骨巨细胞瘤中多核巨细胞的纯化及其性质的探讨

目的 :利用酶消化方法对骨巨细胞瘤中多核巨细胞进行纯化 ,以弥补破骨细胞获取量少的问题 ,为骨质疏松的体外研究提供丰富的细胞来源。并用免疫组化的方法对骨巨细胞瘤中多核巨细胞的性质和来源进行探讨。方法 :体外分离培养 8例骨巨细胞瘤的多核巨细胞 ,在培养 2 0h后 ,用 0 .5 g·L-1胰蛋白酶 / 0 .2 g·L-1EDTA联合消化的方法去除贴壁能力较弱的单核基质细胞。将分离培养的骨巨细胞瘤多核巨细胞与牙磨片共培养 ,观察骨巨细胞中多核巨细胞的噬骨能力。并用破骨细胞特异表达的空泡型质子泵、Ⅱ型碳酸酐酶、组织蛋白酶K、基质金属蛋白酶 9对多核巨细胞进行免疫组化染色和TRAP染色。结果 :利用酶联合消化的方法可以获得较高纯度的多核巨细胞 ,纯化率达 85 %。骨巨细胞瘤中的多核巨细胞对破骨细胞所特异表达的空泡型质子泵、Ⅱ型碳酸酐酶、组织蛋白酶K、基质金属蛋白酶 9呈强阳性表达 ,TRAP染色阳性 ,体外培养具有噬骨能力。结论 :利用 0 .5 g·L-1胰蛋白酶 / 0 .2g·L-1EDTA消化的方法可获得较高纯度的多核巨细胞 ,可为破骨细胞体外研究提供丰富的细胞来源。骨巨细胞瘤中的多核巨细胞在功能表达上与破骨细胞相似 ,它可能来源于病变中圆形单核基质细胞的融合     

骨巨细胞瘤中多核巨细胞的来源

目的:研究骨巨细胞瘤中多核巨细胞的来源,探讨骨巨细胞瘤是破骨细胞或者是肿瘤细胞。方法:本次试验标本30例为解放军222医院病理科经病例证实的手术标本。采用链菌素亲生物素一过氧化物酶连接法(sp)免疫组化技术。抗体PCNA、P53、P21、CD68、AACT以及SP染色试剂均为即用型,阳性判断以细胞浆、细胞膜或细胞核着棕色颗粒为阳性反应,以缓冲液PBS代替一抗作阴性对照,确定骨巨细胞瘤中多核巨细胞的来源。结果:30例骨骨细胞瘤中的多核巨细胞均不表达PCNA、p53及c-er Bb2、有8例表达p21,其包浆课件棕褐色的阳性颗粒,所有标本中的巨细胞均呈现CD68强阳性,棕褐色的颗粒绝大多数位于细胞浆中,少数多核巨细胞呈Vimentin阳性反应,还有一部分多核巨细胞呈Lysozyme中性或阳性反应。结论:巨细胞瘤中的多核巨细胞与破骨细胞在形态学及酶组织化学与免疫组织化学与破骨细胞相似。多核巨细胞具有一定的破骨能力,由此可见,多核巨细胞是破骨细胞,属于终末细胞,而不是肿瘤细胞。     

骨巨细胞瘤中多核巨细胞的来源

目的：研究骨巨细胞瘤中多核巨细胞的来源,探讨骨巨细胞瘤是破骨细胞或者是肿瘤细胞。方法：本次试验标本30例为解放军222医院病理科经病例证实的手术标本。采用链菌素亲生物素一过氧化物酶连接法（sp）免疫组化技术。抗体 PCNA、P53、P21、CD68、AACT 以及 SP 染色试剂均为即用型,阳性判断以细胞浆、细胞膜或细胞核着棕色颗粒为阳性反应,以缓冲液 PBS 代替一抗作阴性对照,确定骨巨细胞瘤中多核巨细胞的来源。结果：30例骨骨细胞瘤中的多核巨细胞均不表达 PCNA、p53及 c －erBb2、有8例表达 p21,其包浆课件棕褐色的阳性颗粒,所有标本中的巨细胞均呈现 CD68强阳性,棕褐色的颗粒绝大多数位于细胞浆中,少数多核巨细胞呈 Vimentin 阳性反应,还有一部分多核巨细胞呈 Lysozyme 中性或阳性反应。结论：巨细胞瘤中的多核巨细胞与破骨细胞在形态学及酶组织化学与免疫组织化学与破骨细胞相似。多核巨细胞具有一定的破骨能力,由此可见,多核巨细胞是破骨细胞,属于终末细胞,而不是肿瘤细胞。     

骨巨细胞瘤Jaffe分级的PCNA评价

目的 观察骨巨细胞瘤Ｊａｆｆｅ组织分级与瘤组织增殖的关系。方法 应用免疫组化ＡＢＣ法对２７例不同组织级别的骨巨细胞瘤进行增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）检测。结果 ＰＣＮＡ的阳性反应仅见于基质细胞的胞核中，多核巨细胞呈阴性反应。不同组织级别的骨巨细胞瘤之间，ＰＣＮＡ阳性检出率无显著差别（Ｐ〉０．０５）。结论 骨巨细胞瘤Ｊａｆｆｅ分级系统与肿瘤细胞的增殖情况无关；多核巨细胞非肿瘤细胞。     

IL—1α促进骨巨细胞瘤中破骨样细胞体外骨吸收研究

目的：比较骨巨细胞瘤中的多核巨细胞与破骨细胞骨吸收的功能特点。方法：体外分离骨巨细胞瘤中的多核巨细胞与骨片共同培养，观察ＩＬ－１α对多核巨细胞体外骨吸收的影响。结果：ＩＬ－１α可使多核巨细胞骨吸收陷窝的数目和面积增加；其作用随剂量增加而增强；ＩＬ－１α对多核巨细胞的促进作用具有长效性。结论：ＩＬ－１α具有促进多核巨细胞体外骨吸收作用，说明多核巨细胞与破骨细胞在骨吸收功能方面有相似性。     

骨巨细胞瘤的超微结构

本文对5例分别属于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级的骨巨细胞瘤进行了透射电镜观察。这些肿瘤的主要细胞成分包括多核巨细胞,间质细胞和淋巴细胞。间质细胞又分为成纤维细胞样间质细胞和巨噬细胞样间质细胞两种。 作者发现在巨细胞中存在核分裂,这表明巨细胞也可通过此方式进行自我增殖。 文中描述了各种间质细胞的超微结构,指出在Ⅰ、Ⅱ级肿瘤中巨噬细胞样间质细胞和淋巴细胞常伴随出现在变性的Ⅰ型间质细胞周围,这种现象可能与人体对肿瘤的免疫功能有关。 在Ⅲ级骨巨细胞瘤巨细胞和间质细胞中可见到铰多的异形核、有丝分裂及大量的染色质间颗粒。作者认为将骨巨细胞瘤分为良、恶性两级有一定的实际意义,而观察肿瘤中各种细胞成分的分化程度和淋巴网状内皮细胞的数量和分布将有助于确定骨巨细胞瘤的分级。     

骨巨细胞瘤Jaffe分级的PCNA评价

目的观察骨巨细胞瘤Ｊａｆｆｅ组织分级与瘤细胞增殖的关系。方法应用免疫组化ＡＢＣ法对２７例不同组织级别的骨巨细胞瘤进行增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）检测。结果ＰＣＮＡ的阳性反应仅见于基质细胞的胞核中，多核巨细胞呈阴性反应。不同组织级别的骨巨细胞瘤之间，ＰＣＮＡ阳性检出率无显著差别（Ｐ＞０．０５）。结论骨巨细胞瘤Ｊａｆｆｅ分级系统与肿瘤细胞的增殖情况无关；多核巨细胞非肿瘤细胞。     

骨巨细胞瘤的细胞生物学

目的 探讨骨巨细胞瘤中多核巨细胞和单核基质细胞的起源及在肿瘤中的作用,方法 应用免疫组织化学方法检测50例骨巨细胞瘤手术标本的增殖细胞核抗原（PCNA）、巨噬细胞抗原（CD68）、波形蛋白、抗糜蛋白酶（AACT）、抗胰蛋白酶（ACT）以及溶菌酶的表达和分布状况。结果 多核巨细胞主要表达CD68、AACT、ACT以及溶菌酶,无一表达PCNA;单核基质细胞可分为两种类型,以纤维母细胞型占优势,主要表达波形蛋白和PCNA;组织细胞型主要表达CD68、AACT、ACT以及溶菌酶。结论 多核巨细胞并非肿瘤细胞,它可能来自单核巨噬细胞系统,单核基质细胞中的纤维母细胞型为肿瘤的主要增殖成分,可能来自间充质。     

IL-1α促进骨巨细胞瘤中破骨样细胞体外骨吸收研究

目的：比较骨巨细胞瘤中的多核巨细胞与破骨细胞骨吸收的功能特点。方法：体外分离骨巨细胞瘤中的多核巨细胞与骨片共同培养，观察ＩＬ１α（５０μｇ／Ｌ，１００μｇ／Ｌ）对多核巨细胞体外骨吸收的影响。结果：ＩＬ１α可使多核巨细胞骨吸收陷窝的数目和面积增加；其作用随剂量增加而增强；ＩＬ１α对多核巨细胞的促进作用具有长效性。结论：ＩＬ１α具有促进多核巨细胞体外骨吸收作用，说明多核巨细胞与破骨细胞在骨吸收功能方面有相似性。     

骨巨细胞瘤的超微结构观察

对三例分别取材于病理组织和体外培养的骨巨细胞瘤的细胞进行了透射电镜观察，电镜发现单核间质细胞有三种亚型，多核巨细胞胞浆中有大量的粗面内质网、线粒体和初、次级溶酶体，说明多核巨细胞有很高的代谢活性，Ⅰ、Ⅱ型间质细胞具有成纤维细胞的特点，Ⅲ型间质细胞具有组织细胞的特点，而多核巨细胞很可能也是构成肿瘤的主要细胞成份。     

PCNA在骨巨细胞瘤的表达及与病理分桶和复发的关系

应用免疫组织化学技术，对３２例骨巨细胞瘤进行增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的检测分析，探讨ＰＣＮＡ在骨巨细胞瘤的表达分布及与Ｊａｆｆｅ病理分级和复发的关系。结果显示，ＰＣＮＡ的阳性反应只在内巨细胞瘤波形蛋白阳性的单核基细胞的胞核中出现，而多核巨细胞均无阳性表达；ＰＣＮＡ在骨巨细胞瘤中的增殖指数虽随Ｊａｆｆｅ病理分级增高有呈递增趋势，但各级相互之间有交叉重叠现象；ＰＣＮＡ增殖指数低即低度增生的骨巨细胞瘤     

骨肿瘤增殖细胞核抗原免疫组化研究

应用增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）单克隆抗体免疫组化方法检测４０例骨肿瘤切片。结果表明，各亚型和各组织学分级的骨肉瘤和骨巨细胞瘤ＰＣＮＡ阳性率无统计学意义。骨巨细胞瘤组织中的单核基质细胞和多核巨细胞中的部分细胞核呈ＰＣＮＡ阳性，提示单核基质细胞是肿瘤性细胞，而部分多核巨细胞是由这些肿瘤性单核基质细胞融合而来。软骨肉瘤ＰＣＮＡ阳性率明显低于骨肉瘤的软骨母细胞型。     

骨巨细胞瘤内多核巨细胞的超微结构观察

本文观察了六例骨巨细胞瘤,探讨了多核巨细胞的超微結构改变,其组织发生有迹象表明由单核基质细胞融合形成的。根据形态特征、恒定存在和生物学行为综合分析,认为多核巨细胞也是骨巨细胞瘤的实质瘤细胞。     

骨巨细胞瘤中p53基因的异常

应用免疫组化及分子杂交方法研究了１０例骨巨细胞瘤及４例胎儿骨标本。大部分多核巨细胞及约２０％－４０％的单核基质细胞对抗巨噬细胞单抗标记呈阳性，胎儿骨中破骨细胞对抗巨噬细胞单抗标亦呈阳性。在抗Ｐ５３蛋白单抗染色中，３０％－６０％的ＳＴＣ标记阳性。     

骨巨细胞瘤瘤组织中M-CSF、TNF-Α的检测及其意义

目的:探讨细胞因子与骨巨细胞瘤局部溶骨的关系.方法:通过ELISA法、WESTERN BLOT法和免疫组化法对10例骨巨细胞瘤、5例骨肉瘤和5例正常人血清进行了TNF-Α和M-CSF表达及定位检测.结果:骨巨细胞瘤组织TNF-Α含量和M-CSF表达率明显高于骨肉瘤和正常人血清.TNF-Α由骨巨细胞的部分单核基质细胞和多核巨细胞分泌;而M-CSF由部分单核基质细胞分泌,多核巨细胞则不表达.结论:骨巨细胞瘤中各种细胞分泌不同的细胞因子可能参与该肿瘤的局部骨质吸收.     

骨巨细胞瘤体外原代培养及特性

目的观察骨巨细胞瘤体外培养细胞的形态生长特性及DNA倍体含量。方法取手术切取的骨巨细胞瘤新鲜标本8例,以组织培养法进行原代培养,观察细胞形态、生长曲线,FCM分析其倍体含量。结果骨巨细胞瘤原代培养种可见3种细胞;多核巨细胞可以长期培养。FCM分析显示:5例复发及2例原发病例是二倍体或亚二倍体,1例原发病例是非整倍体。结论单核梭形细胞是骨巨细胞瘤的主要肿瘤性成分;FCM无助于骨巨细胞瘤的预后判断。     

骨巨细胞瘤的p16蛋白表达特点

目的 :探讨p16蛋白表达与骨巨细胞瘤发生的关系。方法 :采用免疫组织化学S P法检测 4 2例骨巨细胞瘤的p16蛋白表达。结果 :骨巨细胞瘤的p16蛋白表达缺失率为 6 6 .7% ,p16蛋白表达随骨巨细胞瘤恶性程度的上升而降低。骨巨细胞瘤的多核巨细胞有 3种染色状态。结论 :p16蛋白表达降低与骨巨细胞瘤的发生有关 ,骨巨细胞瘤的多核巨细胞可能存在不同种类。     

骨巨细胞瘤中的多核巨细胞体外骨吸收研究

目的：比较破骨细胞与骨巨细胞瘤中多核巨细胞的特点，明确后者的性质和来源。方法：用倒置相差显微镜观察体外培养的多核巨细胞的一般形态及降钙素对它的影响；用骨片与多核巨细胞共同培养法观察多核巨细胞的体外骨吸收功能，用扫描电镜观察骨吸收陷窝，Ｇｏｍｏｒｉ染色观察多核巨细胞的酸性磷酸酶活性。结果：倒置相差显微镜下可见多核巨细胞胞核较多（２０个以上），胞浆周边不规则，有伪足样突起；胞浆内可见较多大小不等的空泡；降钙素（１００μｇ·Ｌ－１）可抑制多核巨细胞的伪足样运动；多核巨细胞与灭活的骨片共同培养时可见骨吸收陷窝形成，扫描电镜下可见吸收陷窝底面有原纤维；Ｇｏｍｏｒｉ染色时可见多核巨细胞的酸性磷酸酶呈阳性。结论：证实了多核巨细胞具有破骨细胞的形态特征与骨吸收功能，可能来源于骨髓的破骨细胞前体细胞     

骨巨细胞瘤中多核巨细胞与其它类型多核细胞的对比观察

通过电镜观察、细胞化学、间接免疫荧光和免疫组织化学方法,对12例骨巨细胞瘤中多核巨细胞(MGC)进行观察,并与破骨细胞(OC)、炎性(异物)巨细胞对比。结果表明四种细胞极为相似,均具有酸性磷酸酶、过氧化物酶、α-1-抗胰蛋白酶、α-1-1抗糜蛋白酶等,这些物质被认为是巨噬细胞标志,提示MGC起源与巨噬细胞有关,并为MGC与OC来自同一祖先提供一定证据。     

应用单抗KP1观察骨巨细胞瘤细胞成分

应用单抗ＫＰ１观察骨巨细胞瘤细胞成分胡世平，高美钦，黄健文关键词：骨巨细胞瘤；多核巨细胞单克隆抗体骨巨细胞瘤（ＧＣＴ）是我国常见的骨肿瘤之一。在组织学上常被看作良性肿瘤。但有局部复发的倾向，少数发生良性肺转移。在光镜下，ＧＣＴ包含两种细胞，既多核巨细...