组织纤溶酶原激活剂及其抑制物的研究进展

纤溶酶原转变成有纤溶活性的纤溶酶是纤溶过程中决定性的一步。组织型纤溶酶原激活剂（ｔｉｓｓｕｅｔｙｐｅｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎａｃｔｉｖａｔｏｒ,ｔＰＡ）是体内主要的纤溶酶原激活物,而纤溶酶原激活剂抑制物（ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎａｃｔｉｖａｔｏｒｉｎｈｉｂｉｔｏｒ,ＰＡＩ）是组织型纤溶酶原激活剂（ｔＰＡ）的快速抑制剂。近年来国内大量的研究发现,ｔＰＡ、ＰＡＩ活性或含量的变化与许多疾病,特别是心、脑血管疾病密切相关,已引起专家学者日益广泛的重视［１,２］。本文就组织纤溶酶原激活剂及其抑制剂的分子…     

纤溶酶原激活剂抑制物2型抑制细胞凋亡的研究进展

纤溶酶原激活剂抑制物2型(PAI-2)是一种多功能蛋白质,除了能有效抑制尿激酶(uPA)和双链组织型纤溶酶原激活物(tPA)而调节纤溶活性外,还参与了很多其它的生理病理过程,例如组织重建、胚胎发育、感染、免疫系统发育、肿瘤浸润和迁移等。更有研究表明胞内型PAI-2在抑制细胞凋亡方面也发挥着重要作用。本文就近年来PAI-2抑制细胞凋亡的研究进展作一综述。     

人组织型纤溶酶原激活剂及其生理性抑制剂的结构与功能

一、人组织型纤溶酶原激活剂的结构和功能 人组织型纤溶酶原激活剂(Tissueplasminogen Activator,t-PA)由527个氨基酸组成,分子量约为67000,属丝氨酸类蛋白水解酶。它能使纤溶酶原(Plasminogen,Plg)变成纤溶酶(plasmin,plm),后者促使水不溶性纤维蛋白(Fibrin,Fb)水     

抗单链尿激酶型纤溶酶原激活剂单克隆抗体的制备

尿激酶型纤溶酶原激活剂（ｕＰＡ）是近年来研究较多的溶血栓药物之一。它存在两种形式：单链尿激酶（ｓｃｕＰＡ）或称尿激酶原及双链尿激酶（ｕＰＡ）或称尿激酶〔１〕。由于临床发现ｕＰＡ大剂量注射易出现大面积出血的倾向，所以，人们对特异性强于ｕＰＡ的ｓｃｕＰＡ进行了深入地研究。由于ｓｃｕＰＡ能选择性地在纤维蛋白表面激活纤溶酶原，进而选择性地溶解血栓，而受到人们的重视。目前，我们虽已构建了高表达水平的工程细胞株，但纯化工艺有待进一步完善。鉴于国内尚未报道过ｓｃｕＰＡ单克隆抗体（ｍＡｂ）的制备，我们用常规细…     

纤溶酶原激活剂的放射酶分析

我所对纤溶酶原激活剂（ＰＬＧＡ）的测定建立了一项新方法，纤溶酶原在其激活上生成纤溶酶，该酶能特异地水解包被＾１２５Ｉ－纤维蛋白底物生成可溶性的＾１３５Ｉ－多肽产物。通过测定产物的放射性强度，计算了样口中纤溶酶原激活剂活怀。该方法是具有高度特异性和灵敏度，并且简单快速，可为凝、溶务基础研究和临床血栓病的防治服务。     

尿激酶型纤溶酶原激活物及其特异受体和抑制物与肺癌的浸润转移

研究尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)及其特异受体(uPA-R)和抑制物(PAI-1、PAI-2)在肺癌浸润转移中的作用.应用RIA分别对67例经组织病理确诊的各期肺癌和30例肺部相关炎症患者及30名健康献血者进行了相应的检测.结果显示,小细胞肺癌Ⅱ期和Ⅲ期患者血浆中uPA、uPA-R、PAI-1水平显著升高(P＜0.001),而PAI-2的水平逐渐降低;腺癌、鳞癌伴有浸润主支气管及肺门淋巴结者uPA、uPA-R与PAI-1水平亦显著升高(P＜0.001);周围型肺癌未见淋巴结受侵者uPA、uPA-R、PAI-1与PAI-2水平异常升高.uPA、uPA-R与PAI-1在肺癌中水平明显升高,并与肺癌的浸润转移相关密切,可作为肿瘤患者早期诊断、预后评估的有力指标.     

胃癌组织中尿激酶型纤溶酶原激活剂及其受体基因表达和临床意义

目的：研究尿激酶型纤溶酶原激活剂（ｕＰＡ）及其特异受体（ｕＰＡＲ）与胃癌的关系及其在胃癌浸润转移中的作用。方法：采用ｃＤＮＡ－ｍＲＡＮ原位分子杂交技术,分别检测了６４例胃癌及其癌旁组织中ｕＰＡ和ｕＰＡＲｍＲＮＡ表达情况,同时结合病人的临床生物学指征进行分析。结果：癌与癌周比较,ｕＰＡ和ｕＰＡＲｍＲＮＡ阳性表达率明显升高,Ｐ〈０．００１。在伴有淋巴结转移的病例中,ｕＰＡ和ｕＰＡＲ阳性例数分别为１９／２９和２４／２９,与无转移的１０／３５和１３／３５相比,Ｐ分别〈０．０１和〈０．００１。在浸润到肌层、浆膜层的病例中ｕＰＡ和ｕＰＡＲ阳性例数分别为２５／３８和３０／３８,与浸润到粘膜和粘膜下层的４／２６例和７／２６相比,Ｐ均〈０．００１。在ｕＰＡ和ｕＰＡＲ同时阳性的病例中,伴有淋巴结转移和浸润到肌层以下的分别占１５／２     

纤溶酶原激活剂抑制物-1基因启动子区4G/5G多态性与妊娠高血压综合征的关系

目的　探讨纤溶酶原激活剂抑制物 - 1(plasminogen activator inhibitor- 1,PAI- 1)基因启动子区 4 G/ 5 G多态性与妊娠高血压综合征 (pregnancy- induced hypertension syndrome,PIHs)发病的相关性。方法　应用聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性分析 ,检测了 171例 PIHs患者 (PIHs组 )和 193名正常妊娠妇女 (对照组 )的 PAI- 1基因 4 G/ 5 G多态性。结果　 (1) PIHs组 PAI- 1基因型频率分布 :4 G/ 4 G型为4 7.4 % ,4 G/ 5 G型为 4 1.5 % ,5 G/ 5 G型为 11.1% ;PIHs组 4 G等位基因频率 (0 .6 81)和 4 G/ 4 G型频率(47.4 % )显著高于正常对照组孕妇 (0 .4 95和 2 1.2 % ) (P<0 .0 0 1)。 (2 )重度 PIHs患者组 4 G/ 4 G型和 4 G等位基因频率 (6 1.3%和 0 .75 8)显著高于轻度 PIHs组 (35 .8%和 0 .6 2 3) (P<0 .0 0 1) ;中度 PIHs组 (42 .8%和0 .6 5 2 )和轻度 PIHs组比较差异无显著性 (P>0 .0 5 )。 (3) 4 G/ 4 G基因型孕妇发生 PIHs的相对风险率的比数比为 3.34,95 %的可信区间为 2 .14～ 5 .2 2。结论　 PAI- 1基因 4 G/ 5 G多态性参与 PIHs的发病 ,纯合子4 G/ 4 G基因型可能是 PIHs发病的重要危险因素之一。     

含人组织型纤溶酶原激活剂cDNA重组逆转录病毒的制备及鉴定

将人组织型纤溶酶原激活剂ｃＤＮＡ与逆转录病毒载体ＬＮＳＸ重组后转染病毒包装细胞ＰＡ３１７，形成完整的重组病毒颗粒，电镜下重组病毒呈散在分布，球形，直径９０～１８０ｎｍ，由囊膜、外壳和核心三部分组成。重组病毒颗粒感染ＮＩＨ３Ｔ３细胞，在含Ｇ４１８培养基中筛选培养２周后计数阳性细胞克隆数，结果达６×１０８ＣＦＵ／Ｌ；被感染的受体细胞ＮＩＨ３Ｔ３高效表达具有纤溶活性的重组人组织型纤溶酶原激活剂。     

血清中尿激酶型纤溶酶原激活物在女性乳腺癌诊断中的应用

近年来,在我国京津沪地区,乳腺癌发病率已居于妇女恶性肿瘤首位川.研究表明,癌细胞在浸润转移的过程中存在着细胞外基质(extracellularmatrix,ECM)和基底膜成分被相关蛋白酶溶解的活动,纤溶酶原激活在ECM水解过程中起重要作用.     

组织型纤溶酶原激活剂在移植血管桥再狭窄动物血管的差异表达

目的研究组织型纤溶酶原激活剂（t—PA／PLAT）在移植血管桥再狭窄动物血管的差异表达。方法通过兔双侧颈动脉进行动脉桥和静脉桥的移植,形成双侧移植血管桥再狭窄动物模型。应用免疫组化检测t-PA在动物模型动脉桥、静脉桥的表达并进行比较。结果血管桥移植前,t-PA在实验动物颈动脉和颈静脉的表达差异无统计学意义（P〉0．05）;血管桥移植后,t-PA在动脉桥的表达明显高于静脉桥（P〈0．05）,于16周时达到高峰[（32．34±4．74）％比（16．74±3．14）％],以后随时间延长而出现表达减少（P〈0．05）。结论t-PA在术后早期对血管桥具有保护作用,其表达的高低与术后血管桥再狭窄关系密切。     

人纤溶酶原结构和功能研究进展

人纤溶酶原(plasminogen,Plg)是纤溶系统的主要成分,与体内多种生理、病理过程密切相关。本文综述Plg基因及其编码的蛋白质的结构与功能,由此进一步阐述其临床意义。     

抗PAI抑制作用的组织纤溶酶原激活剂在大肠杆菌中的表达

目的:构建t-PA活性不被PAI-1抑制的新一代t-PA突变体。方法:根据t-PA的结构特点,去除t-PA分子中的指状区、表皮生长因子和Kringle1区,以含全长t-PA编码区序列的pUC18质粒为模板,经PCR扩增编码氨基酸1~3和176~527位的截短式t-PADNA序列;并将该t-PA分子中的PAI-1结合位点,即第373~384位核苷酸(AAGCACAGGAGG)突变为(GCGGCCGCGGCG),相应的氨基酸KHRR则变为AAAA。结果:测序证实,t-PA突变体的DNA序列正确,将其克隆于大肠杆菌表达载体中,并在大肠杆菌中得到高效表达。表达蛋白占总菌体蛋白的30%,以包涵体形式存在。经蛋白质变性、复性,得到有活性的t-PA突变体。t-PA突变体与PAI-1反应后t-PA的活性未受到抑制。结论:t-PA突变体可能是一种用于治疗心肌梗死和脑血栓等血栓性疾病的强效且剂量要求低的新型生物工程药物。     

重组纤溶酶原激活剂抑制剂-2对裸鼠皮下纤维肉瘤细胞移植瘤超微结构的影响

目的：研究重组纤溶酶原激活剂抑制剂一２基因表达对纤维肉瘤细胞超微结构的影响。方法：透射电镜对裸鼠皮下纤维肉瘤细胞移植瘤细胞超微结构进行研究。结果：ＨＴ１０８０Ｃ＋细胞形态多为不规则形状，细胞膜呈波状和突起。核膜呈波状或是凹陷很深。而转染纤溶酶原激活剂抑制剂一２基因的克隆细胞则显示细胞膜基本无突起，核多呈校形或椭圆形，核膜较平滑等良性化的结构。结论：重组纤溶酶原激活剂抑制剂一２可使纤维肉瘤细胞恶性特征减弱，降低肿瘤细胞的侵袭性。     

尿激酶型纤溶酶原激活物受体及可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体与炎症相关的研究进展

尿激酶型纤溶酶原激活物受体（urokinase plasminogen activator receptor,uPAR）与尿激酶型纤溶酶原激活物（urokinase plasminogen activator,uPA）同为纤溶酶原激活系统的主要成员,是一种协调多种信号转导途径的多功能分子,可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体（soluble urokinase plasminogen activator receptor,suPAR）是其可溶形式。除凝血-纤溶以外,uPAR参与了肿瘤侵袭及炎症等多种疾病过程,而suPAR可能是一种良好的炎性标志物。本文就uPAR及suPAR在炎症中的作用进行简要综述。     

重组纤溶酶原激活剂抑制剂-2对裸鼠皮下纤维肉瘤细胞移植瘤超微结构的影舷

目的研究重组纤溶酶原激活剂抑制剂-2基因表达对纤维肉瘤细胞超微结构的影响.方法透射电镜对裸鼠皮下纤维肉瘤细胞移植瘤细胞超微结构进行研究.结果HT1080C+细胞形态多为不规则形状,细胞膜呈波状和突起.核膜呈波状或是凹陷很深.而转染纤溶酶原激活剂抑制剂-2基因的克隆细胞则显示细胞膜基本无突起,核多呈梭形或椭圆形,核膜较平滑等良性化的结构.结论重组纤溶酶原激活剂抑制剂-2可使纤维肉瘤细胞恶性特征减弱,降低肿瘤细胞的侵袭性.     

纤溶酶原激活物抑制因子-1蛋白分子的结构与功能

纤溶酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)是组织型纤溶酶原激活物(t-PA)和尿型纤溶酶原激活物(u-PA)的特异性抑制剂。对PAI-1分子的结构与功能的认识,有助于了解PAI-1发挥抑制 作用的机理。本文综述了近年来对PAI-1蛋白分子结构与功能研究的进展,介绍了PAI-1分子中一些区域的作用以及影响PAI-1抑制活性的一些因子。     

2型糖尿病血管并发症患者血浆纤溶抑制物水平分析

严重危害中老年健康的常见病——2型糖尿病（Diabetes Mellitus，T2DM）常并发血栓性病变。主要由血管内皮细胞合成的纤溶酶原激活抑制物（Plasminogen Activator Inhibitor，PAI-1）及主要由肝脏分泌于血浆中的凝血酶激活的纤溶抑制物（Thrombin Activatable Fibrinolysis Inhibitor，TAFI）都可能参与或促进血栓形成。     

LPS促进HUVECs表达纤溶酶原激活物抑制物1

目的：观察LPS对脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)表达组织纤溶酶原激活物(tPA)和纤溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)的影响。 方法： 用生长良好的第2、3代HUVECs进行试验。用cell counting kit-8(CCK-8)测定LPS刺激后细胞活性变化；发色底物法测定LPS组和对照组培养液中tPA, PAI-1活性；RT-PCR检测细胞内tPA和PAI-1 mRNA水平。 结果： 与对照组相比，LPS(10 mg/L)对细胞活性没有明显差异。LPS诱导PAI-1活性在24-72 h显著升高(P<0.05),且显著上调PAI-1 mRNA，24 h达到峰值，以后渐降，72 h达到正常水平。而LPS组与对照组tPA活性与tPA mRNA无明显差异(P>0.05)。 结论： LPS(10 mg/L)可显著上调PAI-1 mRNA转录和分泌而不影响tPA mRNA，结果提示LPS可活化内皮细胞，诱发PAI-1 mRNA表达和蛋白分泌而抑制纤溶系统，这有利于微血栓的形成、血栓稳定,血液凝固和DIC发生。     

低密度脂蛋白受体相关蛋白与纤溶系统

低密度脂蛋白受体相关蛋白(LRP)是近年新发现的一种细胞表面蛋白,为低密度脂蛋白受体(LDLR)家族的一员,能与多种配体结合,参与纤溶系统多种成分的代谢,从而调节纤溶系统功能的稳定。