]内皮细胞损伤后PAI-1mRNA阳性率明显增加,救心胶囊显著降低其表达。[结论]救心胶囊保护内皮细胞,参与血液凝固性调节,防止冠状动脉粥样硬化继发血栓形成。     

鼻敏康颗粒对变应性鼻炎豚鼠IL-4mRNA基因表达水平的影响

以变应性鼻炎豚鼠为模型，观察到鼻敏康颗粒可明显降低变应性鼻炎豚鼠鼻黏膜组织中IL-4mRNA基因表达水平，与中、西对照药比较有明显差异（P〈0．01）。