姜黄素单体影响肝癌BEL-7402细胞凋亡及其周期蛋白D表达的研究

目的 采用细胞学实验观察3种姜黄素单体对肝癌细胞株BEL-7402的抑制增殖及诱导细胞凋亡的作用强度和机制.方法 以四甲基偶氮唑蓝(MTT)、Annexin Ⅴ-FITC双标记及流式细胞术(FCM)实验观察3种姜黄素对肝癌细胞株BEL-7402增殖的抑制作用与细胞周期变化,采用 Western blot实验分析3种姜黄素对肝癌细胞株BEL-7402细胞周期蛋白D表达的影响.结果 (1)3种姜黄素均可通过诱导肝癌细胞凋亡而有效抑制肝癌细胞生长增殖,存在时间与剂量效应,以姜黄素Ⅲ抑制效果最强.(2)3种姜黄素通过影响细胞周期生长的调控信号、降低细胞周期蛋白D表达量致使肝癌细胞停滞于G1/S期.结论 3种姜黄素均可通过抑制肝癌细胞周期蛋白D表达而诱导细胞凋亡,有效地抑制肝癌细胞生长增殖,具有很高的临床治疗价值.     

七叶皂苷对人肝癌HepG-2细胞增殖与凋亡的实验研究

目的：观察研究七叶皂苷对人肝癌HepG-2细胞的增殖周期及凋亡的影响,探讨七叶皂苷抗肿瘤作用的机制。方法：噻唑蓝（MTT）法检测七叶皂苷对人肝癌HepG-2细胞生长的抑制作用,流式细胞仪分析七叶皂苷对人肝癌HepG-2细胞周期及凋亡的影响。结果：七叶皂苷对人肝癌HepG-2细胞的增殖有明显的抑制作用,并随着作用浓度的增大,抑制作用逐渐增强。流式细胞仪检测可见亚二倍体峰,提示七叶皂苷有诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡作用。七叶皂苷可通过诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡并将细胞阻滞在G0~G1期,使细胞不能进入S期进行DNA合成,最终使瘤细胞的体外增殖受到抑制。结论：七叶皂苷抑制人肝癌HepG-2细胞的增殖,使细胞周期阻滞和诱导细胞凋亡,七叶皂苷可能在其抗肝癌作用中具有重要意义。     

4-HPR体外诱导A549细胞凋亡与Bcl-2家族蛋白相关性研究

目的研究4-HPR对肺腺癌细胞A549体外生长的影响及机制的初步探讨。方法MTT法观察4-HPR对肺腺癌细胞株A549的生长抑制作用,流式细胞术观察4-HPR诱导A549细胞凋亡作用和对细胞周期的影响,Western blot分析凋亡相关蛋白表达。结果4-HPR抑制A549的增殖呈剂量依赖性;4-HPR诱导A549细胞凋亡,凋亡过程伴随Bcl-2、Bcl-xS/L表达下降,而Caspase-3、Caspase-9的表达无明显变化。结论4-HPR可明显抑制肺腺癌细胞的增殖,通过降低Bcl-2和Bcl-xS/L促进A549细胞凋亡,为进一步探讨4-HPR治疗肺腺癌的机制提供实验依据。     

榄香烯对人肝癌细胞7402、宫颈癌细胞Hela的凋亡诱导作用及下调Bcl—2蛋白表达

目的 研究中药榄香烯对人肝癌细胞7402、宫颈癌细胞Hela的体外抑瘤效应及其作用机制。方法 应用MTT比色法观察榄香烯对细胞的生长抑制作用;荧光显微镜和透射电镜观察细胞结构的改变;DNA凝胶电泳和流式细胞术等分析细胞凋亡、周期变化及Bcl-2蛋白表达情况。结果 榄香烯对7402和Hela细胞有较强的体外增殖抑制作用。榄香烯能诱导7402和Hela细胞凋亡,同时伴随有Bcl-2蛋白表达下调。结论 榄香烯对7402、Hela细胞有较强的抗瘤效应,其可能与Bcl-2蛋白下调引起的细胞凋亡有关。     

全反式维甲酸诱导A549细胞凋亡机制的初步探讨

目的研究全反式维甲酸(ATRA)对肺腺癌A549细胞凋亡的影响及机制。方法MTT法观察ATRA对肺癌细胞株A549的生长抑制作用,流式细胞仪观察ATRA诱导A549细胞凋亡作用和对细胞周期的影响,Western Blot分析凋亡相关蛋白表达。结果ATRA抑制A549的增殖呈剂量依赖性;ATRA可诱导A549细胞凋亡,凋亡过程伴随caspase-3、caspase-9表达增加,而Bcl-2、Bcl-Xs/LP的表达无明显变化。结论ATRA可明显抑制A549细胞的增殖,可通过上调caspase-9、caspase-3的表达促进A549细胞凋亡。     

姜黄素对人肝癌细胞株HepG-2生长及超微结构的影响

目的 探讨姜黄素对人肝癌细胞HepG-2生长抑制作用及其对细胞超微结构的影响。方法 采用MTT法观察药物对癌细胞生长的影响，应用透射电镜观察癌细胞的超微结构改变。结果 MTT法显示，姜黄素能抑制肝癌细胞的生长，随着剂量增加，其效应也增加。电镜观察显示癌细胞经姜黄素作用后超微结构发生改变，凋亡细胞多见。结论 姜黄素具有抑制HepG2肝癌细胞生长的作用，其作用机制之一为诱导细胞凋亡。     

山楂酸抑制食管鳞癌细胞增殖、迁移与诱导凋亡的作用研究

目的 探讨山楂酸对食管鳞癌细胞增殖、迁移与诱导凋亡的影响及可能机制。方法 分别以不同浓度的山楂酸处理ECA-109细胞,MTT检测细胞增殖,划痕实验检测细胞迁移,Annexin V-FITC/PI双染凋亡法检测细胞凋亡,Western blot检测细胞中Bax、Bcl-2和p53蛋白的表达。结果 山楂酸剂量依赖性抑制ECA-109细胞的增殖和迁移,Annexin V-FITC/PI双染检测到细胞经给药后发生凋亡,且细胞中Bax、p53蛋白表达上升,Bcl-2蛋白表达下降。结论 山楂酸对食管鳞癌细胞的增殖和迁移有抑制作用,且通过上调Bax、p53和下调Bcl-2的表达来诱导该细胞凋亡。     

雷帕霉素抑制人结肠癌细胞体外增殖及其机制研究

目的 研究哺乳动物雷帕霉素靶蛋白mTTOR特异性抑制荆雷帕霉素(Rapamycin)对体外培养的人结肠癌Lovo细胞生长的抑制作用,并初步探讨其机制.方法 分别用0.5、1.0、2.5和5.0ug/mL雷帕霉素对Lovo细胞进行干预,采用MTT检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达.结果 雷帕霉素对Lovo细胞表现出明显的增殖抑制作用,细胞增殖活性随浓度增加、时间延长逐渐降低,呈现量-效、对-效关系.雷帕霉素呈浓度依赖性诱导细胞凋亡,并明显降低Lovo细胞中凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达水平.结论 雷帕霉素通过下调凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达,诱导结肠癌Lovo细胞凋亡,从而抑制其增殖及生长.     

苦参碱诱导人肺鳞癌SK-MES-1细胞凋亡作用及其可能机制

目的：探讨苦参碱（MT）诱导人肺鳞癌细胞株SK-MES-1凋亡作用及其抗肿瘤机制。方法：培养人肺鳞癌细胞株SK-MES-1,用不同浓度的MT处理SK-MES-1细胞,用MTT法检测MT对SK-MES-1细胞生长增殖的抑制作用;流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期;流式细胞术检测细胞相关凋亡蛋白Bcl-2、bax、caspase-3表达。结果：MT抑制SK-MES-1细胞增殖和诱导SK-MES-1细胞的凋亡作用均呈剂量和时间依赖性。与对照组相比,苦参碱处理后的SK-MES-1细胞G0/G1期百分比明显增高,S期细胞比例下降。Bax和capase-3表达增强,Bcl-2表达下调。结论：MT在体外能抑制人肺鳞癌细胞株SK-MES-1增殖,诱导细胞凋亡,其诱导作用具有明显的量效和时效关系,可能与抑制Bcl-2活性、激活bax和capase-3有关。     

苦参碱对小鼠H22细胞抗肿瘤作用的实验研究

目的:观察苦参碱在体内和体外的抗肿瘤作用.方法:MTT法检测苦参碱对小鼠腹水瘤细胞H22的体外杀伤作用;Annexin V-FITC/PI双标记法检测苦参碱对体外培养的H22细胞的诱导凋亡作用;在BALB/C小鼠H22移植瘤模型上观察苦参碱的体内抑瘤活性,透射电镜观察苦参碱治疗后荷瘤小鼠肝癌细胞的超微结构改变;免疫组化法检测荷瘤小鼠肝癌组织中Bcl-2、Bax蛋白表达.结果:苦参碱在体外能够明显抑制H22细胞的生长和增殖,并可诱导细胞凋亡;对小鼠肿瘤生长也有明显抑制作用,高、低浓度组抑瘤率分别为60.71%和62.53%;用药组小鼠肿瘤组织中,电镜下可见较为典型的细胞凋亡的形态学改变;肿瘤组织中Bcl-2蛋白表达明显降低,Bax蛋白表达增强,与荷瘤对照组相比有显著性差异(P＜0.01).结论:苦参碱在体内外对H22肿瘤细胞生长均有抑制作用,同时可促进肿瘤细胞表达Bax蛋白,抑制Bcl-2表达,诱导肿瘤细胞凋亡.     

莱菔硫烷对人肝癌HepG-2细胞Bcl-2与Bax基因转录及蛋白表达的影响

目的：研究莱菔硫烷（Sulforaphane,SFN）在体外对HepG-2细胞Bcl-2、Bax基因转录和蛋白表达的影响,探讨SFN诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡的机制。方法：不同浓度SFN处理体外培养的HepG-2细胞株48 h,采用SRB法测定SFN对HepG-2细胞增殖的影响;激光共聚焦显微镜观察凋亡细胞形态;流式细胞仪检测SFN作用后的细胞凋亡率;Western blot法和RT-PCR法检测SFN在蛋白和mRNA水平上对Bcl-2和Bax表达的影响。结果：SFN对HepG-2细胞的GI50为9.40μmol/L,TGI为26.68μmol/L;10、20、40μmol/L的SFN作用于HepG-2细胞48 h后,激光共聚焦显微镜下呈现典型的凋亡细胞形态,细胞凋亡率分别为（27.42±0.43）%、（46.53±0.35）%和（58.92±0.48）%（P〈0.01）;细胞内Bcl-2蛋白和mRNA表达水平均显著降低（P〈0.01）,而20、40μmol/L的SFN作用后细胞内Bax蛋白和mRNA的表达水平均显著升高（P〈0.01）,Bcl-2/Bax和Bcl-2 mRNA/Bax mRNA均随SFN剂量的增加显著降低（P〈0.01）,且变化趋势均呈一定的剂量依赖关系。结论：SFN能抑制HepG-2细胞的增殖,诱导HepG-2细胞凋亡,可在翻译和转录水平下调Bcl-2、上调Bax的表达,这可能是SFN诱导HepG-2细胞凋亡的主要机制之一。     

原白头翁素衍生物对人肝癌HepG-2细胞的诱导凋亡作用

[目的]观察原白头翁素衍生物对人肝癌HepG-2细胞的诱导凋亡作用.[方法]应用MTT法、HE染色及AO/EB荧光染色方法观察原白头翁素衍生物对人肝癌HepG-2细胞形态的影响.[结果]原白头翁素衍生物对人肝癌HepG-2细胞增殖抑制作用呈质量浓度依赖性和时间依赖性(P<0.05,P<0.01).倒置显微镜下见,给予原白头翁素衍生物5.0 mg/L后早期细胞出现凋亡,晚期细胞发生碎裂坏死;HE染色和AO/EB荧光染色观察见细胞出现典型凋亡形态学变化.[结论]原白头翁素衍生物对人肝癌HepG-2细胞有抑制增殖和诱导凋亡作用.     

3-溴丙酮酸对人肝癌HepG-2细胞增殖和凋亡的影响

目的：通过3-溴丙酮酸作用于HepG-2细胞,观察3-溴丙酮酸对HepG-2细胞增殖和凋亡的影响。方法：MTT法检测细胞增殖,倒置显微镜和透射电镜观察细胞形态,流式细胞术检测细胞周期分布和细胞凋亡。结果：3-溴丙酮酸在25～75μg/mL范围内,对HepG-2细胞的增殖具有明显的抑制作用并呈现剂量依赖性。3-溴丙酮酸处理HepG-2细胞后,倒置显微镜观察到细胞生长稀疏,细胞质透亮度下降,细胞脱落增多;透射电镜观察到染色质固缩、边集,核质内可见空泡。流式细胞术结果显示3-溴丙酮酸可将HepG-2细胞阻滞于S期,且DNA直方图上可见亚二倍体峰。在3.125～25μg/mL范围内,3-溴丙酮酸可剂量依赖性的诱导HepG-2细胞凋亡。结论：3-溴丙酮酸抑制HepG-2增殖并诱导HepG-2凋亡。     

轮叶党参总皂苷对HepG-2细胞凋亡的作用

目的:探讨轮叶党参总皂苷(CLTS)对人肝癌HepG-2细胞的抑制作用,阐明其凋亡调控作用机制.方法:HepG-2细胞分为100、200、300、400、500、600mg·L-1CLTS处理组和对照组(未加CLTS),处理HepG-2细胞72 h后,采用MTT法检测细胞生长抑制率,计算半数抑制浓度(IC50);HeP...     

中药蛇六谷石油醚萃取物B部位体外抗肿瘤作用的实验研究

[目的]观察蛇六谷石油醚萃取物B部位对大鼠胶质瘤C6、人胃癌SGC-7901、人肝癌HepG-2细胞的抑制作用,并对其作用机制进行探讨。[方法]采用MTT法、生长曲线法和吖啶橙荧光染色法测定蛇六谷石油醚萃取物B部位对C6、SGC-7901、HepG-2细胞生长及凋亡的影响。[结果]蛇六谷石油醚萃取物B部位均有不同程度的抑制上述三种细胞的增殖及导致细胞凋亡的作用。[结论]蛇六谷石油醚萃取物B部位在体外具有抗肿瘤作用,其机制可能与诱导肿瘤细胞凋亡有关。     

马鞭草总黄酮诱导肝癌HepG-2细胞凋亡及可能机制

目的 探讨马鞭草总黄酮对肝癌HepG-2细胞凋亡的作用及可能机制.方法 采用浓度为50、100和200 mg/L的马鞭草总黄酮处理体外培养的肝癌HepG-2细胞,流式细胞仪和琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡;流式细胞仪检测活性氧簇(ROS)和膜电位变化;Western印迹法分析Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9和P53蛋白表达水平.结果 与未给药对照组比较,马鞭草总黄酮50、100和200 mg/L给药组均能促进肝癌HepG-2细胞凋亡(P<0.01),增加ROS水平(P<0.01),降低线粒体膜电位(P<0.05,P<0.01);马鞭草总黄酮50、100和200 mg/L可增加Caspase-3、Caspase-9和P53蛋白表达水平(P<0.05,P<0.01).结论 马鞭草总黄酮可体外诱导肝癌HepG-2细胞凋亡,其诱导凋亡的机制可能与其增加ROS水平、降低线粒体膜电位,并同时上调Caspase-3、Caspase-9、P53蛋白水平有关.     

高浓度葡萄糖诱导HepG-2细胞的凋亡及其调控的相关机制

目的 探讨高浓度葡萄糖诱导HepG-2细胞的凋亡及其调控的可能机制.方法 用含不同浓度葡萄糖的DMEM处理HepG-2细胞,分为正常组(糖浓度为5.5 mmol/L)和高浓度葡萄糖组(糖浓度分别为25、40、100、150、200 mmol/L ),采用MTT、Hoechst染色法观察细胞的增殖和凋亡状况; Weste...     

5,2′,4′-三羟基-6,7,5′-三甲氧基黄酮对肝癌HepG-2细胞增殖的抑制作用

[目的]观察5,2′,4′-三羟基-6,7,5′-三甲氧基黄酮对肝癌HepG-2细胞增殖的影响.[方法]采用MTT比色法观察5,2′,4′-三羟基-6,7,5′-三甲氧基黄酮对肝癌HepG-2细胞增殖的抑制作用;采用流式细胞仪检测5,2′,4′-三羟基-6,7,5′-三甲氧基黄酮对HepG-2细胞周期分布的影响,同时结合扫描电子显微镜观察HepG-2细胞的凋亡情况.[结果]5,2′,4′-三羟基-6,7,5′-三甲氧基黄酮可抑制肝癌HepG-2细胞的增殖,其作用呈时间及浓度依赖性;可改变肝癌HepG-2细胞周期的分布,使多数细胞阻滞于G2/M期.[结论]5,2′,4′-三羟基-6,7,5′-三甲氧基黄酮可诱导肝癌HepG-2细胞凋亡,改变细胞周期分布,从而抑制细胞增殖.     

人穿孔素基因的克隆及其在HepG-2细胞中的表达

目的：观察克隆的人穿孔素(perforin,PFN)基因在HepG-2细胞中的表达及其对转染的HepG-2细胞的作用．方法：用RT-PCR方法获取人PFN cDNA．将所获基因克隆入真核表达载体pcDNA3．1^- A,转染HepG-2细胞．间接免疫荧光法检测目的蛋白表达,电镜观察转染细胞的形态和结构变化,细胞计数检测转染目的基因后细胞的增殖情况．结果：成功获得人PFN全长cDNA,并构建了真核表达载体．转染HepG-2细胞后,检测出目的蛋白的表达．细胞计数发现细胞增殖被明显抑制．电镜观察显示,崩解的细胞呈现坏死的典型特征．结论：人PFN全长cDNA可以在转染的HepG-2细胞中表达,并且可使转染细胞的形态发生变化,出现大量细胞坏死．