UPLC指纹图谱结合模式识别分析不同产地生/制何首乌

采用超高效液相色谱(UPLC),建立不同产地生/制何首乌二苯乙烯苷(TSG)的含量测定方法和指纹图谱。大孔树脂柱处理各样品,UPLC分析,Waters ACQUITY UPLC@BEH C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm),乙腈-0.5%甲酸溶液梯度洗脱,流速0.3 mL·min~(-1),波长254 nm,柱温(25±5)℃。结果发现大孔树脂分离后药材二苯乙烯苷含量均在25.0%以上;成功建立不同产地生/制何首乌药材UPLC指纹图谱;标定了17个色谱峰,聚类分析不能完全将生/制首乌分开,而主成分分析可明显地将其分为两类;二苯乙烯苷是两类何首乌自变量投影重要性指标(VIP)差异最大的组分。前处理方法可获得高含量的二苯乙烯苷,测定方法简单,灵敏,可靠,可用于生/制何首乌的快速鉴别,可作为何首乌药材整体质量控制的方法之一。     

合欢花HPLC指纹图谱模式识别及含量测定研究

目的:建立合欢花药材HPLC指纹图谱分析方法,结合模式识别与含量测定为其质量控制提供科学依据。方法:采用HPLC法,Waters CORTECS C18色谱柱(150 mm×4. 6 mm,2. 7μm),以乙腈-0. 1%磷酸水为流动相,梯度洗脱,流速1. 0 m L/min,检测波长270 nm。通过相似度分析、主成分分析、正交偏最小二乘法判别分析对16批合欢花指纹图谱进行评价,寻找合欢花的主要差异性化学成分,并测定其含量。结果:建立了合欢花药材的指纹图谱,确定12个共有峰,并指认了其中3个共有峰,16批药材相似度均大于0. 90。根据聚类分析结果,可将16批药材聚为2类,通过主成分分析和正交偏最小二乘法判别分析确定槲皮苷为合欢花的主要差异性化学成分,方法学考察符合规定,RSD均小于3. 0%。结论:该方法精密度高、重现性好,可为合欢花药材质量控制与评价提供参考。     

基于HPLC指纹图谱结合化学模式识别的护肝片质量控制研究

目的建立中成药护肝片的HPLC指纹图谱,为其质量评价提供依据。方法采用HPLC法,以五味子醇甲为参照,绘制10批护肝片原料粉样品的HPLC图谱;利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004 A)进行相似度评价,确定共有峰。采用主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)对样品进行模式识别分析。结果 10批护肝片样品的HPLC图谱有22个共有峰,经对照品进行化学指认共鉴定了其中的6个色谱峰,分别是五味子醇甲、柴胡皂苷a、柴胡皂苷c、柴胡皂苷d、五味子甲素、五味子乙素。10批供试品的相似度均大于0.97,表明该药物总体质量较为稳定;但通过PCA发现不同批次药物质量之间存在微小差异,且主要分为2类,最后进一步采用OPLS-DA筛选出了导致批次药物质量差异的2种主要成分,分别为12号峰(柴胡皂苷d)和22号峰。结论护肝片指纹图谱的构建和化学模式识别为护肝片的质量评价提供了可行的理论依据,可为生产厂家在药品生产中更高效、合理地控制药品质量提供科学依据。     

不同产地制何首乌HPLC指纹图谱研究及5种成分的含量测定

目的:通过测定不同产地制何首乌中二苯乙烯苷、大黄素、大黄素甲醚、五没食子酰葡萄糖、没食子酸5种指标性成分的含量,建立制何首乌HPLC指纹图谱分析方法。方法:采用高效液相色谱法,Agilent Eclipse XDB-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),乙腈-0.1%磷酸水溶液梯度洗脱,流速1.0 mL/min,波长254 nm,柱温30℃,对13批制何首乌药材的HPLC指纹图谱进行分析。结果:通过使用中药指纹图谱相似度评价软件分析,确定了29个共有峰,指认了五没食子酰葡萄糖、没食子酸、二苯乙烯苷、大黄素、大黄素甲醚5个化学成分。结论:本实验所建立的方法可为不同产地不同批次制何首乌药材质量评价提供参考。     

贵州何首乌HPLC指纹图谱研究

目的:建立贵州产何首乌药材的指纹图谱,为其质量控制提供依据。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱:Agillent ZABAX-C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相:乙腈-0.4%磷酸水溶液梯度洗脱,流速:1.0 mL/min,柱温:25℃,检测波长:280 nm,分析时间:60 min。结果:对贵州不同产地的药材样品进行分析,确定了9个共有峰,精密度、稳定性、重复性试验中各共有峰相对保留时间和相对峰面积的RSD均小于3%,16批样品相似度均达0.9以上。结论:所建立的方法简便、可靠,可为何首乌药材的质量控制提供指导和依据。     

何首乌与制何首乌补血作用及HPLC指纹图谱的比较

目的:通过比较何首乌、制何首乌水煎液的补血作用及其HPLC指纹图谱,初步探索两者药效不同的物质基础.方法:将大鼠分为4组,除正常组外,对其他3组大鼠于实验第2和第6天分别sc 0.015,0.03 g·kg-1剂量的乙酰苯肼,并于第6天起每天ip 0.03 g·kg-剂量环磷酰胺,持续3d,建立大鼠贫血动物模型,并于造模期间每天对相应组别大鼠灌胃何首乌、制何首乌水煎液各2 g·kg-1,造模结束后取血检测给药后大鼠外周血象红细胞计数(RBC),血红蛋白测定(Hgb),红细胞压积(HCT)的变化.通过高效液相色谱分析法,制定并建立何首乌与制何首乌的HPLC指纹图谱.结果:与正常对照组比较,贫血模型组大鼠RBC,Hgb,HCT均显著降低(P＜0.01),说明造模成功;何首乌组大鼠RBC,Hgb,HCT与贫血模型组比较,差异无统计学意义,仅HCT显著高于模型组(P＜0.05);制何首乌组大鼠RBC,Hgb,HCT与模型组比较,均显著升高(P＜0.01或P＜0.05).指纹图谱比对则发现制何首乌与何首乌有成分的差异,同时也有共有成分含量的差异.结论:制何首乌具有显著的补血功效,研究结果提示制何首乌中所含有的新的化学成分很有可能为麦拉德反应的产物,制何首乌较何首乌具有更佳补血功效有可能是该部分产物与较为温和的药性共同作用的结果.     

基于HPLC指纹图谱结合化学模式识别的长白瑞香质量控制研究

目的:建立长白瑞香HPLC指纹图谱。方法:采用SunFire~(TM) C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;以乙腈-0.05%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱;检测波长为327 nm;柱温为40℃;进样量为10μL;流速为1.0 mL/min;建立10批不同产地的长白瑞香指纹图谱,进行相似度评价,结合化学计量学方法对长白瑞香进行质量研究。结果:建立的指纹图谱共标定34个共有峰,指认其中3个成分,其相似度均在0.950以上;聚类分析可将样品聚为2类,结合主成分分析、正交偏最小二乘判别分析发现其中14个成分是造成不同批次样品差异性的主要标记物。结论:该分析方法科学、准确、简便易行,指纹图谱结合化学模式识别技术可更加系统、全面地评价长白瑞香的质量。     

基于HPLC指纹图谱结合化学模式识别及定量测定的夏枯草质量控制研究

目的建立夏枯草药材HPLC指纹图谱,结合化学模式识别技术筛选出不同批次夏枯草质量差异性标志物,并以其为指标建立夏枯草含量测定方法,为科学全面地评价夏枯草药材质量提供参考。方法采用HPLC法建立30批不同产地夏枯草的指纹图谱,利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A进行相似度评价,确定共有峰;运用主成分分析和正交偏最小二乘判别分析,筛选出不同批次夏枯草质量差异性标志物,基于筛选出的质量差异性标志物建立含量测定方法,并对61批夏枯草药材进行含量测定。结果建立了夏枯草HPLC指纹图谱,共标定28个共有峰,其相似度均在0.970以上,表明30批夏枯草药材的整体质量相对稳定;采用主成分分析和正交偏最小二乘判别分析筛选出了不同批次夏枯草质量差异的5个标志物,分别为咖啡酸(5号峰)、金丝桃苷(9号峰)、异槲皮苷(10号峰)、异迷迭香酸苷(11号峰)和迷迭香酸(12号峰),以5个标志物为指标,对其进行含量测定,色谱峰分离度良好,且线性关系良好,平均加样回收率为95.0%～105.0%,RSD值均低于3%。结论该方法科学、准确、可靠,指纹图谱结合化学模式识别技术和含量测定构建了一个更加完善、合理、有效的夏枯草质量评价方法。     

HPLC指纹图谱结合多成分含量测定评价香附质量

目的 建立香附药材的高效液相色谱(High performance liquid chromatography, HPLC)指纹图谱,结合4种化学成分含量对不同产地及用药规格香附的质量进行综合评价。方法 采集HPLC指纹图谱,并结合聚类分析(Cluster analysis, CA)和主成分分析(Principal component analysis, CA)等多种化学计量学方法对不同产地及用药规格的香附药材进行区分比较。利用HPLC法测定香附药材中香附烯酮、α-香附酮、木犀草素和阿魏酸的含量。结果 CA和PCA分析结果显示,不同产地香附均可单独聚为一类,而浙江金华与其他产地香附差异最大,河南尉氏香附综合得分最高,质量较优;正交偏最小二乘法判别分析(Orthogonal partial least square-discriminant, OPLS-DA)结果显示,指纹图谱中13号峰(α-香附酮)、10号峰(香附烯酮)和14号峰是不同产地间香附质量产生差异的主要成分。广东湛江和浙江金华香附中香附烯酮与α-香附酮含量较为接近,香附烯酮含量远大于河南香附,α-香附酮含量远小于河南香附;不...     

松栀丸HPLC指纹图谱模式识别及大黄素含量测定

目的建立松栀丸HPLC指纹图谱并测定主要差异性成分大黄素的含量,为松栀丸质量评价提供依据。方法采用HPLC对3批松栀丸共60个样品进行检测,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2.0版)计算相似度,运用主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘-判别分析(OPLS-DA)对松栀丸进行模式识别,寻找差异性成分,并对其含量进行测定。结果建立了松栀丸的指纹图谱,标定了17个共有峰。3批样本的相似度为0.898~0.971。通过PCA和OPLS-DA基本能区分不同批次松栀丸,确定大黄素为松栀丸的主要差异性成分。3批松栀丸中大黄素含量分别为0.0135~0.0171 mg/g、0.0367~0.0436 mg/g、0.0221~0.0310 mg/g。结论HPLC图谱结合PCA和OPLS-DA可快速评价松栀丸的质量,为松栀丸的质量控制提供依据。     

不同产地何首乌HPLC指纹图谱研究

目的建立不同产地何首乌Polygonum multiflorum的HPLC指纹图谱。方法采用HPLC法建立不同产地16批何首乌药材的指纹图谱,色谱条件为Extend C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱,体积流量1.0 m L/min,检测波长280 nm,通过Matlab软件对共有峰面积进行主成分分析,同时对16批何首乌中的二苯乙烯苷进行测定。结果 16批何首乌的相似度在0.936~0.998,说明不同产地何首乌样品质量稳定。同时确定了18个共有峰,并通过HPLC/Q-TOF/MS对何首乌共有峰进行定性分析。主成分分析结果与相似度分析结果一致,同时二苯乙烯苷量与主成分分析结果一致。结论该方法简便、可靠,可为何首乌药材的质量控制提供指导和依据。     

基于HPLC指纹图谱结合化学模式识别分析相思子叶质量

目的 基于HPLC指纹图谱结合化学模式识别分析相思子Abrus precatorius L.叶质量.方法 相思子叶50％乙醇提取物的分析采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相0.1％甲酸-(甲醇-乙腈)(8:2),梯度洗脱;体积流量1.0mL/min;检测波...     

不同产地板蓝根HPLC指纹图谱结合化学模式识别研究

目的:建立板蓝根水溶性成分的HPLC指纹图谱,结合化学模式识别方法,对不同产地板蓝根的质量进行评价.方法:建立HPLC色谱条件获取色谱数据,计算33批板蓝根之间的相似度,采用系统聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)及偏最小二乘法分析(PLS-DA)方法对33批板蓝根按药材与饮片之间进行区分,并找出与该分类结果相关性...     

诃子HPLC指纹图谱及模式识别研究

目的研究诃子的质量控制方法。方法采用高效液相色谱建立诃子药材的HPLC指纹图谱,收集了12批样品进行测定,并使用主成分分析对指纹图谱进行了模式识别研究。采用HPLC-MS技术对色谱峰进行了初步归属。结果通过主成分分析可知,诃黎勒酸为其中比较重要的指标。结论本方法为诃子质量控制及综合评价奠定了基础。     

白术UPLC指纹图谱模式识别及含量测定研究

目的建立不同产地白术的超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱及含量测定方法,并用于不同产地白术的质量评价。方法采用Waters ACQUITY UPLC CSH C18(2.1 mm×100 mm,1.7μm)色谱柱,流动相A为0.05%磷酸水,B为乙腈,梯度洗脱,流速为0.2 m L·min~(-1);柱温为25℃;进样量2μL。指纹图谱采用中药色谱指纹图谱相似度评价(2012版)软件,对25个不同产地的白术UPLC指纹图谱进行分析,并用SPSS版本软件进行聚类分析和主成分分析。结果 25批样品中指纹图谱标定了13个峰作为共有峰,精密度、重复性、稳定性中共有峰相对峰面积和相对保留时间的相对标准偏差(RSD)均小于2.0%。25批样品的某些样品的相似度差异较大,相似度为0.416~0.979;聚类分析将25批白术分为4类,主成分分析用2个主成分对25批样品进行综合性分析。含量测定中白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ和白术内酯Ⅲ的线性范围分别为0.086~0.60μg(r=0.999 9)、0.084~0.58μg(r=0.999)、0.090~0.62μg(r=0.999 9),加样回收率分别在95.83%~101.4%,98.61%~102.8%,97.44%~102.6%;平均加样回收率分别为98.38%,RSD 1.88%;99.54%,RSD 2.74%;98.29%,RSD 2.16%。结论建立的方法简单、可靠,精密度、稳定性、重复性良好;通过相似度和主成分对不同产地白术的差异性进行分析,可为白术的质量评价提供参考,也为白术后期深入研究奠定基础。     

HPLC指纹图谱结合化学模式识别评价舒筋活血制剂的整体质量

目的建立舒筋活血制剂(舒筋活血胶囊、舒筋活血片)HPLC指纹图谱的方法,为其整体质量评价提供参考。方法色谱柱为Agilent Poroshell 120 SB-C18(150 mm×4.6 mm,2.7μm),以乙腈-0.2%甲酸水溶液为流动相,进行梯度洗脱;体积流量0.5mL/min,检测波长277nm,柱温30℃。采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"(2012版)考察23批舒筋活血制剂的相似度,结合主成分分析(principal component analysis,PCA)、聚类分析(cluster analysis,CA)以及正交偏最小二乘判别分析(orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA)对舒筋活血制剂进行整体质量评价。结果舒筋活血制剂的HPLC指纹图谱中18批样品(S1～S17和S23)的相似度0.900,通过PCA、CA和OPLS-DA,23批样品聚成3类,S1～S16来自同一厂家为一类;S23和S17为一类;S18～S22为一类,并从10个共有峰中确定差异较大的4个共有峰,分别为1、3(5-羟甲基糠醛)、6(苯乙酸)和10(4-甲氧基水杨醛)号峰。结论所建立的指纹图谱结合化学模式识别方法稳定、简单,可用于评价舒筋活血制剂质量。     

36批何首乌药材质量的HPLC指纹图谱评价研究

 目的建立评价何首乌药材质量优劣的指纹图谱分析方法。方法采用高效液相色谱分析,LiChro CART C₁₈柱(4 mm×250mm,5μm),乙腈-水梯度洗脱,检测波长亦梯度变化,流速为1.0 mL·min^-1,柱温30℃。数据分析采用“计算机辅助相似性评价系统”软件。结果测定了36批何首乌药材的HPLC指纹图谱,建立了36批药材的总共有模式,计算得到各批药材的相似度,其中30批药材的相似度介于0.859 7～0.998 2,6批药材介于0.328 2～0.471 5。结论以相似度0.85为界,大于0.85认定为合格药材,小于0.85为不合格药材。本方法的评价结果与根据药典标准的划分结果一致,但更合理、直观、可操作性更强。     

HPLC指纹图谱评价何首乌和制何首乌不同提取部位肝毒性

目的 HPLC指纹图谱评价何首乌和制何首乌不同提取部位肝毒性。方法基于内毒素(脂多糖,LPS)的特异质肝损伤动物模型,HPLC法测定何首乌和制何首乌不同提取部位信噪比(S/N)大于10的指纹峰总面积,并以大鼠ALT、AST水平为评价指标,从而获得特异质肝损伤评价。结果何首乌与制何首乌3种提取部位的S/N比值大于10的指纹峰总面积从大到小依次为50%乙醇、75%乙醇、水,何首乌联合LPS给药组的肝损伤严重程度从重到轻依次为LPS+50%乙醇-何首乌、LPS+75%乙醇-何首乌、LPS+水-何首乌,制何首乌联合LPS给药组的肝损伤严重程度从重到轻依次为LPS+50%乙醇-制何首乌、LPS+75%乙醇-制何首乌、LPS+水-制何首乌。结论何首乌、制何首乌50%乙醇提取的部位毒性最大,HPLC总峰面积也最大,能更好的体现毒性成分信息。     

HPLC指纹图谱结合化学模式识别探讨脉安颗粒质量差异

目的 建立脉安颗粒高效液相色谱法（HPLC）指纹图谱,结合化学模式识别影响质量差异的特征化合物,探讨脉安颗粒质量差异。方法 收集19批脉安颗粒,分析并匹配指纹图谱,评价相似度;采用MetaboAnalyst 5.0在线分析系统及Simca 14.1软件进行聚类分析、主成分分析及偏最小二乘法-判别分析,评价样品质量并找出影响样品质量的特征化合物。结果 建立了脉安颗粒HPLC指纹图谱,匹配21个共有峰,分别指认出8个化合物,指纹图谱相似度为0.882~0.987。经分析,19批样品可分为3类,明确了影响脉安颗粒质量差异的特征成分。结论 建立的HPLC指纹图谱结合化学模式识别方法可用于脉安颗粒质量综合评价及差异性成分分析,为其质量标准提升提供参考。     

白芍的HPLC指纹图谱及模式识别研究

目的 研究白芍药材的质量控制方法.方法 采用高效液相色谱建立了白芍药材的HPLC的指纹图谱,收集了不同批次的47批样品进行测定,并使用聚类分析和主成分分析对指纹图谱进行了模式识别研究.结果 主成分分析和聚类分析结果一致,样品分为药材和饮片两类.结论 该方法可用于白芍质量控制及综合评价.