培养基对鼠杂交瘤的影响：杂交瘤活性、细胞增殖和抗体产生最佳条件的确定

由于培养基的选择对杂交瘤的表型有深刻影响，所以检测所使用的培养基是否为杂交瘤的增殖、维持生长以及抗体的产生提供了晟佳条件是很有意义的。本文作者选用了三种来自不同亲代骨髓瘤的杂交瘤系对8种培养基进行了实验，初步鉴别出了最佳的培养基配方。     

rHuIL-6和rHuIL-2对人杂交瘤细胞增殖、克隆化以及抗体产生的影响

rHuIL6对人一鼠杂交瘤86—1、87—3和人—(人×鼠)杂交瘤C_的增殖、克隆化和抗体分泌均有明显的促进作用。rHuIL-2能提高C_8杂交瘤的增殖水平。rHuIL-6和rHuIL-6和rHuIL-2同时应用对人—鼠杂交瘤86—1和87—3细胞的克隆化效率和抗体分泌水平有明显的协同作用。     

条件培养液中杂交瘤生长因子对人—鼠杂交瘤生长、克隆化及抗体分泌的影响

本文报道了含有杂交瘤生长因子的人纤维母细胞系CRL1506和EB病毒转化经克隆化的人B淋巴母细胞系N23两种条件培养液,对分泌肾综合征出血热病毒人单克隆抗体的人-鼠杂交瘤和人—(人—鼠)杂交瘤细胞系的生长、克隆化及抗体分泌有明显促进作用,并排除了白细胞介素2和白细胞介素4作用的可能性。结合文献报道,初步认为来自这两种条件培养液的杂交瘤生长因子很可能含有白细胞介素6。正确选择促进人—鼠杂交瘤生长、克隆化和抗体分泌的条件培养液,对于克服生产人单克隆抗体杂交瘤技术所存在的融合率低、克隆化难、抗体产量少等困难具有较大的应用价值。     

丁酸钠对杂交瘤细胞增殖及抗体分泌的影响

用含不同浓度丁酸钠完全培养液和无血清培养液培养分泌抗组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)单克隆抗体的杂交瘤细胞。当丁酸钠浓度为0.25～0.5 mmol/L时,对杂交瘤细胞分泌抗体能力具有刺激作用,提高抗体效价2～4倍,对细胞生长无抑制作用。表明丁酸钠可作为一种添加剂用以提高杂交瘤细胞分泌抗体的能力。     

小鼠杂交瘤在一种低蛋白培养基中长期产生抗体

为了追踪世界上的新技术,了解当前单克隆抗体杂交瘤研究的新动态,兹由第四军医大学微生物学和免疫学研究生同志们将第五届杂交瘤研究年会(1986年1月26～29日 Baltimore,Maryland,U.S.A)文摘(Hybridoma,1986,5(1):53)全部翻译出来,共计68篇,以飧读者。     

杂交瘤培养中抗体产生的调节:抗独特型抗体对杂交瘤细胞产生抗-DNA抗体的负调节作用

许多浆细胞瘤对调节信号有反应。能够在体外培养中对调节信号有反应的肿瘤细胞系对研究免疫细胞活化过程中免疫调节分子的作用及亚细胞水平的分子机制非常重要。本文研究了抗独特型抗体(抗-id)在杂交瘤产生抗-DNA抗体(抗-DNA)过程中的调节作用。     

温度对鼠-鼠杂交瘤生长和单克隆抗体产生的影响(文摘)

本文研究了不同培养温度对鼠-鼠杂交瘤HB-32细胞的生长、单克隆抗体(McAb)产生、葡萄糖消耗和乳酸产生的影响。 作者用含有10％胎牛血清,葡萄糖(4g/L),NaHCO_3(2.2g/L)草酰乙酸(13.2mg/L),胰岛素(0.8mg/L).丙酮酸钠(5.5mg/L),非必需氨基酸和1％抗真菌抗生素DMEM培育HB-32细胞。 作者发现,①最大活细胞浓度(Xvmax)依赖于培养温度。37℃细胞浓度为3.2×10~6/ml,与已报道的同一细胞系结果相似;33℃     

产生增强LAK活性的双特异性抗体的杂交-杂交瘤

至今用化学交联,体细胞杂交及基因工程等四种主要方法可以产生识别两个不同抗原的双特异性抗体(Bispecific antibody)。实验证明,双特异性抗体的临床应用价值优于单价的单克隆抗体。我们在对自产的抗人小细胞肺癌单克隆抗体较系统的研究基础上,利用杂交-杂交瘤(Hybid-Hybridoma)方法建立了几株分泌抗人小细胞肺癌和人CD3的双特异性抗体的交杂-杂交瘤细胞系。     

杂交瘤细胞系在低血清和无血清培养基长期培养中抗体产生能力的丧失

本文报道了分泌特异性抗磷酰胆碱McAb(IgG_1)的鼠杂交瘤细胞系(167.4 G5.3),在不同血清浓度(10％、5％、2.5％、1.25％胎牛血清FBS)及无血清培养基OPTI—MEM中适应培养6个月以上,以观察其生长和细胞分泌抗体能力的变化。结果所有的适应细胞随着血清含量的升高,其分泌抗体能力越稳定。适应培养,虽然提高了该细胞系在低血清或无血清培养基中的生长率,但在低血清培养基中(1.25％FBS)细胞产生抗体能力丧失。在1.25％FBS条件下培养,     

在化学成分限定的无血清、无蛋白培养基中杂交瘤细胞生长和单克隆抗体分泌的最佳条件

应用于人类的单克隆抗体(McAb)需要化学纯度和生物学纯度。最好的方法是以无血清、无蛋白的培养基进行体外培养。本文作者建立了一种维挣最佳杂交瘤细胞生长和McAb 分泌的化学成分基本限定的培养基,这种培养基是由IDMEM、HF_(12)M 和NCTC_(135)M 按5:5:1比例组成的混合液(V/V/V),外加25mM 葡萄糖、4～6mM 谷氨酰胺、50μM 二巯基乙醇,0.01～0.1%(W/V)普卢兰尼克F68(一种非离子     

不同培养基对人杂交瘤细胞培养效应的影响

培养液是细胞培养的基本要素,选择适当的培养液是人杂交瘤技术成功的重要因素之一。我们分析比较了三种商品化培养液RPMI1640、DMEM、IMDM对分泌人单抗杂交瘤细胞的培养效应,包括对维持细胞的活力、增殖、克隆效率及抗体分泌等参数的观察比较,发现RPMI1640对人-(人×鼠)杂交瘤细胞“87-3”与人-鼠杂交瘤“87-3”培养效应最佳,为首选培养液。     

藻酸钙凝胶固定法能增进无血清培养基中杂交瘤产生抗体的稳定性

虽然在杂交瘤细胞培养中加入胎牛血清能促进细胞生长,但胎牛血清价格昂贵。其组分尚未完全弄清,再加之其质量不稳定,它还常常是微生物污染的来源,血清带入到培养液中的蛋白质,使得抗体的纯化困难。这些都是使用胎牛血清的不利因素。人们进行了大量的研究以期减少或停止使用血清。现已有好几种无血清的杂交瘤细胞培养基应市。然而,研究发现,杂交瘤细胞在无血清培养基中长期培养会丧     

应用杂交瘤技术产生单克隆抗HBsAg群活性决定簇“a”抗体

用纯化HBsAg adr亚型免疫的小鼠脾细胞与NS-1和653-P10骨髓瘤细胞进行的9次融合实验中,筛选到6株分泌抗-HBs的杂交瘤细胞,对定名为Z26F7-S6C9杂交瘤细胞株分泌抗-HBs的特异性用ELISA双抗原夹心法、PHA法、免疫电镜等     

携双抗体纳米微泡对卵巢癌细胞增殖活性的影响

背景：免疫治疗可通过多种途径增强抗肿瘤免疫反应,联合免疫治疗是一个更好的选择。超声靶向微泡破坏技术可将药物、基因、抗体和细胞因子直接输送到免疫细胞的细胞质中,进一步增强免疫应答。然而,通过超声靶向微泡破坏技术将携趋化因子受体4抗体和细胞程序性死亡配体1抗体双靶向纳米微泡应用于卵巢癌的治疗尚未见报道。目的：探讨超声辐照携趋化因子受体4抗体和程序性死亡配体1抗体双靶向纳米微泡对卵巢癌细胞增殖、迁移的影响。方法：对IOSE-80正常卵巢上皮细胞及SKOV3、CAOV3卵巢癌细胞进行培养及扩增,采用双标记荧光免疫法对3种细胞中的趋化因子受体4和细胞程序性死亡配体1蛋白进行共定位,蛋白质印迹法检测3种细胞中趋化因子受体4和程序性死亡配体1蛋白相对表达量,并筛选出实验细胞。制备携不同配体的靶向纳米微泡后,即单纯的纳米微泡、携趋化因子受体4抗体的纳米微泡、携趋化因子受体4和程序性死亡配体1抗体的纳米微泡。取对数生长期的SKOV3卵巢癌细胞,分6组处理：A组加入McCoy’s 5A培养基,B组加入含基质细胞衍生因子1的McCoy’s5A培养基,C组加入单纯的纳米微泡溶液与含基质细胞衍生因子1的McCo...     

TLSFjm生物学活性检测方法及产生最佳条件的选择

在建立三种简便、敏感的TLSFjm生物学活性检测方法的基础上,筛选出TLSFjm产生的最佳条件。结果表明,以细胞浓度1×10~6/ml,培养时间48h,TLSFjm产生活性最高,PHA和IL-1β对JM产生TLSFjm具有协同促进作用,A23187单独也可促进JM细胞产生TLSFjm,无血清RPMI1640培养条件产生的TLSFjm活性同10％NCS RPMI1640无明显差异,为纯化TLSFjm提供了实验依据。另外还发现1％BSA能很好保护TLSFjm活性,BSA还可保护TLSFjm,使之在冻融过程中避免活性丧失。TLSFjm活性在-20℃保存明显优于4℃。     

低血清条件下杂交瘤细胞系生长和McAb产生的研究

本文报告了肾综合症出血热(HFRS)病毒单克隆抗体(McAb)3G1/3F8杂交瘤细胞系在无/低血清条件细胞生长和McAb产生的实验结果,首先将3G1/3FB细胞系培养于小牛血清(CFS)浓度为20％、10％、7.5％、5％、2％、1％和0％的RPMI-1640中观察血清浓度对细胞生长和McAb产生的影响。结果显示在2％～7.5％CBS中培养96h细胞系生长达到最大密度,10％～20％CBS中培养72h即可达到最大密度,CBS低     

确定抗体最佳滴度的简便方法

确定抗体最佳滴度的简便方法１曹世俭２李敬军作者单位：１北京天坛医院病理科１０００５０２北京市神经外科研究所神经病理室１０００５０作者简介：曹世俭，男，４６岁，主管技师随着技术的进步，免疫组化方法日趋简单，一般只需对一抗适当稀释，便可获得理想的染色结果...     

抗体结构、个体型和抗体多变性的产生

抗体有两种功能:一是识别非己细胞和大分子(抗原),二是清除这些物质。由于抗原为数甚多,必然需要各种各样的抗体。有人推测成年人的免疫系统至少可以产生10~6的抗体分子。机体如何产生和保持大量的抗体分子,是当今免疫学研究的中心课题。所有抗体或免疫球蛋白的基本结构都是由4条多肽链组成(见图),两两相同:两条由约215个氨基酸组成的轻链(L),两条比轻链约长一倍的重链(H)。各链之间通过二硫键和共价键连接。各个肽链内部另有一些由二硫键隔成的功能区,这样的区轻链有2个、重链有辱个。各区功能不同。负     

下丘脑、垂体条件培养基对内皮细胞NOS和ICAM-1表达的影响

动脉粥样硬化(AS)早期病变的形成包括两个重要环节：一是血液中单核细胞与内皮细胞(EC)粘附，继而迁移到内皮下转变为巨噬细胞(MP)；二是MP或平滑肌细胞(SMC)摄取脂质后转变为泡沫细胞^[1]。因而，研究EC功能对AS早期防治极为重要。我们以前的工作证实：毁损弓状核可诱发AS早期病变，如内皮变性、核肿胀、内皮下层增生出现许多大小不等的空泡、