旋毛虫肌肉期幼虫分泌排泄物中46—58kD蛋白的纯化及其在诊断中的…

本研究以常规ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和电洗脱技术相结合，分离纯化旋毛虫肌肉期幼虫分泌排泄物中４６－５８ｋＤ的蛋白组份，并用于Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ诊断旋毛虫病。检测结果；旋毛虫病人血清３４份，阳性３２份，阳性反应率为９４．１２％；正常人血清１００份未发现假阳性；对蛔虫病人，囊虫病人，血吸虫病人及肺吸虫病血清谱无交叉反应出现。     

COMPARATIVE STUDY ON DETECTION OF ANTI-TOXOPLASM A GONDII ANTIBODIES BY USING DOT-ELISA AND DOT-IMMUNOGOLD SILVER STAINING

为比较斑点免疫金银染色（Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ）和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测弓形虫抗体的敏感性和特异性，本实验以弓形虫速殖子可溶性蛋白抗原为诊断用抗原，同时用Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测６５份弓形虫感染者血清、１７６份其他寄生虫感染者血清和７６份对照血清。结果显示，用Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ及Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测弓形虫感染者抗体阳性率分别为９８．４６％及９２．３１％，平均抗体滴度分别为１∶３８４及１∶２１８（１∶２０－１∶２５６０）。用Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ检测，有２３份血清抗体滴度高于Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ，有８份低于Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ。二种方法所测抗体滴度呈直线正相关关系（ｒ＝０．６０８，Ｐ＜０．０１）。二种方法检测其他寄生虫感染者和对照血清，假阳性率分别为５．９５％及１３．８９％。Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ操作流程和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ相似，但敏感性、特异性均优于Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ，前者不使用对人体有害的底物，有较好的推广前景。     

斑点免疫金银染色与Dot—ELISA检测抗弓形虫抗体的对比研究

为比较斑点免疫金银染色（Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ）和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测弓形虫抗体的敏感性和特异性，本实验以弓形虫速殖子可溶性蛋白抗原为诊断用抗原，同时用Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测６５份弓形虫感染者血清、１７６份其他寄生虫感染者血清和７６份对照血清。结果显示，用Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ及Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测弓形虫感染者抗体阳性率分别为９８．４６％及９２．３１％，平均抗体滴度分别为１：３８４及１：     

四种弓形虫病血清学诊断方法的比较研究

本研究应用弓形虫的斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）、常规酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）和间接免疫荧光试验（ＩＦＡ）及间接血凝抑制试验（ＩＨＡ）四种方法，分别检测了同一批人血清（１５０份）。结果表明：（１）四种方法中以Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ最为敏感，血清阳性检出率最高为１９．３％；ＩＦＡ次之为１１．３％；ＥＬＩＳＡ为８．６９％；ＩＨＡ最低仅为６．６６％。（２）Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ明显优于常规ＥＬ     

三种免疫学方法检测抗班氏丝虫IgG的比较

用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ），斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）和斑点免疫金银染色（Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ）同步检测５０份班氏微丝蚴血症者血清中抗丝虫ＩｇＧ。ＥＬＩＳＡ，Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ和Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ检测抗体阳性率分别为８６％（４３／５０），９０％（４５／５０）。ＥＬＩＳＡ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ联合应用阳性率为９６％（４８／５０）。ＥＬＩＳＡ与Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ检测微丝蚴血症者抗体阳性率有     

斑点免疫金银染色用于弓形虫病血清学诊断的研究

采用斑点免疫金银染色（Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ）和斑眯酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＩ．ＩＳＡ），以弓形速殡子可溶性蛋白抗原作为靶抗原检测６５例弓形虫感染者血清抗弓 虫ＩｇＧ，Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ和Ｄｏｔ－ＥＳＩＳＡ检测阳性率分别不９８．４６％和９２．４６％。血清平均滴度在Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ为１：３９４，在Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ为１：２１８。两法均一的有５９例，其中在两法中抗体滴度相同者２８例，Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ检测滴     

Dot－ELISA检测抗原与IHA、COPT检测抗体诊断血吸虫病的比较

本文比较了斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）检测循环抗原，间接血凝试验（ＩＨＡ）、环卵沉淀试验（ＣＯＰＴ）检测抗体诊断血吸虫病的效果。１２例急性血吸虫病患者血清３种方法检测均为阳性；２７７例慢性血吸虫病患者血清３种方法检测阳性率分别为７９．４２％、６４．６２％和６３．１８％。１４例华支睾吸虫病患者血清和８９例健康人血清Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测均为阴性。１０例急性血吸虫病患者，在离开流行区经吡喹酮治疗后３７周时粪检全部转阴，检测血清循环抗原４例转阴，其余６例滴度大幅度下降；ＩＨＡ检测３例转阴，其余７例几何平均倒数滴度（ＧＭＲＴ）由４７．５７降至９．３５；ＣＯＰＴ检测平均环沉率由２１．５％降至４．１２％。结果表明Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测血吸虫循环抗原具有较好的敏感性和特异性。这３种方法在血吸虫病诊断及疗效考核中均有一定价值。     

Dot-ELISA的囊虫病免疫诊断价值

本文用纯化糖蛋白抗原对１１６ 例囊虫病人血清进行Ｄｏｔ－ ＥＬＩＳＡ检测,阳性率为９６．８％ （１１２／１１６）,３６ 例健康人血清皆为阴性,２７ 例肝吸虫病与包虫病人血清除２例外均为阴性,并以ＩＨＡ和ＥＬＩＳＡ作对照,结果表明Ｄｏｔ－ ＥＬＩＳＡ 在３种方法中敏感性和特异性较高     

应用单克隆抗体检测蚊体内幼丝虫的实验观察

以马来丝虫感染期幼虫为靶抗原制备多株单克隆抗体从中筛选出１Ｇ１，１Ｈ１单克隆抗体，检测人工感染马来丝虫的中华按蚊。当中华按蚊吸食马来微丝蚴的兔血后，分别解剖同时以ＥＬＩＳＡ及Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测饲养不同时间的中华按蚊。结果显示，饲养９ｄ的按蚊马来丝虫幼虫阳性率，人工解剖为８６．６％，ＥＬＩＳＡ和Ｄｏｔ－ＥＬＳＩＡ法分别为８２．２％和７７．８％。     

旋毛虫幼虫排泄分泌抗原用于诊断人旋毛虫病的可行性探讨

作者将自行分离制备的旋毛虫肌肉期幼虫２４小时排泄分泌抗原，用间接ＥＬＩＳＡ共检测３４份旋毛虫病人血清，３２份为阳性，阳性率９４％．而８２份正常人血清均为阴性反应。且不与蛔虫病人、囊虫病人血清发生交叉反应，但与肺吸虫及血吸虫病人血清发生交叉反应。经用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及铵银染色后显示，该抗原含有１１种蛋白组份，分子量介于９６ｋＤ－１７．６ｋＤ之间。有３条主带，分子量分别为４０、４８、５３ｋＤ。酶联免疫印迹试验表明旋毛虫病人血清能特异识别分子量为４８ｋＤ蛋白。而肺吸虫及血吸虫病人血清所能识别的区带均小于４０ｋＤ。该结果表明４８ｋＤ蛋白抗原组分在人旋毛虫病上具有潜在诊断价值，而酶联免疫印迹试验不失为一种可行的人旋毛虫病的诊断方法。     

抗旋毛虫肌肉期幼虫排泄分泌物中46-58kDa蛋白IgM和IgG抗体的研究

目的寻求简便、快速、可靠的方法,用于旋毛虫病的诊断及疗效考核。方法建立检测抗旋毛虫肌肉期幼虫排泄分泌物(TsL1-ES)中46-58kDa蛋白抗体的斑点金免疫渗滤试验(DIGFA),并对患者在治疗前和治疗后血清中特异抗体水平的动态变化进行研究。结果旋毛虫病患者治疗前血清中特异IgM和IgG抗体的检出率分别为94.83%(55/58)和91.38%(53/58);正常人血清(100份)、囊虫病(25份)、血吸虫病(20份)、肺吸虫病(20份)及蛔虫病(22份)病人血清均未检出该两类特异性抗体。52例两类抗体均阳性的旋毛虫病患者经有效药物治疗后3个月、6个月、1年、1.5年连续采血,经DIGFA检测连续观察的结果表明,IgM抗体出现较早,阴转较为明显和迅速,治疗后3月的阴转率达46.15%(24/52),1年的阴转率可达88.46%(46/52);而IgG抗体则出现较晚,阴转缓慢,治疗后1.5年的阴转率仅为23.08%(12/52)。结论DIGFA为检测抗TsL1-ES中46-58kDa蛋白抗体的有效方法,检测IgM抗体可用于诊断及疗效考核,而IgG抗体的检测不宜用来判断疗效。     

蚯蚓抗原抑制性Dot-ELISA检测蠕虫病患者血清抗体的实验研究

目的　建立蚯蚓抗原抑制性Dot-ELISA ,并观察其对日本血吸虫病、肺吸虫病、旋毛虫病人血清抗体检测特异性的影响。方法　应用Pa -Ag抑制性Dot-ELISA对 15 8份日本血吸虫病人、97份肺吸虫病人和 6 2份旋毛虫病人阳性血清进行检测 ,并将结果与Dot-ELISA所获结果予以比较分析 ,观察两种方法之间有无显著性差异。结果　Pa -Ag抑制性Dot -ELISA在SEA、Pw -Ag和Ts-Ag的交叉反应抑制率 (39 90 %～ 94 72 % )与Dot -ELISA比较有显著性差异 (P >0 0 5～0 0 1)。结论　Pa -Ag抑制性Dot-ELISA在显著提高寄生蠕虫病血清免疫学诊断特异性的同时 ,又保证了其 10 0 %的敏感性     

Dot-IGSS检测日本血吸虫病人血清抗体的研究

运用斑点免疫金银染色法(Dot-IGSS)检测了日本血吸虫病人血清抗体,并与斑点酶联免疫试验(Dot-ELISA)作了比较。检测了急性血吸虫病人血清38份,两法结果全部阳性;慢性血吸虫病人血清70份,Dot-IGSS阳性69份(98.6％),Dot-ELISA阳性65份(92.9％);治疗后血吸虫病人血清40份,Dot-IGSS阳性15份(37.5％),Dot-ELlSA阳性11份(27.5％)。用两法检测华枝睾吸虫病人血清20份,均有1份为阳性;检测正常人血清40份,均未出现阳性反应。将8份阳性血清作倍比稀释(1:20～1:61440)后分别用该两法检测,Dot-IGSS的敏感性明显高于Dot-ELISA(P<0.05)。对120例过去无血吸虫病史、接触疫水且皮试阳性者血清检测结果表明,Dot-IGSS的阳性检出率明显高于Dot-ELISA、COPT及循环抗原测定法(P<0.01)。     

斑点免疫金银染色法诊断囊虫病的研究

用斑点免疫金银染色法(Dot-IGSS)和Dot-ELISA检测40份确诊为囊虫病患者的血清。两种方法检测的阳性率均为100％,用Dot-IGSS检测,40份血清的平均滴度为1:27470,显著高于用Dot-ELISA检测的平均滴度1:9069(P<0.01)。检测50份义务献血员血清,假阳性率分别为2％和4％。10份日本血吸虫病人血清分别有1份和2份出现假阳性。与肝吸虫病人血清无交叉反应,与包虫病人血清有明显的交叉反应。     

双抗体夹心-ELISA用于旋毛虫活动性感染的诊断及疗效考核

目的检测宿主血清中旋毛虫循环抗原 ( CAg)以诊断本病和考核药物疗效。方法双抗体夹心 -ELISA法。结果 94只实验感染旋毛虫小鼠 ,受染 3d后 ,即有 7%的小鼠显示阳性反应 ,受染 30 d,无论受染幼虫数目多寡 ( 50、1 50及 30 0条幼虫 /只 ) ,全部受染鼠 ( 1 0 0 % )均显示阳性反应。给予丙硫咪唑治疗后的第 1周 ,CAg的阳性率仍为 1 0 0 % ,但在治疗后第 2、3及 4周 ,则分别降为 60 %、2 0 %及 1 0 %。检测 61头感染旋毛虫猪血清中 CAg,4 0头 ( 65.6%± 6.1 % )呈阳性反应。 1 0 0头正常猪均为阴性 ,30头感染囊尾蚴和 30头感染弓形虫的猪 ,仅 1头感染弓形虫的猪出现轻度交叉反应。检测 36例旋毛虫病人血清中 CAg,2 6例 ( 72 .2 % )呈阳性反应。 50例正常人皆为阴性。 1 4 2例其他 9种寄生虫病人 ,仅 1例囊尾蚴病人出现轻度交叉反应。结论旋毛虫 CAg的检测具有早期诊断和考核药物疗效的价值。     

斯氏狸殖吸虫幼虫排泄分泌抗原Dot—ELISA诊断肺吸虫病研究

目的 探索斯氏狸殖吸虫幼虫排泄分泌抗原的免疫诊断价值。方法 采用斯氏狸殖吸虫幼虫排泄分泌抗原Dot-ELISA检测28例斯氏狸殖吸虫病人血清、6份日本血吸虫病人血清、4份华支睾吸虫病人血清、20份健康 人血清中抗斯氏狸殖吸虫幼虫排泄分泌抗原的抗体IgG。结果 斯氏狸殖吸虫幼虫排泄分泌抗原与28例斯氏狸殖吸虫病人血清均呈阳性反应,与其它2种吸虫病和健康人血清未发生反应。结论 斯氏狸殖吸虫幼虫排泄分泌抗原Dot-ELISA为诊断肺吸虫病敏感、特异的诊断方法。     

斑点-ELISA检测黑热病抗体的研究

以往,常规ELISA已应用于黑热病的诊断,但由于载体表面对于可溶性抗原吸附的实际浓度难于确定,且批间的差异亦很大,这些因素往往影响了实验结果。1982年Hawkes等,首先将它改良为斑点免疫结合试验(斑点-ELISA)并用于单克隆抗体的鉴定。鉴于此法简易、快速,且可目测等优点,故我们用于黑热病患者抗体的检测,现报道如下。     

双抗体夹心Dot-ELISA诊断新疆地区皮肤利什曼病

应用双抗体夹心Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法诊断新疆皮肤利什曼病患者的循环抗原或抗原—抗体复合物获得较好的结果。实验证明，经皮肤组织病理切片，原虫确诊的３０例患者，２５例为阳性反应（８３．３％）。同时对麻风病、结核病以及疟疾患者进行交叉试验，均为阴性。     

Comparison of Dot-ELISA with Sandwich-ELISA for the detection of circulating antigens in patients with bancroftian filariasis

We compared the performance of a newly developed Dot-ELISA with that of a previously described Sandwich-ELISA to detect parasite antigens in sera from patients with bancroftian filariasis. The same monoclonal antibody and the same sera were used in both tests. In the Dot-ELISA, 67 of 70 sera from microfilaremic donors were deemed to contain filarial antigens when screened at a dilution of 1:50. End titers were 1:80-1:1280. With the Sandwich-ELISA, 64 of the same sera were positive at a dilution of 1:10 and 42 were positive at a dilution of 1:50. End titers were 1:10-1:320. The specificity of both assays was greater than 95%, but their sensitivity was remarkably different. The Dot-ELISA could detect as little as 0.055 ng/ml microfilarial antigen added to normal human sera, whereas the lower limit with the Sandwich-ELISA was 10 ng/ml parasite antigen. Additionally, the Dot-ELISA does not require radioactivity or sophisticated equipment and, therefore, can be performed in virtually all filariasis-endemic areas.     

Rapid serodiagnosis of leptospirosis using the IgM-specific Dot-ELISA: comparison with the microscopic agglutination test

The dot enzyme-linked immunosorbent assay (Dot-ELISA) was compared to the microscopic agglutination test (MA test) for the diagnosis of human leptospirosis. Of 177 sera from 68 soldiers who trained in the Republic of Panama, 102 sera were positive in the MA test and 93 of these sera were positive in the IgM-specific Dot-ELISA. Incidence of infection was 50 of 68 patients with the MA test and 48 of 68 in the IgM Dot-ELISA. Five MA test-positive sera were reactive only in the IgG-specific Dot-ELISA, suggesting previous exposure. All 21 infecting serovars of Leptospira interrogans, as determined by positive reactions in the MA test or culture of blood and urine specimens, were reactive in the Dot-ELISA. Of 75 sera negative in the MA test, 61 were nonreactive in the Dot-ELISA. However, 9 of these 14 Dot-ELISA-positive/MA test-negative sera were acute samples from patients whose later sera were MA test-positive. Positive reactions in the IgM Dot-ELISA occurred in 2 of 30 control, 4 of 10 Lyme disease, 1 of 11 relapsing fever, and 1 of 8 yaws sera; 10 syphilis patient sera were nonreactive. The IgM-specific Dot-ELISA appears to be sensitive and specific for the serodiagnosis of acute leptospirosis. In addition, this rapid test is inexpensive, simple to perform, utilizes minute volumes of killed leptospiral antigen and is easily adaptable to field use.