青藤碱对吗啡依赖离体豚鼠回肠作用的实验研究

目的探讨青藤碱对吗啡依赖性的戒断作用及机制。方法建立豚鼠离体回肠模型,以纳络酮催促吗啡依赖性戒断收缩,观察10、50和250 μmol/L Sin及0.1 μmol/L尼莫地平在加入纳络酮前后给药对戒断性收缩的影响;观察青藤碱对乙酰胆碱引起的正常豚鼠回肠收缩的作用。结果青藤碱及尼莫地平均可抑制纳络酮催促的戒断性收缩,对乙酰胆碱引起的正常豚鼠回肠收缩也有抑制作用,青藤碱的作用呈剂量依赖趋势。结论青藤碱能够抑制吗啡依赖的戒断症状。     

千斤拔对吗啡依赖离体豚鼠回肠戒断性收缩作用的研究

[目的]观察千斤拔（大叶）水煎液对纳络酮引起的吗啡依赖离体豚鼠回肠戒断性收缩的作用,及它对乙酰胆碱引起的正常离体豚鼠回肠平滑肌收缩的影响。[方法]通过制作豚鼠离体回肠正常组标本和培养吗啡依赖离体回肠组标本,观察千斤拔水煎液对加入纳络酮（Nal）1min前后对吗啡组戒断性收缩的影响;及千斤拔水煎液对加入Ach 1min前后对正常组回肠收缩的影响。[结果]大叶千斤拔水煎液对乙酰胆碱引起的正常豚鼠回肠收缩和纳络酮引起的吗啡依赖离体豚鼠回肠戒断性收缩均有抑制作用,并且它的作用呈剂量依赖趋势。[结论]大叶千斤拔水煎液能够抑制吗啡依赖离体回肠平滑肌的戒断性收缩。     

青风藤对吗啡在离体豚鼠回肠中依赖性的作用

目的：观察青风藤（QFT）对吗啡在离体豚鼠回肠中戒断反应的影响，以及对乙酰胆碱（Ach)引起豚鼠回肠收缩的影响，评价青风藤对吗啡依赖豚鼠回肠的作用。方法：戒断性收缩由1μmol.L^-1纳络酮（Nal)加入已在含3μmol.L^-1吗啡（Mor)的37．5℃Krebs液中孵育4h的离体豚鼠回肠引起。结果：当QFT（0．04，0．2，1．0g.L^-1)在加入Nal1有后给药，Nal催促的戒断性收缩被抑制，与Mor依赖对照组相比较有显性差异（P＜0．05）；QFT（0．04，0．2，1．0g.L^-1)对Ach引起的正常豚鼠回肠收缩也有抑制作用，与Ach对照组相比较均有显性差异（P＜0．05），QFT的作用呈剂量依赖趋势。结论：青风藤能够抑制Mor依赖的戒断症状。     

褪黑素对豚鼠回肠体外吗啡依赖性的影响

目的 观察褪黑素(MT)对豚鼠体外回肠吗啡依赖性的影响。方法 以豚鼠体外回肠为实验对象，37℃孵育3h，测定纳洛酮催发引起的戒断性收缩强度，作为产生依赖性的指标。结果 豚鼠回肠标本用含吗啡(终浓度4μmol/L)的Krebs液孵育3h，纳洛酮(终浓度为4μmol／L)可催发戒断症状(特异性收缩)；MT(终浓度800μmol／L)单独孵育3h．纳洛酮不会催发戒断性收缩；急性给MT(终浓度分别为100，200，400μmol／L)或预防性给MT(终浓度分别为25，100，400μmol／L)均可剂量依赖性地减弱回肠戒断后的特异性收缩。结论 MT可抑制回肠吗啡依赖性的产生且减弱回肠的吗啡依赖戒断性反应。     

戒毒康对吗啡依赖豚鼠离体回肠戒断性收缩的影响

目的 研究戒毒康对吗啡依赖豚鼠离体回肠催促戒断反应的抑制作用。方法 连续递增皮下注射吗啡,建立豚鼠身体依赖性模型,利用MD2000 Super Lab 生物信息采集系统观察戒毒康对纳洛酮催促诱发吗啡身体依赖性豚鼠离体回肠的戒断性收缩的抑制作用。结果 戒毒康高(0.6 mg·mL^-1)、中(0.3 mg·mL^-1)、低(0.15 mg·mL^-1)3个剂量对吗啡依赖豚鼠离体回肠纳洛酮催促戒断性收缩的抑制率分别为：78.8%,46.8%,30.0%,并呈剂量相关性,其中高剂量组和中剂量组与模型组比较,有显著性差异。结论 戒毒康在一定程度上能抑制吗啡依赖豚鼠离体回肠体外纳洛酮催促戒断性收缩。     

吗啡长时程作用对新生鼠TM神经细胞cAMP和cGMP的影响以及青藤碱的干预作用

目的观察体外原代培养的新生鼠下丘脑结节乳头核（TM）神经细胞在吗啡长时程作用下胞内cAMP及cGMP水平的变化以及青藤碱对它的影响。方法采用原代培养7d的TM神经细胞，加入含100μmol／L吗啡的培养液培养48h，形成类吗啡依赖神经细胞，经100μmol／L纳洛酮戒断后，用EIA法测定细胞内cAMP和cGMP含量。不同剂量的组胺或青藤碱存纳洛戒成断前30min作用于细胞，同时测定药物对正常TM细胞内cAMP和cGMP水平的影响。结果以100μmol／L吗啡作用于新生鼠TM细胞48h后，胞内cAMP及cGMP含量明显升高，经100μmol／L纳洛酮戒断后．胞内cAMP含量出现反弹性超高现象，而cGMP含量则明显下降，cAMP与cGMP比值明显增大。30、100μmol／L青藤碱及40μmol／L组胺对正常TM神经细胞的cAMP及cGMP含量无明显影响，300μmol／L青藤碱及80μmol/L组胺可使正常细胞内cAMP含量明显升高。三个剂量的青藤碱及40μmol／L组胺预先作用可明显降低吗啡依赖的TM细胞经纳洛酮戒断时的cAMP超高水平，同时明显升高cGMP水平，使细胞内增大的cAMP与cGMP比值减小。结论在吗啡（100μmol／L）长时程（48h）作用下，TM神经细胞内cAMP及cGMP水平发生了明显的变化，中枢组胺能神经系统可能参与了吗啡依赖的形成与戒断过程，青藤碱可显著降低吗啡依赖细胞戒断时的cAMP超高水平，同时升高cGMP水平，使两者比值趋于正常。     

吗啡长时程作用对新生鼠TM神经细胞cAMP和cGMP的影响以及青藤碱的干预作用

目的观察体外原代培养的新生鼠下丘脑结节乳头核(TM)神经细胞在吗啡长时程作用下胞内cAMP及cGMP水平的变化以及青藤碱对它的影响。方法采用原代培养7d的TM神经细胞,加入含100μmol/L吗啡的培养液培养48h,形成类吗啡依赖神经细胞,经100μmol/L纳洛酮戒断后,用EIA法测定细胞内cAMP和cGMP含量。不同剂量的组胺或青藤碱在纳洛酮戒断前30min作用于细胞,同时测定药物对正常TM细胞内cAMP和cGMP水平的影响。结果以100μmol/L吗啡作用于新生鼠TM细胞48h后,胞内cAMP及cGMP含量明显升高,经100μmol/L纳洛酮戒断后,胞内cAMP含量出现反弹性超高现象,而cGMP含量则明显下降,cAMP与cGMP比值明显增大。30、100μmol/L青藤碱及40μmol/L组胺对正常TM神经细胞的cAMP及cGMP含量无明显影响,300μmol/L青藤碱及80μmol/L组胺可使正常细胞内cAMP含量明显升高。三个剂量的青藤碱及40μmol/L组胺预先作用可明显降低吗啡依赖的TM细胞经纳洛酮戒断时的cAMP超高水平,同时明显升高cGMP水平,使细胞内增大的cAMP与cGMP比值减小。结论在吗啡(100μmol/L)长时程(48h)作用下,TM神经细胞内cAMP及cGMP水平发生了明显的变化,中枢组胺能神经系统可能参与了吗啡依赖的形成与戒断过程。青藤碱可显著降低吗啡依赖细胞戒断时的cAMP超高水平,同时升高cGMP水平,使两者比值趋于正常。     

三七总皂甙对吗啡戒断大鼠海马磷酸化CREB蛋白表达及CREB/DNA结合活性的影响

目的:研究三七总皂甙(PNS)对吗啡依赖及纳络酮催促戒断大鼠海马组织CREB,pCREB蛋白表达及CREB/DNA结合活性的影响,探讨PNS抑制吗啡戒断症状的作用机制. 方法:应用剂量递增法皮下注射盐酸吗啡建立吗啡躯体依赖模型,采用腹腔注射纳络酮建立催促戒断模型,大鼠在给予吗啡的同时,采用4种不同剂量PNS进行灌胃. 采用Western blot和电泳迁移率改变分析法(EMSA)分别观察PNS对吗啡依赖及戒断大鼠海马组织总CREB,pCREB蛋白表达及CREB/DNA结合活性的影响. 结果:①不同剂量PNS组、吗啡成瘾(MOR)组及纳络酮催促戒断(NAL)组大鼠海马组织总CREB蛋白表达与对照组相比无显著性差异(P>0.05);②MOR组pCREB蛋白表达及CREB/DNA结合活性数值略高于对照组(P>0.05),NAL组pCREB蛋白表达及CREB/DNA结合活性数值明显高于对照组和MOR组(P<0.01);③PNS可以剂量依赖性的抑制纳络酮催促戒断所引起的pCREB蛋白表达增高和CREB/DNA结合活性的增强. 结论:PNS可以剂量依赖的抑制吗啡成瘾及纳络酮催促戒断诱导的大鼠海马组织CREB磷酸化和CREB/DNA结合活性的增强.     

三七总皂甙对吗啡戒断大鼠海马神经细胞内游离钙的影响

目的 研究三七总皂甙(panax notoginseng saponins,PNS)对吗啡戒断大鼠海马神经细胞内[Ca2+]i的影响,探讨PNS缓解吗啡戒断症状的可能机制.方法 应用剂量递增法大鼠皮下注射吗啡及腹腔注射纳络酮建立吗啡躯体依赖及催促戒断模型.在给予吗啡的同时分别以PNS 100、200、400 mg/kg对大鼠灌胃,记数大鼠的体质量变化和跳跃次数以确定模型建立是否成功,采用流式细胞术测定其海马神经细胞内[Ca2+]i浓度.结果 ①PNS呈剂量依赖性抑制戒断大鼠体质量减轻和跳跃的发生,②慢性吗啡作用可以使海马神经细胞内[Ca"]i明显升高;纳络酮可迅速下词这种异常增高的[Ca2+]i;PNS则可增加纳络酮催促戒断大鼠海马神经细胞内[Ca2+]i,且呈剂量依赖性.结论 PNS可能通过调节神经细胞内[Ca2+]i,抑制吗啡依赖大鼠催促戒断症状的发生.     

大鼠对尼美舒利的依赖性实验研究

报道了大鼠对尼美舒利与吗啡、苯巴比妥的依赖性研究。结果表明，用尼美舒利处理的大鼠，突然停药或给予纳络酮未观察到戒断症状；吗啡组大鼠突然停药或用纳络酮诱导，可观察到明显的戒断症状；苯巴比妥处理大鼠突然停药后，也可观察到戒断症状；对于吗啡和苯巴比妥依赖的大鼠，尼美舒利没有替代作用。     

腹侧被盖区微注射MK-801对大鼠吗啡戒断症状的影响

目的：研究中脑一边缘多巴胺回路腹侧被盖区(VTA)内源性谷氨酸信号转导在吗啡戒断形成中的作用．方法：给VTA微注射不同剂量谷氨酸NMDA受体拮抗剂( )MK-801,用行为学方法观察对吗啡戒断大鼠戒断症状的影响．递增量吗啡ip7d建立依赖模型,末次给药1．5hip盐酸纳洛酮(2mg／kg)诱发戒断症状,以Gellert-Hohzman Score和湿狗样颤为评价戒断症状程度的指标,进行统计学分析．结果：( )MK-801(2,5,10g／L)微注射于VTA可明显减弱吗啡戒断大鼠湿狗样颤的发生次数,且能显著降低吗啡戒断鼠的Gellert-Holtzman Score．结论：VTA内源性谷氨酸受体及其与中脑一边缘多巴胺能信号转导相互作用,参与吗啡戒断的形成,提示谷氨酸受体拮抗剂可用于吗啡戒断的治疗。     

PI-3K信号通路在吗啡依赖纳洛酮激发戒断反应中的作用

目的：研究PI-3K信号通路在吗啡依赖纳洛酮激发戒断反应中的作用。方法：在小鼠急性和慢性吗啡依赖和戒断模型上,采用鞘内和脑室内注射PI-3K抑制剂对吗啡依赖小鼠纳洛酮催促戒断反应的影响,探讨神经元PI-3K信号通路吗啡依赖和戒断过程中的作用。结果：鞘内预先注射PI-3K信号通路抑制剂LY294002及Wortmanin能明显加重急性和慢性吗啡依赖小鼠纳洛酮激发戒断反应。脑窜内预先注射PI-3K信号通路抑制剂LY294002及Wortmanin也明显加重急性和慢性吗啡依赖小鼠纳洛酮激发戒断反应。结论：脊髓和脊髓上中枢神经元PI-3K信号通路均参与吗啡依赖的形成及戒断反应的表达。     

两种吗啡依赖模型大鼠脑内单胺神经递质的变化以及青藤碱的调节作用

目的 探讨吗啡依赖大鼠催促戒断模型与条件性位置偏爱模型大鼠脑内单胺类递质的变化以及中药活性成分青藤碱对其的影响.方法 采用剂量递增法复制吗啡依赖大鼠模型,经纳洛酮催促,引发躯体戒断症状.连续给予吗啡(5 mg/kg,sc)6d,采用倾向性训练程序训练大鼠,建立大鼠条件性位置偏爱模型.两个模型分别给予青藤碱低、高两个剂量(30 mg/kg,60 mg/kg,im)治疗.下丘脑去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)和多巴胺(DA)含量采用荧光分光光度法测定.结果 1.吗啡依赖大鼠经纳洛酮催促后,戒断评分值明显升高,同时伴有下丘脑NE和5-HT水平升高[分别为(7.07±1.41)μg/g脑组织和(1.15±0.35)μg/g脑组织],与空白对照组Ⅰ[分别为(3.34±0.97)μg/g脑组织和(0.49±0.21)μg/g脑组织]比较,差异有显著性(P<0.01).大鼠脑内DA水平下降[(0.28±0.12)μg/g脑组织],与空白对照组1[(0.39±0.14)μg/g脑组织]比较,差异有显著性(P<0.05).2.在吗啡诱导的大鼠条件性位置偏爱模型,大鼠脑内DA和5-HT水平升高[分别为(1.13±0.36)μg/g脑组织和(1.23±0.34)μg/g脑组织],与空白对照组Ⅱ[分别为(0.43±0.11)μg/g脑组织和(0.47±0.18)μg/g脑组织]比较,差异有显著性(P<0.01).NE则无明显改变[(3.28±1.10)μg/g脑组织],与空白对照组Ⅱ[(3.57±1.17)μg/g脑组织]比较,差异无显著性(P>0.05).青藤碱连续用药可显著抑制催促戒断症状和吗啡引起的位置偏爱的形成,对脑内单胺神经递质水平有明显的降低作用.结论 吗啡依赖的形成和戒断与脑内单胺神经递质有密切关系,吗啡的躯体戒断症状与NE和5-HT升高的关,而位置偏爱效应主要与DA水平升高有关.青藤碱能抑制纳洛酮催促戒断症状,消除吗啡诱导的大鼠位置偏爱的形成,对脑组织单胺类神经递质水平的紊乱具有调节作用.     

Acetamide-45抑制电场刺激及醋氯甲胆碱引起的离体气道收缩

目的:探讨新型抗变态反应药N-对氟苄基-3-[(N-4-吡啶)-乙酰胺]-吲哚-45 (acetamide-45)对电场刺激引起的大鼠离体气管/支气管收缩,及醋氯甲胆碱引起的豚鼠离体气管收缩的影响.方法:以acetamide-45预处理标本后,①记录电场刺激引起胆碱能神经兴奋所致的标本收缩,观察acetamide-45的作用;②以累积剂量法给予醋氯甲胆碱,观察acetamide-45对醋氯甲胆碱量效曲线的影响,气管张力的变化通过换能器转变为电信号并由记录仪记录.结果:Acetamide-45 (1～30 μmol·L-1)能浓度依赖性地抑制电场刺激引起的大鼠气管/支气管的胆碱能收缩,其在气管的IC50(95%可信限)为10.74(8.87～13.00)μmol·L-1,在支气管的IC50(95%可信限)为18.83(14.57～24.33)μmol·L-1.Acetamide-45浓度依赖地抑制醋氯甲胆碱引起的豚鼠离体气管收缩,3～30 μmol·L-1 acetamide-45使醋氯甲胆碱的量效曲线的最大效应下降24.6%～43.2%,EC50增大3.1～21.4倍.结论:acetamide-45抑制离体气道平滑肌收缩的作用,可能是通过非特异性抑制乙酰胆碱和胆碱能受体结合而产生的.     

Anti-apoptotic effect of morphine-induced delayed preconditioning on pulmonary artery endothelial cells with anoxia/reoxygenation injury

Background Opioid preconditioning （PC） reduces anoxia/reoxygenation （A/R） injury to various cells. However, it remains unclear whether opioid-induced delayed PC would show anti-apoptotic effects on pulmonary artery endothelial cells （PAECs） suffering from A/R injury. The present study was conducted to elucidate this issue and to investigate the potential mechanism of opioid-induced delayed PC.
Methods Cultured porcine PAECs underwent 16-hour anoxia followed by 1-hour reoxygenation 24 hours after pretreatment with saline （NaCI; 0.9%） or morphine （1 μmol/L）. To determine the underlying mechanism, a non-selective KATe channel inhibitor glibenclamide （Glib; 10 μmol/L）, a nitric oxide （NO） synthase blocker NG-nitro-L-arginine methyl ester （L-NAME; 100 μmol/L）, and an opioid receptor antagonist naloxone （Nal; 10μmol/L） were given 30 minutes before the A/R load. The percentage of apoptotic cells was assessed by terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end labeling （TUNEL） staining, eNOS mRNA level was measured by real-time polymerase chain reaction （PCR）. NO content of PAECs supernatants was measured with the Griess reagent.
Results Compared to the A/R PAECs, morphine-induced delayed PC significantly reduced PAECs apoptosis （（18.1±1.9）% vs （5.5±0.3）%; P 〈0.05）, increased NO release （（11.4±1.3） μmol/L vs （20.5±2.1） μmol/L, P 〈0.05）, and up-regulated eNOS gene expression nearly 9 times （P 〈0.05）. The anti-apoptosis effect of morphine was abolished by pretreatment with Glib, L-NAME and Nal, but the three agent-selves did not aggravate the A/R injury. Furthermore, L-NAME and Nal offset the enhanced release of NO caused by pretreatment with morphine.
Conclusions Morphine-induced delayed PC prevents A/R injury of PAECs. This effect may be mediated by activation of KATe channel via opioid receptor and NO signaling pathways.     

盐酸吗啡对肠道运动的离体与在体作用及机制研究

目的：研究盐酸吗啡对肠道平滑肌运动的影响及其作用机制。方法：制备家兔离体小肠，记录小肠平滑肌发展张力、静止张力、收缩频率，观察盐酸吗啡对肠肌运动的影响。并进一步测定不同浓度的盐酸吗啡灌胃前后小鼠小肠推进运动的变化。结果：5mg／L、10mg／L、30mg／L的盐酸吗啡作用于离体肠肌，对家兔小肠发展张力均有明显的抑制作用（P〈0．05）。纳洛酮可削弱盐酸吗啡对肠肌发展张力的抑制作用，吗啡对肠肌发展张力的抑制作用从78．7％&#177;13．4%至87．8％&#177;11．2％（P〈0．05）。阿托品可阻断盐酸吗啡对肠肌发展张力的抑制作用，吗啡对肠肌发展张力的抑制百分比从77．2％&#177;12．1％至103．7％&#177;12．8％（P〈0．05）。而酚妥拉明则增强盐酸吗啡对肠肌发展张力的抑制作用，吗啡对肠肌发展张力的抑制百分比从79．2％&#177;11．8％至69．8％&#177;15．3％（P〈0．05）。用不同浓度（75、150、300mg／L）的盐酸吗啡灌胃后小鼠小肠推进均减慢，推进率分别为54．9％&#177;15．5％、47．7％&#177;14．3％、37．1％&#177;5．8％，与生理盐水灌胃组比较有显著性意义（P〈0．05）。结论：盐酸吗啡在离体与在体水平对肠肌运动均有抑制作用，其机制可能与阿片受体、胆碱能受体、肾上腺素能受体有关。     

吗啡戒断大鼠脊髓和脑干以及前脑皮层胶质细胞源性神经营养 …

观察吗啡依赖或戒断时大鼠脊髓,脑干和皮层胶质细胞源性神经营养因子（ｇｉａｌｃｅｌｌ ｄｅｒｉｖｅｄ ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ ｆａｃｔｏｒ,ＧＤＮＦ）以及受体ＧＤＮＦＲ－α和ＧＤＮＦＲ－β基因的表达以及毒蕈碱乙酰胆碱受体（ｍＡｃｈ）、Ｎ－甲基－Ｄ－天门冬氨酸（ＮＭＤＡ）受体拮抗或一氧化氮合酶（ＮＯＳ）抑制剂处理后对它们合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）,以β－ａｃｔｉｎｍＲＮＡ作为内标检测ＧＤＮＦ,ＧＤＮ     

生姜对NK_1受体介导的豚鼠离体回肠收缩影响

目的 :观察生姜及其主要辛辣成分对NK_1受体介导的豚鼠离体肠管收缩的影响,从NK_1受体角度初步探讨生姜的止吐机制。方法:以豚鼠离体回肠为实验材料,利用恒温组织浴槽,在高中低三个浓度生姜汁(50μL、100μL、200μL)、6-姜酚(3×10-5mol·L~(-1)、1×10-5mol·L~(-1)、3×10-6mol·L~(-1))、6-姜烯酚(3×10-5mol·L~(-1)、1×10-5mol·L~(-1)、3×10-6mol·L~(-1))存在和不存在情况下,分别建立P物质(SP)和选择性NK_1受体激动剂GR73632的量效曲线,观察对肠管收缩和量效曲线的影响。结果:生姜汁、6-姜酚、6-姜烯酚均能剂量依赖性地抑制SP激发的离体肠管收缩增强,降低其平均张力(P<0.05,P<0.01或P<0.001);均可剂量依赖性地使SP的最大效应降低(P<0.001);除低浓度6-姜酚外,3个剂量的生姜汁、高中浓度的6-姜酚、3个浓度的6-姜烯酚对SP最大效应的抑制作用均显著强于SR140333(3×10-7mol·L~(-1)),与SR140333比较差异有统计学意义(P<0.001)。6-姜酚、6-姜烯酚均能剂量依赖性地抑制GR73632激发的离体肠管收缩增强,降低其平均张力(P<0.05或P<0.001);均可剂量依赖性地使GR73632的最大效应降低(P<0.001);高浓度6-姜酚和高浓度6-姜烯酚,对GR73632最大效应的抑制作用与阳性药SR140333(3×10-7mol·L~(-1))存在时比较均有增强趋势,但差异没有统计学意义(与SR140333比较,P>0.05)。生姜汁、6-姜酚、6-姜烯酚均可使SP的量效曲线非平行右移,并使最大效应显著降低;6-姜酚、6-姜烯酚均可使GR73632的量效曲线右移,并使最大效应显著降低。结论:生姜及其主要辛辣成分可以非竞争性阻断NK_1受体,这可能是生姜止吐作用的重要机制。