5种补益方对环磷酰胺毒性的拮抗作用

目的:研究5种补益方对环磷酰胺造模小鼠毒性的拮抗作用。方法:采用微核法、逆转录PCR、抗氧化试剂盒、流式细胞术等检测骨髓细胞微核率、P53基因表达、还原型谷胱甘肽(GSH)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、脾指数、脾细胞凋亡率、胸腺指数、细胞周期等。结果:5种补益方能拮抗环磷酰胺造成的小鼠骨髓细胞、胸腺细胞的增殖抑制;拮抗脾细胞增殖抑制(理中汤不明显);增重免疫器官;降低骨髓细胞微核率;拮抗小鼠血清CAT的降低;拮抗小鼠血清GSH降低(理中汤不明显);抑制MDA升高(金匮肾气汤不明显);四君子汤和六味地黄汤还在减少脾细胞凋亡、拮抗SOD降低、影响P53基因表达等方面显示了较好的效果。结论:5种补益方能拮抗环磷酰胺的毒性,对环磷酰胺造模小鼠有一定的保护作用。其中以四君子汤、六味地黄汤效果较佳。     

针灸对CTX化疗小鼠骨髓造血微环境中骨髓基质细胞细胞周期的影响

目的:探讨针灸抗化疗毒副反应,改善骨髓造血微环境中骨髓基质细胞支持造血功能的分子生物学机制。方法:40只SPF级雄性昆明种小鼠,随机分为空白组、模型组、针刺组、艾灸组。采用国际公认的环磷酰胺(CTX)骨髓抑制模型。针刺组、艾灸组分别采用针刺、艾灸治疗,每天1次,连续5 d。空白组、模型组每天陪同针刺组、艾灸组抓取、固定,不做任何处理。每组分别于治疗后第1天、第3天、第5天随机处死3只小鼠,采用石蜡包埋小鼠左侧股骨,应用石蜡包埋组织单细胞悬液制备方法,制备成小鼠骨髓基质细胞单细胞悬液,经流式细胞仪检测小鼠骨髓造血微环境中骨髓基质细胞的细胞G1期、S期、G2期细胞百分率。结果:与模型组比较,针刺组和艾灸组可以降低CTX化疗小鼠骨髓造血微环境中骨髓基质细胞(BMSC)G1期细胞含量,其中3 d组、5 d组差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,针刺和艾灸可以提高3 d组BMSC的S期细胞含量,针刺和艾灸可以降低5 d组BMSC的S期细胞含量,差异均具有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,针刺组和艾灸组可以提高1 d组、3 d组、5 d组BMSC的G2期细胞含量,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:烷化剂CTX损伤骨髓造血微环境的同时,破坏了骨髓基质细胞的细胞周期规律,从而产生骨髓抑制,严重影响骨髓造血功能。针刺与艾灸可以促进CTX化疗后骨髓基质细胞(BMSC)的细胞修复,加速骨髓基质细胞从G1期向S期的转化,增强骨髓基质细胞DNA的合成,延长G2期,同时利用细胞G2期阻滞的时机,尽快修复受损DNA,加速细胞有丝分裂,进入增殖状态,提高骨髓基质细胞的修复能力,保护骨髓造血微环境,促进骨髓造血功能的重建。     

针灸对环磷酰胺所致骨髓抑制小鼠骨髓细胞周期调节蛋白Cyclin D1表达及细胞周期的动态影响

目的 探讨针灸抗化疗毒副反应,改善骨髓抑制、提高外周血白细胞数量的分子生物学机制。     

益气补血方对环磷酰胺所致骨髓抑制小鼠外周血象的影响

目的:观察益气补血方对环磷酰胺(CTX)所致骨髓抑制小鼠外周血象的影响。方法:昆明种小鼠随机分为3组:正常对照组,模型组,益气补血组(17.47 g.kg-1.d-1),采用ip CTX 100 mg.kg-1.d-1,连续3 d,制成骨髓抑制小鼠模型。益气补血组在造模前提前给药7 d,直至实验结束。于造模后的0,1,3,5,7,10 d检测小鼠外周血白细胞、红细胞和血小板计数。结果:造模后模型组第1 d,3 d白细胞分别为(1.19±0.55),(3.17±1.20)109/L,而益气补血组为(2.05±1.13),(7.99±5.70)109/L(P<0.01)。造模后模型组第3 d,5 d血小板分别为(406.60±137.51),(290.10±104.58)109/L,而益气补血组为(644.20±159.75),(355.30±72.06)109/L(P<0.05或P<0.01)。红细胞未出现明显变化。结论:益气补血方可以减轻环磷酰胺所致的小鼠骨髓抑制,促进其外周血白细胞和血小板的恢复。     

清胰消积方对实验性胰腺癌体内生长和细胞周期的影响

目的:研究中药清胰消积方对人胰腺癌细胞株SW1990的体内抑瘤作用及其对细胞周期的影响。方法:荷瘤裸小鼠随机分为对照组、5-FU组、中药不同剂量组,治疗后计算抑瘤率,以流式细胞术检测肿瘤的细胞周期分布。结果:中药小、中、大剂量组抑瘤率分别为21.31%、38.16%及29.09%;细胞增殖指数为15.33%、15.78%及15.74%,均小于对照组(P<0.05)。中药组的G0/G1期细胞比例高于对照组,G2/M低于对照组(P<0.05)。结论:清胰消积中药对人胰腺癌体内生长有抑制作用,其机理之一是阻止肿瘤细胞进入增殖周期。     

补虚化瘀方对联合化疗荷瘤小鼠骨髓造血功能的影响

目的观察补虚化瘀方对联合化疗荷瘤小鼠骨髓造血的作用。方法采用P388瘤株造成荷瘤小鼠模型后,再以环磷酰胺、阿糖胞苷腹腔注射获得联合化疗荷瘤小鼠骨髓抑制模型,实验分为正常组、模型组及补虚化瘀方组,进行血常规、骨髓有核细胞(BMC)计数、粒单系祖细胞(CFU-GM)集落计数、骨髓细胞增殖能力测定。结果联合化疗可致荷瘤小鼠血红蛋白(Hb)、白细胞计数(WBC),BMC、CFU-GM集落计数及骨髓细胞增殖能力明显低于正常组(P<0.01),补虚化瘀方可提高联合化疗荷瘤小鼠外周血Hb、WBC数,提高BMC、CFU-GM集落计数及骨髓细胞增殖能力(P<0.01)。结论补虚化瘀方对联合化疗荷瘤小鼠骨髓抑制模型具有保护造血细胞和促进其化疗损害后的修复作用。     

脾肾方(扶正冲剂)对小鼠胸腺的影响

我们曾报道过脾肾方有减轻化疗毒副反应,增强骨髓造血功能和提高机体免疫功能的作用。为了探讨脾肾方近期减轻化疗毒副反应和远期提高胃癌术后生存期的机理,本文重点观察脾肾方对化疗小鼠胸腺的调节作用。材料与方法 (1)动物:昆明种小鼠,雄性,体重18～22g,每批10～12只。(2)药物:脾肾方由党参、白术、女贞子、菟丝子、枸杞子等组成。用50%     

清暑解表方对流感病毒FM1感染小鼠的肺组织及肺、胸腺指数的影响

目的:研究清暑解表方对流感病毒FM1感染小鼠的肺组织及肺、胸腺指数的影响。方法:48只小鼠随机分为正常组、模型组、利巴韦林组、清暑解表方高、中、低剂量组,共6组,用流感病毒FM1滴鼻建立小鼠感染模型。观察肺组织病理变化情况,并测定肺、胸腺、脾指数。结果:与正常组比较,模型组肺指数明显升高(P0.05),胸腺指数明显降低(P0.05)。清暑解表方高剂量组能降低肺指数(P0.05),中剂量组能升高胸腺指数(P0.05),但3个剂量组对脾指数均无显著性差异(P0.05)。结论:清暑解表方能改善FM1感染小鼠的肺部病变,降低肺指数并升高胸腺指数。     

填精补血方和活血生血方对马利兰造血损伤小鼠骨髓、脾和胸腺的影响

马利兰小剂量持续给药4至5周导致小鼠慢性造血损伤,用中医填精补血方和活血生血方治疗4周后,比较观察各组小鼠骨髓、脾和胸腺光镜下结构。结果表明填精补血方能显著促进损伤小鼠骨髓、脾和胸腺的修复,揭示中医填精补血方不仅能改善骨髓造血,而且对免疫机能也有调节作用。实验中未见到活血生血方有此作用。     

补阳还五汤含药血清对骨髓间充质干细胞增殖及细胞周期的影响

目的:研究补阳还五汤含药血清对骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖及细胞周期的影响。方法:以6.5,13,26 g·kg~(-1)补阳还五汤和等量蒸馏水连续灌胃SD大鼠1周,制备3种补阳还五汤含药血清和空白血清。将BMSCs分为补阳还五汤6.5 g·kg~(-1)组(用含10%6.5 g·kg~(-1)生药制备的血清培养),补阳还五汤13 g·kg~(-1)组(用含10%13 g·kg~(-1)生药制备的血清培养),补阳还五汤26 g·kg~(-1)组(用含10%26 g·kg~(-1)生药制备的血清培养),空白组(用含10%空白血清培养)。采用噻唑蓝(MTT)比色法检测各组BMSCs的增殖活性,流式细胞术检测细胞周期,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测磷脂酰肌醇-3羟基激酶(PI3K)和磷酸化丝(苏)氨酸蛋白酶(p-Akt)(Ser473)蛋白的表达。结果:13,26 g·kg~(-1)生药制备的补阳还五汤含药血清作用BMSCs 48,72 h后,细胞增殖活性较空白组明显升高(P0.05);3种补阳还五汤含药血清作用48 h后,BMSCs在S期的细胞比率随着药物浓度的升高而升高,与空白组比较有统计学意义(P0.05);13,26 g·kg~(-1)生药制备的补阳还五汤含药血清作用48 h后,PI3K和p-Akt(Ser473)蛋白表达较空白组显著增强(P0.01)。结论:13,26 g·kg~(-1)生药制备的补阳还五汤含药血清可能通过活化PI3K/Akt信号通路促使细胞进入S期,增强BMSCs增殖活性。     

环磷酰胺及其制剂的二阶导数差示脉冲极谱法定量研究

 目的 建立环磷酰胺及其制剂的二阶导数差示脉冲极谱定量分析方法。方法 二阶导数差示脉冲极谱法。结果 环磷酰胺在乙醇-水(1∶9)的溶液中,于-0.101 V（vs Ag/AgCl）处出现一良好的二阶导数差示脉冲极谱峰,其峰幅值与环磷酰胺在 0.1～1.4 mmol·L^-1范围内呈非常显著的线性关系（P＜0.01）, 检测限为9.0 nmol·L^-1。结论 本法简便、快速、灵敏,结果准确。     

《普济方》止痛方药研究

以1959年人民卫生出版社出版排印本《普济方》(乾隆四十六年刊《四库全书》文渊阁版《普济方》为底本,参校明永乐《普济方》刻本残卷)为研究对象,简要介绍《普济方》著作及成书情况,浅溯"痛证"理论发展源流,主要探讨《普济方》对止痛方药收录状况、收方特色和学术价值,了解经《普济方》收录及保存的自晋至明朝初期诸多"痛证"相关理论及方药文献,特别是今已亡佚不存的诸多止痛方药文献的作用和特点,分析《普济方》一书在中医学方剂发展史中的意义及作用。     

经方治疗心脑血管病案

在《黄帝内经.素问》等中医经典书籍的指导下,以《伤寒杂病论》、《金匮要略》理论为依据,对于西医诊断心脑血管疾病,以四诊为诊疗方法,注重抓主症、立足六经辨证为纲,辨以阳衰、心悸、阴阳两虚、痰饮、水气凌心以及寒结等,并用经方予以治疗,临床实践中取得满意疗效。     

试论方剂中的阴阳燥湿观

为了更好地平衡人体的阴阳燥湿,发挥方剂增效减毒作用,根据组方药物不同的燥润特性采取燥润相兼、燥以济润、润以济燥3种不同配伍方式,来治疗临床诸症,是方剂中阴阳燥湿观的体现,也是刘时觉教授阴阳燥湿论的进一步总结完善。     

自拟中药“关节舒散”系列方剂治疗风湿类疾病686例疗效观察及分析

目的：中医药理论体系的优势在于注重机体平衡和整体调节,针对目前中医药治疗风湿关节炎、类风湿性关节炎的现状,提出风湿、类风湿性关节炎防治的新思路,观察我院自拟纯中药制剂＂关节舒散＂系列方剂治疗风湿、类风湿性关节炎的疗效。方法：将临床确诊类风湿性关节炎患者686例,随机分为2组,即＂关节舒散＂系列方剂治疗组（Ⅰ组）、雷公藤多苷片治疗组（Ⅱ组）,每组343例。结果：两组均可改善RA的症状、体征与实验室检查指标,Ⅰ组总有效率96%以上,Ⅱ组总有效率70%,I组疗效明显优于Ⅱ组（P〈0.05）,且毒性和不良反应明显减少（P〈0.05）。结论：＂关节舒散＂系列方剂治疗风湿、类风湿性关节炎有较好的临床疗效,无肝肾损害等不良反应。     

熊胆粉联合环磷酰胺用药通过调控肿瘤微环境抑制结直肠癌肝转移作用的研究

目的:探讨熊胆粉联合环磷酰胺(cyclophosphamide,cytoxan,CTX)用药通过调节肿瘤炎症微环境对小鼠结直肠癌(colorectal carcinoma,CRC)肝转移模型的增免抑瘤抗转移作用.方法:脾脏原位注射SL4细胞制作小鼠CRC肝转移模型.随机分5组:模型组、CTX组(80 mg· kg-1)和CTX联合熊胆粉高、中、低剂量组(300,150,75 mg·kg-1).术后口服灌胃给药12d,于第13天取材,解剖肝脾称重,HE染色,免疫荧光分析;外周血、脾和肝转移瘤进行流式细胞免疫表型分析.结果:CTX组及CTX联合熊胆粉各组肝脾质量明显低于模型组(P＜0.05);HE染色和免疫荧光分析表明,正常组织中淋巴细胞浸润较多,肿瘤组织周围有以巨噬细胞为主的大量炎细胞浸润;流式细胞检测结果表明:外周血中,联合治疗组与CTX组相比,T淋巴细胞显著升高(P＜0.05),CD4/CD8增加;脾细胞悬液中,联合治疗组与CTX组比较,淋巴细胞总数增加,以B细胞增加较为显著(P＜0.05),CD11b,F4/80细胞明显降低(P＜0.05);肝转移瘤中,联合治疗后比单独CTX治疗单核巨噬细胞下降(P＜0.05).结论:熊胆粉联合CTX治疗不仅能保肝增免,还可通过调节肿瘤微环境,减少对单核巨噬细胞等的募集起到抗炎进而抗肿瘤转移作用,其中熊胆粉低剂量与CTX联合用药组降低炎症细胞浸润的作用最为显著.     

基于数据挖掘技术的治疗遗精方剂组方规律分析

目的:分析《中医方剂大辞典》收录治疗遗精方剂的处方用药及配伍规律,为临床治疗遗精提供参考.方法:筛选《中医方剂大辞典》收录治疗遗精的方剂,基于中医传承辅助软件系统,采用软件集成的改进互信息法、复杂系统熵聚类等数据挖掘方法对筛选方剂进行处方分析.结果:共筛选370首治疗遗精方剂,涉及中药282味.方中补益、固涩、安神之品出现频数较高.方中出现频数最高的单味药为茯苓(129次),占总处方数的34.9％;方中出现频率最高的药对为山药-茯苓(66次),3味中药组合为山药、五味子、熟地黄(35次),4味中药组合为山茱萸、山药、熟地黄与茯苓(22次).关联分析结果显示,在治疗遗精的方剂中知母常配黄柏,莲须常配芡实;山茱萸、茯苓常配山药,巴戟天、茯苓常配肉苁蓉.演化得到核心组合36个,新处方7首.结论:《中医方剂大辞典》收录治疗遗精方剂组方以补益中药为主,辅以安神、固涩之品,标本兼治,可为中医药临床治疗遗精提供一定参考.     

基于"方证相应"原理的中药生物药剂学PK/PD研究模式初探

依据"方证相应"科学原理,借鉴药物动力学、药效动力学结合模型(PK/PD结合模型),针对"中药生物药剂学"研究的技术关键问题①中药复方的组方配伍均可明显影响中药化学成分在体内的药动学,并与疗效和毒副作用密切相关,如何通过生物药剂学的模式描述此类作用?②正常和病理状态下的药动学过程有所不同,生物药剂学所用动物模型如何体现"证"的特征？③方作用于证,使证递减与转化,在机体生理、病理指标与药物分布等时空变化呈现动态对应状态下,如何确认方的药效物质种类及其数量？提出以PK/PD为基本研究手段的中药生物药剂学研究模式:①以"效"为核心,同时辅以成分药动学,更好的体现中医药的整体性;②综合多种主要药效成分的药动学与药效学,构筑"整合药动学/药效学"评价体系;③采用数据挖掘技术,建立"时间-浓度-效应"三相同步表征的PK/PD数学函数,探讨"方证相应"有关"有是证即有是方,有证而为,无证而不为"机制的生物药剂学表达模式.     

三伏贴中芥子碱及细辛挥发油促进HaCaT细胞摄取延胡索乙素的作用及其机制研究

目的研究三伏贴中芥子碱硫氰酸盐(SPT)及细辛挥发油(AEO)促进角质形成细胞HaCaT摄取延胡索乙素(THP)的作用及其机制。方法采用MTT法检测SPT、AEO和THP对HaCaT细胞活力的影响;根据方中THP自发荧光的特点,采用激光共聚焦扫描显微镜可视化观察SPT及AEO促进HaCaT细胞摄取THP的作用,并用HPLC法测定HaCaT细胞中THP的量;以1,6-二苯基-1,3,5-己三烯(DPH)为荧光探针,利用荧光偏振技术研究SPT、AEO及THP对HaCaT细胞的细胞膜流动性的影响。结果 SPT及AEO均能显著促进THP被HaCaT细胞摄取,且AEO的促进作用优于SPT。SPT、THP、AEO分别作用于DPH标记的HaCaT细胞后,AEO组HaCaT细胞的荧光偏振度和细胞膜微黏度均显著降低,细胞流动性增加,证明AEO是通过提高细胞膜流动性从而促进HaCaT细胞摄取THP,而THP、SPT均不能增加细胞膜流动性。结论三伏贴中SPT及AEO均可促进HaCaT细胞摄取THP,AEO促进机制与其提高细胞膜流动性相关,而SPT的促进作用不是通过增加细胞膜流动性实现,其具体机制有待进一步探明。     

近代中西医汇通及其对当代中医学发展的影响

探讨近代中西医汇通及其对当代中医学发展的影响。从明代万历年的西医传入到1949年的中西医结合,300余年的中西医汇通史经历了启蒙、创立到鼎盛发展的3个历史时期。近代中西医的碰撞、沟通,使得具有几千年发展历史的传统中医开始了第一次对自身生存命运的思考,汇通派的"实验中医观"、"以西补中观"和"新中医观"等思想主导了近代中医的变革与发展。认为现代医学的发展面临着危机,迫切需要中西医合力;现代中医只有与西医和其他学科加强深入汇通,加快发展步伐,才能适应世界医学重新调整医学目的和改变医学模式的需要。同时,在现代的中西医汇通中,坚持中医的思维方式,推进中医特色的科学研究,提高汇通人才的传统文化素养等至关重要。