人胚脊髓一氧化氮合酶阳性神经元的研究

人胚脊髓一氧化氮合酶阳性神经元的研究＊曹玉纯李陈莉侯广棋侯洁（河北医科大学组胚教研室）材料和方法：取４－７月人胚共１５例，经４％多聚甲醛灌注后，于脊髓腰膨大处取长０．５－１ｃｍ，投入４％多聚甲醛中，４℃固定４８ｈ，再入３０％蔗糖（０．１Ｍ，ＰＢＳ溶液...     

对变性肌肉组织进行改性以获得用于促进周围神经组织再生支架的几种方法的评价

目前治疗神经缺损最常用的方法是自体神经移植，存在着供体部位功能缺失等问题，因此人们不断研究替代方法，使用神经导管即是其中较受关注的课题。已由许多工作选用变性肌肉组织制备神经导管，本工作研究了将变性肌肉作为人工细胞外机智基质填充于导管内促进神经再生的可能性。所用肌肉组织取材于雄性Ｗｉｓｔａｒ鼠背部。试样Ａ是将肌肉组织直接以２％多聚甲醛固定作为对照组；试样Ｂ为肌肉组织先于－２０℃储蓄２４ｈ，再浸泡于４℃去离子水中２４ｈ，再以２％多聚甲醛固定；试样Ｃ为肌肉组织在１６％乙酸溶液室温浸泡１ｈ，真空干燥１ｈ…     

寒冷状态下鼠的循环功能及其影响

０２２寒冷状态下鼠的循环功能及其影响［日］／市川隆…／／产业医学。－１９９４，３６（２），－１５５取出生后５９～６０天大白鼠，分为４组，每组５只，暴露于４℃寒冷中实验１２周。其中，２４ｈ暴露组：全天４℃状态下饲养；８ｈ和４ｈ暴露组：每周５天，每天分别...     

失血对巨噬细胞分泌IL—1的影响及其机制分析

作者观察了失血性休克早期大鼠腹腔巨噬细胞分泌ＩＬ－１能力的变化，并初步分析其机制，发现休克后１ｈ、２ｈ巨噬细胞分泌ＩＬ－１的能力分别较失血前提高５１％及６３％，差异均有显著性。此后巨细胞分泌ＩＬ－１的能力逐渐降低，至休克后４ｈ较失血前下降３１％，差异有高度显著性。     

亮氨酸脑啡肽纤维和神经元在大鼠脚间核亚核的密度

用雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠７只，以含０．２％苦味酸和４％多聚甲醛的磷酸盐缓冲液灌注。取脑，作冠状连续切片，切片以兔抗Ｌ－ＥＮＫ抗血清孵育及ＡＢＣ法处理。结果见到脚间核的首侧、中央、背外侧和尖４个亚核中含有亮氨酸脑啡肽免疫阳性纤维，而背外侧和尖亚核中还有免疫阳性的神经元。用计算机图像分析系统测量首侧亚核，中央亚核，背外侧亚核，尖亚核内Ｌ－ＥＮＫ物质的密度，数据依次为５１．９３％、５７．５５％、４４．４６     

肿瘤转移基因mts1在肺癌中的表达及其与淋巴结转移的关系

一、材料与方法１标本：收集１９９５～１９６年我校三所附属医院手术切除的肺癌标本共４１例,在手术切除后立即取标本小部分置４％多聚甲醛固定２小时,以１５％蔗糖ＰＢＳ漂洗２小时,空气中略干燥后置－７０℃冰箱保存用作原位杂交;大部分置液氮中保存备用。所有标...     

胎儿海马的形态学研究

胎儿海马的形态学研究张兵王先荣（兰州医学院组胚教研室）本文分别选取了胎龄为３－４个月（４例），５－６个月（８例），７－８个月（５例），９－１０个月（６例）共四组水囊引产胎儿大脑立即置入１０％的甲醛中固定三日，取左半球进一步固定一周后，切取颞叶内海马中...     

固定液浓度与固定时间对人乙酰胆碱受体抗体与大鼠神经元—nAchR之间免疫结

目的：探讨进行膜受体免疫组化染色的标本制备时应采用的合适固定液浓度和固定时间,以提高反应的敏感性和稳定性。方法：在不同固定液浓度和固定时间固定的脑切片,用免疫组织化学法显示人乙酰胆碱受体抗体（ＡｃｈＲａｂ）与大鼠膜受体ＡｃｈＲ的免疫结合反应。结果：４％多聚甲醛灌注固定０．５ｈ且不经后固定组的染色结果最好,受体的免疫组化染色深,细胞数量多,突起长,其它组均不如这一组结果满意。结论：用免疫组化检测膜受体时,应采用４％多聚甲醛灌注固定０．５ｈ且不后固定的固定方法。     

2, 3-丁二酮单肟对冷停搏心脏的保护作用

目的：观察心肌兴奋收缩脱敏剂２,３－丁二酮单肟（ＢＤＭ）对冷停搏心脏的保护作用。方法：本实验采用ＳＤ大鼠４８只,高Ｋ组取心脏用ＳｔＴｈｏｍａｓ液４℃保存：ＢＤＭ组用ＢＤＭ－Ｋ－Ｈ液保存心脏。分别保存８ｈ,１８ｈ,２４ｈ Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ灌流装置,再灌注４０ｍｉｎ。结果：１８ｈ后,高Ｋ＾＋组６０％不复跳,心率和冠脉流量都显著低于ＢＤＭ组,心肌质膜和线粒体Ｎａ－Ｋ＾＋－ＡＴＰａｓｅ活性也显著低于     

自体输血的保存温度对血小板功能的影响

０１０自体输血的保存温度对血小板功能的影响［日］／小堀正雄…／／临床麻醉，－１９９５，１９（９）．－１３４７９名健康受试者取自身新鲜血，观察贮存在４℃及室温中对血小板的影响。采血９ｍｌ，加入３．２％枸椽酸钠１ｍｌ共１０ｍｌ，在室温保存３ｈ为对照组，与...     

失血对巨噬细胞分泌IL－1的影响及其机制分析

作者观察了失血性休克早期大鼠腹腔巨噬细胞分泌ＩＬ－１能力的变化，并初步分析其机制，发现休克后１ｈ、２ｈ巨噬细胞分泌ＩＬ－１的能力分别较失血前提高５１％及６３％，差异均有显著性。此后巨噬细胞分泌ＩＬ－１的能力逐渐降低，至休克后４ｈ较失血前下降３１％，差异有高度显著性。将不同浓度的β－ＥＰ及质皮酮分别与巨噬细胞共同培养，发现前者刺激ＩＬ－１的产生，后者抑制其分泌，均呈量效关系。实验结果提示，在失血早期巨噬细胞分泌ＩＬ－１的能力有显著变化，内源性阿片肽及糖皮质激素可能参与调节失血时巨噬细胞ＩＬ－１的分泌。     

辐射引起的小鼠外周血淋巴细胞凋亡及其机理

用原位末端标记、ＤＮＡ电泳和免疫组化技术，观察了经２，４，６和８Ｇｙ不同剂量γ－射线照射后，小鼠外周血淋巴细胞的凋亡和与凋亡有关的Ｂａｘ和Ｂｃｌ－２蛋白在其中的作用。结果表明：（１）在照射后早期（４ｈ～７ｄ），淋巴细胞凋亡率迅速增加，如２，４，６和８Ｇｙ照射后４ｈ，凋亡率分别为对照值的２．６，３．８，５．５和１０．４倍，显示出较好的剂量效应关系。（２）随着照射剂量的增加，淋巴细胞绝对数急剧降低，如２，４，６和８Ｇｙ照射后４ｈ，淋巴细胞的绝对数分别为对照值的８２％，６３％，４７％和２２％，与淋巴细胞凋亡呈相反趋势，提示凋亡可能是急性照射后淋巴细胞减少的主要原因之一。（３）ＤＮＡ凝胶电泳显示，６Ｇｙ照射后３ｄ，淋巴细胞出现特征性的梯形谱；末端标记法显示，６Ｇｙ照射后７ｄ，凋亡率达到峰值，为照前值的１６倍，这些结果与Ｍａｙ－Ｇｒｕｎｗａｌｄ－Ｇｉｅｍｓａ染色所得数据基本符合。（４）照射后Ｂａｘ和Ｂｃｌ－２蛋白的异常表达证实，二者在淋巴细胞凋亡的调控中起重要作用。上述结果为阐明淋巴细胞辐射损伤与修复的机制，以及急性放射病的防治提供了重要的依据。     

人胎盘培养上清液对单克隆抗体分泌的影响

本研究在培养分泌抗甲状腺球蛋白单克隆抗体（ＩｇＧ型）杂交瘤Ｈ４株时，加入不同浓度（０％、２．５％、５％、１０％、２０％）的人胎盘培养上清液（ＨＰＳ）、培养不同的时间（２４ｈ、４８ｈ、７２ｈ、９６ｈ）后取上清液，用ＥＬＩＳＡ法检测各培养上清液中抗体含量。结果表明，低浓度（２．５％、５％）ＨＰＳ能够使Ｈ４单抗分泌增强（Ｐ〈０．０１）；而高浓度（２０％）的ＨＰＳ能够使Ｈ４单抗分泌减弱（Ｐ〈０．０１）。研     

人睫状神经营养因子基因在大肠杆菌中的表达

目的克隆人睫状神经营养因子（ｈＣＮＴＦ）基因，并在大肠杆菌宿主系统中高效表达出具有生物活性的ｈＣＮＴＦ蛋白。方法从人外周神经组织总ＲＮＡ经逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）扩增得到编码人ＣＮＴＦ的全长ｃＤＮＡ片段，此片段经回收和纯化后克隆进ＰＧＥＭ－５Ｚｆ（＋）质粒载体，并进行了ＤＮＡ序列分析，然后进一步亚克隆进Ｔ７启动子表达载体，用ＩＰＴＧ在大肠杆菌宿主中诱导ｈＣＮＴＦ蛋白表达，并以体外培养的鸡胚背根神经节（ＤＲＧ）神经元测定了重组ｈＣＮＴＦ蛋白的神经营养活性。结果成功克隆了人ＣＮＴＦ基因，含重组ＣＮＴＦ质粒的大肠杆菌经０．４ｍｍｏｌ／ＬＩＰＴＧ诱导３小时后，靶蛋白占细菌总蛋白的２５％以上。结论ｈＣＮＴＦ基因的克隆和高效表达为进一步研究其结构功能关系和临床应用打下了基础     

吐温80合并温热对B16黑色素瘤细胞hsp70、c-fos、Ubiquitin蛋白表达的影响

吐温８０合并温热对Ｂ１６黑色素瘤细胞ｈｓｐ７０、ｃ－ｆｏｓ、Ｕｂｉｑｕｉｔｉｎ蛋白表达的影响杨耀琴杨虎川陶惠红朴文姬（上海铁道大学基础医学院组胚教研室）本研究通过免疫组织化学方法，观察吐温８０与温热合并作用后即时、４ｈ和３ｄ后，Ｂ１６肿瘤细胞热休克蛋...     

人胚脾LAK细胞某些生物学特性初探

人胚脾ＬＡＫ细胞某些生物学特性初探彭新青，程一棹应用Ｆｌｃｏｌｌ－Ｈａｐａｑｕｅ法制备人胚脾细胞，在含ｒＩＬ－２０．５Ｕ／ｍｌ（ＴＧｐ－３，日本产），１０％ＡＢ型血清的ＲＰＭＩ１６４０中培养，收获ＬＡＫ细胞用于实验。人胚脾ＬＡＫ细胞的形态及核型：在４...     

－50℃冻存致人肝癌SMMC－7721细胞恶性表型改变

以１５％ＤＭＳＯ＋８５％ＲＰＭＩ１６４０为抗冻剂，研究了一５０℃低温冻存对人肝癌ＳＭＭＣ－７７２１细胞的作用。实验结果表明，经一５０℃冻存复温后恢复培养的１３ｈ中，ＳＭＭＣ－７７２１细胞的有丝分裂率较对照下降１．０９％。经一５０℃多次冻存后，人肝癌ＳＭＭＣ－７７２１细胞染色体主流范围有向正常人二倍体细胞染色体转变的趋势，主流范围由建株时的５４～５８条转变为４６～５３条，且４６条染色体的分裂相由建株时的０％转变为１６％。乳酸脱氢酶同工酶（ＬＤＨ）分析证明，经一５０℃多次冻存处理的ＳＭＭＣ－７７２１细胞ＬＤＨ各组分的百分含量较建株时有明显改变，由原来典型的肝癌细胞趋于Ｈ型（Ｈ型≥Ｍ型）ＬＤＨ３（２９．３％）＞ＬＤＨ４（２６．８％）＞ＬＤＨ２（２５．３％）＞ＬＤＨ５（１４．９％）＞ＬＤＨ１（３．６％），转变为以Ｍ型为主的分布ＬＤＨ４（４８．３％）＞ＬＤＨ５（２８．３％）＞ＬＤＨ３（１８．９％）＞ＬＤＨ２（４．４％）＞ＬＤＨ１（０％）。提示一５０℃冻存使ＳＭＭＣ－７７２１细胞的恶性表型发生改变，对ＳＭＭＣ－７７２１细胞可能起诱导分化作用。     

生物材料体外动态血清接触对CH50及补体的影响

选用硅橡胶管（ＳＲ）、涤纶纤维材料（ＰＥＴＦ）、聚氯乙烯管（ＰＶＣ）及用醋酸纤维素（ＣＡ）、聚醚砜（ＰＥＳ）、聚氨酯涂层的聚氯乙烯管，分别与血清在３７℃下进行循环接触，根据接触前（０ｍｉｎ）、接触后５、１５、６０、１８０ｍｉｎ取血清，用ＩＬ－Ｍｏｎａｒｃｈ７６１型生化分析仪测定Ｃ３、Ｃ４，用试管法测定ＣＨ５０，实验结果表明，ＣＡ，ＰＥＴ，ＳＲ材料接触后血清的Ｃ３、Ｃ４，ＣＨ５０明显低于接触前，其中     

乳糖化人生长激素放射免疫分析方法的研究

目的：探讨鼠肝、肾匀浆中乳糖化生长激素（ｈＧＨ－Ｌ）和人生长激素（ｈＧＨ）的放射免疫分析（ＲＩＡ）方法。方法：取正常小鼠肝或肾匀浆，再在匀浆液中准确加入不同量的ｈＧＨ－Ｌ和ｈＧＨ，制得不同浓度的工作液，参照常规ＲＩＡ方法制作标准曲线。再取静脉注射ｈＧＨ－Ｌ或ｈＧＨ后不同时刻的小鼠肝和肾，经匀浆处理后，应用制作的标准曲线测定肝和肾的ｈＧＨ－Ｌ或ｈＧＨ浓度，以评价ｈＧＨ－Ｌ的体内动力学行为，并为该分析     

人未成熟卵母细胞的体外培养和体外受精

收集人次级卵泡中的卵母细胞（ｎ＝６９）进行体外培养和体外受精。２３个卵母细胞经体外培养后用组织学方法观察，１９个（成熟率８３％）排出第一极体。４６个经体外培养后再进行体外受精的卵母细胞中有２４个（受精率５３％）成为受精卵。其中有１３个（卵裂率５４％）在体外发育到２－细胞胚或４－细胞胚。本实验结果提示人次级卵泡中的初级卵母细胞经体外培养可达成熟并具有受精能力。