化疗并中药斑蝥酸钠治疗前后MMP-2表达水平与卵巢癌转移的关系

任何肿瘤的生长和转移都依赖血管生成,新生血管形成需要细胞外基质(ECM)的降解和重建,基质金属蛋白酶(matrix metal-loproteinases,MMPS)在破坏ECM中起主要作用[1],并发现在多种肿瘤组织MMP-2、MMP-9有表达[2]。但外周血中的MMPS表达少见报道。新辅助化疗是卵巢癌综合治疗的重要组成部分,术前主要通过抑制肿瘤细胞增殖、杀灭肿瘤细胞,从而缩小肿瘤体积,降低肿瘤分期、分级。了解卵巢癌对化学药物的敏感性,有     

筋骨草提取物抑制乳腺癌转移与MMPs和TIMPs 表达的关系研究

目的:探讨筋骨草提取物(HBG)对乳腺癌及转移的抑制作用,及其对与乳腺癌侵袭和转移密切相关的基质金属蛋白酶及其抑制物的影响.方法:采用小鼠乳腺癌细胞株4T1原位接种制作乳腺癌自发转移模型,给予50～200 mg· kg-1HBG后评价各组肿瘤生长和肺转移情况;并用免疫印迹法测定肿瘤原位灶和转移灶MMP-2/9,TIMP-1/2的表达水平.结果:50 ～200 mg·kg-1HBG呈剂量依赖性抑制乳腺癌生长和肺转移;下调MMP-2和MMP-9的表达;上调TIMP-1和TIMP-2表达.结论:筋骨草提取物通过调节乳腺癌细胞MMPs和TIMPs的表达而发挥抗乳腺癌及其转移的作用.     

血清VEGF、MMP-9水平在恶性肿瘤患者中的临床意义及中药对VEGF和MMPs的影响

目的:探讨血清中VEGF、MMP-9水平在判断肿瘤侵袭、转移、预后过程中的作用,以及中药对VEGF和MMPs的影响。方法:查阅近期文献,对血清VEGF、MMP-9水平在肿瘤诊治过程中的意义进行了思考和探讨。结论:血清VEGF、MMP-9水平在肿瘤诊治和预后判断过程中的作用有待进一步研究,中药可能通过抑制肿瘤血管的生成和细胞外基质、基底膜的降解破坏抑制肿瘤的侵袭、转移。     

丁香茄生物碱对人非小细胞肺癌体外作用及其机制研究

目的研究丁香茄生物碱对人非小细胞肺癌A549抗肿瘤转移作用及其机制。方法采用MTT法检测丁香茄生物碱对非小细胞肺癌A549细胞毒活性;划痕实验和Transwell细胞侵袭实验检测药物对肿瘤细胞体外迁移和侵袭作用的影响;ELISA法检测药物对细胞金属基质蛋白酶2(MMP-2)、金属基质蛋白酶9(MMP-9)表达的变化。结果丁香茄生物碱可显著抑制肿瘤细胞的增殖(P0.05);抑制A549细胞的迁移和侵袭,高剂量抑制率为63.4%;与对照组比较,丁香茄生物碱组MMP-2、MMP-9蛋白表达显著降低(P0.05,P0.01)。结论丁香茄生物碱可对人非小细胞肺癌A549增殖,抑制肿瘤细胞侵袭,其作用机制可能与抑制MMP-2、MMP-9蛋白表达有关。     

益胃饮对小鼠移植性前胃癌术后复发转移及MMP-9、BCL-2、VEGF的影响

目的:研究益胃饮治疗胃癌的可能作用机制,为临床应用益胃饮治疗胃癌提供理论依据。方法:①动物试验:通过建立小鼠肺转移瘤模型,研究益胃饮灌胃给药对615小鼠肺转移瘤形成与生长的影响;②免疫组化试验:通过对小鼠肿瘤标本免疫组织化学染色分析,研究益胃饮对肿瘤组织血管内皮生长因子(VEGF)、细胞黏附分子变异体6(CD44v6)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(BCL-2)表达的影响;③酶联免疫吸附试验:通过对小鼠血清酶联免疫吸附试验检测,研究益胃饮灌胃给药对荷瘤小鼠血清VEGF、MMP-9表达水平的影响。结果:益胃饮可抑制小鼠肺转移瘤的形成与转移,并抑制肿瘤组织表达VEGF、MMP-9和BCL-2,下调荷瘤小鼠血清VEGF、MMP-9表达水平。结论:益胃饮具有抑制胃癌细胞复发及肺转移作用,其分子机制可能是益胃饮抑制了MMP-9、BCL-2及VEGF的表达。     

大黄素抑制体内外胰腺癌转移的实验研究

目的:探讨大黄素抑制体内外胰腺癌转移的作用及其机制.方法:不同浓度大黄素(10,20,40μmol·L-1)作用人胰腺癌细胞株SW1990 2 h后,观察大黄素对SW1990细胞迁移和侵袭的作用;不同浓度大黄素(10,20,40 μmol·L-1)作用SW1990细胞48 h后,Western blot印迹检测胰腺癌细胞中NF-kB和MMP-9表达的变化;建立胰腺癌原位移植模型,分成对照组、大黄素低、高剂量组(20,40 mg·kg-1),实验结束后观察大黄素对裸鼠胰腺癌转移的抑制作用;免疫组织化学法检测裸鼠胰腺肿瘤组织中CD34,NF-kB,MMP-9的阳性表达.结果:大黄素可抑制体外人胰腺癌SW1990细胞迁移和侵袭,呈浓度依赖性;大黄素可下调人胰腺癌SW1990细胞中NF-kB和MMP-9的表达水平;与对照组相比较,大黄素低、高剂量均可明显抑制瘤荷裸鼠中胰腺癌转移,并下调CD34,NF-kB和MMP-9在胰腺肿瘤组织中的阳性表达(P＜0.05).结论:大黄素可抑制体内外胰腺癌转移,该作用可能通过下调NF-kB和MMP-9表达而实现.     

脑疏宁对创伤性脑损伤大鼠脑组织MMP-2/9表达的影响

目的:观察中药脑疏宁对创伤性脑损伤大鼠基质金属蛋白酶基质金属蛋白酶(MMPs)表达的影响。方法:采用免疫组化方法检测脑组织MMPs蛋白的表达,测定脑组织含水量及伊文思蓝(EB)含量,电镜下观察血脑屏障超微结构改变。结果:创伤组大鼠伤侧脑组织含水量、伊文思蓝(EB)含量及伤灶周围基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达水平均明显高于假手术组(P<0.01);血脑屏障结构破坏。脑疏宁组脑组织含水量、EB含量及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达水平均明显低于创伤组(P<0.05,P<0.01);血脑屏障结构较为完整。结论:脑疏宁可通过改善血脑屏障损伤减轻创伤性脑水肿,其保护血脑屏障的作用可能是通过抑制MMP-2和MMP-9蛋白表达实现的。     

芪参益气滴丸干预大鼠心肌梗塞后蛋白表达的动态观察

目的探讨心肌梗塞后大鼠心肌肿瘤坏死因子α表达、基质金属蛋白酶(MMPs)及基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMPs)及转化生长因子(TGF)蛋白表达。方法结扎大鼠冠状动脉前降支复制心肌梗塞模型,为心肌梗塞组。同时设假手术组,分别于术后3 d、2周、4周、8周对梗塞区心肌组织采用Western-blot法检测TNF、明胶酶(MMP-9)、TGF及TIMP-1蛋白表达。结果心肌梗塞组不同时相心肌较同期非治疗组肿瘤坏死因子α蛋白表达显著增加,呈时间依赖性;MMP-9、TIMP-1蛋白表达及TGF均较同期非治疗组明显增加。结论肿瘤坏死因子α基因过度表达与MMPs、TGF蛋白表达增加及其活性增强变化相一致,心肌肿瘤坏死因子α表达增加可能是心肌梗塞后心肌间质重塑和心力衰竭发生发展的重要机制之一。     

魟鱼软骨多糖对Lewis肺癌VEGF MMP-2和MMP-9蛋白表达的影响

目的探讨魟鱼软骨多糖(RCG)对Lewis肺癌血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达的影响。方法:接种Lewis肺癌细胞,复制肺癌移植瘤模型;将实验分为生理盐水(Saline)组、不同剂量魟鱼软骨多糖(RCG)组、环磷酰胺(CTX)组,给药后观察肿瘤生长情况,计算肿瘤抑制率和肺转移瘤灶数目;采用Westernblot检测瘤组织中VEGF、MMP-2和MMP-9的蛋白表达。结果:与生理盐水组比较,魟鱼软骨多糖各剂量组对肿瘤的抑制率和肺转移数都具有显著性差异(P<0.05;P<0.01);与生理盐水比较,该多糖各剂量组对VEGF、MMP-2和MMP-9的蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。结论:魟鱼软骨多糖明显抑制小鼠Lewis肺癌原发瘤的生长和转移,可能与其抑制肿瘤VEGF、MMP-2和MMP-9蛋白的表达有关。     

基于MMP-2、MMP-9探讨胃肠安方及其拆方抑制人胃癌裸鼠原位移植瘤生长及转移的部分配伍机制

目的通过体内研究探讨胃肠安方及其不同功效组成药物拆方对胃癌裸鼠原位移植瘤生长及转移作用效果及其配伍规律。方法将胃肠安方按其功效拆分为健脾理气、清热解毒、软坚散结三大组成部分,采用2×2×2析因实验设计方案,建立裸小鼠人胃癌原位移植模型。观察胃肠安方不同功效组成药物抑制胃癌生长及转移作用效果及其之间是否存在交互作用。结果①胃肠安方全方组及健脾理气组、软坚散结组、健脾清热组的抑瘤率分别为28.5%、24.6%、28.8%及30.2%,与模型组瘤重比较明显下降,差异有统计学意义(P0.05);软坚散结因素在抑制瘤重方面具有主效应,健脾理气及软坚散结因素存在交互作用。②胃肠安全方组、清热解毒组、健脾清热组的转移率分别为22.22%、10.00%、18.18%,与模型组75.00%比较,能明显降低裸鼠胃肿瘤的转移率(P0.05)。③胃肠安全方组及其不同治则拆方配伍各组中除软坚散结组外,均能抑制MMP-2蛋白表达,尤其以健脾理气组及全方组作用最为明显(P0.05);健脾组、健脾清热组及全方组对MMP-9蛋白表达抑制作用最为明显(P0.05)。析因分析结果显示,在软坚散结因素存在时,健脾理气因素与清热解毒因素在下调MMP-2蛋白表达方面具有协同作用。胃肠安方及其拆方对裸鼠胃肿瘤组织MMP-2基因表达具有不同程度的抑制作用,以全方组、健脾软坚组、清热软坚组作用最为明显(P0.01)。析因分析结果显示,健脾理气与清热解毒及清热解毒与软坚散结组之间对MMP-2的基因表达抑制具有相互交互作用。全方组、健脾软坚组对裸鼠胃肿瘤组织MMP-9 mRNA表达抑制作用明显(P0.01),健脾理气与清热解毒及健脾理气与软坚散结组对MMP-9 mRNA表达抑制具有相互交互作用。胃肠安方全方组及健脾理气组明显抑制裸鼠胃肿瘤组织MMP-2及MMP-9的活性(P0.01),析因分析结果显示,在清热解毒因素存在时,健脾理气与软坚散结因素在抑制MMP-2及MMP-9活性方面具有协同作用,而在缺乏清热解毒因素时,健脾理气与软坚散结因素在抑制MMP-2及MMP-9活性方面存在拮抗作用。结论胃肠安方全方组、清热解毒组、健脾清热组能明显抑制胃癌的生长和转移,清热解毒组抑制胃癌转移效果最为明显,健脾理气因素抑制瘤重主效应具有显著性,健脾理气及软坚散结因素在抑制瘤重方面存在交互作用;析因分析结果显示,在软坚散结因素存在的情况下,健脾理气和清热解毒因素对下调MMP-2蛋白表达具有协同作用,在软坚散结因素缺乏时,健脾理气和清热解毒因素对下调MMP-2蛋白表达具有拮抗作用。在清热解毒因素存在的情况下,健脾理气和软坚因素对抑制MMP-2和MMP-9活性具有协同作用,在清热解毒因素缺乏时,健脾理气和软坚因素对抑制MMP-2和MMP-9活性存在拮抗作用。     

宫颈鳞癌组织中MMP-9和VEGF的表达与微血管密度相关性研究

目的探讨金属蛋白酶-9(MMP-9)和血管内皮生长因子(VEGF)在宫颈上皮内瘤样病变(CIN)和宫颈鳞癌中的表达及其相关性。方法选择手术切除的宫颈鳞癌组织标本47份作为肿瘤组,宫颈上皮内瘤样病变(CIN)标本35份作为CIN组,正常宫颈组织(NCE)21份作为NCE组,采用免疫组化SP法检测各组MMP-9和VECF的表达和微血管密度(MVD)(CD34标记)。结果肿瘤组、CIN组中MMP-9和VEGF阳性率和MVD值均明显高于NCE组(P<0.05),肿瘤组明显高于CIN组(P<0.05);MMP-9和VEGF阳性表达均与肿瘤组的临床分期、组织分化程度、有无淋巴结转移相关,并且在宫颈鳞癌组织中两者表达呈正相关;肿瘤组中MMP-9和VEG;F阳性者的MVD值明显高于其阴性者(P<0.05),MMP-9和VEGF的表达与MVD值存在显著性差异(P<0.05)。结论 MMP-9和VEGF在宫颈鳞癌发生、发展中可能起重要作用,MMP-9和VEGF及MVD值与宫颈鳞癌的浸润转移密切相关,可作为预后的判断指标。     

电针配合威灵仙关节腔内注射对大鼠膝骨关节炎MMPs及HA的影响

目的探讨电针配合威灵仙膝关节腔内注射对大鼠膝骨关节炎基质金属蛋白酶(MMPs)及关节液透明质酸(HA)影响的作用机制。方法将40只大鼠随机分为对照组、电针组、关节腔注射组、电针+关节腔注射组,采用膝关节腔内注射弗氏剂的方法建立膝骨关节炎动物模型;电针组取三阴交、足三里、行间、血海、太冲、阳陵泉及主穴以下旁开0.5 cm为配穴电针刺激20 min,关节腔注射组于关节腔内注射威灵仙注射液;电针+关节腔注射组治疗方法为电针+关节腔注射;观察膝关节肿胀率及消肿时间,采用酶免疫吸附试验测定血清MMPs(MMP-1、MMP-2、MMP-3、MMP-9、MMP-13)阳性表达水平,关节腔积液中白介素(IL-1β)、HA含量。结果与电针组及关节腔注射组比较,电针+关节腔注射组膝关节肿胀率、消肿时间、MMP-1、MMP-9表达水平明显降低,HA明显提高(P0.05)。结论电针配合威灵仙膝关节腔内注射治疗大鼠膝骨关节炎的作用机制可能与抑制MMPs过度表达并增加HA分泌而促进局部炎症吸收,延缓关节软骨退行性变相关。     

骨肉瘤中基质金属蛋白酶-2,VEGF的表达及微血管密度之间的关系

目的:探讨基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及血管内皮因子(VEGF)在骨肉瘤中的表达及其与微血管密度(MVD)的关系从而了解其在肿瘤转移、复发中的作用.方法:采用免疫组化中间接法及链霉菌抗生物素-过氧化物酶(SP)法检测了96例骨肉瘤.使用半定量分析法判定MMP-2和VEGF的表达结果.MVD由检测CD34的表达而间接反映.结果:高MVD组中VEGF阳性表达率明显高于低MVD组,而两组MMP-2的表达无显著差异.MMP-2在骨肉瘤组织中的阳性表达率与正常对照组无显著差异.初发与复发组、转移与无转移组MMP-2阳性表达率无显著差异.结论:MMP-2不能作为评定骨肉瘤术后是否复发与是否出现早期转移的指标.而VEGF与MVD均能作为评定预后的指标.     

基质金属蛋白酶-9在胃癌中的表达及意义

目的探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达在胃癌发生、发展及转移中的作用。方法应用流式细胞术检测54例胃癌标本中MMP-9的表达。结果 MMP-9在胃癌组织中的表达量明显高于正常胃黏膜组织,在不同分化程度、不同浸润深度、有无淋巴结转移的胃癌组织之间MMP-9表达均有显著性差异(P均<0.05)。结论胃癌组织中MMP-9高表达,MMP-9在胃癌发展中起重要作用。     

OPN和MMP-9在胆管癌细胞侵袭转移中的作用

目的探讨骨桥蛋白(OPN)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在胆管癌细胞侵袭转移中的作用。方法应用免疫组化SP法检测OPN和MMP-9在60例胆管癌和30例正常胆管组织中的表达情况,通过两者与胆管癌临床病理特征的关系了解其在胆管癌细胞侵袭转移中的作用,并分析两者相关性。结果 OPN在胆管癌、正常胆管组织中阳性表达率分别是65.0%(39/60),26.7%(8/30);MMP-9在胆管癌、正常胆管组织中阳性表达率分别是71.7%(43/60)和33.3%(10/30);OPN和MMP-9在胆管癌组织表达阳性率均明显高于在正常胆管组织,且与肿瘤浸润、淋巴结转移显著相关(P0.05);Spearman相关分析显示OPN、MMP-9在胆管癌组织中阳性表达呈正相关性(r=0.319,P=0.012)。结论 OPN和MMP-9在胆管癌组织中高表达,与肿瘤浸润、淋巴结转移密切相关,可能在胆管癌的侵袭转移中发挥了协同作用,可作为胆管癌重要的生物学参考指标。     

大黄素抑制胰腺癌裸鼠原位移植瘤的实验研究

目的:观察大黄素(Emodin)对胰腺癌裸鼠原位移植瘤生长、转移的抑制作用并探讨其机制。方法:建立胰腺癌裸鼠原位移植瘤模型(SOI),随机分为对照组、实验Ⅰ组、实验Ⅱ组等3组(n=10),第3周开始分别经灌胃给予溶媒(0.1%二甲基亚砜)0.2mL/只、大黄素20mg/kg、大黄素40mg/kg,每周3次,共两周。术后第8周处死裸鼠,测量原位肿瘤瘤重并计算抑瘤率;观察荷瘤裸鼠肿瘤转移情况;免疫组织化学法检测肿瘤组织的增殖指数(PI)、微血管密度(MVD)以及金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达。结果:与对照组相比,实验Ⅰ组肿瘤生长未受明显抑制,但转移明显被抑制;实验Ⅱ组肿瘤生长和转移均受显著抑制;实验Ⅰ、Ⅱ组肿瘤组织中PI、MVD及MMP-9的表达均明显降低。结论:大黄素具有抑制胰腺癌裸鼠原位移植瘤生长和转移的作用,这可能是通过抑制胰腺肿瘤MMP-9的表达而实现。     

苦参碱对小鼠Lewis肺癌的影响

目的 研究苦参碱对小鼠Lewis肺癌的作用,并初步探讨其作用机制.方法 建立小鼠Lewis肺癌模型,实验分为模型组、不同剂量苦参碱组、环磷酰胺组,计算原发瘤抑制率及肺转移灶数;采用Western blotting检测原发瘤组织基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-9)蛋白表达.结果 苦参碱各剂量组小鼠原发瘤抑制率、肺转移灶数与模型组比较差异显著(P<0.05、0.01);与模型组比较,苦参碱各剂量组MMP-2、MMP-9蛋白表达水平显著降低(P<0.01).结论 苦参碱明显抑制小鼠Lewis肺癌原发瘤的生长和转移,可能与其抑制肿瘤组织MMP-2和MMP-9蛋白表达有关.     

复方黄芪当归汤对MS大鼠肾损害的干预作用及其机制研究

目的:观察复方黄芪当归汤对MS大鼠肾损害的干预作用,论证其在诊治MS方面的药用价值。方法:制备大鼠代谢综合征模型,观察正常对照组、模型组、预防组、中药治疗组以及西药对照组,各组用药前后肾脏组织形态学病理改变,并观察对肾小管组织中MMPs及TIMPs的水平表达的影响。结果:(1)干预4周后,除预防组外各组大鼠的体质量均较正常对照组明显增加,差异显著(P0.05);(2)与正常对照组相比,各组大鼠MMP-2、TIMP-2、MMP-9、TIMP-1的mRNA相对表达量均显著增加,MMP-2/TIMP-2,MMP-9/TIMP-1比值均低于正常对照组(P0.05);(3)各组大鼠MMP-2、TIMP-2、MMP-9、TIMP-1的mRNA相对表达量均低于模型组,MMP-9/TIMP-1、MMP-2/TIMP-2比值均高于模型组,具有统计学差异(P0.05)。结论:(1)复方黄芪当归汤预防和治疗组能减少MS模型大鼠肾组织MMP-2、TIMP-2、MMP-9、TIMP-1的mRNA表达,并升高MMP-2/TIMP-2、MMP-9/TIMP-1比值,改善MMPs/TIMPs平衡。(2)复方黄芪当归汤预防和治疗组能减轻MS模型大鼠的肾脏损伤。     

结直肠癌患者CEA、MMP-2、MMP-9检测的临床意义

目的应用ELISA法分别检测结直肠癌患者和正常对照组血清中癌胚抗原(CEA)、基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9的表达水平,并分析其与结直肠癌临床特征的相关性。方法选取300例经术后病理确诊为结直肠癌的患者作为观察组,100例健康成人血清作为正常对照组,应用酶联免疫吸附实验检测血清中CEA、MMP-2和MMP-9的含量。结果观察组患者血清中CEA、MMP-2和MMP-9表达量显著高于对照组,CEA、MMP-2和MMP-9的表达量与肿瘤直径和Dukes分期密切相关。结论 CEA、MMP-2和MMP-9可能在结直肠癌发生发展中起重要作用;MMP-2和MMP-9可能具有协同作用。早期联合检测CEA、MMP-2和MMP-9可能对判断患者的预后及指导临床治疗有重要价值。     

VEGF-C与肿瘤淋巴转移

淋巴系统转移是大多数恶性肿瘤的主要转移途径,也是导致肿瘤患者死亡的重要因素,而新生淋巴管的形成则是肿瘤淋巴转移的必要条件.血管内皮生长因子C(Vascular endothelial growth factor-C, VEGF-C)是血管内皮生长因子(VEGF)家族的新成员,率先由人前列腺肿瘤细胞株中提纯,并克隆了其cDNA.