中药诱导胃癌细胞凋亡的研究进展

胃癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一。随着科学技术的发展和人类对健康的需求,国内外对胃癌的研究越来越深入。目前,在胃癌综合治疗中,中医药所发挥的作用越来越大,可明显提高患者的生活质量,并延长生存期。中医药的抗癌机制研究日益受到重视,尤其是诱导癌细胞凋亡的相关作用机制。通过对单味中药及中药复方诱导胃癌细胞凋亡的总结,从而为中医药治疗胃癌的基础机制及临床应用提供指导,促进中医药在临床中治疗胃癌的发展。     

中药诱导胃癌细胞凋亡的研究进展

目的：探讨中药诱导胃癌细胞凋亡的研究进展。方法：对近年来相关文献进行分析、总结。结论：中药可通过对肿瘤细胞的直接杀伤作用、阻滞肿瘤细胞增殖周期、增强免疫活性、诱生细胞因子、影响凋亡信号的传导来诱导细胞凋亡,诱导细胞凋亡已成为中药防治胃癌的重要机理。     

双灵固本散对人胃癌细胞凋亡相关基因表达调节的研究

目的：研究双灵固本散对人胃癌细胞BGC-823凋亡相关基因表达水平的影响。方法：用人细胞凋亡基因芯片对双灵固本散处理前后人胃癌细胞BGC-823凋亡相关基因的表达水平变化进行定量研究。结果：在检测到有明显表达差别的15个凋亡相关基因中，14个基因的mRNA丰度在药物处理后明显升高，一个基因的mRNA丰度在药物处理后明显降低。结论：在本实验中，证明双灵固本散具有诱导体外胃癌细胞的凋亡作用，并可能是通过外部（extrinsic）凋亡途径实现的。     

广谱晚癌康对人肝癌细胞凋亡相关基因表达的影响

目的：探讨广谱晚癌康（I号、Ⅱ号）治疗原发性肝癌的作用机制。方法：选择性生长良好的人肝癌细胞株，分别培养实验组和对照组的肿瘤细胞，滴加稀释度为1：50抗人bcl-2,Bax和Fas及PCNA的单克隆抗体，采用荧光免疫组化显示技术和激光共聚焦显微细胞仪的定量技术（Confobal microscope,ACAS570型）观测扫描细胞的荧光值。结果：广谱晚癌康I号及I号＋Ⅱ号能影响人肝癌细胞凋亡相关基因Bcl-2,Bax,Fas表达增加，Ⅱ号能影响Bcl-2表达减少，而影响Fas表达影响。结论：广谱晚癌康（I号、Ⅱ号）对人体肝癌细胞有治疗作用，其作用机制可能是通过对凋亡相关基因调控的表达来实现的。同时也表明广谱晚癌康的抗癌作用，I号、Ⅱ号联合作用＞I号单纯使用＞Ⅱ号单纯使用。     

健脾解毒方诱导裸鼠人胃癌细胞凋亡相关基因表达的研究

目的:研究健脾解毒方对裸鼠人胃癌皮下移植瘤的抑制作用,利用基因芯片筛选其诱导裸鼠人胃癌细胞凋亡相关基因表达,分析其可能的作用靶点。方法:建立人胃癌MKN-45细胞裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为4组:生理盐水对照组、替加氟化疗组100mg·kg-1·2d-1、中药健脾解毒方组(40g/kg)、健脾解毒方联合化疗药组(健脾解毒方40g/kg联合替加氟100mg·kg-1·2d-1,每组12只。给药14d后观察各组瘤体质量量和动物生存期,并利用Affymetrix Genechip U133 Plus2.0基因芯片筛选健脾解毒方诱导凋亡相关基因表达。结果:与对照组相比,健脾解毒方组瘤体质量量明显降低(P<0.01),生存期显著延长(P<0.01)。且健脾解毒方联合化疗药组对肿瘤的生长抑制作用明显优于单纯化疗组和单纯健脾解毒方组(P<0.05)。基因芯片分析结果显示,健脾解毒方治疗后表达丰度相差在2倍以上基因的有879个,其中与细胞凋亡相关的基因有358个。结论:健脾解毒方抗裸鼠人胃癌作用,联合化疗药可提高疗效,其抗癌机制与诱导胃癌细胞凋亡有关。     

银杏外种皮多糖对人胃癌细胞凋亡及其凋亡诱导基因表达的影响

目的：研究银杏外种皮多糖对人胃癌细胞凋亡及其凋亡诱导基因表达的影响。方法：应用体外培养方法和流式细胞技术，检测人胃癌SGC-7901细胞的凋亡率及其凋亡诱导基因bax的阳性蛋白标记率。结果：银杏外种皮多糖40～160μg／ml可诱导人胃癌SGC-7901细胞的凋亡，在培养24h～72h期间，具有量效关系和时效关系。银杏外种皮多糖40～160μg/ml也同时促进bax基因的表达。结论：银杏外种皮多糖的抗肿瘤作用机制之一可能与其诱导癌细胞凋亡有关，其诱导癌细胞凋亡的作用机制之一可能与其影响bax基因的表达有关。     

中医药调控Bcl-2表达诱导胃癌及癌前病变细胞凋亡的研究

胃癌是我国最常见的消化道肿瘤，发病率及死亡率居恶性肿瘤之首。细胞凋亡是恶性肿瘤普遍的自发现象，肿瘤的发生、发展、治疗及预后均与凋亡关系密切。诱导肿瘤细胞凋亡是成功治疗肿瘤的基础和关键。细胞凋亡过程由众多基因共同调控。Bcl-2为一类抗凋亡基因，其通过抑制凋亡而参与肿瘤的发生。研究药物对调节细胞凋亡相关基因的影响对于肿瘤的预防和治疗有重要的意义。其中，中药对抑制凋亡基因Bcl-2的调节作用受到了众多学的关注。     

一氧化氮与细胞凋亡相关疾病的关系及其调控

 目的 综述一氧化氮(NO)在细胞凋亡相关疾病中的作用,以及以NO作为治疗靶点的药物研究进展情况。方法 以近几年国外该领域有代表性的文献为依据,根据NO对细胞凋亡的调控作用,对细胞凋亡相关疾病的发生和防治进行综述。结果与结论 细胞凋亡异常与其胞内的NO水平异常有关。细胞凋亡相关疾病的发生与NO介导的相应器官或组织细胞凋亡的程度有密切关系。因此,药物通过调控NO水平,抑制或促进细胞凋亡,可以达到治疗这些疾病的目的。     

癌平口服液含药血清对人胃癌细胞凋亡的影响

目的：研究中药复方癌平口服液对人胃癌细胞凋亡的影响。方法：采用癌平口服液含药血清，温育体外培养的人胃癌细胞BGC-823，通过流式细胞仪细胞周期DNA含量分析，研究该方对体外培养的人胃癌细胞BGC-823凋亡的影响。结果：癌平口服液药物血清有诱导体外培养的人胃癌细胞BGC-823凋亡的作用。结论：诱导胃癌细胞凋亡是癌平口服液抗癌作用的机制之一。     

阻癌胃泰对胃癌前病变细胞凋亡指数影响的实验研究

目的：以MNNG合并胃毒占膜机械损伤方法制作了胃癌前病变大鼠模型。采用健脾化瘀方法，选用阻癌胃泰进行预防和治疗给药，用免疫组化法检测了细胞凋亡指数。结论：研究结果显示，无论是预防给药还是治疗给药，以健脾化瘀为组方依据的阻癌胃泰具有较显著的预防和治疗胃黏膜上皮不典型增生作用。能够促进黏膜细胞的正常凋亡。     

心肌缺血-再灌注时细胞凋亡及相关基因调控

目的观察黄芪抑制家兔心肌缺血-再灌注时细胞凋亡的作用.方法采用结扎冠状动脉左前降支后再通的方法,复制家兔心肌缺血再灌注的动物模型,对心肌缺血-再灌注、黄芪治疗、心肌缺血、假手术等不同情况下心肌坏死面积、心肌细胞DNA电泳、凋亡细胞的形态(TUNEL法、电镜)及bcl-2与bax原位杂交进行了观察.结果再灌注组和黄芪治疗组的梗死面积小于单纯缺血组;DNA电泳发现再灌注组呈凋亡的典型表现,单纯缺血组表现为细胞坏死,黄芪治疗组梯形条带中DNA含量较心肌缺血-再灌注组明显减少;TUNEL染色发现缺血组有散在阳性细胞,再灌注组有大量的阳性标记,且积聚成团,黄芪治疗组较再灌注组明显减少;电镜观察发现再灌注组线粒体等细胞亚结构损伤严重,而黄芪治疗组则明显减轻.缺血组bcl-2与bax表达增多,再灌注组bax表达增多而bcl-2表达减少,黄芪治疗可下调bax且一定程度上调bcl-2.结论缺血再灌注可引起心肌细胞的凋亡,黄芪可确实抑制凋亡的发生.     

竹节参总皂苷对脑缺血大鼠神经细胞凋亡和即早基因表达的影响

目的:观察竹节参总皂苷(TSPJ)对脑缺血再灌大鼠神经细胞凋亡和早期快速反应基因c-fos,c-jun表达的影响。方法:60只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组、TSPJ组(200,100,50 mg.kg-1)。线栓法制备大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤模型;HE染色检测脑组织病理变化;TUNEL法检测神经细胞凋亡;免疫组化方法检测c-fos,c-jun的表达。结果:脑缺血再灌注损伤后,模型组大鼠脑组织病理损伤明显,TUNEL细胞较假手术组显著增多(P<0.01),c-fos,c-jun表达较假手术组明显增强(P<0.01);TSPJ可明显改善模型大鼠脑组织病理形态,TSPJ(200,100 mg.kg-1)组与模型组相比,TUNEL阳性细胞数明显减少(P<0.01或P<0.05),c-fos,c-jun阳性表达减少(P<0.01或P<0.05)。结论:对脑缺血损伤具有保护作用,其作用可能是通过下调c-fos,c-jun蛋白表达,从而干预脑缺血后的神经细胞凋亡。     

舌苔变化与凋亡相关基因分子机理的研究

目的:检测常见舌苔变化与舌上皮细胞凋亡情况及凋亡相关基因TGF-β3与fas mRNA和蛋白产物,探讨舌苔变化与舌上皮细胞凋亡、凋亡相关基因表达的关系.方法:运用TUNEL技术、原位杂交、免疫组化和图像分析技术.结果:与正常薄苔比较,剥苔fas基因过度表达伴随细胞凋亡增多,而厚苔TGF-β3基因低表达伴随细胞凋亡减少.舌苔上皮细胞中促凋基因fas、TGF-β3表达水平变化趋势与细胞凋亡水平变化趋势一致.结论:凋亡相关基因fas、TGF-β3表达水平的变化可能是影响舌苔上皮细胞凋亡并导致舌苔厚度变化的重要原因.     

电针对局灶性脑缺血大鼠海马神经细胞凋亡及Bcl-2 Bax caspase-3表达的影响

目的:研究电针对局灶性脑缺血再灌注大鼠神经细胞凋亡和相关基因表达的影响。方法:SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型对照组、尼莫地平组、电针治疗组(左侧肩禺、外关、髀关、足三里)、非穴位对照组(左侧天泉与曲泽连线中点、曲泽与郗门中点、五里与阴胞连线中点和膝关与中都连线中点)。采用线拴法造成大鼠局灶性脑缺血再灌注模型(MCAO),分别于缺血后即刻、再灌注后即刻和再灌注后2h电针,共3次。末端脱氧核糖核酸介导生物素化脱氧尿嘧啶缺口末端标记(TUNEL)法测定海马凋亡神经细胞,免疫组织化学方法研究海马神经细胞caspase-3、Bcl-2和Bax基因表达。结果:与假手术组比较,MCAO大鼠海马凋亡细胞明显增加,caspase-3和Bax基因表达增强,Bcl-2/Bax比值显著降低;电针能明显降低MCAO大鼠海马TUNEL、caspase、Bax和Bcl-2阳性细胞数,Bcl-2/Bax比值显著升高。结论:电针可通过抑制神经细胞凋亡途径实现对脑缺血及缺血再灌注损伤的保护作用。     

左旋四氢巴马汀在大鼠急性脑缺血再灌注时对凋亡相关基因蛋白表达的影响

目的:观察左旋四氢巴马汀(L-tetrahydropalmatine,L-THP)在脑缺血再灌注时对凋亡相关基因蛋白表达的影响。方法:在建立大鼠急性全脑缺血再灌注模型基础上,采用免疫组织化学法、原位末端标记法,分别检测假手术组、脑缺血再灌注组及 L-THP 治疗组:海马 CAl 区 Caspase-3、Fas、c-Fos、c-Myc、P53阳性细胞及凋亡细胞数。结果:脑缺血再灌注时,Caspase-3、Fas、c-Fos、C-Myc、P-53阳性细胞及细胞凋亡数均增加,与假手术组比较差异有显著性(P<0.01),L-THP 可减少这几项参数,L-THP 治疗组与脑缺血再灌注组比较差异亦有显著性(P<0.05,P<0.01)。结论:在脑缺血再灌注细胞凋亡过程中,L-THP 可通过抑制上述凋亡相关基因蛋白的表达,减少神经元凋亡,对脑缺血损伤起保护作用。     

电针对大鼠脊髓损伤后细胞凋亡相关基因Caspase-9的研究

目的:采用大鼠急性脊髓损伤模型,观察电针对脊髓损伤后神经细胞凋亡与其相关基因Caspase-9表达及变化规律的影响,进一步揭示电针治疗脊髓损伤的作用机制。方法:采用A llen's法制备急性脊髓损伤模型。动物分为电针组、药物组(Caspase-3抑制剂组)、模型组、假手术组。免疫组化法检测Caspase-9的表达变化。结果:免疫组化方法检测结果表明:Caspase-9在14d时,电针组表达量低于模型组(P<0.05)。结论:电针通过抑制Caspase-9在大鼠脊髓损伤神经元中表达,抑制神经细胞凋亡,减轻了脊髓继发性损伤,促进神经功能恢复。     

参麦注射液及氨茶碱对肺气肿大鼠小气道平滑肌细胞凋亡及相关基因表达的影响

目的：探讨中药中风Ⅱ号口服液（简称中风Ⅱ号）干预急性脑梗塞的效果和机制。方法：临床方面：对160例急性脑梗塞患者进行随机对照研究，试验组用中风Ⅱ号结合西药治疗，对照组采用单纯西药治疗。动物实验：采用单侧结扎沙土鼠颈总动脉的方法建立脑梗塞动物模型，随机分成模型组、生理盐水组、中风Ⅱ号组。结果：临床研究证实，中风Ⅱ号能改善中医证候、神经功能。动物实验表明：（1）中风Ⅱ号在6h内明显抑制谷氨酸释放；（2）中风Ⅱ号可有效保护超氧化物歧化酶及谷胱甘肽过氧化物酶，清除自由基。结论：中风Ⅱ号能改善脑组织功能，治疗脑梗塞，值得开发应用。     

参麦注射液及氨茶碱对肺气肿大鼠小气道平滑肌细胞凋亡及相关基因表达的影响

目的；探讨参麦注射液及氨茶碱对木瓜蛋白酶致大鼠肺气肿小气道平滑肌细胞凋亡及其Fas/FasL系统表达的影响。方法：采用免疫组织化学及TUNEL法，检测气管内注入木瓜蛋白酶后肺气肿模型1、3、5、7、15、30天组和正常对照组，小气道平滑肌细胞凋亡及其Fas/FasL系统表达，以及参麦注射液和氨茶碱对其影响。结果：正常对照组小气道平滑肌细胞Fas、FasL表达很低，阳性率分别为（2．31±0．55）％、（1．28±0．47）％，气道内注入木瓜蛋白酶后，空白组小气道平滑肌细胞（SASMC）Fas、FasL表达随着注酶时间的延长而阳性率也明显增加，参麦注射液有抑制大鼠SASMC Fas 、FasL表达的作用，而氨茶碱作用不明显。同时，发现正常对照组大鼠SASMC凋亡百分率也很低（0．87±0．32）％，气道内注入木瓜蛋白酶后，空白组SASMC凋亡百分率随着注酶时间的延长而凋亡百分率也明显增加，用参麦注射液治疗后可使大鼠SASMC凋亡降低，而氨茶碱作用不明显。结论：在肺气肿形成过程中，Fas和FasL参与了小气道平滑肌细胞的凋亡调控，参麦注射液可能通过抑制炎性介质释放，影响Fas和FasL蛋白表达和减少小气道平滑肌细胞的凋亡，对肺气肿有一定的治疗作用。     

青蒿琥醋诱导人原代白血病细胞凋亡及其相关基因表达谱的初步研究

目的 探索青蒿琥酯治疗人类急性白血病的作用及其分子机理.方法 收集人类急性白血病患者骨髓细胞,进行原代培养;MTT法检测青篙琉醋对急性白血病原代细胞增殖的影响;基因芯片观察青蒿琥酯作用前后相关基因表达变化.结果 浓度为50,25,12.5 ug/ml,的青蒿琥酯分别作用于急性白血病原代细胞,48h后抑制率依次为56.25%、41.49%、30.08%;72h后抑制率依次为59.8%、45.07%、33.57%,呈剂量、时间依赖关系;青蒿琥酯醋对AL原代细胞的半数抑制率浓度(IC50为18.3 ug/mL;经青蒿琥酯作用后,AML-M3和ALL-L2原代细胞基因表达谱分别呈现变化趋势,并与药物剂量呈梯度比例关系.结论 青蒿琥酯抗AL原代细胞的作用包括多方面,诱导细胞凋亡是其主要作用,可能的机制包括通过Bcl-2途径、线粒体途径、Tnf/TnfR1及Fas/FasL信号转导途径、Jak/Stat通路等诱导AL细胞凋亡;同时青蒿琥酯还有抑制AL原代细胞的增殖及诱导AL原代细胞向成熟分化的作用.     

狼疮定对SLE患者外周血淋巴细胞凋亡及Fas基因表达的影响

目的:现察中药狼疮定对SLE患者外周血淋巴细胞凋亡的影响,分析其治疗SLE可能的作用机理。方法:临床上筛选45例SLE患者,分单用激素组和并用狼疮定组两组,用药60天前后各检测一次,利用电镜观察及TUNEL法测细胞凋亡、SP法测Fas基因表达。结果:SLE患者外周血淋巴细胞凋亡率高于正常人,活动期高于缓解期,并用狼疮定组治疗后明显低于单用激素组(P<0.05);SLE患者Fas基因表达阳性率明显低于正常人,并用狼疮定组治疗后明显高于单用激素组(P<0.05)。结论:狼疮定能提高SLE患者Fas基因表达阳性率,增强其对淋巴细胞凋亡的调控作用,这可能与其能有效缓解病情,改善紊乱的免疫内环境的作用机理有关。